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ATM网络信元时隙映射的CDV及其容限
1
作者 胡文华 朱世伟 +1 位作者 陈雷 陈锦江 《计算机研究与发展》 EI CSCD 北大核心 1998年第3期255-260,共6页
源流量点和ＵＰＣ控制点间的信元延迟变化（ＣＤＶ）对ＣＡＣ，ＵＰＣ的控制有着重要的影响．文中在分析ＣＤＶ成因的基础上，研究了基于信元接口的ＡＴＭ网络信元时隙映射的ＣＤＶ，提出了ＣＤＶ的计算公式和一些结论，并确定了ＣＤＶ... 源流量点和ＵＰＣ控制点间的信元延迟变化（ＣＤＶ）对ＣＡＣ，ＵＰＣ的控制有着重要的影响．文中在分析ＣＤＶ成因的基础上，研究了基于信元接口的ＡＴＭ网络信元时隙映射的ＣＤＶ，提出了ＣＤＶ的计算公式和一些结论，并确定了ＣＤＶ容限． 展开更多
关键词 信元映射 cdv容限 ATM网络 cdv B-ISDN
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基于CdV/dt现象分析的功率MOS管建模 被引量：6
2
作者 徐申 高海翔 +1 位作者 何晓莹 孙伟锋 《东南大学学报（自然科学版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第1期18-22,共5页
为了改善功率MOS管及其驱动电路在高频开关状态下,功耗与可靠性等性能上的恶化问题,分析了此类电路中由于CdV/dt现象所导致的寄生效应.首先考虑功率MOS管及驱动电路的主要寄生参数,详细分析了CdV/dt现象产生的机理.在此基础上,采用状态... 为了改善功率MOS管及其驱动电路在高频开关状态下,功耗与可靠性等性能上的恶化问题,分析了此类电路中由于CdV/dt现象所导致的寄生效应.首先考虑功率MOS管及驱动电路的主要寄生参数,详细分析了CdV/dt现象产生的机理.在此基础上,采用状态方程的建模方法,提取关键电压与电流参数作为状态变量,建立并有效验证了一种功率MOS管的数学分析模型.通过对此模型的仿真,发现CdV/dt现象会带来栅极耦合电压、穿通电流、漏极振荡等不良寄生效应.同时对各种寄生参数与效应间的关系进行了分析.最后,根据仿真分析结果,给出了电路的优化设计方法.实际电路的测试结果证明,该功率MOS管模型与驱动电路的优化方法在CdV/dt现象分析与改善上具有明显作用. 展开更多
关键词 功率MOS管 cdv/dt现象 建模 寄生参数
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犬瘟热弱毒株CDV_3生物学特性鉴定 被引量：8
3
作者 程世鹏 闫喜军 +1 位作者 吴威 肖家美 《经济动物学报》 CAS 2004年第3期142-145,共4页
以SPF鸡胚成纤维细胞 (CEF)从国外引进的疫苗中分离到犬瘟热弱毒株CDV3 。对犬瘟热弱毒株CDV3 的理化特性 ,细胞病变规律 ,病毒毒价 ,核酸型、血清学交叉反应 ,试验动物的安全性及免疫原性等内容进行了试验 ,结果表明 ,犬瘟热弱毒株CDV3... 以SPF鸡胚成纤维细胞 (CEF)从国外引进的疫苗中分离到犬瘟热弱毒株CDV3 。对犬瘟热弱毒株CDV3 的理化特性 ,细胞病变规律 ,病毒毒价 ,核酸型、血清学交叉反应 ,试验动物的安全性及免疫原性等内容进行了试验 ,结果表明 ,犬瘟热弱毒株CDV3 可作为狐犬瘟热疫苗生产用毒种。 展开更多
关键词 犬瘟热 弱毒株 cdv3 生物学特性 病毒
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水貂犬瘟热CDV_3疫苗株基因组序列测定及H基因遗传稳定性分析 被引量：8
4
作者 赵建军 柴秀丽 +5 位作者 王凤雪 邵西群 陈涛 罗国良 闫喜军 吴威 《经济动物学报》 CAS 2009年第1期13-20,共8页
