CISD2敲除细胞系的构建及其对口蹄疫病毒复制的影响

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作者 陈治彤 张伟 +6 位作者 蔡建涛 吕岳芹 刘泓屹 曹伟军 顾有方 郑海学 杨帆 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第7期862-869,共8页

本研究旨在初步探究细胞铁硫蛋白2(CISD2)对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。运用CRISPR/Cas9基因编辑方法成功构建CISD2基因敲除的猪肾细胞系(PK-15),通过测序与Western-blot鉴定CISD2基因的敲除,采用间接免疫荧光试验、Western-blot、RT-... 本研究旨在初步探究细胞铁硫蛋白2(CISD2)对口蹄疫病毒(FMDV)复制的影响。运用CRISPR/Cas9基因编辑方法成功构建CISD2基因敲除的猪肾细胞系(PK-15),通过测序与Western-blot鉴定CISD2基因的敲除,采用间接免疫荧光试验、Western-blot、RT-qPCR等方法比较FMDV在CISD2基因敲除细胞系和野生型细胞中的复制差异,统计分析CISD2对FMDV复制的影响。结果显示,测序及Western-blot证实CISD2基因敲除单克隆细胞系构建成功,间接免疫荧光试验、Western-blot、RT-qPCR等方法均显示FMDV在CISD2基因敲除细胞中的复制水平显著高于野生型细胞。本研究成功利用CRISPR/Cas9系统构建了CISD2基因敲除细胞系,并发现在该细胞中能显著促进口蹄疫病毒复制。上述结果为进一步探究CISD2的功能及其在调控FMDV等病毒感染机制方面提供了材料和数据支撑。 展开更多

关键词 口蹄疫病毒 CRISPR/Cas9 cisd2基因 细胞系

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CISD2抑制铁死亡减轻气道上皮细胞炎症损伤

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作者 陈雪 宁谦 《山西医科大学学报》 2025年第4期390-397,共8页

目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-丝氨酸-组氨酸(CDGSH)铁硫结构域蛋白2(CISD2)在调控气道上皮细胞炎症损伤与铁死亡中的作用及其可能的分子机制。方法构建过表达CISD2的重组慢病毒(LV),转染人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)以实现CISD2... 目的探讨半胱氨酸-天冬氨酸-甘氨酸-丝氨酸-组氨酸(CDGSH)铁硫结构域蛋白2(CISD2)在调控气道上皮细胞炎症损伤与铁死亡中的作用及其可能的分子机制。方法构建过表达CISD2的重组慢病毒(LV),转染人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)以实现CISD2过表达。采用脂多糖(LPS)和白细胞介素-13(IL-13)刺激BEAS-2B细胞以构建气道上皮细胞损伤模型。将BEAS-2B细胞分为对照组、模型组、模型+LV-Ctrl组、模型+LV-CISD2组和模型+LV-CISD2+ML385(Nrf2抑制剂)组。采用Western blot检测CISD2、核因子红细胞2相关因子2(Nrf2)、溶质载体家族7第11成员(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平。采用细胞计数试剂盒-8(CCK-8)评估细胞活性。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测炎症因子IL-6和IL-8的表达水平。采用C11-BODIPY荧光探针测定脂质过氧化。采用相关试剂盒检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和铁离子的水平。结果与对照组比较,模型组和模型+LV-Ctrl组CISD2的表达水平下降(P<0.01);与模型组和模型+LVCtrl组比较,模型+LV-CISD2组CISD2表达水平升高(P<0.01)。与对照组比较,模型组和模型+LV-Ctrl组细胞活性降低(P<0.01),IL-6和IL-8的表达增加(P<0.05),脂质过氧化和铁离子水平升高(P<0.01),Nrf2的表达增加(P<0.05),SLC7A11和GPX4的表达减少(P<0.01)。与模型组和模型+LV-Ctrl组比较,模型+LV-CISD2组细胞活性升高(P<0.01),IL-6和IL-8的表达减少(P<0.05),脂质过氧化和铁离子水平降低(P<0.01),Nrf2、SLC7A11和GPX4的表达增加(P<0.01)。与模型+LV-CISD2组比较,模型+LV-CISD2+ML385组Nrf2、SLC7A11和GPX4的表达减少(P<0.01),细胞活性降低(P<0.01),而脂质过氧化和铁离子水平升高(P<0.01)。结论CISD2过表达能够减轻气道上皮细胞炎症损伤,其作用机制可能与调节Nrf2-SLC7A11/GPX4信号通路以抑制铁死亡相关。 展开更多

