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对虾病毒IHHNV介导的双启动子驱动的对虾CDK1基因表达载体的构建与表达研究
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作者 肖蕊 王金武 郭华荣 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期153-164,共12页
针对体外培养刀额新对虾(Metapenaeus ensis)细胞存在分裂停滞和难以连续传代的问题,本研究团队已建立了一种基于传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)基因组的基因转移与表达... 针对体外培养刀额新对虾(Metapenaeus ensis)细胞存在分裂停滞和难以连续传代的问题,本研究团队已建立了一种基于传染性皮下及造血组织坏死病毒(Infectious hypodermal and hematopoietic necrosis virus,IHHNV)基因组的基因转移与表达系统(pUC19-IHHNV-PH-GUS和Bacmid-VP28),但该系统尚未应用于介导永生性转化相关基因在对虾及其细胞中的转移。鉴于此,本研究将该系统中的GUS报告基因替换为EGFP报告基因,并插入对虾永生性转化相关基因——细胞周期蛋白依赖性激酶(Cell cycle protein-dependent kinase,CDK1),构建了病毒表达载体pUC19-IHHNV-PH-CDK1-P2A-EGFP。同时,为提高CDK1基因在对虾细胞中的表达效率,进一步引入对虾白斑综合征病毒(White spot syndrome virus,WSSV)的WSV249启动子,构建了双启动子病毒表达载体pUC19-IHHNV-PH-WSV249-CDK1-P2A-EGFP。利用昆虫病毒多角体蛋白(Polyhedrin,PH)基因作为启动子(PH启动子),通过Sf9细胞对PH启动子和WSV249启动子的活性进行分析,结果表明,WSV249启动子可以在Sf9细胞中有效驱动基因的表达,但其活性显著低于PH启动子。进一步,将上述2种病毒表达载体分别与Bacmid-VP28质粒共转染至Sf9细胞中,从而发现所包装出的混合病毒能够有效感染对虾体外培养血淋巴细胞和造血组织细胞及对虾成体组织,且含双启动子PH-WSV249的混合病毒的感染效率更高。然而病毒感染后的对虾细胞存活能力有限,未在其中观察到明显的促进细胞增殖现象,本研究怀疑该现象与包装出的IHHNV会对细胞产生毒害作用有关。总之,本研究优化并构建了高效的对虾基因病毒表达载体,并验证了其在对虾及其细胞中的基因转移潜力。 展开更多
关键词 刀额新对虾 基因转移 cdk1基因 传染性皮下及造血组织坏死病毒 昆虫杆状病毒 病毒表达系统
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miR-185、LZTS1、CDK1对晚期非小细胞肺癌化疗疗效的预测价值
2
作者 苏筝 郑玲玲 李明珠 《实用癌症杂志》 2025年第2期230-233,246,共5页
目的 探讨miR-185、LZTS1、CDK1对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗疗效的预测价值。方法 收集92例NSCLC患者临床资料,依照化疗疗效分为良好组(77例)和不良组(15例)。比较2组患者一般资料;比较癌组织与癌旁组织中miR-185、LZTS1、CDK1 mRNA... 目的 探讨miR-185、LZTS1、CDK1对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)化疗疗效的预测价值。方法 收集92例NSCLC患者临床资料,依照化疗疗效分为良好组(77例)和不良组(15例)。比较2组患者一般资料;比较癌组织与癌旁组织中miR-185、LZTS1、CDK1 mRNA水平;比较不同疗效的miR-185、LZTS1、CDK1 mRNA水平;评估miR-185、LZTS1、CDK1对晚期非小细胞肺癌化疗疗效的预测价值。结果 2组性别、年龄、吸烟、病理分型、临床分期、淋巴结转移、肿瘤直径比较,差异不显著(P>0.05)。癌组织的miR-185、LZTS1mRNA水平均低于癌旁组织,癌组织CDK1 mRNA水平高于癌旁组织,差异显著(P<0.05)。良好组的miR-185、LZTS1mRNA水平均低于不良组,CDK1 mRNA水平高于不良组,差异显著(P<0.05)。miR-185、LZTS1、CDK1联合对晚期非小细胞肺癌化疗疗效的预测价值良好,灵敏度、特异度相对单一指标较好,受试者操作特征曲线(ROC)下面积(AUC)最大,为0.882,灵敏度为0.733,特异度为0.922。三者预测阈值分别为1.135、0.220、2.200。结论 晚期NSCLC患者癌组织中miR-185、LZTS1低表达,CDK1高表达。miR-185、LZTS1、CDK1对晚期NSCLC化疗疗效具有一定的预测价值,可能成为临床上晚期NSCLC化疗疗效的评估指标。 展开更多
关键词 miR-185 LZTS1 cdk1 晚期 非小细胞肺癌 化疗 疗效 预测
