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肿瘤相关抗原编码基因CHP2对细胞增殖的抑制作用 被引量：2
1
作者 曲迅 杨美香 +1 位作者 刘福利 孙宝柱 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2003年第4期253-256,共4页
目的:研究肿瘤相关抗原编码基因CHP2对细胞增殖作用的影响.方法:采用PCR方法获得目的基因,克隆至真核表达载体pcDNA3,对产生的重组子进行酶切鉴定及DNA序列测定;测序正确的重组子用脂质体转染的方法转入293细胞系,药物G418筛选稳定转染... 目的:研究肿瘤相关抗原编码基因CHP2对细胞增殖作用的影响.方法:采用PCR方法获得目的基因,克隆至真核表达载体pcDNA3,对产生的重组子进行酶切鉴定及DNA序列测定;测序正确的重组子用脂质体转染的方法转入293细胞系,药物G418筛选稳定转染细胞株,分别在基因水平以及蛋白水平进行鉴定;用3H-TdR掺入的方法检测CHP2对细胞增殖的影响.结果:经琼脂糖凝胶电泳及测序鉴定,所插入的片断方向及序列完全正确;Western blotting结果显示,获得的稳定转染细胞株能够高效的表达CHP2蛋白.细胞增殖实验结果显示CHP2稳定转染细胞株的3H-TdR掺入值明显低于对照组.结论:CHP2在细胞中的有效表达能够显著显著抑制细胞的增殖,CHP2可能是参与细胞生长调控的一个重要的调节因子. 展开更多
关键词 肿瘤相关抗原 chp2 稳定转染 细胞增殖
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肿瘤相关基因chp2在白血病细胞中表达的研究 被引量：11
2
作者 李彬 李洪强 +4 位作者 马丽 芦颖 李庆华 茹永新 庞天翔 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期734-737,共4页
为了探讨人类肿瘤相关基因chp2在白血病原代细胞和白血病细胞系中表达的特点,选择24例白血病患者、4种白血病细胞系及10名正常人外周血单个核细胞(PBMNC),用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测chp2基因的表达水平。结果显示,10例正常对照细胞c... 为了探讨人类肿瘤相关基因chp2在白血病原代细胞和白血病细胞系中表达的特点,选择24例白血病患者、4种白血病细胞系及10名正常人外周血单个核细胞(PBMNC),用实时定量PCR(RQ-PCR)方法检测chp2基因的表达水平。结果显示,10例正常对照细胞chp2mRNA的表达检出率为80%,阳性的表达量为(0.744±0.682)×105cpsμ/。l白血病原代细胞和白血病细胞系chp2mRNA的表达量较正常对照组明显增高(p<0.05),原代细胞中的7例急性髓细胞白血病(AML)、6例慢性髓细胞白血病(CML)、7例急性淋巴细胞白血病(ALL)和4例慢性淋巴细胞白血病(CLL)的表达量分别是(11.637±5.588)、(6.122±3.785)、(4.262±2.561)和(3.434±1.974)×105cpsμ/l;白血病细胞系中K562细胞、Jurkat细胞、HL-60细胞和M07e细胞的表达量为(5.243±1.852)、(4.463±1.621)、(4.137±1.837)和(2.578±1.137)×106cpsμ/l,白血病细胞系的表达量高于原代细胞。结论:人类肿瘤相关基因chp2在白血病原代细胞和白血病细胞系中表达水平明显增高,提示其在白血病细胞生长过程中发挥着重要的作用。 展开更多
关键词 chp2 肿瘤相关基因 白血病细胞 实时定量PCR
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黑鲷钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)基因克隆及表达差异 被引量：1
3
作者 陈淑吟 张志勇 +5 位作者 孙瑞健 贾超峰 孟乾 祝斐 张志伟 吴国均 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期661-669,共9页
钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)为参与细胞内pH及细胞增殖调控的关键因子。用RACE末端PCR方法得到黑鲷CHP2(AsCHP2)基因全长cDNA,并利用生物信息学方法分析该基因的序列特征与同源性;同时利用实时荧光定量PCR方法检测AsCHP2的mRNA在黑鲷整... 钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)为参与细胞内pH及细胞增殖调控的关键因子。用RACE末端PCR方法得到黑鲷CHP2(AsCHP2)基因全长cDNA,并利用生物信息学方法分析该基因的序列特征与同源性;同时利用实时荧光定量PCR方法检测AsCHP2的mRNA在黑鲷整体仔鱼,90d、180d黑鲷,杂交F_(2)(真鲷♂×黑鲷♀)及回交F_(1)(黑鲷♂×杂交F_(1)♀)的脑、心脏、肌肉、肝脏和性腺等组织中的表达。研究结果表明:(1)AsCHP2cDNA序列全长1722bp,5'-非编码区(UTR)长度69bp,3'-UTR长度1069bp,开放阅读框长度为585bp,编码194个氨基酸;其结构域包含2个EF-hand结构及1个核输出信号;其蛋白分子质量为21.87ku,理论等电点为4.89;同源建模获得了CHP2的二级与三维结构。AsCHP2基因的核苷酸序列与其他鱼类的相似性为86%~81%,编码的氨基酸序列与其他鱼类的相似性为80%~72%。邻接系统树显示了黑鲷CHP2氨基酸序列与其他鱼类的进化关系。序列比对与结构分析表明,AsCHP2基因具有典型的CHP2基因结构。(2)AsCHP2的mRNA在黑鲷的仔鱼期(5~35d)及大规格个体的脑、肝脏及肌肉组织中均有表达,在90d个体各组织中的表达量均高于在180d个体各组织中的表达量;在180d黑鲷、杂交F_(2)及回交F_(1)的个体中,基因在脑、肝脏、肌肉及性腺等不同组织中均有表达,且均在心脏中高表达、在性腺中低表达。这些结果显示,CHP2基因在海水鱼类的生长、发育过程中发挥功能。 展开更多
