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ERα和ClC-3的周期性表达与他莫昔芬抗乳腺癌作用的相关性研究
1
作者 李雪苛 侯秀颖 +3 位作者 刘世情 杨海峰 朱林燕 何伟丽 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第3期417-426,共10页
目的:探讨雌激素受体α(ERα)和ClC-3氯通道的周期性表达、分布和相互作用及其与他莫昔芬(TAM)抗乳腺癌周期特异性的相关性。方法:通过网络数据库分析ERα与ClC-3的表达相关性,三维分子模拟软件和免疫共沉淀法分析ERα和ClC-3的蛋白间... 目的:探讨雌激素受体α(ERα)和ClC-3氯通道的周期性表达、分布和相互作用及其与他莫昔芬(TAM)抗乳腺癌周期特异性的相关性。方法:通过网络数据库分析ERα与ClC-3的表达相关性,三维分子模拟软件和免疫共沉淀法分析ERα和ClC-3的蛋白间相互作用;胸腺嘧啶脱氧核苷(TdR)双阻断释放法和诺考达唑阻滞细胞周期,流式细胞术检测细胞周期;MTT法检测细胞活力;Western blot检测ERα和ClC-3的蛋白表达;免疫荧光染色检测ERα和ClC-3的亚细胞分布。结果:(1)网络数据库分析表明,ERα和ClC-3的表达显著相关;免疫共沉淀实验显示这两种蛋白存在相互作用;(2)使用TdR双阻断释放法和诺考达唑获得不同周期的人乳腺癌T47D细胞;(3)TAM对G2/M期的细胞活力抑制作用最强;(4)ERα和ClC-3的蛋白表达均有周期差异,且二者亚细胞分布存在周期性特点并表现为共定位;(5)ERα和ClC-3在各周期均存在蛋白间的相互作用;(6)TAM作用于各周期细胞后,处于G2/M期细胞的ERα蛋白表达最高,但对ClC-3在各周期的表达无显著影响。结论:人乳腺癌T47D细胞中ERα和ClC-3的表达和分布存在周期差异性,并且ERα和ClC-3存在蛋白间的相互作用;ERα的周期特性可能介导了TAM的抗乳腺癌作用周期特异性。 展开更多
关键词 乳腺癌 雌激素受体Α clc-3氯通道 他莫昔芬 细胞周期
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毛竹CLCs基因家族鉴定及高盐与干旱胁迫下的表达模式分析
2
作者 陈诗蕾 郭琳 +2 位作者 鲁海雯 叶晓莉 林新春 《核农学报》 北大核心 2025年第11期2374-2387,共14页
氯离子通道蛋白(CLC)是一类介导以Cl-为代表的阴离子跨膜转运的重要通道或转运蛋白家族,在高盐与干旱胁迫等多种非生物胁迫中发挥重要作用。为探究毛竹CLCs基因家族的功能,本研究通过生物信息学方法对毛竹CLCs基因家族成员进行鉴定与分... 氯离子通道蛋白(CLC)是一类介导以Cl-为代表的阴离子跨膜转运的重要通道或转运蛋白家族,在高盐与干旱胁迫等多种非生物胁迫中发挥重要作用。为探究毛竹CLCs基因家族的功能,本研究通过生物信息学方法对毛竹CLCs基因家族成员进行鉴定与分析,利用RNA-Seq测序和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对高盐与干旱因子胁迫下CLCs基因的表达情况进行分析。结果表明,在毛竹全基因组中共鉴定到18条CLCs基因,这些基因编码蛋白长度为455~1440 aa,分子量为49358.04~157276.61 Da,理论等电点为6.40~8.85。系统进化分析表明,18条PeCLCs基因分为2个亚类,6个亚家族,且同一亚家族在基因结构方面具有相似性。共线性分析得出CLCs基因家族在毛竹中共有9个共线性基因对,且非同义突变率/同义突变率(Ka/Ks)值均小于1。启动子顺式元件结果显示,PeCLCs基因的启动子序列中含有胁迫响应、激素响应等多种元件。转录组数据分析结果显示,PeCLCs基因存在组织与其发育阶段特异性,大部分毛竹PeCLCs基因在鞭根系统与不同发育时期的竹笋中相对高表达,表明PeCLCs可在鞭根系统和竹笋快速生长过程中维持Cl-稳态。qRT-PCR结果显示,大部分PeCLCs在高盐与干旱胁迫条件下被诱导表达,说明PeCLCs可响应高盐与干旱胁迫。本研究结果为毛竹CLCs基因家族功能的进一步研究提供了参考依据与基因资源。 展开更多
关键词 毛竹 clc基因家族 生物信息学 高盐胁迫 干旱胁迫
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拟南芥过表达杉木ClC3HDZ1基因及其对缺磷胁迫的响应