关键词 哮喘 气道上皮细胞 炎症损伤 铁死亡 cisd2 脂质过氧化 NRF2

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CISD2基因对膀胱癌预后和诊断的系统性分析

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作者 于鹏 贺天珍 +9 位作者 李兆峰 赵凯 张宗亮 尹心宝 王振林 张玉莲 杨瀚 李雪禹 王庆雷 王科 《临床医学进展》 2023年第1期737-748,共12页

目的:研究CISD2在膀胱癌(bladder cancer, BLCA)中的表达水平与生存预后的关系,预测患者的生存期,并分析CISD2的表达水平与免疫细胞浸润的相关性,从而研究该基因对肿瘤进展的影响。方法:用R分析CISD2在TCGA-BLCA数据库中的mRNA表达水平... 目的:研究CISD2在膀胱癌(bladder cancer, BLCA)中的表达水平与生存预后的关系,预测患者的生存期,并分析CISD2的表达水平与免疫细胞浸润的相关性,从而研究该基因对肿瘤进展的影响。方法:用R分析CISD2在TCGA-BLCA数据库中的mRNA表达水平和临床数据,并对CISD2在膀胱癌中的共表达基因进行功能和信号通路富集分析。进一步用R语言分析CISD2与免疫细胞浸润的关系。结果:生物信息学分析表明CISD2在膀胱癌组织中表达水平显著高于相对应的癌周正常膀胱组织(P dm cells、T helper cells、Tgd、Neutrophils、Macrophages等免疫细胞浸润呈正相关关系,与pDC、NK CD56bright cells、Mast cells及B cells的浸润水平呈负相关关系。结论:CISD2在BLCA中可能与不良预后相关,并可能为BLCA的诊断和治疗提供新分子靶点。 展开更多

关键词 膀胱癌 cisd2 TCGA 预后 诊断

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CISD2在早期宫颈腺癌中的表达和临床意义 被引量：1

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作者 刘璐欣 何勉 +2 位作者 刘军秀 夏梦 王晶 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期728-733,共6页

【目的】:探讨CISD2在早期宫颈腺癌组织中的表达及其与临床特征的关系。【方法】采用免疫组织化学染色法分析CISD2在56例FIGO分期为IB-IIA期的早期宫颈腺癌组织中的表达,并以3例正常宫颈组织作为阴性对照。运用统计学分析CISD2表达水平... 【目的】:探讨CISD2在早期宫颈腺癌组织中的表达及其与临床特征的关系。【方法】采用免疫组织化学染色法分析CISD2在56例FIGO分期为IB-IIA期的早期宫颈腺癌组织中的表达,并以3例正常宫颈组织作为阴性对照。运用统计学分析CISD2表达水平与早期宫颈腺癌的临床病理特点与预后的关系。【结果】CISD2在FIGO分期为IB-IIA期的早期宫颈腺癌患者组织中44.6%为高表达,55.4%为低表达,在正常宫颈组织中不表达。CISD2的表达水平与早期宫颈腺癌患者深肌层浸润(P=0.023),淋巴结转移(P=0.003)和卵巢转移(P=0.014)有明显相关。高表达CISD2的早期宫颈腺癌患者5年生存率明显低于CISD2低表达患者(P=0.002)。多因素分析提示CISD2的表达水平是早期宫颈腺癌患者总体生存期的独立预测指标(P=0.027)。【结论】在早期宫颈腺癌患者中CISD2的表达与临床特征和预后有关,它可能是一种新的预测早期宫颈腺癌患者预后的分子标志物。 展开更多

关键词 cisd2 早期宫颈腺癌 预后标志物

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CISD2在肝细胞肝癌组织和细胞中的表达及其临床意义 被引量：1

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作者 刘发煇 侯婉云 罗春英 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第24期4287-4291,共5页

