敲除CDC20可明显抑制宫颈癌细胞的增殖及侵袭转移

1

作者 莫艳秀 舒洋 +4 位作者 莫钰兰 刘峻彤 徐欧欧 邓华菲 王岐本 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第6期1200-1211,共12页

目的 探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在宫颈癌中的功能及其对宫颈癌C33A细胞增殖、迁移以及侵袭的影响和作用机制。方法 TCGA数据库分析CDC20在宫颈癌组织中的表达情况,免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织与癌旁组织中的CDC20和β-Catenin蛋... 目的 探讨细胞分裂周期蛋白20(CDC20)在宫颈癌中的功能及其对宫颈癌C33A细胞增殖、迁移以及侵袭的影响和作用机制。方法 TCGA数据库分析CDC20在宫颈癌组织中的表达情况,免疫组化(IHC)检测宫颈癌组织与癌旁组织中的CDC20和β-Catenin蛋白表达水平。利用CRISPR/Cas9设计CDC20基因双靶点的sgRNA2&7序列,构建重组质粒并测序验证。将宫颈癌细胞C33A按转染的质粒不同分为sgRNA-NC组和sgRNA-CDC20组,通过qRT-PCR和Western blotting检测CDC20的mRNA和蛋白表达水平,平板克隆检测其增殖能力,流式细胞术检测细胞周期和凋亡水平;Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力。将2组C33A细胞分别接种于裸鼠(5只/组)双侧腋下左、右两侧,定期监测肿瘤体积并绘制其生长曲线,称取裸鼠体质量并脱臼处死。Western blotting分别检测细胞和瘤体组织中的CDC20和β-Catenin蛋白的表达水平;免疫共沉淀(CoIP)和免疫荧光共定位验证CDC20与β-Catenin的相互作用。结果 CDC20和β-Catenin在宫颈癌组织中的表达高于癌旁组织(P<0.001)。体外细胞实验结果显示:与sgRNA-NC组细胞比较,sgRNA-CDC20敲除株的细胞增殖能力下降(P<0.001)且细胞凋亡显著升高(P<0.01);迁移和侵袭能力受到明显抑制(P<0.05)。体内动物实验结果显示:与sgRNA-NC组比较,sgRNACDC20组的瘤体体积生长曲线明显减小(P<0.05),但裸鼠体质量无明显变化(P>0.05);sgRNA-CDC20组中的细胞和组织中的CDC20和β-Catenin的蛋白水平明显降低(P<0.05),免疫共沉淀(CoIP)和免疫荧光验证CDC20和β-Catenin存在相关性。结论CDC20在宫颈癌组织、细胞以及瘤体中的表达明显升高,敲除CDC20可明显抑制C33A细胞的增殖和侵袭转移能力,并促进凋亡,其机制可能与Wnt/β-Catenin信号通路密切相关。 展开更多

关键词 CRISPR/Cas9 cdc20 宫颈癌 WNT/Β-CATENIN

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基于TCGA数据库探讨CDC20在宫颈癌组织中的表达及其对癌细胞自噬的影响 被引量：2

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作者 莫艳秀 徐欧欧 +3 位作者 李梁政 喻坤林 贺嘉旖 王岐本 《现代肿瘤医学》 2025年第3期375-387,共13页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle protein 20,CDC20)在宫颈癌(cervical cancer,CC)组织中的表达,并分析CDC20对宫颈癌细胞自噬的影响。方法:基于TCGA数据库分析CC组织中CDC20的表达以及对宫颈癌患者生存率和临床分期... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle protein 20,CDC20)在宫颈癌(cervical cancer,CC)组织中的表达,并分析CDC20对宫颈癌细胞自噬的影响。方法:基于TCGA数据库分析CC组织中CDC20的表达以及对宫颈癌患者生存率和临床分期的影响,GSEA富集分析CDC20与自噬通路的相关性,通过STRING分析蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,ssGSEA算法和Spearman's分析免疫细胞浸润。免疫组化检测宫颈癌和癌旁组织中CDC20的表达水平。CRISPR-cas9技术设计双靶点敲除sgRNA2&7-CDC20基因并构建其细胞稳株。分别设置sgRNA-NC组、sgRNA-CDC20组、sgRNA-NC组+血清饥饿24 h和sgRNA-CDC20+血清饥饿24 h组。透射电镜(TEM)检测细胞中自噬小体的变化,免疫荧光、qRT-PCR和Western Blot法检测自噬基因p62、Beclin 1和LC3的细胞定位、mRNA和蛋白表达水平。结果:与癌旁组织相比,宫颈癌组织中CDC20呈高表达,其高表达与患者的年龄、临床分期、免疫浸润和不良预后(P<0.05)以及较短的总生存期(P<0.001)高度相关。GSEA提示CDC20高表达参与自噬等九个通路。通过STRING数据库筛选到53个CDC20的互作蛋白。免疫组化结果显示CDC20在宫颈癌组织中的表达量显著高于癌旁组织。TEM结果显示敲除CDC20可诱导宫颈癌C33A细胞发生自噬;免疫荧光显示p62、Beclin 1和LC3主要定位在细胞质中,CDC20敲除和血清饥饿24 h均能观察LC3的荧光强度有明显增多且具有叠加效应;qRT-PCR和Western Blot分析结果都显示敲除CDC20后增加细胞内酸性自噬体囊泡的形成和显著性增强自噬相关蛋白LC3B-II/I的表达(P<0.05)。结论:CDC20在宫颈癌组织和细胞中均高表达并影响自噬,可能是CC的独立预后标志物,CDC20有望成为分子靶向治疗的新靶点。 展开更多