3
作者 黄朝章 赵紫宇 +3 位作者 曾一帆 叶小鹏 马祥庆 帅鹏 《森林与环境学报》 北大核心 2025年第5期501-508,共8页
为探究杉木ClC3HDZ1转录因子响应缺磷胁迫的作用机制。通过构建杉木ClC3HDZ1转录因子过表达拟南芥植株,研究其对缺磷胁迫的响应,提取杉木叶片中的总RNA并将其反转为cDNA,利用三步法聚合酶链式反应(PCR)扩增出ClC3HDZ1转录因子的编码序... 为探究杉木ClC3HDZ1转录因子响应缺磷胁迫的作用机制。通过构建杉木ClC3HDZ1转录因子过表达拟南芥植株,研究其对缺磷胁迫的响应,提取杉木叶片中的总RNA并将其反转为cDNA,利用三步法聚合酶链式反应(PCR)扩增出ClC3HDZ1转录因子的编码序列片段,连接至带有35S启动子驱动的PCAMBIA1300载体,转化到农杆菌,通过花序侵染法导入野生型拟南芥植株。经含有潮霉素的MS固体培养基筛选和PCR鉴定获得过表达植株,培养至T_(3)代。将T_(3)代过表达杉木ClC3HDZ1基因植株和野生型植株分别在缺磷和正常磷条件下垂直培养,观察测定不同植株的根长,测定不同植株组织总磷含量、花青素相对含量及叶绿素含量。结果表明:缺磷培养下,过表达植株根长受抑制程度小于野生型,且组织总磷含量高于野生型,花青素相对含量和叶绿素含量均低于野生型。杉木ClC3HDZ1基因异源过表达可促进拟南芥植株体内总磷的积累,抵抗缺磷胁迫,同时使拟南芥叶片中花青素增幅减小。 展开更多
关键词 杉木 clc3HDZ1基因 拟南芥 过表达 缺磷胁迫
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基于作者研究相似性的CLC与IPC类目同现映射研究 被引量：1
4
作者 宋艳辉 陈歆琦 《情报学报》 CSSCI CSCD 北大核心 2024年第8期927-935,共9页
期刊论文与专利文献间的知识流动展现了科学研究与技术创新的演进路线。对中国图书馆分类法(Chinese Library Classification,CLC)和国际专利分类法(International Patent Classification,IPC)进行类目映射分析,有助于打通论文资源与专... 期刊论文与专利文献间的知识流动展现了科学研究与技术创新的演进路线。对中国图书馆分类法(Chinese Library Classification,CLC)和国际专利分类法(International Patent Classification,IPC)进行类目映射分析,有助于打通论文资源与专利资源之间的壁垒,识别不同学科领域内论文与专利之间的科技发展特性。本文提出了一种将社会网络分析思想与同现映射相融合的映射方法:将同一作者且研究主题高度相关的论文与专利进行一对一组合作为单位数据,利用CLC与IPC同时对每个单位数据进行分类标注,结合类目相似度计算,对数据集的标注结果进行分析。最终,得到具有普适性的CLC与IPC类目间的一对一映射、一对多映射以及双向映射关系。 展开更多
关键词 clc IPC 研究相似性 同现映射
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电针内关穴对心肌缺血大鼠心脏氯离子通道CLC-3、CLC-4蛋白表达的影响 被引量：6
5
作者 侯国亮 张小卿 +2 位作者 梁繁荣 陈以国 成泽东 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第10期3119-3121,共3页
目的:探讨电针内关穴对异丙肾上腺激素(ISO)诱导的心肌缺血大鼠心肌氯离子通道CLC-3、CLC-4蛋白表达的影响。方法:使用皮下注射IOS的方法制备大鼠心肌缺血模型,各组分别电针治疗7d后取材,观察各组血清乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(S... 目的:探讨电针内关穴对异丙肾上腺激素(ISO)诱导的心肌缺血大鼠心肌氯离子通道CLC-3、CLC-4蛋白表达的影响。方法:使用皮下注射IOS的方法制备大鼠心肌缺血模型,各组分别电针治疗7d后取材,观察各组血清乳酸脱氢酶(LDH)和超氧化物歧化酶(SOD)活性和心肌细胞氯离子通道CLC-3、CLC-4蛋白表达。结果:与模型组比较,内关组LDH水平降低(P<0.01)、SOD水平升高(P<0.01),心肌细胞氯离子通道CLC-3、CLC-4蛋白表达均明显减弱(P<0.01)。而列缺组、非经非穴组与模型组比较各指标均无明显差别。结论:循经电针内关穴对心肌缺血大鼠产生治疗作用,其机制之一可能是通过调节心肌细胞氯离子通道CLC-3、CLC-4蛋白表达而实现的。 展开更多