目的:探究CDGSH铁硫结构域2(CISD2)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和细胞中的表达及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测100例HCC肿瘤组织标本及46例癌旁肝组织标本中CISD2的蛋白表达水平,分析CISD2与临... 目的:探究CDGSH铁硫结构域2(CISD2)在肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)组织和细胞中的表达及临床病理意义。方法:采用免疫组织化学染色方法检测100例HCC肿瘤组织标本及46例癌旁肝组织标本中CISD2的蛋白表达水平,分析CISD2与临床病理特征、增殖相关蛋白Ki-67、患者生存率的相关性;运用Western blot法检测人HCC细胞株BEL7404、HepG2、SMMC-7721以及人正常肝细胞株L02中CISD2的表达,分析其表达差异。结果:CISD2在HCC肿瘤组织中的表达水平明显高于癌旁肝组织,CISD2在肝癌细胞株中的表达水平也明显高于正常肝细胞,差异有统计学意义(P<0.01)。CISD2的表达与HCC患者的肿瘤大小(P<0.05)以及Ki-67指数相关(P<0.001),CISD2高表达患者的总生存率低于低表达者。结论:CISD2在HCC组织和细胞中高表达,其表达水平与患者的预后有关。CISD2可能成为HCC预后判断的标志和治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 cisd2 肝细胞肝癌 增殖 预后

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结直肠癌患者癌组织DPD和CISD2及NAT10表达与预后的相关性 被引量：2

6

作者 李达 石三保 张成 《中华实用诊断与治疗杂志》 2023年第8期797-801,共5页

目的观察结直肠癌患者癌组织DPD、CISD2、NAT10表达变化,探讨其与结直肠癌患者预后的相关性。方法2016年1月—2017年1月中国人民解放军北部战区总医院诊治结直肠癌患者143例,均行手术治疗,术后采用5-氟尿嘧啶化疗。记录患者临床分期、... 目的观察结直肠癌患者癌组织DPD、CISD2、NAT10表达变化,探讨其与结直肠癌患者预后的相关性。方法2016年1月—2017年1月中国人民解放军北部战区总医院诊治结直肠癌患者143例,均行手术治疗,术后采用5-氟尿嘧啶化疗。记录患者临床分期、远处转移情况等临床病理资料,采用免疫组织化学法检测手术切除的结直肠癌及癌旁组织DPD、CISD2、NAT10表达情况,分析癌组织DPD、CISD2、NAT10表达与结直肠癌患者临床病理特征的关系。随访5年,根据生存情况将143例患者分为预后良好组101例和预后不良组42例,比较2组临床病理特征及癌组织DPD、CISD2、NAT10阳性表达率;采用多因素Cox回归分析结直肠癌患者预后不良的影响因素;采用相加模型分析结直肠癌组织CISD2、NAT10表达对DPD表达的交互作用。结果结直肠癌组织DPD、CISD2、NAT10阳性表达率(56.64%、51.75%、53.15%)均高于癌旁组织(18.88%、28.67%、26.57%)(P<0.05)。癌组织DPD、CISD2、NAT10阳性表达的结直肠癌患者临床分期Ⅲ期(64.20%、64.86%、61.84%)、有远处转移(22.22%、29.73%、26.32%)比率分别高于癌组织DPD、CISD2、NAT10阴性表达者(38.71%、9.68%,40.58%、2.90%,43.28%、5.97%)(P<0.05),分化程度、淋巴结转移、神经及脉管侵犯比率与癌组织DPD、CISD2、NAT10阴性表达者比较差异均无统计学意义(P>0.05)。预后不良组低分化、临床分期Ⅲ期、有远处转移比率(76.19%、85.71%、52.38%)及癌组织DPD、CISD2、NAT10阳性表达率(80.95%、78.57%、88.10%)均高于预后良好组(41.58%、39.60%、1.98%、46.53%、40.59%、38.61%)(P<0.05),淋巴结转移、神经及脉管侵犯比率与预后良好组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。癌组织DPD阳性(HR=2.987,95%CI:1.658~4.068,P<0.001)、CISD2阳性(HR=2.574,95%CI:1.245~3.874,P<0.001)、NAT10阳性(HR=3.175,95%CI:2.547~3.957,P<0.001)是结直肠癌患者预后不良的影响因素。结直肠癌组织CISD2、NAT10对DPD阳性存在正向交互作用(RERI=4.254,95%CI:3.251~5.064;AP=0.435,95%CI:0.329~0.516;SI=1.940,95%CI:1.755~2.313);CISD2、NAT10均为阳性时DPD阳性的风险是二者均为阴性时的9.778倍(OR=9.778,95%CI:7.029~11.283,P<0.001)。结论癌组织CISD2、NAT10、DPD阳性表达的结直肠癌患者预后不良,CISD2、NAT10表达对DPD阳性表达存在正向交互作用,可能与促进肿瘤上皮-间质转化及5-氟尿嘧啶耐药有关。 展开更多