关键词 TCGA 宫颈癌 自噬 预后 cdc20

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CDC20表达水平与胆管癌患者PD-L1表达及免疫检查点抑制剂治疗疗效的相关性

3

作者 鲜枫 别俊 +2 位作者 张国军 宋学武 许国辉 《现代肿瘤医学》 2025年第12期2107-2113,共7页

目的:探讨细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)表达与胆管癌患者程序性死亡受体配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)表达及免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗疗效的相关性。方法:使用GEPIA在... 目的:探讨细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)表达与胆管癌患者程序性死亡受体配体1(programmed death-ligand 1,PD-L1)表达及免疫检查点抑制剂(immune checkpoint inhibitors,ICIs)治疗疗效的相关性。方法:使用GEPIA在线数据库评估CDC20和PD-L1表达的相关性。免疫组化检测CDC20和PD-L1的表达。使用SPSS软件分析CDC20表达与PD-L1表达和ICIs治疗疗效的相关性及对生存期的影响。结果:生信分析显示CDC20表达与PD-L1表达呈显著正相关(R=0.69,P<0.001)。临床样本中,CDC20高表达组患者的PD-L1阳性率显著高于CDC20低表达组(P<0.05);在含ICIs方案治疗中,CDC20低表达组的客观缓解率(objective response rate,ORR)显著高于CDC20高表达组(P=0.021);在ICIs单药治疗的亚组分析中,CDC20高表达组的ORR则高于CDC20低表达组(P=0.045)。生存分析显示,CDC20低表达组的无进展生存期(progression-free survival,PFS)和总生存期(overall survival,OS)显著长于CDC20高表达组(P<0.001)。多因素回归分析表明,CDC20、PD-L1和中性粒细胞计数为ICIs治疗胆管癌疗效的独立影响因素(P<0.05)。结论:CDC20表达可作为胆管癌患者免疫治疗疗效的预测因子,为个性化免疫治疗策略的制定提供了潜在依据。 展开更多

关键词 cdc20 胆管癌 PD-L1 免疫检查点抑制剂 疗效

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CDC20在逆转胰腺癌细胞吉西他滨耐药中的作用

4

作者 蒋世力 温景然 +2 位作者 冯秋月 马金玉 高丽霞 《贵州医科大学学报》 2025年第9期1334-1341,共8页

目的探讨癌基因细胞分裂周期蛋白20(cell division cyclin 20,CDC20)对胰腺癌吉西他滨耐药细胞生物功能的影响。方法生物信息学方法分析CDC20与胰腺癌患者生存期限的相关性;选用大剂量冲击与低剂量递增法构建耐药细胞株,通过qRT-PCR、We... 目的探讨癌基因细胞分裂周期蛋白20(cell division cyclin 20,CDC20)对胰腺癌吉西他滨耐药细胞生物功能的影响。方法生物信息学方法分析CDC20与胰腺癌患者生存期限的相关性;选用大剂量冲击与低剂量递增法构建耐药细胞株,通过qRT-PCR、Western blot实验检测CDC20在野生型与耐药细胞中的表达水平;通过慢病毒体系构建敲减CDC20的细胞并检测其生长情况;细胞生长与Western blot实验评价CDC20抑制剂与吉西他滨联合处理对耐药细胞的影响。结果对胰腺癌病人进行Kaplan-Meier生存期限分析结果提示,CDC20高表达与胰腺癌病人的生存期限成负相关(P<0.05);CDC20在胰腺癌吉西他滨耐药细胞中表达上调(P<0.05);敲减CDC20可以减缓耐药细胞的生长能力(P<0.05);CDC20抑制剂与吉西他滨联合处理可以降低吉西他滨耐药细胞生长能力并促进其凋亡(P<0.05)。结论CDC20在胰腺癌吉西他滨耐药中发挥调控作用,可作为治疗胰腺癌吉西他滨耐药的潜在靶标。 展开更多

关键词 cdc20 胰腺癌 吉西他滨 药物耐药 细胞增殖 凋亡

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CDC20通过稳定NLRP3的表达促进食管癌细胞增殖的研究 被引量：1