对水貂犬瘟热CDV3疫苗株基因组进行全序列测定与分析，以阐明该疫苗株的来源亲本毒株，基因特征及H基因遗传稳定性。将CDV3疫苗株基因组cDNA分9个重叠片段进行RT-PCR并克隆入pMD 18-T载体中，测定全长cDNA序列。并与CDV野毒参考株和疫苗... 对水貂犬瘟热CDV3疫苗株基因组进行全序列测定与分析，以阐明该疫苗株的来源亲本毒株，基因特征及H基因遗传稳定性。将CDV3疫苗株基因组cDNA分9个重叠片段进行RT-PCR并克隆入pMD 18-T载体中，测定全长cDNA序列。并与CDV野毒参考株和疫苗株N、F和H基因氨基酸序列比对分析其基因变异情况。通过对CDV3疫苗株6个不同生产批次（Veto细胞培养代次）H基因序列测定以分析毒株的分子遗传稳定性。基因序列分析结果表明：CDV3疫苗株基因组全长15690bp，与CDV野毒株基因组同源性较低（93．0％～95．3％）。H基因核苷酸和氨基酸序列与Lederle疫苗株（EF418783）同源性最高，分别为99．6％和98．7％。而6个不同培养代次CDV3疫苗株H基因氨基酸序列无任何差异。由此证实CDV3疫苗株的亲本毒株与Lederle疫苗株有着最密切关系，不同培养代次的CDV3疫苗株H基因具有较高的遗传稳定性。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 cdv3疫苗株 基因组序列 遗传稳定性
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犬瘟热病毒贵州株CDV-GZ1的分离与鉴定 被引量：3
5
作者 曾智勇 周莉 +3 位作者 汤德元 肖超能 刘志杰 梁海英 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2012年第2期109-112,共4页
为丰富我国犬瘟热病(CD)的流行病学资料,同时为CDV贵州分离株主要抗原基因及结构研究奠定基础,对贵阳市某宠物医院犬瘟热病毒金标卡检测呈阳性病死犬的肝脏、肺脏、淋巴结等组织,取适量经混合研磨过滤后,同步接种于Vero传代细胞上进行... 为丰富我国犬瘟热病(CD)的流行病学资料,同时为CDV贵州分离株主要抗原基因及结构研究奠定基础,对贵阳市某宠物医院犬瘟热病毒金标卡检测呈阳性病死犬的肝脏、肺脏、淋巴结等组织,取适量经混合研磨过滤后,同步接种于Vero传代细胞上进行病毒分离培养,并对该分离毒株进行理化特性、电镜形态、血清学和核酸检测等系列鉴定。结果表明:在Vero细胞上盲传至第6代时稳定出现特征性的CPE,该毒株为RNA囊膜病毒,电镜下可见胞浆包涵体、病毒粒子呈晶格状排列,病毒可被犬瘟热阳性血清中和,分离病毒为犬瘟热病毒并被命名为CDV-GZ1株。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 分离 鉴定 cdv-GZ1
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貉源犬瘟热病毒CDV-ZC株分离鉴定、全基因测序与分析 被引量：3
6
作者 戴秀美 常维山 +3 位作者 张永兵 王敏 王蕾 郭树源 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期711-717,共7页
应用非洲绿猴肾细胞(Vero)从山东省诸城市疑似犬瘟热(canine distemper,CD)感染貉的肝脏、脾脏、肺脏等组织病料的研磨上清液中分离出1株病毒。分离株经Vero细胞传至第4代出现典型的细胞病变效应(CPE),经毒力测定、血清学、RT-PCR检测... 应用非洲绿猴肾细胞(Vero)从山东省诸城市疑似犬瘟热(canine distemper,CD)感染貉的肝脏、脾脏、肺脏等组织病料的研磨上清液中分离出1株病毒。分离株经Vero细胞传至第4代出现典型的细胞病变效应(CPE),经毒力测定、血清学、RT-PCR检测及测序、回归动物试验证明为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV),命名为CDV诸城分离株(CDV-ZC)。采用RT-PCR方法分段克隆分离株的全基因序列并测序,测序成功的各序列依次拼接得到全基因序列并进行序列比对。结果表明,CDV-ZC株全基因(KJ994343)与标准美洲型犬瘟热强毒株A75/17核苷酸同源性高达96.5%,而与疫苗株Onderstepoort、CDV3等亲缘关系较远,同源性为91.6%~92.0%。血凝素(H)基因序列分析表明,CDV-ZC株与国内野毒株LN(13)2、GP株等以及日本野毒株UENO、HAMA等共同归属于Asia-1型,在H蛋白信号淋巴细胞激活因子(SLAM)受体结合区即542~544位增加了1个潜在N-连接糖基化位点(N-X-S/T)。致病性强毒株CDV-ZC的成功分离及全基因序列测定加深了我们对当前中国CDV流行株遗传变异情况的了解,为CD的有效预防、诊断及控制提供理论依据。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 cdv-ZC株 分离与鉴定 全基因测序 血凝素基因