关键词 心肌缺血 电针 内关穴 clc-3 clc-4
原文传递
CLC谐振型感应电能传输系统的H_∞控制 被引量：35
6
作者 戴欣 余奎 孙跃 《中国电机工程学报》 EI CSCD 北大核心 2010年第30期47-54,共8页
CLC谐振型感应电能传输系统较传统的LC谐振型系统具有更大的谐振容量和更小的频率漂移,但由于系统的高阶及多周期点特性,对CLC型系统的控制更为困难。为实现CLC谐振型系统的输出鲁棒控制,将系统状态变量及非线性开关函数进行频域线性化... CLC谐振型感应电能传输系统较传统的LC谐振型系统具有更大的谐振容量和更小的频率漂移,但由于系统的高阶及多周期点特性,对CLC型系统的控制更为困难。为实现CLC谐振型系统的输出鲁棒控制,将系统状态变量及非线性开关函数进行频域线性化,通过平衡点变换,得到平衡点附近的广义状态空间平均(generalized state space averaging,GSSA)扰动模型。建立了系统的H∞控制系统结构,提出GSSA模型误差扰动有界定理并给出了证明。给出了相应的H∞扰动控制律,并通过仿真及实验结果验证了该模型及控制方法的有效性。 展开更多
关键词 clc谐振 H∞控制 广义状态空间平均扰动模型 感应电能传输
原文传递
小功率开关电源CLC纹波抑制电路特性分析 被引量：4
7
作者 成毅 庹先国 +2 位作者 范磊磊 刘静 王洪辉 《电源技术》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1128-1130,共3页
在便携式仪器中通常使用小功率开关电源为系统供电,电源的纹波噪声直接影响系统的性能。采用MAX606芯片设计了12 V的开关电源,以π型CLC低通滤波器对其输出纹波进行抑制,通过改变电解电容的类型(贴片铝电解、直插铝电解、贴片钽电解)、... 在便携式仪器中通常使用小功率开关电源为系统供电,电源的纹波噪声直接影响系统的性能。采用MAX606芯片设计了12 V的开关电源,以π型CLC低通滤波器对其输出纹波进行抑制,通过改变电解电容的类型(贴片铝电解、直插铝电解、贴片钽电解)、电容值大小、电感值大小以及负载,分析了CLC电路纹波抑制特性。结果表明,小功率开关电源CLC滤波电路中,电感对纹波抑制作用较大,电容作用较小;贴片铝电解效果最好,钽电解次之,直插铝电解效果最差;应选用mH级电感和100μF以上电容。 展开更多
关键词 开关电源 纹波 π型 clc
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基于盐逆境下植物CLC同源基因的发掘和功能解析的研究进展 被引量：7
8
作者 於丙军 刘振 卫培培 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期187-194,共8页
植物盐害的阴离子毒害主要由Cl^-造成,盐逆境下植物体内Cl^-吸收、运输及其调控的分子机制已成为植物耐盐性研究不可忽视的重要方面,但有关Cl^-毒害问题相对Na^+毒害和适应的研究在过去较少受到关注。Cl^-通道(chloride channels,CLCs)... 植物盐害的阴离子毒害主要由Cl^-造成,盐逆境下植物体内Cl^-吸收、运输及其调控的分子机制已成为植物耐盐性研究不可忽视的重要方面,但有关Cl^-毒害问题相对Na^+毒害和适应的研究在过去较少受到关注。Cl^-通道(chloride channels,CLCs)是一类广泛分布于原核和真核生物细胞膜(主要是内膜系统),以介导Cl^-为代表的阴离子运输的重要转运蛋白家族。本文对目前已报道的包括拟南芥、大豆、水稻等多种植物的CLC同源基因及其编码蛋白进行了系统的生物信息学分析,并对植物CLC同源基因参与耐氯(盐)功能解析方面的研究进展进行了归纳,为今后进一步发掘和利用植物耐氯(盐)基因,全面揭示植物耐盐性的分子机制和最终寻求提高大豆、水稻等作物耐氯(盐)性的分子育种途径,指明可借鉴的研究方向。 展开更多
关键词 植物clc同源基因 盐逆境 Cl^-通道蛋白 耐氯(盐)性
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ClC-3反义寡核苷酸对ConA诱导的T淋巴细胞增殖的影响 被引量：9
9
