[目的]探讨MUC16蛋白的硫酸化O型连接糖对食管鳞癌细胞的迁移作用。[方法]TCGA数据库分析MUC16在食管癌组织中的表达水平。过表达或敲低MUC16后,划痕实验检测食管鳞癌细胞KYSE-30的迁移水平。过表达或敲低CHST4后,Lectin blot和Alcian b...[目的]探讨MUC16蛋白的硫酸化O型连接糖对食管鳞癌细胞的迁移作用。[方法]TCGA数据库分析MUC16在食管癌组织中的表达水平。过表达或敲低MUC16后,划痕实验检测食管鳞癌细胞KYSE-30的迁移水平。过表达或敲低CHST4后,Lectin blot和Alcian blue染色检测食管鳞癌细胞中MUC16的O型连接糖硫酸化水平以及食管鳞癌细胞的迁移水平,LC-ESI-MS检测MUC16的O型连接糖类型。[结果]相比于食管正常组织,食管癌组织中MUC16和CHST4的表达水平较高(0.78±0.13 vs 0.09±0.02;0.43±0.08 vs 0.07±0.02,P<0.05)。过表达MUC16后,食管鳞癌细胞的迁移水平显著上升;敲低MUC16后,食管鳞癌细胞的迁移水平显著下降。敲低CHST4后,MUC16 O型连接糖的硫酸化水平显著下降,食管鳞癌细胞的迁移水平显著下降;过表达CHST4后,MUC16 O型连接糖的硫酸化水平显著上升,食管鳞癌细胞的迁移水平显著上升。食管鳞癌细胞在m/z 813和1121处发现了含有GlcNAc-6-O-硫酸的低聚糖,而敲低CHST4后硫酸化的低聚糖水平降低。[结论]CHST4介导的MUC16蛋白O型连接糖硫酸化对食管鳞癌细胞的迁移具有促进作用(1.00±0.05 vs 1.83±0.12)。展开更多
文摘[目的]探讨MUC16蛋白的硫酸化O型连接糖对食管鳞癌细胞的迁移作用。[方法]TCGA数据库分析MUC16在食管癌组织中的表达水平。过表达或敲低MUC16后,划痕实验检测食管鳞癌细胞KYSE-30的迁移水平。过表达或敲低CHST4后,Lectin blot和Alcian blue染色检测食管鳞癌细胞中MUC16的O型连接糖硫酸化水平以及食管鳞癌细胞的迁移水平,LC-ESI-MS检测MUC16的O型连接糖类型。[结果]相比于食管正常组织,食管癌组织中MUC16和CHST4的表达水平较高(0.78±0.13 vs 0.09±0.02;0.43±0.08 vs 0.07±0.02,P<0.05)。过表达MUC16后,食管鳞癌细胞的迁移水平显著上升;敲低MUC16后,食管鳞癌细胞的迁移水平显著下降。敲低CHST4后,MUC16 O型连接糖的硫酸化水平显著下降,食管鳞癌细胞的迁移水平显著下降;过表达CHST4后,MUC16 O型连接糖的硫酸化水平显著上升,食管鳞癌细胞的迁移水平显著上升。食管鳞癌细胞在m/z 813和1121处发现了含有GlcNAc-6-O-硫酸的低聚糖,而敲低CHST4后硫酸化的低聚糖水平降低。[结论]CHST4介导的MUC16蛋白O型连接糖硫酸化对食管鳞癌细胞的迁移具有促进作用(1.00±0.05 vs 1.83±0.12)。
