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烟草腺毛烷烃合成相关基因NtCER1a的克隆及分析
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作者 余婧 赵会纳 +7 位作者 杨盛刚 雷庭 王艺焜 王兵 李昕建 张西仲 夏海乾 雷波 《中国烟草学报》 北大核心 2026年第1期55-65,共11页
【背景和目的】探究烟草CER1-like基因的功能。【方法】从栽培烟草K326的腺毛组织中克隆了与烷烃合成相关的NtCER1a基因,采用构建进化树、保守结构域、亚细胞定位等生物信息学分析以及实时荧光定量PCR、GUS染色、酵母单杂交等方法,对NtC... 【背景和目的】探究烟草CER1-like基因的功能。【方法】从栽培烟草K326的腺毛组织中克隆了与烷烃合成相关的NtCER1a基因,采用构建进化树、保守结构域、亚细胞定位等生物信息学分析以及实时荧光定量PCR、GUS染色、酵母单杂交等方法,对NtCER1a基因的功能进行了初步预测。【结果】NtCER1a基因CDS长度为1869 bp,编码622个氨基酸,在进化上来自于其祖先种林烟草的NsCER1基因,二者氨基酸序列相似性为99.84%,NtCER1a定位于内质网且有2个跨膜结构域,具有CER1基因家族典型特征的保守结构域FA_hydroxylase、Wax2_C以及His-rich motif。NtCER1a基因主要在烟草腺毛组织中表达,其启动子pNtCER1a含有光响应、赤霉素响应等元件及MYB、MYC类转录因子结合位点,酵母单杂交结果显示,MYB类转录因子NtMYB306a与pNtCER1a相结合。【结论】推测NtCER1a基因是烟草腺毛中烷烃生物合成的醛脱羰酶编码基因,此外,NtCER1a基因表达可能受到转录因子NtMYB306a的调控。 展开更多
关键词 烟草 腺毛 烷烃 MYB转录因子 cer1基因
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番茄表皮蜡质合成相关基因SlCER1-7的克隆与功能验证 被引量:1
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作者 张瑞益 封文佳 +4 位作者 李奔奔 宋怡颖 韦明月 柴乖强 霍彦波 《园艺学报》 北大核心 2025年第7期1733-1744,共12页
利用生物信息分析和表达分析、转基因等方法研究了番茄果实表皮蜡质合成相关基因SlCER1-7的功能。结果表明,SlCER1-7序列全长为2078 bp,开放阅读框为1884 bp,编码627个氨基酸;SlCER1-7为亲水性蛋白;同源比对和系统进化分析表明SlCER1-7... 利用生物信息分析和表达分析、转基因等方法研究了番茄果实表皮蜡质合成相关基因SlCER1-7的功能。结果表明,SlCER1-7序列全长为2078 bp,开放阅读框为1884 bp,编码627个氨基酸;SlCER1-7为亲水性蛋白;同源比对和系统进化分析表明SlCER1-7与茄子CER1的亲缘关系最近。SlCER1-7在番茄成熟叶、绿果皮、黄果皮和红果皮中均有较高的表达水平,而在幼叶中的表达量较低。在番茄中过表达SlCER1-7,果实总蜡质含量增高,并以直链C33烷烃和支链iso-C32烷烃增加最明显;保水性测定表明SlCER1-7转基因番茄果实的保水性增强。 展开更多
关键词 番茄 表皮蜡质 cer1 基因克隆 保水性
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千里光脂肪醛脱羰基酶(CER1蛋白)的保守基序(CSM)与功能结构域分析 被引量:6
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作者 汤贤春 钱倩 +2 位作者 罗才林 王蕾 钱刚 《生命科学研究》 CAS CSCD 2016年第5期395-400,共6页
基于已构建的千里光全长c DNA文库,克隆其脂肪醛脱羰基酶基因(Gen Bank No.:KT895253),并进一步分析该基因所编码蛋白质(CER1蛋白)的氨基酸保守基元序列(conserved sequence motif,CSM)和蛋白质功能结构域的关系。蛋白质一级结构分析发... 基于已构建的千里光全长c DNA文库,克隆其脂肪醛脱羰基酶基因(Gen Bank No.:KT895253),并进一步分析该基因所编码蛋白质(CER1蛋白)的氨基酸保守基元序列(conserved sequence motif,CSM)和蛋白质功能结构域的关系。蛋白质一级结构分析发现,千里光CER1蛋白由623个氨基酸残基组成;进化树和序列比对结果提示SH-片段和LH-片段这两个富含His的保守基元序列在不同物种中表现出高度保守性;3-D结构预测结果表明,高等植物CER1蛋白水合状态下具有高效的底物结合能力和脂肪醛脱羰基的催化效率。因此,根据脂肪醛脱羰基酶氨基酸保守基序对蛋白质功能域的决定作用,推测CER1蛋白的保守结构域是形成底物结合部位和酶催化活性中心的结构基础。 展开更多