5

作者 关瑞瑞 郝茜 +5 位作者 张雅琦 孙庆港 陈怡恬 李秀敏 周祥 韩涛 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期473-484,共12页

背景与目的:食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)是死亡率较高的恶性肿瘤之一,其发生、发展的机制不明。CDC20被认为具有癌基因功能,其表达失调与肿瘤的发生、发展密切相关。CDC20在多种肿瘤中表达升高,敲低CDC20能够抑制肿瘤细胞增殖。N... 背景与目的:食管癌(esophageal carcinoma,ESCA)是死亡率较高的恶性肿瘤之一,其发生、发展的机制不明。CDC20被认为具有癌基因功能,其表达失调与肿瘤的发生、发展密切相关。CDC20在多种肿瘤中表达升高,敲低CDC20能够抑制肿瘤细胞增殖。NLRP3是炎症小体的主要成分之一,炎症小体失调与肿瘤的发生、发展也密切相关。本研究旨在探究CDC20是否通过NLRP3促进ESCA细胞增殖,同时分析其调控机制。方法:通过癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库和GTEx公共数据库分析ESCA患者中CDC20和NLRP3基因的表达水平。收集新乡医学院第一附属医院收治的80例ESCA患者的临床病理学资料和组织,通过免疫组织化学染色检测NLRP3在ESCA患者中的蛋白表达水平。本研究通过新乡医学院第一附属医院伦理委员会的审批(编号:EC-021-137)。通过短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)技术检测敲低CDC20和NLRP3基因后对食管鳞状细胞癌细胞系EC9706和KYSE150增殖能力的影响。通过免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)、蛋白酶体抑制剂和泛素化实验检测CDC20是否与NLRP3相互作用,以及阐明CDC20是否通过泛素化途径调控NLRP3表达。结果:TCGA数据库分析结果显示,ESCA组织中CDC20和NLRP3 mRNA表达水平明显高于癌旁组织。免疫组织化学结果也进一步显示,与癌旁组织相比,CDC20、NLRP3在ESCA组织中蛋白表达水平升高。敲低CDC20和NLRP3基因可抑制ESCA细胞增殖。Co-IP、蛋白酶体抑制剂和泛素化实验证实CDC20通过NLRP3的LRR区与NLRP3相互作用,且CDC20通过促进NLRP3泛素化稳定其表达。结论:CDC20和NLRP3在ESCA癌组织中表达上调,且CDC20通过泛素化NLRP3稳定其表达,从而促进ESCA细胞增殖,提示CDC20和NLRP3可能是ESCA潜在的诊断靶向标志物。 展开更多

关键词 食管癌 cdc20 NLRP3 泛素化 增殖

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马钱苷元对白血病细胞增殖及CDC20/MAD2表达的影响

6

作者 张月明 罗雅琴 +2 位作者 张玉梅 丁继元 王敬毅 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2058-2061,共4页

目的探讨马钱苷元对人急性髓系白血病MOLM-13细胞增殖过程中Cdc20及Mad2的影响。方法不同浓度马钱苷元处理MOLM-13细胞24、48、72 h后CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测不同浓度马钱苷元作用于MOLM-13细胞24h后细胞周期及凋亡的变... 目的探讨马钱苷元对人急性髓系白血病MOLM-13细胞增殖过程中Cdc20及Mad2的影响。方法不同浓度马钱苷元处理MOLM-13细胞24、48、72 h后CCK-8法检测细胞增殖情况;流式细胞术检测不同浓度马钱苷元作用于MOLM-13细胞24h后细胞周期及凋亡的变化;Western blot检测不同浓度马钱苷元作用于MOLM-13细胞48h后Mad2和Cdc20蛋白表达情况。结果马钱苷元能显著抑制MOLM-13细胞增殖,促进MOLM-13细胞凋亡,细胞周期阻滞于G2/M期,Mad2和Cdc20蛋白表达水平均降低。结论马钱苷元对人急性髓系白血Molm细胞增殖具有较明显的抑制作用,其机制可能与调节Mad2和Cdc20的蛋白表达水平,影响细胞有丝分裂有关。 展开更多

关键词 马钱苷元 急性髓系白血病 cdc20 MAD2 有丝分裂

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CDC20在胃腺癌组织中的表达及其临床意义

7

作者 隋文文 肖瑶 +1 位作者 王瑞涵 吕蓓蓓 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第18期3502-3506,共5页