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莱菔硫烷诱导HepG-2细胞G_2/M期阻滞及其对Cdk1和CyclinB1蛋白表达的影响 被引量:5
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作者 邹翔 曲中原 +2 位作者 高鹏 孙胜男 季宇彬 《中医药学报》 CAS 2010年第2期8-12,共5页
目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对H... 目的:研究莱菔硫烷(SFN)在体外对人肝癌HepG-2细胞G2/M期的阻滞作用,并探讨其分子作用机制。方法:10、20、40μmol·L-1的SFN处理体外培养的HepG-2细胞株48h后,采用流式细胞仪检测SFN对HepG2细胞周期的影响;WesternBlot法检测SFN对HepG2细胞内Cdk1、p-Cdk1(Thr14)和CyclinB1蛋白表达的影响。结果:SFN作用于HepG-2细胞48h后,随着SFN浓度的增大,G2/M期细胞比例逐渐升高,当SFN浓度达到40μmol·L-1时,G2/M期细胞比例达到31.95%,且出现凋亡峰;随SFN浓度的增大,细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达量显著降低(P<0.01或P<0.05),同时p-Cdk1(Thr14)的表达显著升高(P<0.01或P<0.05)。结论:SFN可诱导人肝癌HepG-2细胞发生G2/M期阻滞;SFN可通过下调HepG-2细胞内Cdk1和CyclinB1蛋白的表达、上调p-Cdk1(Thr14)的蛋白表达水平,进而抑制Cdk1-CyclinB1复合物的形成和活化使人肝癌HepG-2细胞阻滞在G2/M期。 展开更多
关键词 莱菔硫烷 人肝癌HEPG-2细胞 G2/M阻滞 cdk1 p-cdk1(Thr14) CYCLINB1
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白屈菜碱对SGC-7901细胞Cdk1、cyclinB1表达影响 被引量:8
4
作者 季宇彬 孟凡影 +1 位作者 曲中原 邹翔 《哈尔滨商业大学学报(自然科学版)》 CAS 2012年第1期1-3,共3页
研究白屈菜碱对人胃癌SGC-7901细胞Cdk1、p-Cdk1(Thr14)、cyclinB1蛋白表达,探讨白屈菜碱诱导人胃癌SGC-7901细胞G2/M期阻滞的机制.采用Western blotting法测定白屈菜碱对SGC-7901细胞Cdk1、p-Cdk1(Thr14)、cyclinB1蛋白表达的影响.不... 研究白屈菜碱对人胃癌SGC-7901细胞Cdk1、p-Cdk1(Thr14)、cyclinB1蛋白表达,探讨白屈菜碱诱导人胃癌SGC-7901细胞G2/M期阻滞的机制.采用Western blotting法测定白屈菜碱对SGC-7901细胞Cdk1、p-Cdk1(Thr14)、cyclinB1蛋白表达的影响.不同质量浓度的白屈菜碱可显著下调人胃癌SGC-7901细胞内Cdk1与cyclinB1蛋白表达水平,同时显著上调p-Cdk1(Thr14)蛋白的表达水平,并呈一定的剂量依赖性.白屈菜碱可下调SGC-7901细胞内Cdk1和cyclinB1蛋白的表达,上调p-Cdk1(Thr14)蛋白的表达,这可能是白屈菜碱诱导SGC-7901细胞G2/M期阻滞的主要机制之一. 展开更多
关键词 白屈菜碱 cdk1 p-cdk1(Thr14) CYCLINB1 人胃癌SGC-7901细胞
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联合基因Survivin、CDK1的shRNAs靶向干扰对鼻咽癌CNE-2细胞增值的影响 被引量:10
5
作者 陈淑萍 周红桃 +3 位作者 蔡俊宏 王福利 许茂轩 符生苗 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期239-247,共9页
为了构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,并研究其靶向干扰对鼻咽癌细胞CNE-2生物学行为的改变。本研究通过构建pU6-SurvivinshRNA、pU6-CDK1shRNA和pU6-SurvivinshRNA... 为了构建具有干扰效应的靶向Survivin和CDK1基因及两者串联的短发夹样RNA(short hairpin RNA,shRNA)表达载体,并研究其靶向干扰对鼻咽癌细胞CNE-2生物学行为的改变。本研究通过构建pU6-SurvivinshRNA、pU6-CDK1shRNA和pU6-SurvivinshRNA-CDK1shRNA重组载体,用脂质体Lipofectamine 2000法将其转染入CNE-2细胞株中,应用RT-PCR方法初步筛选具有干扰效应的重组载体,逆转录实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测Survivin、CDK1 mRNA的基因表达水平,Western blot检测Survivin和CDK1蛋白表达以及噻唑蓝溴化四唑(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测癌细胞增殖活性的变化。结果表明:成功构建具有干扰效应的shRNAs表达载体;联合或单基因Survivin、CDK1的shRNAs表达载体干扰CNE-2细胞后,其对应的mRNA和目的蛋白表达均降低,CNE-2癌细胞增殖活性降低,联合基因shRNAs表达载体具有一定程度的干扰增强作用。 展开更多