关键词 千里光 角质层蜡质 脂肪醛脱羰基酶(cer1蛋白) 保守基元序列(CSM) 蛋白质 3-D 结构
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大葱AfCER1基因的克隆及表达分析 被引量:6
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作者 奥娜 赵泓 +1 位作者 裴雁曦 王永勤 《山西农业科学》 2016年第5期569-574,582,共7页
基于大葱RNA-seq转录组数据库中蜡质相关基因Af CER1的序列设计引物,利用RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction)和RACE(Rapid amplification of c DNA ends)技术获得Af CER1(Allium fistulisum CER1)的全长c DNA序列... 基于大葱RNA-seq转录组数据库中蜡质相关基因Af CER1的序列设计引物,利用RT-PCR(Reverse transcription-polymerase chain reaction)和RACE(Rapid amplification of c DNA ends)技术获得Af CER1(Allium fistulisum CER1)的全长c DNA序列,并通过生物信息学手段分析基因的序列;利用RT-PCR和Real-time PCR分析Af CER1基因在大葱野生型和突变型植株中的空间表达模式。结果表明,Af CER1基因全长为2 144 bp,包含一个1 857 bp完整的开放阅读框(ORF),编码618个氨基酸。蛋白序列比对分析表明,Af CER1与其他物种的CER1具有相似的结构域:脂肪酸羟化酶结构域和WAX2-C结构域。由RT-PCR的结果可知,Af CER1基因在大葱的根、叶鞘、叶片等部位均有表达,且在野生型和突变型植株中的表达量有差异。Real-time PCR分析表明,在大葱的根和叶鞘及刚见光的叶片中,Af CER1在突变型植株中的表达量相对野生型少;而在见光较多的叶片部位,Af CER1在突变型植株中的表达量却比野生型多。研究可为大葱蜡质合成的分子机制提供理论基础。 展开更多
关键词 大葱 蜡质 AF cer1 基因克隆 表达分析
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植物激活蛋白对番茄抗病性的诱导作用 被引量:38
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作者 李丽 邱德文 +2 位作者 刘峥 杨秀芬 罗宽 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2005年第4期265-268,共4页
用2μg.ml-1植物激活蛋白处理番茄植株,测定了番茄叶片过氧化物酶、过氧化氢酶活性和过氧化氢的含量。处理番茄4d后,过氧化物酶活性比对照增加117.14%;10min过氧化氢酶活性即迅速上升为对照的2.5倍,12h其活性显著低于对照;过氧化氢含量... 用2μg.ml-1植物激活蛋白处理番茄植株,测定了番茄叶片过氧化物酶、过氧化氢酶活性和过氧化氢的含量。处理番茄4d后,过氧化物酶活性比对照增加117.14%;10min过氧化氢酶活性即迅速上升为对照的2.5倍,12h其活性显著低于对照;过氧化氢含量随过氧化氢酶活性的降低逐渐增加,在36h达最大值134.67μmol.g-1,比对照提高27.5%。通过半定量RT-PCR方法测定了参与蜡质合成基因Cer1表达水平,结果表明,处理番茄2d后Cer1表达量约为对照的2倍。植物激活蛋白处理番茄植株,对灰霉病的防治效果21d时达71.30%。 展开更多
关键词 植物激活蛋白 过氧化物酶 过氧化氢酶 过氧化氢 cer1基因 灰霉病菌
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The ZOS7-MYB60 module confers drought-stress tolerance in rice 被引量:2
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作者 Shubo Zhou Lihong He +5 位作者 Zubair Iqbal Yi Su Jihang Huang Lijing He Mingnan Qu Langtao Xiao 《The Crop Journal》 SCIE CSCD 2024年第5期1369-1378,共10页
