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题名用于CD47靶向研究的细胞模型的构建
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作者
梅恩典
沈俊杰
陈雪娇
钱程
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机构
浙江理工大学生命科学与医药学院
重庆精准生物产业技术研究院有限公司
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出处
《中国细胞生物学学报》
CAS
CSCD
2020年第8期1348-1355,共8页
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基金
科技部重点专项(批准号:2016YFC1303400)资助的课题。
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文摘
CD47是一个新的免疫检查点,然而人源细胞广泛表达CD47,且暂未发现CD47阴性的人源细胞,使CD47靶向研究缺乏可靠的研究模型。该研究以中国仓鼠卵巢(Chinese hamster ovary,CHO)细胞为基础,制备人源CD47慢病毒,进而感染CHO构建CHO-CD47细胞系。利用流式细胞术、反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)及生物结合检测,对CHO-CD47进行评估,流式检测结果表明,CHO-CD47细胞表达人源CD47的阳性率为94.7%,经冻融且10次传代后,CD47阳性率保持稳定(96.4%);RNA水平检测结果表明,CHO-CD47细胞中表达人源CD47 mRNA;此外,蛋白水平检测结果显示,CHO-CD47细胞可成功结合人源CD47配体信号调节蛋白α(signal regulatory protein α,SIRPα)和信号调节蛋白γ(signal regulatory protein γ,SIRPγ)重组蛋白。综上所述,CHO-CD47细胞模型成功构建,可用于CD47靶向研究的结合能力验证,为CD47靶向研究提供可靠的研究模型,为以CD47为靶点的癌症治疗研究提供一定研究基础。
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关键词
cho-cd47
细胞模型
CD47
CHO
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Keywords
cho-cd47
cell model
CD47
CHO
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分类号
R73-3
[医药卫生—肿瘤]
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