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犬瘟热病毒贵州株(CDV-GZ1)F基因的克隆及序列分析 被引量：4
7
作者 曾智勇 周莉 刘志杰 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第6期53-56,共4页
根据GenBank中发表的犬瘟热病毒Onderstepoort株融合蛋白基因(F)序列设计两对特异性引物,采用RT-PCR扩增犬瘟热病毒贵州分离株(CDV-GZ1)的F基因,并进行克隆与序列分析。结果显示,CDV-GZ1株F基因的ORF全长1989bp,氨基酸序列中具有5个潜... 根据GenBank中发表的犬瘟热病毒Onderstepoort株融合蛋白基因(F)序列设计两对特异性引物,采用RT-PCR扩增犬瘟热病毒贵州分离株(CDV-GZ1)的F基因,并进行克隆与序列分析。结果显示,CDV-GZ1株F基因的ORF全长1989bp,氨基酸序列中具有5个潜在N-糖基化位点,氨基酸同源性与美国00-2601株和国内HL株较高,分别为91.6%和91.1%,表明该分离株与00-2601株和HL株具有较近的亲缘关系。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 cdv-GZ1 F蛋白 克隆 序列分析
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犬瘟热病毒（CDV）93039与CDV MD—77株感染Viro细胞的电镜观察 被引量：4
8
作者 遇秀玲 杨怡 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第1期22-25,共4页
采用电镜技术对犬瘟热病毒（ＣＤＶ）９３０３９株和ＣＤＶ ＭＤ－７７株在体外培养细胞中的增殖过程和所致病变特点进行了比较研究。结果表明，２株病毒的形态发生过程与文献报道相符。ＣＤＶ９３０３９株与ＣＤＶＭＤ－７７株相比，... 采用电镜技术对犬瘟热病毒（ＣＤＶ）９３０３９株和ＣＤＶ ＭＤ－７７株在体外培养细胞中的增殖过程和所致病变特点进行了比较研究。结果表明，２株病毒的形态发生过程与文献报道相符。ＣＤＶ９３０３９株与ＣＤＶＭＤ－７７株相比，少见长丝状核衣壳聚集及曲型的胞膜上出芽病毒粒子，涵体以电子致密小体为主，与文献报道的ＣＤＶond株较为相似 ；ＣＤＶ ＭＤ－７７株可见成堆存在的核衣壳结构，胞膜上出芽增殖明显可见。 展开更多
关键词 VERO细胞 超微结构 93039株 MD-77株 cdv
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两级CDV容限参数的流量强制与成形算法
9
作者 胡文华 朱世伟 +1 位作者 陈雷 陈锦江 《计算机工程与设计》 CSCD 北大核心 1998年第4期31-36,共6页
信元时延变化ＣＤＶ对峰值速率警管有很大影响，文中首先提出基于通用信元速率算法ＧＣＲＡ（Ｔ，δ）的ＣＤＶ成形算法，该算法能有效地成形ＣＤＶ使之符合ＧＣＲＡ（Ｔ，δ）算法对ＣＤＶ容限的要求；在对ＣＤＶ成形算法分析的基础上... 信元时延变化ＣＤＶ对峰值速率警管有很大影响，文中首先提出基于通用信元速率算法ＧＣＲＡ（Ｔ，δ）的ＣＤＶ成形算法，该算法能有效地成形ＣＤＶ使之符合ＧＣＲＡ（Ｔ，δ）算法对ＣＤＶ容限的要求；在对ＣＤＶ成形算法分析的基础上，进一步提出了两级ＣＤＶ容限参数的流量强制与成形算法ＴＰ－ＥＳＡ，ＴＰ－ＥＳＡ既能成形ＣＤＶ到任意预设的值，又能防止连接对流量的恶意滥用。文中对算法的实现和操作也进行了研究。 展开更多
关键词 ATM 流量控制 cdv容限 成形算法 计算机网络
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基于GCRA(T,δ)的CDV成形算法及其实现
10
作者 胡文华 朱世伟 +1 位作者 陈雷 陈锦江 《通信技术》 1997年第3期37-40,共4页
文章提出基于通用信元速率算法GCRA（T，δ）的CDV成形算法，该算法能有效地成形CDV使之符合GCRA（T，δ）算法对CDV容限的要求，并对CDV成形器的实现和操作进行了讨论。
关键词 ATM 成形算法 B-ISDN cdv
