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受损脐静脉内皮细胞来源外泌体CELF5介导丙泊酚的神经保护作用
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作者 杜亚婷 李振坤 +3 位作者 冯忠 黄杨心蕊 谭红 薛富善 《临床和实验医学杂志》 2025年第4期337-341,共5页
目的本研究旨在探讨涉及血管内皮损伤的外科手术中丙泊酚对海马神经细胞(HT22细胞)的影响及机制。方法使用丙泊酚(3.6μg/mL)处理HT22细胞6 h,以建立丙泊酚处理的HT22细胞模型(丙泊酚组),对照组添加相同体积磷酸盐缓冲液(PBS)。用枪头... 目的本研究旨在探讨涉及血管内皮损伤的外科手术中丙泊酚对海马神经细胞(HT22细胞)的影响及机制。方法使用丙泊酚(3.6μg/mL)处理HT22细胞6 h,以建立丙泊酚处理的HT22细胞模型(丙泊酚组),对照组添加相同体积磷酸盐缓冲液(PBS)。用枪头连续划损细胞构建物理损伤HT22和脐静脉内皮细胞系(HUVEC)细胞模型。根据Transwell板上室培养细胞种类分为HT22+丙泊酚组/对照组,HUVEC+丙泊酚组/对照组,损伤HT22+丙泊酚组/对照组和损伤HUVEC+丙泊酚组/对照组。检测不同方式处理HT22细胞的生存能力的变化。通过不同类型细胞与HT22细胞共培养探索细胞间的相互影响。分离HUVEC培养液中的外泌体,通过细胞培养液、去外泌体培养液和外泌体处理HT22细胞探究HUVEC来源外泌体与HT22细胞的关系。结果丙泊酚处理的HT22细胞的生存能力降低到46.7%,差异有统计学意义(P=0.038)。当共培养体系中受损的HUVEC细胞位于上室时,丙泊酚处理的HT22细胞的生存能力高于对照组73.1%,差异有统计学意义(P=0.013)。当HT22细胞经此上清液预处理后,丙泊酚处理的HT22细胞的生存能力高于对照组82.7%,差异有统计学意义(P=0.007)。进一步实验证明来自受损HUVEC细胞的外泌体预处理后,丙泊酚处理HT22细胞的生存能力是对照组的2.1倍,差异有统计学意义(P=0.024)。对受损HUVEC细胞和对照HUVEC细胞进行转录组测序,由于差异倍数较大的CELF5在神经元细胞中表达丰度高,将CELF5作为候选基因做进一步验证,并通过蛋白质印迹法证实受损HUVEC细胞分泌的外泌体中CELF5表达量是对照组的1.9倍,差异有统计学意义(P=0.035)。之后构建CELF5敲除的HUVEC细胞系。当使用CELF5敲除的受损HUVEC细胞与HT22细胞共培养时,丙泊酚处理HT22细胞的生存能力是野生组的69.7%,差异有统计学意义(P=0.042)。结论丙泊酚的神经保护作用依赖于受损HUVEC细胞来源的外泌体CELF5。 展开更多
关键词 丙泊酚 神经保护作用 内皮细胞 外泌体 celf5
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