Shanlan upland rice is an important landrace resource with high drought stress(DS)tolerance.Despite its importance,genes responsible for yield in Shanlan upland rice have yet to be discovered.Our previous study identi... Shanlan upland rice is an important landrace resource with high drought stress(DS)tolerance.Despite its importance,genes responsible for yield in Shanlan upland rice have yet to be discovered.Our previous study identified a drought-responsive zinc finger protein,ZOS7,as highly expressed in Shanlandao upland rice.However,the function of this gene in controlling drought tolerance remains largely unexplored.In this study,we found that overexpressing ZOS7,a drought-responsive zinc finger protein,in rice increased biomass and yield under drought stress.Co-overexpressing ZOS7 and MYB60,encoding a protein with which ZOS7 interacted,intensified the yield increase.ZOS7 and MYB60 appear to form a module that confers drought tolerance by regulating stomatal density and wax biosynthesis.The ZOS7-MYB60module could be used in molecular breeding for drought tolerance in rice. 展开更多
关键词 ZOS7 EPFL9 cer1 Stomatal density Wax biosynthesis TRANSCRIPTOME Drought tolerance
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lncRNA CERS6-AS1通过调控miR-138-2-3p抑制人胶质瘤细胞系增殖 被引量:1
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作者 黄琦 翟海程 《医学分子生物学杂志》 CAS 2023年第1期20-25,共6页
目的探讨lncRNA CERS6-AS1对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制.方法qRT-PCR法检测胶质瘤组织、癌旁组织中CERS6-AS1和miR-138-2-3p的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中CERS6-AS1与miR-138-2-3p表达量的相关性;体外培养人胶... 目的探讨lncRNA CERS6-AS1对胶质瘤细胞生物学行为的影响及其可能作用机制.方法qRT-PCR法检测胶质瘤组织、癌旁组织中CERS6-AS1和miR-138-2-3p的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中CERS6-AS1与miR-138-2-3p表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞T98G,将si-NC、si-CERS6-AS1、miR-NC、miR-138-2-3p mimics、si-CERS6-AS1与anti-miR-NC、si-CERS6-AS1与anti-miR-138-2-3p分别转染至T98G细胞;CCK-8法、平板克隆形成实验、Transwell小室实验分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭能力;双荧光素酶报告基因实验检测CERS6-AS1和miR-138-2-3p的靶向关系.结果与癌旁组织比较,胶质瘤组织中CERS6-AS1的表达量升高(P<0.05),miR-138-2-3p的表达量降低(P<0.05);CERS6-AS1与miR-138-2-3p呈负相关(r=-0.8899,P<0.001);si-CERS6-AS1组细胞活力、克隆形成细胞数、迁移及侵袭细胞数均低于si-NC组(P<0.05);CERS6-AS1可靶向调节miR-138-2-3p的表达;miR-138-2-3p组细胞活力、克隆形成细胞数、迁移及侵袭细胞数均少于miR-NC组(P<0.05);si-CERS6-AS1+anti-miR-138-2-3p组细胞活力、克隆形成细胞数、迁移及侵袭细胞数均比si-CERS6-AS1+anti-miR-NC组增多(P<0.05).结论干扰CERS6-AS1表达可通过调控miR-138-2-3p而抑制胶质瘤细胞增殖、克隆形成、迁移及侵袭. 展开更多