作者 钱艳 关永源 +3 位作者 王冠蕾 杨晓茹 贺华 丘钦英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期314-317,共4页
目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷... 目的　研究ClC 3蛋白在T淋巴细胞增殖过程中的作用。方法　采用脂质体转染技术 ,将寡核苷酸导入细胞 ,免疫印迹 (WesternBlot)方法分析ClC 3蛋白表达 ;[3H] TdR参入法观察ClC 3反义寡核苷酸对细胞增殖的作用。结果　①ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的ClC 3蛋白的表达 ;②ClC 3反义寡核苷酸浓度依赖性地抑制ConA诱导的T淋巴细胞增殖。结论　ClC 展开更多
关键词 clc-3 T淋巴细胞 反义寡核苷酸 增殖
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大豆基因组CLC同源基因家族的生物信息学分析 被引量：3
10
作者 李伟 王龙超 +1 位作者 曹金花 於丙军 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期35-43,共9页
利用NCBI网站、Phytozome数据库和有关生物信息学软件,对大豆基因组CLC（chloride channel）同源基因家族进行系统的预测分析和比较。结果表明：大豆CLC同源基因有8～9个拷贝,分别分布于第1、5、9、11、13、16和19号染色体上,内含子数目... 利用NCBI网站、Phytozome数据库和有关生物信息学软件,对大豆基因组CLC（chloride channel）同源基因家族进行系统的预测分析和比较。结果表明：大豆CLC同源基因有8～9个拷贝,分别分布于第1、5、9、11、13、16和19号染色体上,内含子数目为4～23;编码的大豆CLC蛋白氨基酸数量为725～823,整体一致性为63.43%,相对分子质量为（80～91）×103,理论等电点为6.45～8.94,带正或负电荷氨基酸残基比例为7%～10%,均为跨膜蛋白（含9～12个跨膜区）,除Glyma16g06190外均含有2个CBS结构域;具有（Ⅰ）GS/PGIPE、（Ⅱ）GKE/AGPLVH和（Ⅲ）PVGGVLFALEE/G 3个氨基酸残基保守区,其中相应关键氨基酸残基位点决定了它们不同的阴离子（Cl-或NO-3）优先选择属性和蛋白功能（通道或转运蛋白）属性。它们都与拟南芥CLC蛋白亚家族Ⅰ关系较近,其中GmCLC1（Glyma05g14760）、GmsCLC1、Glyma16g06190和Glyma19g25680与AtCLCa、AtCLCb处于同一分支,整体显示序列一致性为87.79%;Glyma09g28620和Glyma16g33351与AtCLCc、NtCLC1同源关系较近,序列一致性为70.99%;Glyma13g23080则与AtCLCg在同一分支,序列一致性为74.21%;而Glyma01g44950和Glyma11g00690则与AtCLCd同源关系最近,序列一致性为90.68%。qRT-PCR分析结果显示,在150mmol·L-1NaCl处理24 h过程中,GmsCLC1基因在栽培大豆N23674品种、野生大豆BB52种群及其后代4076株系中均上调表达,其中在BB52根中上升最显著。结论：大豆多个CLC同源基因在进化过程中发生的功能分化,可能在正常或盐胁迫条件下植株体内阴离子（包括Cl-、NO-3）稳态重建方面发挥不同作用。 展开更多
关键词 大豆 clc同源基因 CBS结构域 氨基酸残基保守区 通道蛋白 转运蛋白
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膀胱移行细胞癌的ClC-3和NF-κB的表达及意义 被引量：5
11
作者 汪岩 康劲松 +4 位作者 王心蕊 王医术 李洪岩 李扬 孙连坤 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期135-137,F0003,共4页