关键词 短发夹样RNA Survivin基因 cdk1基因 鼻咽癌 CNE-2
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Cyclin B1、CDK1在肺癌中过表达及其意义 被引量:4
6
作者 黄淑红 马晓丽 +4 位作者 邱超 黄敬爱 孔维华 谢经武 张红卫 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期122-124,共3页
采用免疫组化ABC法检测 12例肺癌组织、11例癌旁组织及 3例正常肺组织中cyclinB1、CDK1蛋白的表达情况 ,以探讨细胞周期蛋白cyclinB1及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1在不同肺癌组织中的异常表达及其临床意义 .结果显示cyclinB1在正常肺组... 采用免疫组化ABC法检测 12例肺癌组织、11例癌旁组织及 3例正常肺组织中cyclinB1、CDK1蛋白的表达情况 ,以探讨细胞周期蛋白cyclinB1及细胞周期蛋白依赖性激酶CDK1在不同肺癌组织中的异常表达及其临床意义 .结果显示cyclinB1在正常肺组织、癌旁组织、癌组织中阳性率分别为 0 %、9.1%和 5 0 .0 % ,CDK1的阳性率则为0 %、18.2 %和 75 .0 % ,cyclinB1、CDK1在小细胞肺癌和鳞癌中存在广泛的过表达 ,而在大细胞肺癌中没有表达 。 展开更多
关键词 肺癌 细胞周期 CYCLIN B1 cdk1
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山奈酚对CNE-2细胞周期及CyclinB1、Cdk1mRNA表达的影响 被引量:4
7
作者 陈育华 吴国才 +1 位作者 王珍 周碧云 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2012年第5期616-619,共4页
目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处... 目的:观察山奈酚对鼻咽癌CNE-2细胞周期分布及细胞周期素B1(CyclinB1)、细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1)表达的影响。方法:分别用0、20、40、60、80和100μmol/L的山奈酚处理CNE-2细胞。处理24、48和72h后,应用MTT法测定CNE-2细胞活力;处理24和48h后用流式细胞术检测细胞周期;处理24h后用RT-PCR技术检测细胞CyclinB1及Cdk1mRNA的表达水平。结果:随山奈酚作用剂量的增加和作用时间的延长,CNE-2细胞活力逐渐降低(F浓度=385.194,F时间=237.324,F浓度×时间=13.757,P<0.001),细胞被阻滞于G2/M期(P<0.05);CNE-2细胞中CyclinB1和Cdk1mRNA的表达量随山奈酚作用浓度的增加而逐渐降低(F=95.682、154.871,P<0.001)。结论:山奈酚可能通过下调CNE-2细胞CyclinB1和Cdk1mRNA的表达水平,诱导G2/M期阻滞,抑制其增殖。 展开更多
关键词 山奈酚 CNE-2细胞 细胞周期 cdk1 CYCLINB1 鼻咽癌
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CDC25A与CDK1在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:6
8
作者 傅华 于爱军 +2 位作者 陈凯 张学军 李巍 《河北医学》 CAS 2018年第1期80-83,共4页
目的:探索CDC25A和CDK1在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化的方法检测119例胃癌组织中CDC25A和CDK1的表达情况,通过统计分析CDC25A和CDK1与胃癌患者的临床病理特征之间的关系。结果:CDC25A和CDK1在高分化胃癌组织低表达... 目的:探索CDC25A和CDK1在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化的方法检测119例胃癌组织中CDC25A和CDK1的表达情况,通过统计分析CDC25A和CDK1与胃癌患者的临床病理特征之间的关系。结果:CDC25A和CDK1在高分化胃癌组织低表达,在低分化胃癌组织中高表达,与胃癌的病理分级具有相关性(P<0.001);CDC25A和CDK1在早期胃癌中低表达,在晚期胃癌组织中高表达,与胃癌TNM分期具有相关性(P<0.01);CDC25A和CDK1的表达与胃癌患者有淋巴结转移(P<0.001)相关,CDC25A和CDK1在发生淋巴结转移的胃癌组织中高表达,在未发生淋巴结转移的胃癌组织中低表达。结论:CDC25A与CDK1有望成为胃癌诊断与治疗的潜在的分子标志。 展开更多
关键词 CDC25A cdk1 胃癌 转移 分子标志