目的:检测细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)在胃腺癌组织中的表达及临床病理学意义。方法:使用GEPIA数据库分析CDC20在非肿瘤性胃黏膜组织及胃癌组织中的mRNA水平。免疫组化(SP)法检测CDC20蛋白表达,分析其与胃腺癌临... 目的:检测细胞分裂周期蛋白20(cell division cycle 20,CDC20)在胃腺癌组织中的表达及临床病理学意义。方法:使用GEPIA数据库分析CDC20在非肿瘤性胃黏膜组织及胃癌组织中的mRNA水平。免疫组化(SP)法检测CDC20蛋白表达,分析其与胃腺癌临床病理特征及预后的关系。结果:GEPIA分析显示,CDC20在胃腺癌组织中显著高表达(P<0.05)。免疫组化结果显示:CDC20蛋白在胃腺癌组织中的阳性表达率明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05)。且CDC20表达与胃腺癌的淋巴结转移、TNM分期以及分化程度显著相关(P<0.05)。Cox比例风险回归模型分析显示:CDC20高表达是影响胃腺癌患者预后的独立危险因素(P<0.05)。结论:胃腺癌组织中CDC20呈高表达,与肿瘤分期和淋巴结转移显著相关,可能是胃腺癌预后的标志物。 展开更多

关键词 胃肿瘤 腺癌 cdc20 免疫组织化学 预后

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超表达Cdc20基因不影响牛卵母细胞第一极体排出 被引量：2

8

作者 杨文琳 安鹏 +3 位作者 李伟 赵贵民 史芸安 雷安民 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期546-554,共9页

CDC20(cell division cycle 20)是后期促进复合物(anaphase-promoting complex,APC)的共激活剂之一,也是纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)的靶点,在细胞周期调控中扮演重要角色.为探讨Cdc20在第一极体排出(first pola... CDC20(cell division cycle 20)是后期促进复合物(anaphase-promoting complex,APC)的共激活剂之一,也是纺锤体组装检查点(spindle assembly checkpoint,SAC)的靶点,在细胞周期调控中扮演重要角色.为探讨Cdc20在第一极体排出(first polar body extrusion,PBE I)中的作用,Cdc20基因被成功克隆并构建了真核表达载体pCdc20-Venus,随后用T7 Mmessage Mmachine Kit(Ambion)以线性化pCdc20-Venus为模板体外转录(in vitro transcription)获得带帽的Cdc20-Venus mRNA,将Ccdc20-Venus mRNA显微注射到体外培养的牛卵母细胞胞质中进行超量表达.结果表明,真核表达载体pCdc20-Venus转染HeLa细胞后能够正常表达,绿色荧光在细胞核周围呈弥散状分布;将Cdc20-Venus mRNA注射到牛卵母细胞胞质后,胞质内有绿色荧光出现.Cdc20-Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(48.9%)与Venus mRNA注射组卵母细胞的PBE I率(50.9%)和未注射组卵母细胞的PBE I率相比均没有显著差异(P>0.05).通过Cdc20在牛卵母细胞内的超量表达,结果显示,超量表达Cdc20基因对牛卵母细胞PBE I没有显著影响(P>0.05). 展开更多

关键词 牛 cdc20 卵母细胞 超表达 减数分裂 第一极体排出率

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RNA联合干扰对肝癌细胞CDC20和HPSE表达的影响 被引量：1

9

作者 廖允军 王成友 +4 位作者 罗成蓉 孙亮 夏荣 庄礼钊 刘美洲 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第30期18-20,共3页

目的探讨RNA联合干扰(RNAico)对肝癌细胞株Hepa1-6中丝裂原调控子20(CDC20)和乙酰肝素酶(HPSE)表达的抑制作用。方法设计针对小鼠肝癌细胞Hepa1-6 CDC20和HPSE mRNA的小干扰RNA,以阳离子脂质体包埋后转染鼠肝癌细胞Hepa1-6,即RNAico;转... 目的探讨RNA联合干扰(RNAico)对肝癌细胞株Hepa1-6中丝裂原调控子20(CDC20)和乙酰肝素酶(HPSE)表达的抑制作用。方法设计针对小鼠肝癌细胞Hepa1-6 CDC20和HPSE mRNA的小干扰RNA,以阳离子脂质体包埋后转染鼠肝癌细胞Hepa1-6,即RNAico;转染48 h后,采用RT-PCR和Re-al-Time PCR测定CDC20、HPSE mRNA表达的变化。结果联合干扰组CDC20和HPSE mRNA表达明显抑制,与其他各组相比,在统计学上有显著性差异(P<0.05)。结论 RNAico可同时显著抑制小鼠肝癌细胞Hepa1-6中CDC20和HPSE mRNA的表达。 展开更多

关键词 cdc20 乙酰肝素酶 RNA干扰 小鼠 肝癌

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过表达cdc20基因对绒山羊卵母细胞体外成熟的影响 被引量：1

10

作者 张金吨 王标 +4 位作者 李云霞 陈杨林 刘黎明 戴雁峰 李喜和 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2015年第6期32-36,共5页