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CDV疫苗毒在Vero细胞内包涵体形成规律的研究
11
作者 金扩世 于永仁 《中国兽医科技》 CSCD 1991年第8期5-6,共2页
采用Vero细胞生产CDV(犬瘟热)弱毒疫苗是目前国内外生产CDV疫苗的主要方法。若提高CDV疫苗的效价,必须掌握细胞株的选择、培养方法、收毒时间、疫苗的保存及疫苗的使用时机。为了把好疫苗的培养及收毒时间关,我们进行了CDV疫苗毒在Vero... 采用Vero细胞生产CDV(犬瘟热)弱毒疫苗是目前国内外生产CDV疫苗的主要方法。若提高CDV疫苗的效价,必须掌握细胞株的选择、培养方法、收毒时间、疫苗的保存及疫苗的使用时机。为了把好疫苗的培养及收毒时间关,我们进行了CDV疫苗毒在Vero细胞内生长规律的试验。CDV病毒可在细胞内产生包涵体,用G和HE染色后在普通显微镜下即可进行检查。本试验结果表明,CDV疫苗毒在Vero细胞中生长。 展开更多
关键词 cdv 疫苗毒 VERO细胞 形成规律
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犬瘟热病毒CDV-3株感染性克隆的构建与鉴定 被引量：2
12
作者 卜研 闫喜军 +3 位作者 赵建军 李海涛 赵传芳 薛向红 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期178-186,共9页
以国内商品化水貂犬瘟热病毒疫苗所用毒株CDV-3为模板,构建犬瘟热病毒感染性c DNA克隆,为犬瘟热病毒新型疫苗研制、致病机理研究提供理论基础。设计13对引物对其全基因组序列测定,分析单一酶切位点,将CDV-3的全长分5个片段进行RT-PCR扩... 以国内商品化水貂犬瘟热病毒疫苗所用毒株CDV-3为模板,构建犬瘟热病毒感染性c DNA克隆,为犬瘟热病毒新型疫苗研制、致病机理研究提供理论基础。设计13对引物对其全基因组序列测定,分析单一酶切位点,将CDV-3的全长分5个片段进行RT-PCR扩增。经酶切拼接,将5个片段顺次插入到酶切位点改造后的真核载体pc DNA3.2的多克隆酶切位点处,同时在F1首端和F5末端分别加入锤头状核酶和丁型肝炎核酶序列,获得CDV-3株的全长c DNA质粒(pcDNA3.2-CDV-3)。构建表达CDV-3 N、P、L蛋白的3个辅助质粒。利用转染试剂LipofectamineTM 2000将全长质粒和3个辅助质粒共转染293T细胞,3 d后,将上清接种到Vero细胞。观察犬瘟热病毒典型合胞体病变,对重组病毒进行免疫荧光鉴定和标签鉴定。最后,比较wtCDV-3和rCDV-3的生长特性。全长质粒和辅助质粒的酶切鉴定和序列测序均正确。拯救的重组病毒能在Vero细胞上形成典型的合胞体病变,经RT-PCR、间接免疫荧光和电镜观察鉴定,证明成功拯救出重组病毒rCDV-3株。rCDV-3的病毒滴度最高达到107.667 TCID50/mL,比wtCDV-3的滴度106.667 TCID50/mL高出约10倍。rCDV-3感染Vero细胞后,迅速大量增殖,于感染后36 h达到最高病毒滴度。而wt CDV-3增殖平缓,感染后72 h时病毒含量达到最大。文中建立的高效CDV-3株反向遗传操作平台,为犬瘟热病毒新型疫苗研制和致病机理研究奠定基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 cdv-3株 感染性克隆 反向遗传系统
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CDV强毒BJ16B2株H基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定 被引量：1
13
作者 陈美荣 林伟东 +4 位作者 宋天琪 鑫婷 郭晓宇 黄克和 贾红 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2018年第8期2041-2048,共8页