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CDK1靶向shRNA质粒载体的构建及鉴定 被引量:3
9
作者 赵晶 韩苏夏 +2 位作者 马瑾璐 黄辰 张丹 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1053-1055,1060,共4页
目的:设计并构建CDK1-shRNA质粒表达载体,转染肝癌HepG2细胞,验证shRNA对肝癌HepG2细胞CDK1基因的沉默效应,便于进一步研究CDK1的功能。方法:设计针对CDK1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶... 目的:设计并构建CDK1-shRNA质粒表达载体,转染肝癌HepG2细胞,验证shRNA对肝癌HepG2细胞CDK1基因的沉默效应,便于进一步研究CDK1的功能。方法:设计针对CDK1mRNA靶序列的小发夹状RNA,化学合成含茎环结构的正义链与反义链,退火形成带内切酶粘/平末端的双链后,与酶切后的 pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体片段进行连接、转化。经测序等方法鉴定重组克隆。将重组载体质粒经脂质体包裹转染肝癌HepG2细胞,realtime PCR及Western blot检测RNA干扰效果。结果:重组克隆经测序证实插入的序列正确,realtime PCR及Western blot检测证实设计的3条RNA干扰序列有效沉默了肝癌HepG2细胞中的内源性CDK1。结论:所制备的CDK1-shRNA在肝癌HepG2细胞中可获得高效转染,并能产生特异性的基因沉默效应,以CDK1为靶向的shRNA能够有效下调CDK1基因的表达,对周期依赖激酶CDK1功能的研究奠定基础。 展开更多
关键词 SHRNA cdk1 基因沉默 肝癌细胞
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细胞周期依赖性蛋白激酶1(Cdk1/p34cdc2)对喉癌术后局部复发的预测价值 被引量:7
10
作者 孙玉满 刘宏侠 +1 位作者 杨俊泉 吴蒙 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期293-298,共6页
目的检测喉鳞状细胞癌及癌旁切缘组织中p53、p21和Cdk1/p34cdc2蛋白表达及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测85例喉鳞状细胞癌及癌旁切缘组织中p53、p21和Cdk1/p34cdc2蛋白的表达,并收集临床病理资料进行随访。结果在随访2... 目的检测喉鳞状细胞癌及癌旁切缘组织中p53、p21和Cdk1/p34cdc2蛋白表达及其与患者预后的关系。方法应用免疫组化SP法检测85例喉鳞状细胞癌及癌旁切缘组织中p53、p21和Cdk1/p34cdc2蛋白的表达,并收集临床病理资料进行随访。结果在随访2年以上的喉鳞状细胞癌中14例出现局部复发(复发组),71例未复发(未复发组)。在喉鳞状细胞癌和癌切缘组织中p53蛋白阳性率分别为60.0%和36.5%;p21蛋白阳性率分别为38.8%和21.2%;Cdk1/p34cdc2蛋白阳性率分别为70.6%和29.4%。喉鳞状细胞癌复发组和未复发组的切缘组织中p53蛋白阳性率分别为71.4%和29.6%(P=0.003),切缘组织中p21蛋白阳性率分别为50.0%和15.5%(P=0.004),切缘组织中Cdk1/p34cdc2蛋白阳性率分别为57.1%和23.9%(P=0.013)。癌旁切缘组织中p53与p21及Cdk1/p34cdc2蛋白表达之间无相关性(P均>0.05)。结论 p53、p21和Cdk1/p34cdc2蛋白在喉鳞状细胞癌的发生、发展中可能起重要作用;癌旁切缘组织中p53、p21和Cdk1/p34cdc2过表达与喉鳞状细胞癌局部复发密切相关。 展开更多
关键词 喉肿瘤 鳞状细胞癌 p53 P21 cdk1/p34cdc2 局部复发
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P53、P21^(WAF1)和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义 被引量:8
11
作者 史惠蓉 张瑞涛 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第8期882-885,共4页