目的:探讨ClC-3和NF-κB在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学染色技术检测31例病理诊断为膀胱移行细胞癌和6例正常膀胱组织中ClC-3和NF-κB的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中ClC-3主要在癌细胞的胞膜表达,阳性表达... 目的:探讨ClC-3和NF-κB在膀胱移行细胞癌中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学染色技术检测31例病理诊断为膀胱移行细胞癌和6例正常膀胱组织中ClC-3和NF-κB的表达。结果:膀胱移行细胞癌组织中ClC-3主要在癌细胞的胞膜表达,阳性表达率74%(23/31)。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率40%(4/10),Ⅱ级阳性表达率81%(9/11)、Ⅲ级阳性表达率100%(10/10)。NF-κB在癌细胞的胞浆内表达,阳性表达率83%(26/31)。其中膀胱移行细胞癌Ⅰ级阳性表达率60%(6/10),Ⅱ级阳性表达率90%(10/11),Ⅲ级阳性表达率100%(10/10)。6例正常膀胱组织中仅有1例ClC-3表达弱阳性,NF-κB表达均为阴性。膀胱移行细胞癌组织中ClC-3和NF-κB阳性表达率高于正常膀胱组织(P<0.01)。结论:ClC-3和NF-κB可能与膀胱移行细胞癌病理分级和增殖有关。 展开更多
关键词 膀胱移行细胞癌 clc-3 NF-KB 免疫组织化学
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氯离子通道CLC-3在乳腺癌中的表达及临床意义 被引量：9
12
作者 赵维 王岩 +2 位作者 韩振国 孙连坤 张录民 《中国实验诊断学》 北大核心 2009年第3期350-352,共3页
目的研究氯离子通道CLC-3在乳腺癌组织中的表达,探讨其在乳腺癌诊断方面的临床意义及为乳腺癌发生发展方面进一步研究提供基础。方法在27例行乳腺癌改良根治术的乳腺癌患者中,分别将乳腺癌癌灶和周围正常组织用抗CLC-3抗体进行免疫组织... 目的研究氯离子通道CLC-3在乳腺癌组织中的表达,探讨其在乳腺癌诊断方面的临床意义及为乳腺癌发生发展方面进一步研究提供基础。方法在27例行乳腺癌改良根治术的乳腺癌患者中,分别将乳腺癌癌灶和周围正常组织用抗CLC-3抗体进行免疫组织化学染色。结果CLC-3蛋白主要表达在瘤细胞的胞浆和/或胞膜上。由于没有组间差异,应用χ2检验进行组间比较,其中乳腺癌患者21例(77.77%)阳性,6例(22.33%)阴性;乳腺正常组织中3例(11.1%%)阳性,24例(88.9%)阴性。χ2为24.3,P小于0.05,说明良恶性之间有明显差异。结论氯离子通道CLC-3在乳腺癌组织中高表达,恶性之间有明显差异。提示氯离子通道在乳腺癌发生及发展过程中有着病理生理及病理方面的临床意义,为乳腺癌的诊断及进一步研究提供临床应用基础。 展开更多
关键词 氯离子通道clc-3 乳腺癌 免疫组织化学
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刀豆蛋白A促进T淋巴细胞增殖与ClC-3蛋白的关系 被引量：4
13
作者 钱艳 关永源 +3 位作者 王冠蕾 杨晓茹 贺华 丘钦英 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第10期1132-1135,共4页
目的　研究刀豆蛋白A(ConA)促进T淋巴细胞增殖与内源性ClC 3蛋白的关系。方法　免疫印迹 (Westernblot)法检测ClC 3蛋白表达 ;[3 H] TdR参入法观察ConA对细胞增殖的影响。结果　①T淋巴细胞上有内源性ClC 3蛋白表达 ,分子量约为 80ku ;... 目的　研究刀豆蛋白A(ConA)促进T淋巴细胞增殖与内源性ClC 3蛋白的关系。方法　免疫印迹 (Westernblot)法检测ClC 3蛋白表达 ;[3 H] TdR参入法观察ConA对细胞增殖的影响。结果　①T淋巴细胞上有内源性ClC 3蛋白表达 ,分子量约为 80ku ;②ConA可浓度依赖性地促进T淋巴细胞增殖 ;③ConA刺激T淋巴细胞 2 4、4 8、72h后 ,ClC 3蛋白表达均增加 ;刺激 4 8h后ClC 3蛋白表达增加最多。④ConA可浓度依赖性地增加ClC 3蛋白表达。结论　T淋巴细胞上存在内源性ClC 3蛋白表达 ;ClC 展开更多
关键词 CL^-通道 clc-3 T淋巴细胞 增殖 免疫印迹
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人ClC-2基因小分子干扰RNA真核表达载体的构建和鉴定 被引量：4
14