试验旨在获得具有天然构象且抗原性良好的犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)强毒株的H蛋白。以分离的CDV强毒株BJ16B2为模板,RT-PCR特异扩增H基因,克隆至表达载体pFastBacTMHTA上,酶切及测序鉴定正确后比对分析H基因同源性,并将... 试验旨在获得具有天然构象且抗原性良好的犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)强毒株的H蛋白。以分离的CDV强毒株BJ16B2为模板,RT-PCR特异扩增H基因,克隆至表达载体pFastBacTMHTA上,酶切及测序鉴定正确后比对分析H基因同源性,并将重组质粒pFastBacTMHTA-H转化大肠杆菌DH10BacTM感受态细胞,同源重组构建穿梭质粒rBacmid-H,将重组穿梭质粒转染Sf9昆虫细胞,拯救重组杆状病毒。利用IFA和Western blotting对获得的重组蛋白进行鉴定及抗原性分析。结果显示,重组质粒pFastBacTMHTA-H酶切测序鉴定正确,该H基因属于Asia-1强毒株,与参考毒株的核苷酸和氨基酸同源性分别为89.8%~99.3%和89.6%~99.5%。在杆状病毒中所表达的H蛋白能与CDV阳性血清及His-tag抗体发生特异性反应,IFA鉴定能够产生特异性绿色荧光,且在68ku左右出现蛋白条带,表明H蛋白成功表达且具有良好的反应原性。本研究获得了具有天然构象及良好抗原性的CDV重组H蛋白,为后续蛋白结构和抗原特性差异分析、单抗制备、CDV亚单位疫苗的开发奠定了基础。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒(cdv) H基因 昆虫杆状病毒表达系统
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CDV和CPV及CCV多重纳米PCR检测方法的建立与应用 被引量：8
14
作者 罗亚坤 刘琪 +4 位作者 蔺文成 王静 周灵 梁琳 崔尚金 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期1207-1212,共6页
参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒（CDV）N基因序列、犬细小病毒（CPV）VP2基因序列和犬冠状病毒（CCV）M基因序列的保守型片段分别设计特异性引物,建立了CPV（193 bp）、CDV（500 bp）和CCV（780bp）的多重纳米PCR（nano-mPCR）检测方法... 参考Gen Bank上登录的犬瘟热病毒（CDV）N基因序列、犬细小病毒（CPV）VP2基因序列和犬冠状病毒（CCV）M基因序列的保守型片段分别设计特异性引物,建立了CPV（193 bp）、CDV（500 bp）和CCV（780bp）的多重纳米PCR（nano-mPCR）检测方法,同时考查所建立nano-mPCR检测方法的特异性和敏感性。结果表明,该方法特异性和敏感性良好,对CPV、CDV和CCV的最低核酸检测量分别为1.39×10~2、6.0×10~2和6.7×10~2copies/L,其敏感性比普通PCR高100倍。临床样品的检测结果表明,nano-mPCR的建立为CDV、CPV和CCV的单独或混合感染进行早期快速、灵敏、准确的鉴别诊断提供了新方法。 展开更多
关键词 多重纳米PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬冠状病毒 检测 流行病学
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CDV、CPV和CPIV多重PCR检测方法的建立 被引量：8
15
作者 康泰 毕玉敏 +3 位作者 陈欣 孙忠晟 王祖荣 尹燕博 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期62-65,共4页
为了建立一种快速诊断犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬副流感病毒的多重PCR方法,参照GenBank中的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)基因序列,设计了3对引物分别用于特异扩增犬瘟热病毒F基因、犬细小病毒VP2基因和犬副... 为了建立一种快速诊断犬瘟热病毒、犬细小病毒和犬副流感病毒的多重PCR方法,参照GenBank中的犬瘟热病毒(CDV)、犬细小病毒(CPV)、犬副流感病毒(CPIV)基因序列,设计了3对引物分别用于特异扩增犬瘟热病毒F基因、犬细小病毒VP2基因和犬副流感病毒F基因上的目的片段。通过优化反应条件,建立同时扩增CDV(740bp)、CPV(419bp)和CPIV(559bp)的多重PCR方法。结果表明特异性和敏感性良好,对CDV、CPV、CPIV 3种病毒的最低核酸检测量为1ng/μL。临床样品的多重PCR检测结果表明,建立的多重PCR方法能够对CDV、CPV、CPIV单个感染或混合感染的临床样品进行快速鉴别诊断。 展开更多