为研究过表达cdc20基因对绒山羊卵母细胞体外成熟的影响,构建了Myc-cdc20载体,在体外转录成cRNA后显微注射到绒山羊卵母细胞中,观察其对绒山羊卵母细胞体外成熟过程的影响。结果表明,在对照组卵母细胞体外培养的过程中,卵母细胞培养到8 ... 为研究过表达cdc20基因对绒山羊卵母细胞体外成熟的影响,构建了Myc-cdc20载体,在体外转录成cRNA后显微注射到绒山羊卵母细胞中,观察其对绒山羊卵母细胞体外成熟过程的影响。结果表明,在对照组卵母细胞体外培养的过程中,卵母细胞培养到8 h后发生GVBD,18 h后进入MⅠ期,直到24 h后,约75%的绒山羊卵母细胞排出第一极体。卵母细胞在GV期时显微注射g Myc-cdc20 cRNA,培养10 h后,通过Western Blotting的方法检测到了MYC-CDC20融合蛋白的表达。但统计结果显示,试验组卵母细胞各阶段发育时间和成熟率与对照并无显著差异。因此,单独过表达cdc20基因不影响绒山羊卵母细胞体外成熟过程。 展开更多

关键词 过表达 cdc20 绒山羊卵母细胞 体外成熟

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CDC20在细胞分裂周期中的作用 被引量：4

11

作者 张萍 覃文新 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期297-299,共3页

CDC20是细胞周期相关蛋白之一。在细胞分裂周期中,CDC20是纺锤体组装检查点的靶向物和有丝分裂后期促进复合体的正调控因子,在引导细胞周期中某些蛋白质的泛素化降解和确保染色体正常分离的过程中起着重要的作用。

关键词 cdc20 APC/C CDH1 纺锤体组装检查点

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CDC20、TOP2A、NEK2在食管鳞癌中的表达及其与临床病理特征及预后的相关性 被引量：6

12

作者 牛东生 《实用癌症杂志》 2018年第10期1579-1582,共4页

目的探讨CDC20、TOP2A、NEK2在食管鳞癌中表达及其与食管鳞癌临床病理特征及预后的相关性。方法选取实施根治性手术的食管鳞癌患者70例,均术中做病理取材标本,A组(癌组织)、B组(癌旁组织)、C组(正常组织),采用免疫组化法、半定量逆转录... 目的探讨CDC20、TOP2A、NEK2在食管鳞癌中表达及其与食管鳞癌临床病理特征及预后的相关性。方法选取实施根治性手术的食管鳞癌患者70例,均术中做病理取材标本,A组(癌组织)、B组(癌旁组织)、C组(正常组织),采用免疫组化法、半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测CDC20、TOP2A、NEK2表达情况。结果 A组CDC20、TOP2A、NEK2表达水平最高,与B、C组差异明显(P <0. 05); B组CDC20、TOP2A、NEK2表达水平高于C组,差异明显(P<0. 05)。食管鳞癌患者性别、年龄、瘤体大小、位置等因素与CDC20、TOP2A、NEK2表达无相关性(P> 0. 05); TNM分期、淋巴转移及浸润因素与CDC20、TOP2A、NEK2呈正相关性(P <0. 05);肿瘤分化与CDC20、TOP2A、NEK2阳性表达率呈负相关。TNM分期、肿瘤分化程度、淋巴转移、静脉浸润及CDC20、TOP2A、NEK2阳性表达均是影响食管鳞癌患者预后存活的危险因素。结论 CDC20、TOP2A、NEK2高表达与食管鳞癌转移、复发、预后均有密切相关,三项指标联检可准确评估食管癌病理状态,为患者预后判定提供参考。 展开更多

关键词 食管鳞癌 cdc20 TOP2A NEK2 相关性

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Cdc20基因突变对APC^(min/+)小鼠胚胎成纤维细胞生长的影响

13

作者 冯聚玲 赵磊 +5 位作者 谢娟 莫明树 桂庆军 游咏 钟慧 王立生 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期383-387,共5页

目的观察Cdc20AAA/+APCmin/+基因型小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的生物学性状,探讨Cdc20基因突变对MEFs生长的影响及机制。方法制作Cdc20AAA/+APCmin/+基因型、Cdc20AAA/+基因型、APCmin/+基因型和野生型(WT)小鼠胚胎成纤维细胞,绘制生长... 目的观察Cdc20AAA/+APCmin/+基因型小鼠胚胎成纤维细胞(MEFs)的生物学性状,探讨Cdc20基因突变对MEFs生长的影响及机制。方法制作Cdc20AAA/+APCmin/+基因型、Cdc20AAA/+基因型、APCmin/+基因型和野生型(WT)小鼠胚胎成纤维细胞,绘制生长曲线、进行平板克隆形成实验,比较各种基因型MEFs生长特性的改变。各种基因型MEFs核型分析染色体个数,并检测有丝分裂姐妹染色单体分离情况及是否存在染色体不稳定。结果 Cdc20AAA/+APCmin/+基因型MEFs生长速度快于APCmin/+基因型(P<0.01)。Cdc20AAA/+APCmin/+基因型MEFs克隆形成能力明显增强。Cdc20AAA/+APCmin/+MEFs中可见姐妹染色单体的提前分离,且染色体数目异常要多于APCmin/+MEFs,大多数为38对。结论 Cdc20AAA/+基因突变促进APCmin/+小鼠胚胎成纤维细胞生长及增殖,使其呈现肿瘤细胞的生长特性,其机制可能与染色体不稳定有关。 展开更多