作者 杨翔云 张勇 +4 位作者 赖小刚 裴建明 杨安钢 胡玉珍 周士胜 《医学研究生学报》 CAS 2006年第6期487-491,i0011,共6页
目的:构建靶向人C lC-2基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:根据DEQOR提供的siRNA设计原则和程序,设计两个靶向C lC-2基因的发夹状siRNA;通过化学合成的方法合成两对分别互补的寡核苷酸链,退火后得到编码该siRNA的C lC-2... 目的:构建靶向人C lC-2基因小分子干扰RNA(siRNA)真核细胞表达载体。方法:根据DEQOR提供的siRNA设计原则和程序,设计两个靶向C lC-2基因的发夹状siRNA;通过化学合成的方法合成两对分别互补的寡核苷酸链,退火后得到编码该siRNA的C lC-2基因片段。将该片段连接至经BglⅡ和HindⅢ双酶切的真核细胞表达载体pSUPER.puro的多克隆位点,转化扩增提取质粒;对重组质粒进行EcoRⅠ和HindⅢ双酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定。脂质体L ipofectam ineTM2000介导瞬时转染,通过RT-PCR检测人胶质瘤细胞系BT-325细胞中C lC-2mRNA表达。结果:经酶切电泳鉴定和DNA序列分析鉴定,目的片段与真核细胞表达载体pSUPER.puro连接正确。转染两重组质粒细胞的C lC-2 mRNA表达明显降低。结论:成功构建人C lC-2基因干扰真核表达载体2个,分别命名为pSUPER.puro-siC lC-21和pSUPER.puro-siC lC-22,可用于进一步研究C lC-2基因对人胶质瘤侵袭和迁移活动的影响。 展开更多
关键词 clc-2基因 人胶质瘤 RNA干扰 重组载体
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氯通道ClC-2反义寡核苷酸对顺铂作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响 被引量：3
15
作者 苏静 周磊 +2 位作者 张宏宇 孙连坤 康劲松 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期43-46,F0002,共5页
目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON... 目的:探讨氯通道ClC-2反义寡核苷酸(AON)抑制ClC-2基因表达对顺铂(DDP)作用下神经胶质瘤U251细胞侵袭力的影响,为ClC-2成为神经胶质瘤综合治疗的新基因靶点提供理论依据。方法:U251细胞按处理方法不同分为对照组(转染无义寡核苷酸)、AON组(转染ClC-2反义寡核苷酸)、DDP组(无义寡核苷酸与顺铂联用)和AON+DDP组(ClC-2反义寡核苷酸与顺铂联用)。应用RT-PCR检测相关基因ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达;Transwell小室侵袭实验检测各组细胞侵袭力;Transwell小室迁移实验检测各组细胞迁移率。结果:与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组ClC-2、cyclin D1、MMP-2、MMP-9 mRNA表达率降低(P<0.05);Transwell小室侵袭实验中对照组、AON组、DDP组和AON+DDP组侵袭细胞数分别为81.00±4.58、42.01±4.36、48.33±2.52和12.67±5.13;与对照组比较,AON组、DDP组和AON+DDP组穿透细胞数明显降低(P<0.05)。Transwell小室迁移实验中AON组、DDP组、AON+DDP组细胞迁移率(%)分别为72.40±2.20、51.48±1.29、37.87±1.50,与对照组比较均明显降低(P<0.05)。结论:①转染ClC-2反义寡核苷酸能有效抑制ClC-2 mRNA表达;②抑制ClC-2 mRNA能降低U251细胞的迁移力和侵袭力;③ClC-2 mRNA表达降低可促进顺铂对U251细胞迁移力和侵袭力的抑制作用。 展开更多
关键词 氯通道clc-2 反义寡核苷酸 顺铂 神经胶质瘤U251细胞 肿瘤浸润
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ClC-3 siRNA抑制鼻咽癌细胞调节性容积回缩 被引量：4
16