背景与目的:P53、P21WAF1和CDK1是细胞周期中G2/M期DNA损伤检验点"P53通路"的关键因子,本研究拟探讨P53、P21WAF1和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上... 背景与目的:P53、P21WAF1和CDK1是细胞周期中G2/M期DNA损伤检验点"P53通路"的关键因子,本研究拟探讨P53、P21WAF1和CDK1在卵巢上皮性癌组织中的表达及意义。方法:应用免疫组织化学技术检测20例正常卵巢组织、20例卵巢良性上皮性肿瘤组织、76例卵巢上皮性癌组织中P53、P21WAF1、CDK1蛋白的表达,并分析卵巢上皮性癌组织中P53、P21WAF1、CDK1蛋白表达与其临床病理特征的关系以及各蛋白表达之间的相关性。结果:P53、P21WAF1和CDK1蛋白在卵巢上皮性癌中的阳性率与正常卵巢组织和良性卵巢肿瘤相比其差异均有统计学意义(P<0.05),而在正常卵巢组织与良性卵巢肿瘤之间其阳性率差异均无统计学意义(P>0.05)。在卵巢上皮性癌中,临床分期越晚、组织分化越差,P53蛋白表达越高;随着临床分期的增加,P21WAF1蛋白表达逐渐降低;CDK1蛋白的表达与各临床病理特征无相关性。卵巢上皮性癌中P53蛋白和P21WAF1蛋白的表达与CDK1蛋白的表达呈负相关(r=-0.388,P=0.001;r=-0.282,P=0.014),P53蛋白与CDK1蛋白表达呈正相关(r=0.263,P=0.022)。结论:P53蛋白与卵巢上皮性癌的恶性程度相关,P53和P21WAF1蛋白可能与卵巢上皮性癌的恶性进展有关。检测CDK1可能有助于卵巢癌的早期诊断。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 上皮性癌 G2/M期DNA损伤检验点 P53 P21^WAF1 cdk1 免疫组织化学
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Cdk1在浆液性卵巢癌中的表达及其与化疗耐药及预后的相关性 被引量:4
12
作者 李娜 孙朝阳 +4 位作者 周波 郭恩松 卢豪 陈刚 翁丹卉 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第8期1467-1470,共4页
目的:卵巢癌是女性生殖致死率最高的恶性肿瘤。Cdk1作为细胞周期依赖性激酶中的核心分子,对肿瘤细胞的发生发展具有重要作用。本文旨在探讨Cdk1蛋白在上皮性浆液性卵巢癌中的表达情况,并分析其表达水平与患者临床病理特征、化疗反应及... 目的:卵巢癌是女性生殖致死率最高的恶性肿瘤。Cdk1作为细胞周期依赖性激酶中的核心分子,对肿瘤细胞的发生发展具有重要作用。本文旨在探讨Cdk1蛋白在上皮性浆液性卵巢癌中的表达情况,并分析其表达水平与患者临床病理特征、化疗反应及预后之间的关系。方法:采用免疫组化法检测68例浆液性卵巢癌中Cdk1蛋白的表达情况,并结合临床资料分析Cdk1蛋白的表达水平在浆液性卵巢癌患者中的意义。结果:Cdk1在浆液性卵巢癌患者中具有不同程度的阳性表达,其表达水平和患者的年龄、病理分化程度、淋巴结转移情况及临床分期无明显相关性(P>0.05),但是其高表达与化疗耐药明显相关(P=0.040)。化疗耐药的卵巢癌患者中Cdk1的蛋白表达明显高于化疗敏感组,并且生存分析发现,高表达Cdk1的患者预后较差。结论:本研究证明Cdk1在浆液性卵巢癌中有较高表达,并且Cdk1的表达与卵巢癌化疗后复发有关,高的Cdk1表达预示着较差的预后。Cdk1可能是晚期浆液性卵巢癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 cdk1 免疫组化 卵巢癌 化疗耐药
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MicroRNA-490-5p靶向CDK1通过ERK信号通路参与胃癌细胞周期调控 被引量:6
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作者 侯东泽 代劲松 +1 位作者 邓志波 颜登高 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第16期2565-2572,共8页
目的:探讨miR-490-5p对胃癌细胞增殖与周期的调控作用和分子机制,以期为临床治疗胃癌提供新的有效靶点。方法:收集30例胃癌患者的胃癌组织及相应的癌旁组织标本;采用Real-time PCR法检测miR-490-5p和CDK1的表达水平;分析细胞周期相关蛋... 目的:探讨miR-490-5p对胃癌细胞增殖与周期的调控作用和分子机制,以期为临床治疗胃癌提供新的有效靶点。方法:收集30例胃癌患者的胃癌组织及相应的癌旁组织标本;采用Real-time PCR法检测miR-490-5p和CDK1的表达水平;分析细胞周期相关蛋白CDK1与miR-490-5p的靶向关系。MTT法和流式细胞仪检测转染后胃癌细胞生长以及细胞周期情况。结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中miR-490-5p的表达显著下调(P<0.001);转染miR-490-5p mimics的细胞中miR-490-5p的表达显著上调,而miR-490-5p inhibitors中miR-490-5p显著下降(均P<0.001);CDK1是miR-490-5p的靶基因;下调miR-490-5p、上调CDK1能促进胃癌细胞的增殖能力及G1/S期的转化(均P<0.001)。结论:通过上调miR-490-5p可以抑制胃癌细胞的恶性增殖,减少CDK1表达,抑制ERK信号途径,降低了G1/S期的转化速率,从而为胃癌诊断及治疗提供新靶标。 展开更多
关键词 胃癌 MIRNA miR-490-5p cdk1 ERK 细胞周期 信号通路 细胞增殖
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P53、P21WAF-1和CDK1在乳腺癌组织中的表达及意义 被引量:7
14
