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CDKL3表达异常对神经元树突形态发育的影响 被引量:1
1
作者 刘赞华 李华 +1 位作者 苗见雨 王苏平 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 北大核心 2013年第1期1-5,共5页
目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3表达异常对神经元树突形态发育的影响,揭示CDKL3失活与该病的内在联系。方法将体外培养的原代海马神经元随机分为敲减1组、敲减2组、过表达组、敲减拯救组和对照组,采用质粒细胞电转法干扰各组神经元... 目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3表达异常对神经元树突形态发育的影响,揭示CDKL3失活与该病的内在联系。方法将体外培养的原代海马神经元随机分为敲减1组、敲减2组、过表达组、敲减拯救组和对照组,采用质粒细胞电转法干扰各组神经元中CDKL3基因表达,采用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)验证基因干扰质粒的效率,采用细胞免疫荧光组化法及荧光共聚焦显微成像技术检测各组神经元树突分支形态;将小鼠胚胎随机分为敲减1组、敲减2组、过表达组、敲减拯救组和对照组,采用质粒胚胎电转法干扰各组活体神经元中CDKL3基因表达,采用细胞免疫荧光组化法及荧光共聚焦显微成像技术检测各组神经元树突分支形态。结果敲减神经元中的CDKL3可致树突分支数量和总长度显著减少,上调CDKL3则引起相反结果,且敲减CDKL3对树突形态的影响可被转染入神经元的RNA干扰质粒对应的拯救质粒所拯救。结论 CDLK3的表达和活动对神经元树突的生长及分支形成至关重要,CDKL3失活引起神经元树突形态发育异常可能是该基因相关精神发育迟滞的重要病理机制。 展开更多
关键词 精神发育迟滞 cdkl3 神经元 树突
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精神发育迟滞相关基因CDKL3对神经元树突棘形态发育的影响 被引量:2
2
作者 刘赞华 赵永波 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 CAS 2011年第2期110-113,118,共5页
目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3在神经元树突棘生长形成中的作用,以及CDKL3失活与精神发育迟滞间的内在联系。方法采用反转录实时定量聚合酶链反应(RT-realtime Quantitive PCR)方法检测内源性CDKL3基因在小鼠中枢神经系统发育中mRN... 目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3在神经元树突棘生长形成中的作用,以及CDKL3失活与精神发育迟滞间的内在联系。方法采用反转录实时定量聚合酶链反应(RT-realtime Quantitive PCR)方法检测内源性CDKL3基因在小鼠中枢神经系统发育中mRNA水平的时空表达,采用RNA干扰技术和免疫荧光组化方法研究CDKL3在小鼠活体神经元树突棘生长形成中的作用。结果 Cdkl3 mRNA在发育14 d的小鼠胚胎脑组织中即可检测到表达,出生时达峰值,随后下降,至出生后14 d时降至较低水平并维持至成年。采用RNA干扰技术敲减小鼠活体中枢神经系统神经元中的CDKL3可引起神经元树突棘密度显著减少,而上调神经元细胞中的CDKL3可引起相反的结果,并且敲减CDKL3对神经元的病理影响可被转染入神经元的RNA干扰质粒相对应的CDKL3-Res质粒所拯救。结论 CDLK3的表达和活动在神经元树突棘的生长形成中具有至关重要的作用,CDKL3失活引起神经元树突棘形态发育异常极可能是非综合征轻型精神发育迟滞的一个重要病理机制。 展开更多
关键词 精神发育迟滞 cdkl3 神经元 树突棘
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精神发育迟滞相关基因CDKL3失活对侧脑室旁区细胞增殖的影响 被引量:1
3
作者 刘赞华 廉春燕 +2 位作者 李淑敏 赵红 王苏平 《中国临床神经科学》 2016年第2期153-157,165,共6页
目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3失活对侧脑室旁区细胞增殖的影响,揭示CDKL3相关精神发育迟滞的病理机制。方法将体外培养的原代海马神经元随机分为细胞敲减1组、细胞敲减2组、细胞敲减3组和细胞对照组,采用质粒细胞电转法干扰各组... 目的探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3失活对侧脑室旁区细胞增殖的影响,揭示CDKL3相关精神发育迟滞的病理机制。方法将体外培养的原代海马神经元随机分为细胞敲减1组、细胞敲减2组、细胞敲减3组和细胞对照组,采用质粒细胞电转法干扰各组神经元中CDKL3基因表达,采用Western blot法验证基因干扰质粒的效率。将小鼠胚胎随机分为胚胎敲减1组、胚胎敲减2组、胚胎敲减3组和胚胎对照组,采用质粒胚胎电转法干扰各组活体小鼠侧脑室旁区细胞中CDKL3基因表达,采用免疫荧光组化法及荧光共聚焦显微成像技术检测各组侧脑室旁区脑组织单位体积中增殖细胞/总细胞的百分比。结果敲减侧脑室旁区细胞中的CDKL3可导致侧脑室旁区的GFP-Brd U-Hoechst共标细胞/GFP阳性细胞百分比显著下降。结论 CDLK3失活可抑制富含神经前体细胞的侧脑室旁区的细胞增殖,影响皮质神经元的数量,参与非特异性精神发育迟滞的病理过程。 展开更多
关键词 精神发育迟滞 cdkl3 增殖
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精神发育迟滞相关基因CDKL3对神经元轴突形态发育的影响 被引量:1
4
作者 刘赞华 王苏平 《中国临床神经科学》 2011年第3期249-254,共6页
目的:探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3在神经元轴突生长发育中的作用,从而揭示CDKL3失活与精神发育迟滞间的内在联系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-realtimequantitivePCR)方法研究内源性CDKL... 目的:探讨精神发育迟滞相关基因CDKL3在神经元轴突生长发育中的作用,从而揭示CDKL3失活与精神发育迟滞间的内在联系。方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和逆转录-实时定量聚合酶链反应(RT-realtimequantitivePCR)方法研究内源性CDKL3基因在小鼠中枢神经系统发育中mRNA水平的时空表达,采用RNA干扰技术和免疫荧光组化方法研究CDKL3在小鼠体外培养神经元轴突早期发育中的作用。结果:RT-PCR和RT-realtimequantitivePCR结果显示,CDKL3在小鼠胚胎14d开始表达,出生时达峰,随后下降,出生14d时降至较低水平并维持至成年后。免疫荧光组化结果显示,用RNA干扰技术敲减体外培养神经元中的CDKL3可引起神经元轴突分支数量和总长度的显著增加,而上调神经元中的CDKL3可引起相反的结果,并且敲减CDKL3对神经元的病理影响可被转染入神经元的RNA干扰质粒相对应的CDKL3-Res质粒所拯救。结论:CDLK3的表达和活动在神经元轴突的生长、分支形成中具有至关重要的作用,CDKL3失活引起神经元轴突形态发育异常可能与非综合征轻型精神发育迟滞的特征表现相关。 展开更多
关键词 精神发育迟滞 cdkl3 神经元 轴突 小鼠
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