关键词 cdc20 APC^min + 胚胎成纤维细胞 平板克隆形成实验 核型分析 染色体 不稳定 小鼠

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三氧化二砷对急性髓系白血病细胞HL-60 Cdc20及Mad2的影响 被引量：8

14

作者 丁淑敏 徐瑞荣 +1 位作者 阚金耀 王琰 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期710-715,共6页

目的:探讨三氧化二砷(As_2O_3)对急性髓系白血病细胞HL-60增殖过程中Cdc20及Mad2的影响。方法:不同浓度As_2O_3处理HL-60细胞24、48、72 h后CCK-8法检测细胞增殖情况;Real-Time PCR及Western blot技术检测不同浓度As_2O_3作用于HL-60细... 目的:探讨三氧化二砷(As_2O_3)对急性髓系白血病细胞HL-60增殖过程中Cdc20及Mad2的影响。方法:不同浓度As_2O_3处理HL-60细胞24、48、72 h后CCK-8法检测细胞增殖情况;Real-Time PCR及Western blot技术检测不同浓度As_2O_3作用于HL-60细胞48 h后Mad2和Cdc20 mRNA及蛋白表达情况。结果:As_2O_3能显著抑制HL-60细胞增殖,并具有良好的时间剂量相关性。RT-PCR和Western blot检测结果表明,As_2O_34、8、10μmol/L作用于HL-60细胞后,Mad2表达上调,Cdc20表达下降(P<0.05)。结论:As_2O_3对人急性髓系白血病HL-60细胞增殖具有较明显的抑制作用,其机制可能与上调Mad2表达和下调Cdc20表达有关。 展开更多

关键词 三氧化二砷 HL-60 有丝分裂纺锤体检验点 MAD2 cdc20

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CDC20、TOP2A、NEK2的表达特征以及对食管鳞状细胞癌细胞增殖和迁移的影响 被引量：3

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作者 严龙君 夏萌 +2 位作者 李明 陈敬生 金军 《临床和实验医学杂志》 2022年第21期2273-2277,共5页

目的分析食管鳞状细胞癌(ESCC)中CDC20、TOP2A、NEK2基因表达与分期和预后的关系,讨论3者对ESCC细胞的增殖和迁移能力的影响,旨在寻找理想的生物标志物和治疗靶点。方法收集2011年1月至2017年12月鄂州市中心医院肿瘤科112例ESCC患者的... 目的分析食管鳞状细胞癌(ESCC)中CDC20、TOP2A、NEK2基因表达与分期和预后的关系,讨论3者对ESCC细胞的增殖和迁移能力的影响,旨在寻找理想的生物标志物和治疗靶点。方法收集2011年1月至2017年12月鄂州市中心医院肿瘤科112例ESCC患者的临床资料和组织。利用实时荧光定量PCR、蛋白免疫印迹和免疫组织化学法分析CDC20、TOP2A、NEK2基因的表达差异;通过随访对患者进行生存预后分析;培养ESCC细胞系,对细胞分别转染过表达CDC20、TOP2A、NEK2的重组载体pcCDC20、pcTOP2A、pcNEK2,CCK-8实验和伤口愈合实验分析ESCC的增殖率和迁移率变化。结果与癌旁非癌组织比,ESCC组中CDC20、TOP2A、NEK2的mRNA和蛋白水平均增高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。CDC20、TOP2A的高表达与淋巴结转移和生存预后差相关(均P<0.05);NEK2的高表达与肿瘤组织大小相关(P<0.05)。最后,分别与各组阴性对照组比,pcCDC20、pcTOP2A、pcNEK2组的细胞增殖率和迁移率均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论CDC20、TOP2A、NEK2在ESCC组织中表达上调,3者均与ESCC的预后生存差相关;CDC20、TOP2A、NEK2均促进ESCC细胞的增殖和迁移。CDC20、TOP2A、NEK2基因均可能是ESCC的潜在诊断和预后生物标志物。 展开更多

关键词 食管鳞状细胞癌 cdc20 TOP2A NEK2 生存预后 转移

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多态性蛋白Mad2与其配体Cdc20^(121-138)的相互作用研究 被引量：1

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作者 张会亭 赵园园 +1 位作者 葛保胜 黄方 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第3期232-241,共10页