作者 叶东 张海峰 +2 位作者 朱林燕 王立伟 陈丽新 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期216-220,共5页
目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blottin... 目的用siRNA沉默ClC-3氯通道,探讨ClC-3氯通道在鼻咽癌CNE-2Z细胞调节性容积回缩(regulatory volumedecrease,RVD)中的作用。方法使用终浓度100 nmol/L的ClC-3 siRNA转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,流式细胞术检测siRNA的转染率,Western blotting检测ClC-3蛋白表达,活细胞图像系统分析对照组和ClC-3 siRNA组细胞在低渗(160mOsm/L)刺激时的容积调节能力。结果 ClC-3 siRNA转染率为(63.8±3.8)%(n=3,P<0.01),与对照组相比,ClC-3氯通道蛋白的表达减少(60.9±4.0)%(n=3,P<0.01)。对照组细胞的RVD为(42.6±2.8)%(n=20),ClC-3 siRNA组细胞在低渗液中的最大容积与对照组没有显著性差异,但RVD仅为(10.5±4.8)%,RVD抑制率达75.4%(P<0.01)。结论 ClC-3 siRNA成功转染鼻咽癌CNE-2Z细胞,特异性抑制ClC-3蛋白表达,显著降低细胞RVD能力,提示ClC-3氯通道在鼻咽癌细胞调节性容积回缩中起重要作用。 展开更多
关键词 clc-3氯通道 SIRNA 鼻咽癌细胞 细胞容积
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一种改进型CLC电流型谐振逆变器 被引量：1
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作者 刘教民 李建文 +2 位作者 李永刚 杨争艳 张军 《电工技术学报》 EI CSCD 北大核心 2011年第S1期125-129,共5页
针对电流型谐振逆变器中串联二极管反向过电压和负载槽路参数如何合理匹配的问题,提出了一种改进型CLC电流型谐振逆变器拓扑、通过串联缓冲电感、并联栅漏极电容,功率器件实现零电流开通、零电压关断,抑制了二极管产生浪涌电流;通过开... 针对电流型谐振逆变器中串联二极管反向过电压和负载槽路参数如何合理匹配的问题,提出了一种改进型CLC电流型谐振逆变器拓扑、通过串联缓冲电感、并联栅漏极电容,功率器件实现零电流开通、零电压关断,抑制了二极管产生浪涌电流;通过开关频率的改变以及三阶CLC负载中电容比例的定量分析,权衡输出电流与负载线圈支路电流大小,确定小容性的工作范围和输出有功功率最大值。试验结果证明所建拓扑的正确性、定量分析的有效性。 展开更多
关键词 电流型谐振逆变器 并联栅漏极电容 clc负载匹配 容性工作范围
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沉默ClC-3氯通道基因对HeLa细胞周期分布的影响 被引量：3
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作者 叶东 邢德刚 +2 位作者 曾志 陈丽新 王立伟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期257-262,共6页
目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative si... 目的:探讨沉默HeLa细胞的ClC-3氯通道基因后细胞周期分布的变化及其作用机制。方法:依照siRNA设计原则构建沉默ClC-3基因的ClC-3 siRNA并转染HeLa细胞;实验分为空白对照组(control组)、转染试剂对照组(Lipo组)、阴性对照组(negative siRNA组)和ClC-3 siRNA组。采用real-time PCR检测ClC-3 siRNA的沉默效率;流式细胞术检测细胞周期分布情况;Western blot检测ClC-3蛋白及相关细胞周期蛋白(cyclin)D1、细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)4、CDK6、P21和P27等表达。结果:CIC-3 siRNA成功沉默HeLa细胞的ClC-3基因。和其它组相比,ClC-3 siRNA组的细胞周期被阻抑在G_0/G_1期。CIC-3 siRNA组的cyclin D1、CDK4和CDK6蛋白表达水平明显下降,P21和P27蛋白表达水平明显上升。结论:沉默HeLa细胞ClC-3氯通道基因可影响cyclin D1、CDK4、CDK6、P21和27蛋白的表达水平胆抑HeLa细胞周期停滞在G_0/G_1期。 展开更多