关键词 结直肠癌 DPD cisd2 NAT10 上皮-间质转化 5-氟尿嘧啶 耐药

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CISD2基因沉默通过AKT通路抑制人骨肉瘤细胞U2OS的增殖 被引量：2

7

作者 李嘉 王磊 王振宇 《解剖科学进展》 2019年第2期142-145,共4页

目的检测CDGSH铁硫结构域2 (CDGSH iron sulfur domain 2, CISD2)基因对骨肉瘤细胞增殖能力的影响。方法应用化学合成小干扰RNA技术沉默人骨肉瘤细胞系U2OS中CISD2基因的表达,分别通过免疫荧光染色与Western blot实验检测基因沉默效率;... 目的检测CDGSH铁硫结构域2 (CDGSH iron sulfur domain 2, CISD2)基因对骨肉瘤细胞增殖能力的影响。方法应用化学合成小干扰RNA技术沉默人骨肉瘤细胞系U2OS中CISD2基因的表达,分别通过免疫荧光染色与Western blot实验检测基因沉默效率;通过MTT实验与克隆形成实验,研究沉默CISD2基因对细胞增殖能力的影响;流式细胞术检测细胞周期;Western blot实验检测AKT,p-AKT蛋白的表达。结果设计的siRNA抑制人类骨肉瘤细胞系U2OS细胞CISD2基因表达。沉默CISD2基因抑制U2OS细胞的增殖能力与克隆形成能力;流式细胞术实验结果表明沉默CISD2可以诱导U2OS细胞G_0/G_1期抑制;Western blot实验显示沉默CISD2可以抑制p-AKT蛋白的表达。结论沉默CISD2基因抑制骨肉瘤细胞系U2OS的增殖能力与抑制AKT信号传导通路相关。 展开更多

关键词 骨肉瘤 CDGSH铁硫结构域2 增殖

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New insight into curcumin-based therapy in spinal cord injuries： CISD2 regulation 被引量：1

8

作者 Chai-Ching Lin Muh-Shi Lin 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2016年第2期222-223,共2页

Multiple protective effects of curcumin in cases of spinal cord injuries（SCIs）：Curcumin[1,7-bis（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1,6-heptadiene-3,5-dione]is a nonsteroidal,naturally occurring compound commonly utilized... Multiple protective effects of curcumin in cases of spinal cord injuries（SCIs）：Curcumin[1,7-bis（4-hydroxy-3-methoxyphenyl）-1,6-heptadiene-3,5-dione]is a nonsteroidal,naturally occurring compound commonly utilized as a dietary pigment as well as a spice in India.It is obtained from curcuma longa in. 展开更多

关键词 cisd2 regulation SCI New insight into curcumin-based therapy in spinal cord injuries