关键词 多重PCR 犬瘟热病毒 犬细小病毒 犬副流感病毒
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CDV车型在中国的发展动向 被引量：3
16
作者 周鹏 杜金玲 《汽车纵横》 2014年第5期96-99,共4页
自从2010年NV200和五菱宏光上市以来，CDV（Car Derived Van，轿车平台厢式车）这种兼具轿车与厢式货车特征的车型就受到了大家的普遍关注，一方面是由于这种车型在中国市场迅速发展，被广大消费者广泛认可；
关键词 中国市场 车型 cdv 厢式货车 VAN 厢式车 消费者 轿车
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犬瘟热病毒(CDV)ELISA检测方法的建立与应用 被引量：5
17
作者 王吉 卫礼 +3 位作者 付瑞 巩薇 岳秉飞 贺争鸣 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第4期59-62,共4页
目的建立犬CDV抗体ELISA检测方法。方法培养vero细胞,接种CDV病毒,制备vero正常抗原和CDV特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验。结果正常、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为1∶32 ... 目的建立犬CDV抗体ELISA检测方法。方法培养vero细胞,接种CDV病毒,制备vero正常抗原和CDV特异抗原,滴定酶结合物和抗原最佳工作浓度,并进行精密性、敏感性、稳定性、特异性实验。结果正常、特异抗原和酶结合物最佳工作浓度分别为1∶32 000、10μg/mL和1∶8 000;正常、特异抗原批内变异系数分别为9.1%和5.8%,批间平均变异系数分别为8.8%和6.6%;检测灵敏度为1∶2 560;与犬细小病毒(CPV)、犬肝炎病毒(ICHV)均无交叉反应。稳定性试验相对偏差小于25%。结论建立的ELISA方法重复性、稳定性好,特异性、敏感性强。可用于犬CDV抗体的检测。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 ELISA
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表达CDV F蛋白和H蛋白的重组人5型腺病毒的构建及评价
18
作者 时子淇 阚龙飞 +7 位作者 孟宪踊 王建忠 赵永坤 闫飞虎 王铁成 冯娜 高玉伟 夏咸柱 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期858-867,共10页
旨在构建表达犬瘟热弱毒疫苗株CDV11融合蛋白(F)和血凝素蛋白(H)的复制缺陷型重组腺病毒,对重组病毒目的蛋白表达进行鉴定,并研究其免疫原性。利用无缝克隆技术将绿色荧光蛋白基因(EGFP)和CDV11F/CDV11H基因连接到入门载体pENTRTM/D-TOP... 旨在构建表达犬瘟热弱毒疫苗株CDV11融合蛋白(F)和血凝素蛋白(H)的复制缺陷型重组腺病毒,对重组病毒目的蛋白表达进行鉴定,并研究其免疫原性。利用无缝克隆技术将绿色荧光蛋白基因(EGFP)和CDV11F/CDV11H基因连接到入门载体pENTRTM/D-TOPO中,获得重组入门质粒pENTR-EGFP-CDV11F和p ENTR-EGFP-CDV11H。随后使用Gateway技术分别将EGFP-CDV11F和EGFP-CDV11H插入到腺病毒骨架载体中,获得重组质粒pAd-EGFP-CDV11F和pAd-EGFP-CDV11H;将重组质粒经PacⅠ酶切线性化后转染293A细胞以拯救重组腺病毒rAd-EGFP-CDV11F和rAd-EGFP-CDV11H。经荧光显微镜观察、间接免疫荧光鉴定以及蛋白免疫印迹鉴定,重组腺病毒rAd-EGFP-CDV11F和rAd-EGFP-CDV11H可分别在293A细胞、Vero细胞中表达F蛋白和H蛋白,rAd-EGFP-CDV11F滴度可达1.62×10^(9)IFU/mL,rAd-EGFPCDV11H滴度可达1.5×10^(9)IFU/mL。