作者 冯立文 虞飞 +4 位作者 李姝 岳林 高洋 项鹏程 白雪峰 《诊断病理学杂志》 2019年第8期516-518,共3页
目的探讨p53、p21^WAF-1蛋白、CDK1在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集正常乳腺组织120例和乳腺癌组织480例,通过免疫组化EnVision方法检测p53、p21^WAF-1和CDK1蛋白的表达情况,并进行统计学分析。结果p53、p21^WA... 目的探讨p53、p21^WAF-1蛋白、CDK1在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达及临床意义。方法收集正常乳腺组织120例和乳腺癌组织480例,通过免疫组化EnVision方法检测p53、p21^WAF-1和CDK1蛋白的表达情况,并进行统计学分析。结果p53、p21^WAF-1和CDK1蛋白在正常乳腺组织与乳腺癌组织中的阳性率比较差异显著(P<0.05);且乳腺癌中P53表达率与p21^WAF-1表达率呈负相关(r=-0.364,P<0.05),P53表达率与CDK1表达率呈正相关(r=0.626,P<0.05);p21^WAF-1表达与CDK1表达呈负相关(r=-0.218,P<0.05)。p53、p21^WAF-1表达乳腺癌临床分期、组织学分级、病理类型及淋巴结转移有相关性(P<0.05),与患者年龄无相关性(P>0.05);CDK1表达乳腺癌组织学分级、病理类型及淋巴结转移有相关性(P<0.05),与患者临床分期和年龄无关(P>0.05)。结论p53、p21WAF-1蛋白和CDK1的表达与乳腺癌的发生发展相关,且p53蛋白与CDK1的表达呈正相关,与p21^WAF-1蛋白表达呈负相关,可推断乳腺癌的p53-p21^WAF1-CDK1信号通路调节G2/M检验点机制,参与乳腺癌的发病过程。 展开更多
关键词 乳腺癌 免疫组化 P53 p21^WAF-1 cdk1
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非霍奇金淋巴瘤中CyclinB1、CDK1的表达及临床意义 被引量:2
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作者 曾慈梅 谢贤和 +12 位作者 谈顺 王岩 姚红霞 陈岩菊 王琳 吴琼诗 袁小琴 邢雪花 黄海燕 陈俊民 麦泽锋 李慧艳 林银英 《中国肿瘤》 CAS 2011年第8期621-624,共4页
[目的]探讨细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK1)在良恶性淋巴疾病中的表达差异及其临床病理意义。[方法]采用免疫组织化学ABC法检测CyclinB1、CDK1在非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织及淋巴结反应性增生(RH)组织中的表... [目的]探讨细胞周期蛋白B1(CyclinB1)、细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶(CDK1)在良恶性淋巴疾病中的表达差异及其临床病理意义。[方法]采用免疫组织化学ABC法检测CyclinB1、CDK1在非霍奇金淋巴瘤(NHL)组织及淋巴结反应性增生(RH)组织中的表达情况。[结果]CyclinB1、CDK1在NHL中的阳性表达率分别为83.13%和84.34%,在RH组织中的表达分别为30.00%和25.00%,两者在良、恶性淋巴疾病中的表达存在显著差异(P<0.01);CyclinB1、CDK1在有结外受侵的NHL患者中的阳性表达率分别为94.74%和94.74%,明显高于无结外受侵的患者(73.33%和75.56%),在侵袭性NHL中显著高于惰性NHL(P<0.05);NHL中CyclinB1在Ⅲ~Ⅳ期的表达显著高于Ⅰ~Ⅱ期(P<0.05)。[结论]检测CyclinB1、CDK1的表达情况有助于NHL和RH的鉴别诊断,对判断NHL的恶性程度有一定的临床价值。 展开更多
关键词 CYCLINB1 cdk1 非霍奇金淋巴瘤 淋巴结反应性增生 免疫组织化学
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宫颈癌组织中CDC6、CDK1的表达及其与HPV_(16/18)感染的相关性研究 被引量:3
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作者 陈丽萍 刘润花 赵富玺 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第12期2163-2167,共5页
