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CLEC7A调节PD-L1促进卵巢癌生长的作用及机制研究
1
作者 陈瑶 孙思柏 +1 位作者 许俊 何杰 《新医学》 2025年第4期361-371,共11页
目的明确C型凝集素结构域家族7成员(CLEC7A)在高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)中的作用及相应的机制。方法通过癌症基因组图谱-卵巢癌(TCGA-OV)数据集,结合转录调控网络与主调控因子分析(MRA),明确HGSOC中CLEC7A基因对免疫相关基因的作用;通... 目的明确C型凝集素结构域家族7成员(CLEC7A)在高级别浆液性卵巢癌(HGSOC)中的作用及相应的机制。方法通过癌症基因组图谱-卵巢癌(TCGA-OV)数据集,结合转录调控网络与主调控因子分析(MRA),明确HGSOC中CLEC7A基因对免疫相关基因的作用;通过通路富集分析与验证,确定了CLEC7A对酪氨酸激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子3(STAT3)通路的调节机制。分析GSE184880单细胞测序数据集,揭示了CLEC7A低表达与高表达的HGSOC中免疫细胞的比例和细胞通信的差异。收集2017年1月至2022年12月在中国科学技术大学附属第一医院/安徽省立医院确诊并行手术治疗的70例HGSOC和70例卵巢透明细胞癌(OCCC)患者的石蜡肿瘤组织和对应癌旁组织以及临床病理资料,比较HGSOC与OCCC预后相关因素的差异;利用免疫组织化学染色法,检测CLEC7A和PD-L1在HGSOC和OCCC及对应的癌旁组织中的表达水平。构建CLEC7A的短发夹RNA(shRNA)载体,检测CLEC7A抑制后HGSOC细胞增殖和凋亡的变化。在CLEC7A高表达的小鼠肿瘤模型中,观察髓系免疫抑制细胞(MDSC)、CD8^(+)T细胞的比例以及MDSC的功能变化。结果转录调控网络分析显示,叉头框蛋白P3(FOXP3)与CLEC7A对免疫相关基因均起到调节作用,CLEC7A不仅与患者总体生存率相关,还在HGSOC肿瘤组织中呈现高表达(均P<0.05)。敲低CLEC7A后,不仅促进了细胞凋亡,还抑制了HGSOC细胞系的体内外增殖(均P<0.05)。CLEC7A通过JAK/STAT3信号通路调控程序性死亡配体-1(PD-L1)的表达。在CLEC7A高表达的肿瘤组织中,CD8~+T细胞的比例下降,MDSC的比例上升,且MDSC的功能得到增强(均P<0.05)。结论HGSOC中CLEC7A诱导了PD-L1的表达,且促进了HGSOC的增殖与免疫抑制信号通路的激活,可能导致HGSOC的恶性生长。 展开更多
关键词 C型凝集素结构域家族7成员 高级别浆液性卵巢癌 程序性死亡配体-1 JAK/STAT3通路 肿瘤免疫
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CLEC7A在颅内动脉瘤组织和血清中的表达及临床意义
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作者 胡瑞婷 黄利强 +2 位作者 周梦晓 周少旦 胡瑞光 《微创医学》 2021年第4期453-456,共4页
目的探讨CLEC7A在颅内动脉瘤(IAA)组织和血清中的表达及临床意义。方法检索GEO数据库中IAA基因数据集,分析IAA基因数据集中CLEC7A的表达水平及其与患者年龄、性别的关系。收集IAA患者血清标本60例,并收集健康人血清标本20例作为对照,采... 目的探讨CLEC7A在颅内动脉瘤(IAA)组织和血清中的表达及临床意义。方法检索GEO数据库中IAA基因数据集,分析IAA基因数据集中CLEC7A的表达水平及其与患者年龄、性别的关系。收集IAA患者血清标本60例,并收集健康人血清标本20例作为对照,采用ELISA法检测血清中CLEC7A表达水平,分析IAA血清中CLEC7A表达水平与患者年龄、性别的关系,分析血清CLEC7A水平对IAA的诊断价值。结果两个IAA基因数据集(GSE75436和GSE54083)的分析结果显示,CLEC7A在IAA组织中的表达水平显著高于正常动脉组织(P<0.05);GSE54083数据集分析结果显示,不同年龄段和性别的IAA组织中CLEC7A表达水平差异无统计学意义(均P>0.05)。IAA患者血清中CLEC7A表达水平也显著高于健康人血清水平,且年龄高(≥60岁)的患者血清CLEC7A水平表达较年龄低(<60岁)的患者高(均P<0.05);血清CLEC7A在男性和女性患者的表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。受试者工作特征(ROC)曲线显示,血清CLEC7A水平对IAA有一定的诊断价值(灵敏度为0.618,特异度为0.700)。结论CLEC7A在IAA组织和血清中的表达水平均较健康人显著升高,提示CLEC7A与IAA的发病密切相关,血清CLEC7A水平可作为IAA的辅助诊断指标之一。 展开更多
关键词 颅内动脉瘤 clec7a 组织 血清
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小鼠树突状细胞相关C型凝集素-1基因重组腺病毒载体的构建及鉴定 被引量：3
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作者 夏迪 钱倩 +5 位作者 刘志成 谭鸣鸣 丁媛 苏欣 孙文逵 施毅 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2015年第4期341-345,共5页
目的树突状细胞相关C型凝集素-1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)是介导抗真菌天然免疫的重要受体之一。文中旨在构建表达小鼠Dectin-1基因的重组腺病毒载体,扩增、纯化获得高浓度的重组腺病毒。方法将PCR扩增的... 目的树突状细胞相关C型凝集素-1(dendritic cell-associated C-type lectin-1,Dectin-1)是介导抗真菌天然免疫的重要受体之一。文中旨在构建表达小鼠Dectin-1基因的重组腺病毒载体,扩增、纯化获得高浓度的重组腺病毒。方法将PCR扩增的目的片段CLEC7A-p IRES2-EGFP重组到中间载体p DONR221上,再与腺病毒骨架质粒p AD/CMV/V5-DEST重组,获得重组腺病毒质粒p AD-CLEC7A-p IRES2-EGFP,经Pac I线性化后转染人胚肾293(HEK293)细胞,收获重组腺病毒p AD-CLEC7A-p IRES2-EGFP;利用HEK293细胞大量扩增腺病毒;并进行重组腺病毒的滴度测定;用荧光显微镜和实时荧光定量PCR鉴定转染重组腺病毒组(Dectin-1基因重组腺病毒转染HEK293细胞)和转染空病毒组(空病毒转染HEK293细胞)中Dectin-1基因的表达。结果菌落PCR鉴定、酶切鉴定及测序结果均显示重组腺病毒含有Dectin-1基因,腺病毒滴度为5×1011IU/m L,荧光显微镜下可见绿色荧光,PCR检测到转染重组腺病毒组Dectin-1表达量是转染空病毒组的8677.25倍。结论成功构建并获得了较高浓度的Dectin-1基因重组腺病毒载体,为下一步体内外研究Dectin-1高表达在宿主抗真菌天然免疫中的作用奠定基础。 展开更多
关键词 树突状细胞相关C型凝集素-1 clec7a基因 腺病毒载体 模式识别受体
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