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乳腺癌组织中CISD2基因的表达及临床意义 被引量：2

9

作者 王海燕 刘建 +3 位作者 陈晓玲 马艳荣 邢秀玲 牛磊 《解放军预防医学杂志》 CAS 2019年第3期38-39,42,共3页

目的检测乳腺癌患者癌组织中CISD2的表达,分析其表达与临床病理特征、预后的关系。方法收集唐山市人民医院、255医院、唐山工人医院2012-2014年经手术切除、确诊为乳腺癌病例105例,rtPCR及Western blot检测CISD2的表达,并回顾分析其临... 目的检测乳腺癌患者癌组织中CISD2的表达,分析其表达与临床病理特征、预后的关系。方法收集唐山市人民医院、255医院、唐山工人医院2012-2014年经手术切除、确诊为乳腺癌病例105例,rtPCR及Western blot检测CISD2的表达,并回顾分析其临床资料及预后情况。结果 rtPCR及Western blot检测发现:与癌旁组织比较,乳腺癌组织中CISD2 mRNA及蛋白的表达水平明显上调(P<0.05);单因素分析显示:临床分级、淋巴转移、复发情况有关(P<0.05),且临床分级Ⅲ～Ⅳ人群、淋巴转移人群及复发人群CISD2基因明显高表达;COX回归分析发现临床分级、淋巴转移、复发情况、CISD2表达水平与患者的预后有关(P<0.05),且CISD2高表达组比低表达组生存率低。结论 CISD2的高表达是乳腺癌预后不良的独立危险因素,可能会导致淋巴转移、肿瘤复发,导致总体生存率下降,应重视早期筛查和治疗。 展开更多

关键词 乳腺癌 cisd2 基因 临床意义

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基于生物信息学分析CISD2在肝细胞癌中的表达意义及功能网络关系

10

作者 刘发煇 侯婉云 +1 位作者 朱丽兰 罗春英 《右江医学》 2020年第6期415-420,共6页

目的探究CDGSH铁硫结构域2(CISD2)在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用、临床病理意义及其潜在作用机制。方法 Kaplan Meier-plotter分析CISD2 mRNA表达与HCC患者5年生存率的关系;在线网页工具STRING构建CISD2蛋白相互作用网络,基因本体论... 目的探究CDGSH铁硫结构域2(CISD2)在肝细胞癌(HCC)发生发展中的作用、临床病理意义及其潜在作用机制。方法 Kaplan Meier-plotter分析CISD2 mRNA表达与HCC患者5年生存率的关系;在线网页工具STRING构建CISD2蛋白相互作用网络,基因本体论富集分析CISD2蛋白质功能;网页工具TIMER分析CISD2在HCC中与免疫细胞浸润含量之间的关系;GSEA分析CISD2高表达在HCC中参与的信号通路。结果 (1)CISD2 mRNA高表达的HCC患者的5年总生存率低于低表达患者;(2)CISD2与B细胞、CD4^+T细胞、CD8^+T细胞、巨噬细胞和树突状细胞的浸润呈负相关;(3)CISD2主要参与了细胞内二价铁硫簇结合,铁硫簇绑定以及金属集群绑定;(4)GSEA分析表明CISD2高表达在HCC中促进卟啉和叶绿素代谢,戊糖、葡萄糖醛酸转换,抗坏血酸和醛酸代谢,氨基糖和核苷酸糖代谢,淀粉和蔗糖代谢等多条代谢通路。结论 (1)在HCC中,CISD2 mRNA高表达与HCC患者的较差预后有关。(2)CISD2可能通过影响肿瘤细胞的铁离子、能量代谢和肿瘤免疫微环境促进肿瘤细胞的生存和增殖。 展开更多

关键词 cisd2 肝细胞癌 生物信息学 预后 功能网络分析

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Wolfram综合征的临床特征、诊断及治疗 被引量：5

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作者 喻露 刘玉佳 +2 位作者 邱月 韩丹 王桂侠 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2020年第15期1195-1198,共4页

Wolfram综合征是一种罕见的常染色体隐性遗传神经退行性疾病,其主要临床特征为尿崩症、糖尿病、视神经萎缩和感音神经性耳聋。绝大多数患者由WFS1基因突变导致,CISD2基因可引起另一种表型特征的Wolfram综合征,称为Wolfram综合征2型。该... Wolfram综合征是一种罕见的常染色体隐性遗传神经退行性疾病,其主要临床特征为尿崩症、糖尿病、视神经萎缩和感音神经性耳聋。绝大多数患者由WFS1基因突变导致,CISD2基因可引起另一种表型特征的Wolfram综合征,称为Wolfram综合征2型。该病预后差,病死率高,60%的患者在35岁前死亡。虽然目前尚无有效的方法能够延迟、停止或逆转其进展,但规范的临床监测及支持性护理有助于改善患者症状,提高生活质量。现就Wolfram综合征的发病机制、临床特征、诊断及新的治疗方法进行详细阐述。 展开更多

关键词 WOLFRAM综合征 内质网应激 WFS1基因 cisd2基因

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