关键词 clc-3氯通道 HELA细胞 细胞周期 细胞周期蛋白依赖激酶 P21 P27
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H_2ClCS单分子分解反应机理的理论研究 被引量：3
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作者 刘艳 任宏江 王艳丽 《分子科学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期416-421,共6页
用量子化学B3LYP/6-311+G(d,p)方法优化了H2ClCS单分子分解反应驻点物种的几何构型,并在相同水平上通过频率计算和内禀反应坐标(IRC)分析对过渡态结构及连接性进行了验证.用QCISD(T)/6-311++G(d,p)方法计算各物种的单点能,并对总能量进... 用量子化学B3LYP/6-311+G(d,p)方法优化了H2ClCS单分子分解反应驻点物种的几何构型,并在相同水平上通过频率计算和内禀反应坐标(IRC)分析对过渡态结构及连接性进行了验证.用QCISD(T)/6-311++G(d,p)方法计算各物种的单点能,并对总能量进行了零点能校正.利用经典过渡态理论(TST)与变分过渡态理论(CVT)并结合小曲率隧道效应模型(SCT),计算了主反应通道在200 K～2 000 K温度范围内的速率常数kTST,kCVT和kCVT/SCT.结果表明,H2ClCS存在8条可能的裂解通道,可生成产物P1(HCS+HCl),P2(CSH+HCl),P3(H2S+CCl)和P4(ClHCS+H).所有反应均为吸热反应.相对于H2ClCS,各产物能量分别为60.9,222.9,275.7和156.9 kJ.mol-1.通道H2ClCS→TS3→P1的反应势垒为81.5 kJ.mol-1,是标题反应的主反应通道,其余通道为次反应通道.在200 K～2 000 K温度区间内得到主反应通道的表观反应速率常数三参数表达式为.kCVT/SCT=8.7610T0.79exp(-4 053.6/T)s-1. 展开更多
关键词 H2clcS 反应机理 分解反应
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硼替佐米对多发性骨髓瘤CLC-3表达的影响 被引量：3
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作者 庞缨 汤勇波 +3 位作者 李澄宇 谢玮 郭锐 刘捷 《现代肿瘤医学》 CAS 2015年第16期2383-2386,共4页
目的:研究接受硼替佐米化疗的多发性骨髓瘤(MM)患者在化疗前后CLC-3蛋白表达的变化,探讨硼替佐米对MM患者CLC-3的影响及疗效的变化。方法:流式细胞技术分离12例初发、及复发难治的多发性骨髓瘤患者的浆(瘤)细胞,检测其CLC-3蛋白表达情... 目的:研究接受硼替佐米化疗的多发性骨髓瘤(MM)患者在化疗前后CLC-3蛋白表达的变化,探讨硼替佐米对MM患者CLC-3的影响及疗效的变化。方法:流式细胞技术分离12例初发、及复发难治的多发性骨髓瘤患者的浆(瘤)细胞,检测其CLC-3蛋白表达情况。然后所有观察病例均予以硼替佐米为主的化疗方案治疗至少4(4-6)个疗程,检测其CLC-3蛋白表达的水平,了解该指标与临床疗效的关系。结果:12例MM患者治疗前的CLC-3均存在高表达。经硼替佐米为主的化疗方案治疗后,其表达水平呈下降趋势。6例完全缓解(CR)及4例非常好的部分缓解(VGPR)的患者,CLC-3表达水平恢复接近正常。结论:硼替佐米可以对多发性骨髓瘤患者的CLC-3的表达情况产生影响,CLC-3表达水平与硼替佐米疗效呈负相关性。硼替佐米直接能否下调CLC-3水平,以及氯通道可否作为治疗该病的新靶点值得进一步研究。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 硼替佐米 氯通道 clc-3
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