目的:研究CDC6、CDK1在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制,进一步寻找宫颈癌诊断的新的分子标志物。方法:采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤样病变CINⅠ20例、CINⅡ-Ⅲ20例... 目的:研究CDC6、CDK1在宫颈癌组织中的表达及其与HPV16/18感染的相关性,以探讨宫颈癌的发生机制,进一步寻找宫颈癌诊断的新的分子标志物。方法:采用免疫组织化学方法对50例宫颈癌石蜡标本、宫颈上皮内瘤样病变CINⅠ20例、CINⅡ-Ⅲ20例、正常宫颈组织20例进行CDC6、CDK1的检测,同时采用PCR技术检测HPV16/18感染情况。结果:在宫颈癌组织中CDC6、CDK1的阳性率高于CIN和正常宫颈组织,差异有显著性(均P<0.05),且CDC6、CDK1阳性表达率与病理分级有关,差异有显著性(均P<0.05),CDC6阳性表达率均与淋巴结转移有关(P<0.05);CDK1阳性表达率均与淋巴结转移无关(P>0.05);在宫颈癌组织中CDC6和CDK1的阳性表达率与年龄、临床分期无关(均P>0.05)。HPV16/18在正常宫颈组织、CIN和宫颈癌中的阳性率逐渐升高,差异有显著性(P<0.05),但与临床分期、病理分级、淋巴转移、年龄无关(均P>0.05)。CDK1和CDC6的表达有正相关性(rs=0.529,P<0.05);CDC6与HPV16/18感染有关(rs=0.386,P<0.05);CDK1与HPV16/18感染无关(rs=0.145,P>0.05)。结论:宫颈上皮内瘤样病变及宫颈癌组织中CDC6表达的改变可能与HPV16/18感染有关,且互相作用,共同影响CIN的发展及宫颈癌的发生。这些指标综合分析可能为阐明HPV16/18的恶性转化机制以及为提高宫颈癌及其癌前病变诊断率提供参考依据。CDC6、CDK1的异常表达与宫颈癌的恶变程度有关,可作为宫颈癌筛查、预后判断的有用指标。 展开更多
关键词 CDC6 cdk1 人乳头瘤病毒(HPV) 宫颈癌
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二烯丙基二硫诱导人胃癌细胞G2/M期阻滞中p-CDK1、cyclin B1和p21WAF1蛋白的表达 被引量:3
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作者 袁静萍 袁修学 +2 位作者 凌晖 刘瑶 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第10期1396-1397,共2页
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌细胞 G2/M期阻滞 p-cdk1 cyclinB1 P21WAF1 PCNA
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CDK1干扰调节PLK1、Aurora B和TRF1对白血病细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 王冲 李梦亚 +3 位作者 申晓辉 王树娟 王伟琼 刘延方 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期1129-1135,共7页
目的:研究CDK1干扰调节PLK1、Aurora B和TRF1对白血病细胞增殖的影响。方法:以人髓原细胞白血病细胞株HL-60为研究对象,通过调节胞内CDK1表达来研究TRF1表达及其变化对细胞增殖和周期的影响。实验分为对照、shRNA-NC、CDK1-shRNA、pcDNA... 目的:研究CDK1干扰调节PLK1、Aurora B和TRF1对白血病细胞增殖的影响。方法:以人髓原细胞白血病细胞株HL-60为研究对象,通过调节胞内CDK1表达来研究TRF1表达及其变化对细胞增殖和周期的影响。实验分为对照、shRNA-NC、CDK1-shRNA、pcDNA和pcDNA-CDK1共5组。采用RT-PCR检测各组细胞中CDK1表达;集落形成检测细胞增殖;Western blot检测CDK1、PLK1、Aurora B、TRF1及周期蛋白p53、p27和cyclinA的表达。结果:与对照组相比,CDK1-shRNA组中PLK1、Aurora B磷酸化水平及TRF1表达显著下调(P<0.05),细胞集落形成率显著下降,周期相关蛋白p53和p27表达显著升高而cyclinA表达则显著下降(P<0.05)。这表明,干扰CDK1表达可抑制HL-60细胞增殖并延长其进入有丝分裂的时间,从而延长细胞周期。而与对照组相比,pcDNA-CDK1组中CDK1过表达则使PLK1、Aurora B磷酸化水平及TRF1表达显著上升(P<0.05),克隆形成率显著升高,周期相关蛋白p53和p27显著下降且cyclinA表达显著上调(P<0.05)。这表明,CDK1过表达可刺激不良反应发生,从而促进HL-60细胞的增殖并缩短细胞周期。结论:敲除CDK1可抑制PLK1和Aurora B磷酸化并负向调节TRF1,从而抑制白血病细胞的增殖。 展开更多
关键词 cdk1 有丝分裂 端粒酶 细胞周期 白血病
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Cdc2/cdk1和survivin特异性siRNA真核表达载体的设计、构建和鉴定 被引量:1
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作者 朱俊 袁玉林 +3 位作者 彭涛 陈树 黄铄 李双 《海南医学院学报》 CAS 2015年第3期291-295,共5页