多态性蛋白Mad2是有丝分裂纺锤体检测点(SAC)的关键蛋白,也是多态性蛋白质家族中研究最广泛的成员之一.Mad2有两种不同的天然构象:O-Mad2和C-Mad2.Mad2构象间的转变及其与配体Cdc20间的相互作用对SAC发挥其生物学功能至关重要.本文利用... 多态性蛋白Mad2是有丝分裂纺锤体检测点(SAC)的关键蛋白,也是多态性蛋白质家族中研究最广泛的成员之一.Mad2有两种不同的天然构象:O-Mad2和C-Mad2.Mad2构象间的转变及其与配体Cdc20间的相互作用对SAC发挥其生物学功能至关重要.本文利用荧光各向异性技术对O-Mad2和C-Mad2与配体TAMRA-Cdc20^(121-138)间相互作用的热力学及动力学过程进行了系统表征.结果表明:在无盐和低盐溶液(100 mmol/L NaCl)中,Mad2两种构象与Cdc20^(121-138)的平衡解离常数(K_D)均在10^(-6) mol/L,但C-Mad2与Cdc20^(121-138)结合的K_D值约为O-Mad2的1/5;在高盐(300 mmol/L NaCl)溶液中,Mad2两种构象与TAMRA-Cdc20^(121-138)结合的K_D值无明显差别.动力学实验结果显示,在同一种缓冲液中Mad2两种构象与Cdc20^(121-138)相互作用的解离速率常数k_d没有显著差别,而C-Mad2与Cdc20^(121-138)的结合速率常数k_a却比O-Mad2高一个数量级,这表明C-Mad2与Cdc20^(121-138)不仅结合力更强,且结合速率要快很多.Mad2与Cdc20^(121-138)突变体间的相互作用以及离子强度对二者相互作用的影响结果提示,Mad2和Cdc20间的相互作用不是通过静电相互作用,而可能是通过疏水相互作用来实现的.本研究为揭示多态性蛋白Mad2的构象转变机理及其在有丝分裂过程中的作用机制提供了重要的实验基础. 展开更多

关键词 多态性蛋白Mad2 cdc20 热力学 动力学 相互作用

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团头鲂cdc20基因的序列特征和表达分析 被引量：2

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作者 庞连慧 罗双双 +3 位作者 石林林 陈天圣 刘红 王焕岭 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期226-232,共7页

为研究鱼类细胞分裂周期蛋白20基因(cell division cycle 20 homolog,c dc20)的功能,以团头鲂为试验对象,经PCR扩增获得了团头鲂cdc20基因的CDS,基于多序列比对和系统进化树分析该基因的结构和不同物种间的进化关系,采用半定量PCR(semi-... 为研究鱼类细胞分裂周期蛋白20基因(cell division cycle 20 homolog,c dc20)的功能,以团头鲂为试验对象,经PCR扩增获得了团头鲂cdc20基因的CDS,基于多序列比对和系统进化树分析该基因的结构和不同物种间的进化关系,采用半定量PCR(semi-quantitative reverse transcription PCR,sqRT-PCR)、荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)和切片原位杂交的方法检测了该基因的时空表达模式。结果显示,该基因编码区所包含的序列长度为1482 bp,编码493 aa。团头鲂Cdc20氨基酸序列在进化上十分保守,具有7个WD40基序形成的稳定7叶β螺旋桨状结构,与鲤和斑马鱼的相似性最高。qRT-PCR结果显示团头鲂cdc20基因在早期胚胎中的表达量最高,随后呈下降趋势。sqRT-PCR检测发现cdc20基因主要在性腺中表达。性腺切片原位杂交结果显示cdc20在团头鲂各时期卵母细胞中均有表达,主要集中在Ⅱ期卵母细胞的胞质和Ⅲ、Ⅵ期卵母细胞的卵黄颗粒中;另外也发现该基因在精巢的精原细胞和生精小管的生殖上皮中表达量最高,在精子中的表达较低。以上结果表明团头鲂cdc20基因是一个母源基因,可能参与生殖细胞的发育。 展开更多

关键词 团头鲂 cdc20基因 减数分裂 母源基因 表达模式 性腺成熟

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肺腺癌关键基因筛选及CDC20在肺腺癌中的表达 被引量：3

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作者 周春雷 韩菲 樊祥山 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期32-38,共7页