重组腺病毒rAd-EGFP-CDV11F和rAd-EGFP-CDV11H分别通过肌肉注射和滴鼻途径免疫小鼠,并评价免疫后35 d内小鼠体内CDV中和抗体以及IgG的变化情况。结果表明,重组腺病毒rAd-EGFP-CDV11F和rAd-EGFP-CDV11H通过肌肉注射和滴鼻途径免疫均能诱导小鼠产生CDV中和抗体以及IgG,CDV中和抗体水平可达1×22~1×26,IgG抗体效价最高可达1∶3 200~1∶25 600;此外通过肌肉注射途径单独免疫重组腺病毒rAd-EGFP-CDV11H后小鼠体内产生CDV中和抗体水平最高。结论:本研究成功构建了两株携带EGFP标签、能表达CDV11 F和H蛋白的重组腺病毒rAd-EGFPCDV11F和rAd-EGFP-CDV11H,它们具有良好的免疫原性,肌肉注射及滴鼻免疫均可诱导机体产生CDV中和抗体以及特异性IgG。这一结果为进一步研究CDV重组腺病毒载体疫苗及黏膜免疫疫苗提供了理论依据。 展开更多
关键词 犬瘟热病毒 cdv11疫苗株 人5型腺病毒 F蛋白 H蛋白
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犬瘟热病毒(CDV) RPA-SYBR Green Ⅰ 检测方法的建立与应用 被引量：3
19
作者 郝镯 张珊珊 +7 位作者 李楠 田多 李吉平 孟轲音 万忠海 穆玉堂 李忠义 王承宇 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期905-910,共6页
为建立一种新型、稳定、可普遍应用的诊断犬瘟热病毒(CDV)的方法,将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)与SYBR GreenⅠ相结合,根据CDV N基因序列中同源性相对较高的保守区设计1套标有生物素Biotin的特异性引... 为建立一种新型、稳定、可普遍应用的诊断犬瘟热病毒(CDV)的方法,将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification, RPA)与SYBR GreenⅠ相结合,根据CDV N基因序列中同源性相对较高的保守区设计1套标有生物素Biotin的特异性引物和1条标记dSpacer、C3 Spacer的特异性探针,优化反应条件和体系,分析其灵敏性及特异性,最后建立一种可以进行临床应用的,特异性检测CDV的RPA-SYBR GreenⅠ方法。结果显示,成功构建检测CDV的RPA-SYBR GreenⅠ方法,此方法的最佳反应条件为实验人员闭合手掌中孵育10 min,引物与探针的最佳比例为2∶1。该方法的最低检测下限为1×10^(1)~1×10^(0) TCID_(50)/mL,能够特异地检测出CDV。应用本方法检测临床样品的结果与ELISA、RT-PCR方法的结果一致。结果表明,本试验所建立的CDV RPA-SYBR GreenⅠ检测方法特异性强,灵敏度高,操作简单,可应用于临床。 展开更多
关键词 cdv RPA SYBR GreenⅠ N基因 重组酶聚合酶扩增
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ATM 网络物理层信元插入的 CDV 及其容限
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作者 胡文华 朱世伟 +1 位作者 陈雷 陈锦江 《华中理工大学学报》 CSCD 北大核心 1997年第9期76-78,共3页
源流量点和ＵＰＣ控制点间的信元延迟变化（ＣＤＶ）对ＡＴＭ网络的资源分配、ＣＡＣ和ＵＰＣ控制都有着重要的影响．在文献基础上，进一步讨论了基于信元接口的ＡＴＭ网络物理层（ＰＬ）信元插入的情况，研究了信元时隙映射和ＰＬ信元... 源流量点和ＵＰＣ控制点间的信元延迟变化（ＣＤＶ）对ＡＴＭ网络的资源分配、ＣＡＣ和ＵＰＣ控制都有着重要的影响．在文献基础上，进一步讨论了基于信元接口的ＡＴＭ网络物理层（ＰＬ）信元插入的情况，研究了信元时隙映射和ＰＬ信元插入联合作用下的ＣＤＶ，提出了不同序列不同信元的ＣＤＶ计算公式，并确定了ＣＤＶ容限．示例表明：公式计算与定义结果是一致的． 展开更多
关键词 信元延迟变化 容限 物理层信元 ATM网络
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