目的:构建表达靶向cdc2/cdk mRNA和survivin mRNA的siRNA真核表达质粒。方法:从GenBank中搜索Cdc2/cdk1和survivin基因组标准序列,根椐siRNA设计原理构建siRNA真核表达质粒phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-surviv... 目的:构建表达靶向cdc2/cdk mRNA和survivin mRNA的siRNA真核表达质粒。方法:从GenBank中搜索Cdc2/cdk1和survivin基因组标准序列,根椐siRNA设计原理构建siRNA真核表达质粒phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-survivin-shRNA1和phU6-survivinshRNA。phU6-survivin-shRNA1、phU6-survivin-shRNA2、pU6-HK-shRNA质粒均含有增强绿色荧光基因作为报告基因和酶切位点,而phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2均含有红色荧光基因作为报告基因和酶切位点。质粒酶切、电泳、测序鉴定;用脂质体转染鼻咽癌CNE2细胞,荧光显微镜下观察、摄片、计数阳性细胞,计算转染效率,激光共聚焦显微镜检测质粒载体绿色和红色荧光蛋白的表达,免疫印迹法检测真核表达质粒对相应蛋白的抑制率。结果:荧光显微镜下计算转染效率显示在转染鼻咽癌细胞CNE2 48h转染率高达45.00%-57.45%;质粒phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-survivin-shRNA1、phU6-survivin-shRNA2和pU6-HK-shRNA酶切后均可见400bp条带,与预期插入的目的基因大小一致,基因测序证实碱基序列与模板序列相符;在共聚焦显微镜下观察均见大量的细胞表达相应荧光;免疫印迹检测phU6-cdc2/cdk1-shRNA1、phU6-cdc2/cdk1-shRNA2、phU6-survivin-shRNA1和phU6-survivin-shRNA2对鼻咽癌CNE2细胞相应蛋白抑制率分别是33.00±1.41、38.31±1.01(survivin)、36.33±1.21和43.26±1.02(cdk1)。结论:本实验构建了靶向Cdc2/cdk1mRNA和survivin mRNA的真核表达质粒。重组质粒能有效转染人鼻咽癌细胞,phU6-cdc2/cdk1-shRNA2和phU6-survivin-shRNA2与phU6-cdc2/cdk1-shRNA1和phU6-survivin-shRNA1相比,转染CNE2 48h后其对相应蛋白的干扰率相对较高。 展开更多
关键词 鼻咽癌细胞株CNE2 RNA干扰 cdc2/cdk1 SURVIVIN
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甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性及体内外抗肝癌活性 被引量:14
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作者 张敏 李晶晶 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期72-78,共7页
探讨甘草黄酮类化合物对细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK1)的抑制活性及抑制肝肿瘤细胞Bel-7402活性。采用CDK1和CCK-8试剂盒分别测试甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性和对肝癌Bel-7402细胞的体外增殖抑制活性。构建肝癌Bel-7402裸鼠皮下... 探讨甘草黄酮类化合物对细胞周期依赖性蛋白激酶(CDK1)的抑制活性及抑制肝肿瘤细胞Bel-7402活性。采用CDK1和CCK-8试剂盒分别测试甘草黄酮类化合物对CDK1的抑制活性和对肝癌Bel-7402细胞的体外增殖抑制活性。构建肝癌Bel-7402裸鼠皮下肿瘤模型,并将小鼠随机分为3组:灌胃给药组、阳性药物组和空白对照组,连续灌胃给药18 d,每隔1天记录实验小鼠的体重、肿瘤大小变化。结果表明,甘草黄酮类化合物对CDK1/cyclin B均展现出了抑制活性,尤其是异甘草素对CDK1/cyclin B的抑制活性(IC_(50)=0.05±0.005μmol/L)是阳性药物夫拉平度(IC_(50)=0.29±0.230μmol/L)的近6倍;通过分子对接研究发现,异甘草素在CDK1中能够与氨基酸残基K33、E81、L83、S84、D86、D149形成6个氢键,而阳性药物夫拉平度仅与氨基酸残基E81、L83、S84、Q132、D149形成5个氢键;体外抗肿瘤活性研究表明,甘草黄酮类化合物对Bel-7402有较强的抑制作用,其中异甘草素对Bel-7402(IC_(50)=0.7±0.11 mol/L)展现出了最强的抑制活性,是阳性药物夫拉平度(2.4±0.34)mol/L的3倍。动物体内研究表明,异甘草素的LD_(50)为4.38 mg/kg,并能够有效抑制肝癌Bel-7402细胞的增长。 展开更多
关键词 甘草黄酮类化合物 cdk1抑制剂 分子对接 抗肿瘤活性
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