关键词 黑鲷 钙调磷酸酶B同源蛋白2基因 基因克隆 MRNA表达
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EF-hand对钙调磷酸酶B同源蛋白2的生物学功能影响 被引量：1
4
作者 张洪菊 李庆华 +3 位作者 王立洪 蔺亚妮 常国强 庞天翔 《中国医药导报》 CAS 2012年第35期28-31,共4页
目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋白1(NHE1)共转染PS120细胞;采用激光共聚焦显微镜、膜滤过法... 目的探讨EF-hand结构对钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)的生物学功能的影响。方法通过PCR扩增CHP2 cDNA片段,构建带GFP标签的野生型及EF-hand突变型CHP2表达质粒;与钠氢离子交换蛋白1(NHE1)共转染PS120细胞;采用激光共聚焦显微镜、膜滤过法、免疫共沉淀等手段,明确CHP2结合Ca2+的数量、部位,以及对CHP2与NHE1结合的影响;在血清饥饿条件下,观察表达EF-hand突变的CHP2(NHE1/CHP2-EF3m/4m)对细胞生存的影响。结果分别突变EF-hand结构EF3或EF4,CHP2结合Ca2+减少;同时突变EF3和EF4,CHP2不能结合Ca2+;免疫共沉淀实验结果显示乙二胺四乙酸(EDTA)剥夺CHP2携带的Ca2+之后,CHP2与NHE1结合的数量明显减少;不携带Ca2+的CHP2在细胞内与NHE1结合的数量也明显减少;在血清饥饿条件下,表达不携带Ca2+的CHP2的细胞存活数量减少。结论 CHP2能结合2个Ca2+,结合部位在EF3和EF4;携带Ca2+能增强CHP2与NHE1的结合能力;在血清饥饿条件下,携带Ca2+的CHP2能提升细胞抵抗死亡的能力。 展开更多
关键词 钙调磷酸酶B同源蛋白2 钠氢交换蛋白1 EF-HAND CA2+
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利用AutoCAD和Clip2Net技术研究开发《机械制图》教学资源库 被引量：1
5
作者 许菁 《电子世界》 2012年第16期146-148,共3页
机械制图教学以形象思维和空间想象的训练贯彻始终,特别是对于一些基础较差,没有一点实践经验的学生来说,很容易产生畏难和厌学情绪,利用AutoCAD和Clip2Net技术研究开发《机械制图》教学资源库,进一步探索新的教学理念,研究教学方法,采... 机械制图教学以形象思维和空间想象的训练贯彻始终,特别是对于一些基础较差,没有一点实践经验的学生来说,很容易产生畏难和厌学情绪,利用AutoCAD和Clip2Net技术研究开发《机械制图》教学资源库,进一步探索新的教学理念,研究教学方法,采用信息化教学手段,调动学生学习积极性,以提高教学效率。 展开更多
关键词 AUTOCAD chp2Net 资源库
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钙调磷酸酶B同源蛋白2在胃癌恶性表型中的作用及其意义
6
作者 陆冰 李洁莹 +4 位作者 孙梦静 陈博 陈鹏 成玥桦 黄剑飞 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第46期3694-3701,共8页
目的:观察钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)在临床胃癌组织中的表达和恶性表型作用并分析其临床意义。方法:应用临床胃癌组织芯片(297例胃癌和198例对照良性胃黏膜组织),均来自南通大学附属医院生物样本库。经免疫组织化学法检测胃癌组织中C... 目的:观察钙调磷酸酶B同源蛋白2(CHP2)在临床胃癌组织中的表达和恶性表型作用并分析其临床意义。方法:应用临床胃癌组织芯片(297例胃癌和198例对照良性胃黏膜组织),均来自南通大学附属医院生物样本库。经免疫组织化学法检测胃癌组织中CHP2蛋白表达水平,统计分析CHP2蛋白表达水平与胃癌患者临床特征及预后的关系。在胃癌细胞系中分别进行CHP2抑制和过表达细胞学实验,用细胞划痕实验、Transwell实验和CCK-8法检测胃癌细胞恶性表型变化。结果:CHP2蛋白在胃癌组织中高表达(204/297,68.7%),高于非癌的手术切缘组织(31/91,34.1%)、慢性胃炎组织(13/22,59.1%)、肠化胃黏膜组织(13/38,34.2%)、低级别上皮内瘤变胃黏膜组织(12/30,40.0%)以及高级别上皮内瘤变胃黏膜组织(7/17,41.2%)。胃癌组织中CHP2蛋白高表达与胃癌有转移、TNM分期晚有关( P<0.05),多因素分析显示,CHP2蛋白高表达,TNM分期是胃癌患者预后的独立指标( P<0.05)。胃癌细胞HGC-27在下调CHP2表达后,增殖、迁移能力下降( P<0.05);胃癌细胞AGS在上调CHP2表达后,增殖、迁移能力增强( P<0.05)。 结论:在胃癌发展中,CHP2起到促进增殖和转移作用,可以作为胃癌患者预后的分子标志物以及靶向治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 胃肿瘤 钙调磷酸酶B同源蛋白2 预后 增殖 迁移
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