关键词 lncRNA CERS6-AS1 miR-138-2-3p 胶质瘤 细胞增殖 侵袭
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拟南芥雄性不育突变体ms1424的鉴定与基因定位
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作者 陈万利 莫翱溦 +2 位作者 姚远 许鹏辉 陆平利 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1795-1806,共12页
本研究通过筛选拟南芥Ac-Ds突变体库,获得一种雄性不育突变体male sterile 1424(ms1424)。与野生型相比,ms1424的角果短小、种子数少、茎秆明亮。ms1424花粉的亚历山大红染色正常,而花粉体内、体外萌发结果暗示其花粉与柱头的互作有异... 本研究通过筛选拟南芥Ac-Ds突变体库,获得一种雄性不育突变体male sterile 1424(ms1424)。与野生型相比,ms1424的角果短小、种子数少、茎秆明亮。ms1424花粉的亚历山大红染色正常,而花粉体内、体外萌发结果暗示其花粉与柱头的互作有异常。遗传分析显示ms1424的表型由隐性单基因控制。高通量测序和图位克隆将突变基因定位到Chr1:387247~463498,位于该区间的CER1的突变表型与ms1424相似,而遗传等位杂交实验表明ms1424是cer1的等位突变。进一步的分子实验揭示ms1424缺失了一个6216 bp的DNA片段(包括CER1的3084bp)。与多数cer1突变体的特性相同,ms1424在相对湿度为50%~70%和大于90%环境下分别表现为严重不育和正常可育,这说明ms1424是湿度条件型雄性不育。综上,本研究报道了一个新的拟南芥湿度条件型雄性不育材料。 展开更多
关键词 cer1 花粉与柱头的互作 湿度 条件型雄性不育
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Cer(d18:1/16:0)促进HK-2细胞线粒体障碍和纤维化表型转换
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作者 董政委 杨康 +1 位作者 郭晓红 赵换 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第10期2545-2552,共8页
目的探究糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DKD)发展进程中的核心标志物Cer(d18:1/16:0)对人肾小管上皮细胞(Human renal proximal tubule,HK-2)线粒体功能障碍和纤维化表型转换的影响。方法借助qRT-PCR技术,检测高糖刺激下HK-2细胞... 目的探究糖尿病肾病(Diabetic kidney disease,DKD)发展进程中的核心标志物Cer(d18:1/16:0)对人肾小管上皮细胞(Human renal proximal tubule,HK-2)线粒体功能障碍和纤维化表型转换的影响。方法借助qRT-PCR技术,检测高糖刺激下HK-2细胞神经酰胺合成的相关酶在转录水平的表达;使用CCK8法检测不同浓度Cer(d18:1/16:0)对HK-2细胞活力的影响;运用线粒体荧光探针评估不同浓度Cer(d18:1/16:0)刺激后HK-2细胞内线粒体数目变化;Western blot检测给予Cer(d18:1/16:0)前后线粒体相关蛋白及纤维化指标的表达情况。结果高糖环境下HK-2细胞神经酰胺合成酶2(Ceramide synthase 2,CERS2)表达增加;外源性Cer(d18:1/16:0)可显著抑制HK-2细胞活力;外源性Cer(d18:1/16:0)可降低HK-2细胞中线粒体总荧光强度和平均荧光强度;外源性Cer(d18:1/16:0)显著降低CV-ATP5A与CIII-UQCRC2的蛋白表达水平,显著增加Coll 3、α-SMA的蛋白表达水平。结论Cer(d18:1/16:0)可诱导HK-2细胞发生线粒体功能障碍与纤维化表型转换。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 Cer(d18:1/16:0) HK-2细胞 纤维化表型转换 线粒体功能障碍
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