目的:筛选肺腺癌的关键基因,揭示肺腺癌潜在的分子机制。方法:利用3个肺腺癌相关基因芯片数据集,共包括156例肺腺癌和106例正常肺组织,进行肺腺癌潜在关键基因的筛选。结果:通过芯片数据分析得到341个重叠差异表达基因(differentially e... 目的:筛选肺腺癌的关键基因,揭示肺腺癌潜在的分子机制。方法:利用3个肺腺癌相关基因芯片数据集,共包括156例肺腺癌和106例正常肺组织,进行肺腺癌潜在关键基因的筛选。结果:通过芯片数据分析得到341个重叠差异表达基因(differentially expressed gene,DEG),DEG主要富集的生物学过程是细胞外基质组织、调控化学激酶介导的信号通路、细胞对转化生长因子刺激的反应、细胞外基质组装、调控新生血管生成等。通过蛋白互作网络(protein protein interaction,PPI)筛选出10个关键基因,其中8个基因AURKA(aurora kinase A)、CDC20(cell division cycle 20)、CDH5(cadherin 5)、COL1α1(collagenⅠ,α1)、EDN1(endothelin 1)、MMP9(matrix metalloprotein 9)、PECAM1(platelet endothelial cell adhesion molecule 1)、SPP1(secreted phosphoprotein 1)与肺腺癌预后相关。其中CDC20与肺腺癌预后相关性最高,亚组分析发现,CDC20在肺腺癌各年龄段患者中的表达均明显高于正常组,CDC20在一期肺腺癌中表达低于二期、三期、四期,CDC20在腺泡型、实性为主型、混合型、透明细胞型表达高于其他亚型,CDC20在吸烟的肺腺癌患者中的表达低于不吸烟者。免疫组化检测显示CDC20在肺腺癌组织中表达明显高于正常肺组织,且腺泡型、实体型表达高于其他亚型。结论:CDC20在肺腺癌中高表达,且其高表达与肺腺癌的不良预后显著相关。CDC20有可能成为肺腺癌治疗的新靶点。 展开更多

关键词 肺腺癌 cdc20 GENE EXPRESSION Omnibus(GEO) 关键基因 预后

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香石竹Dccdc20基因的克隆及表达分析

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作者 李姝影 李枝林 +4 位作者 马璐琳 桂敏 王玉英 赵雪艳 周旭红 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第19期6266-6273,共8页

减数分裂是香石竹遗传改良的重要环节,Cdc20蛋白在减数分裂中起着重要作用。为了更好的了解Cdc20在香石竹减数分裂中的作用机制。本研究利用RT-qPCR结合RACE技术,从香石竹花药中分离克隆了一个Cdc20基因的全长c DNA序列,命名为Dccdc20 (... 减数分裂是香石竹遗传改良的重要环节,Cdc20蛋白在减数分裂中起着重要作用。为了更好的了解Cdc20在香石竹减数分裂中的作用机制。本研究利用RT-qPCR结合RACE技术,从香石竹花药中分离克隆了一个Cdc20基因的全长c DNA序列,命名为Dccdc20 (GenBanK登录号:2217177)。Dccdc20基因全长1 847 bp,含有439个氨基酸,长1 320 bp的开放阅读框。蛋白序列比对显示Dccdc20基因与其他物种的Cdc20基因有很高的相似度,RT-qPCR结果显示Dccdc20基因的表达量随着花药发育呈现递减趋势,在花蕾长度为1.1~1.2 cm时期的花药中表达最高,而在叶和茎中表达量较低,研究表明该基因可能在调节香石竹减数分裂中发挥作用。 展开更多

关键词 香石竹(Dianthus caryophyllus) cdc20基因 基因表达

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PLK1与CDC20在乳腺癌中的表达及其临床意义 被引量：10

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作者 张哲 杨枫 +2 位作者 杨剑 蒋富强 卢伟 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2017年第7期622-627,共6页

目的探讨PLK1和CDC20在乳腺癌组织中的表达情况,并分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。方法基于cBioPortal数据库和癌症基因图谱(TCGA)数据库中1092例乳腺癌患者的临床资料和mRNA芯片数据,分析PLK1和CDC20的表达情况。采用Kaplan-... 目的探讨PLK1和CDC20在乳腺癌组织中的表达情况,并分析两者表达与临床病理特征及预后的关系。方法基于cBioPortal数据库和癌症基因图谱(TCGA)数据库中1092例乳腺癌患者的临床资料和mRNA芯片数据,分析PLK1和CDC20的表达情况。采用Kaplan-Meier法和Cox风险比例回归模型分析PLK1和CDC20的表达水平与乳腺癌患者预后的关系。采用卡方检验分析PLK1和CDC20的表达与患者年龄、性别及ER、PR、HER-2基因表达之间的关系。结果 PLK1与CDC20在乳腺癌中的表达呈正相关(r=0.88,P<0.001),并且两者表达均与乳腺癌患者的无病生存期(DFS)有关(P均<0.05),PLK1与CDC20同时高表达与同时低表达的患者相比,DFS显著缩短(P=0.007)。同时PLK1和CDC20在ER、PR阴性患者肿瘤组织中的表达水平均显著高于ER、PR阳性患者(P均<0.001)。结论 PLK1和CDC20在乳腺癌中可能起到促进肿瘤转移的作用,可以作为预测肿瘤转移的潜在生物标志物及个体化治疗靶点。 展开更多

关键词 乳腺癌 PLK1 cdc20 转移标志物

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