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树突状细胞负载Tα146-162对EAMG中Crry、CD59a、CD59b mRNA表达的影响 被引量：1
1
作者 李水仙 杨欢 +2 位作者 肖波 胡珏 黄劼 《国际神经病学神经外科学杂志》 2005年第4期293-297,共5页
目的观察实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)小鼠肌肉中Crry、CD59a、CD59b mRNA的表达和Tα146-162-iMDC诱导免疫耐受对三者的影响。方法用GM-CSF、IL-10诱导骨髓细胞分化、增殖为不成熟的髓源性树突状细胞(iMDC),之后将Tα146-162负载... 目的观察实验性自身免疫性重症肌无力(EAMG)小鼠肌肉中Crry、CD59a、CD59b mRNA的表达和Tα146-162-iMDC诱导免疫耐受对三者的影响。方法用GM-CSF、IL-10诱导骨髓细胞分化、增殖为不成熟的髓源性树突状细胞(iMDC),之后将Tα146-162负载其上(Tα146-162-iMDC)。健康雌性C57BL/6小鼠30只,随机分为模型组(A组,12只)、干预组(B组,12只)和正常对照组(C组,6只),A、B组小鼠用电鳗乙酰胆碱受体(T-AChR)免疫诱导EAMG,B组小鼠用Tα146-162-iMDC干预。按照Christadoss标准对小鼠进行EAMG评分,3H-TdR标记检测淋巴细胞增殖反应,RT-PCR方法检测Crry、CD59a、CD59b mRNA表达。结果A、B组小鼠平均临床评分分别是1.67±1.15vs0.33±0.65(P<0.01),发病率分别是75%vs25%(P<0.05)。B组较A组小鼠抗原特异性淋巴细胞增殖反应明显降低(P<0.01)。A组较C组小鼠Crry mRNA、CD59a mRNA表达明显降低(P<0.05);B组较A组Crry mRNA、CD59a mRNA表达明显升高(P<0.05),B组CD59a mRNA与C组相比无显著性差异(P>0.05)。3组小鼠肌肉中均检测不到CD59b mRNA。结论Crry mRNA、CD59a mRNA表达减少可能参与EAMG发生,CD59b可能与EAMG发病无关;Tα146-162-iMDC上调小鼠肌肉中Crry、CD59a mRNA表达及抑制抗原特异性淋巴细胞增殖反应可能是其阻抑EAMG发生的机制之一。 展开更多
关键词 树突状细胞 实验性自身免疫性重症肌无力 TΑ146-162 Crry cd59a CD59b MRNA表达 EAMG C57BL/6小鼠 淋巴细胞增殖反应
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CD59a在激光诱导小鼠脉络膜新生血管形成中的作用
2
作者 许琴 金涛 +2 位作者 林素香 王雅丽 肖煜晨 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2014年第4期330-332,共3页
目的探讨补体调节蛋白CD59a在激光诱导小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成中的作用。方法实验分3组:C57BL/6小鼠对照组、CD59a(-/-)小鼠组、rsCD59a-FC预处理小鼠组。氪红激光光凝诱导小鼠CNV模型,观察上皮-脉络... 目的探讨补体调节蛋白CD59a在激光诱导小鼠脉络膜新生血管(choroidal neovascularization,CNV)形成中的作用。方法实验分3组:C57BL/6小鼠对照组、CD59a(-/-)小鼠组、rsCD59a-FC预处理小鼠组。氪红激光光凝诱导小鼠CNV模型,观察上皮-脉络膜-巩膜复合物CNV的发生率;免疫组化检测膜攻击复合物沉积;RT-PCR检测CD59a mRNA表达。结果 C57BL/6小鼠对照组在光凝后第3天、第5天见CD59a mRNA表达下调,分别为60%、30%。CD59a(-/-)小鼠组、rsCD59a-FC预处理小鼠组在光凝后第3天、第5天未见CD59a mRNA表达下调。C57BL/6小鼠见少量膜攻击复合物沉积、CD59a(-/-)小鼠见大量膜攻击复合物沉积、rsCD59a-FC预处理组未见膜攻击复合物沉积。光凝后第5天,C57BL/6小鼠见少量CNV生成;CD59a(-/-)小鼠见大量CNV形成;rsCD59a-FC预处理小鼠未见CNV形成。结论激光诱导小鼠CNV形成过程中,膜攻击复合物起核心作用;CD59a调节补体激活,rsCD59a-FC通过阻断MAC的沉积阻断小鼠CNV的形成;rsCD59a-FC将成为治疗AMD疾病的又一策略。 展开更多
关键词 cd59a 脉络膜新生血管 黄斑变性
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临床血液病患者CD55、CD59、CD34表达的诊断价值
3
作者 王丽萍 孙常铭 +2 位作者 王坤 曹德琦 闫丽娜 《河北医药》 2025年第9期1503-1506,共4页
目的探讨CD55、CD59、CD34抗原表达率及平均荧光强度在临床血液病的早期诊断及鉴别的诊断价值。方法选择2019年12月至2023年5月收治的血液病患者50例,另选同期健康体检者20例为对照组,采用流式细胞仪测定血液病患者及对照组CD55、CD59、... 目的探讨CD55、CD59、CD34抗原表达率及平均荧光强度在临床血液病的早期诊断及鉴别的诊断价值。方法选择2019年12月至2023年5月收治的血液病患者50例,另选同期健康体检者20例为对照组,采用流式细胞仪测定血液病患者及对照组CD55、CD59、CD34在外周血、骨髓及膜蛋白抗原表达情况及平均荧光强度的差异,找出其相关性和特异性。结果与对照组比较,外周血、骨髓在阵发性血红蛋白尿(PNH)组、骨骼增生异常综合征(MDS)组、再生障碍性贫血(AA)组、急性淋巴细胞白血病(ALL)组患者CD55、CD59、CD34表达差异有统计学意义(P<0.05)。各血液病患者比较,CD55、CD59、CD34表达差异均有统计学意义(P<0.05);不同患者的膜蛋白抗原表达阳性率CD55、CD59比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CD34膜蛋白抗原表达阳性率在各组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。CD55、CD59、CD34百分率及平均荧光强度在红细胞与单核细胞及中性粒细胞间差异有统计学意义(P<0.05),CD55、CD59平均荧光强度在红细胞与淋巴细胞间差异有统计学意义(P<0.05)。不同疾病组患者比较,糖水试验、罗氏试验、酸溶血试验、游离血红蛋白检测差异有统计学意义(P<0.05),而结合珠蛋白检测差异无统计学意义(P>0.05)。结论在血液病患者诊断及鉴别方面,CD55、CD59、CD34外周血、骨髓及膜蛋白抗原异常表达率及平均年荧光强度以及常规实验的异常,能够作为有效的诊断及鉴别指标。 展开更多
关键词 CD55 CD59 CD34 血液病
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CD 59基因在重度子痫前期孕产妇胎盘中的表达
4
作者 秦春蕾 姚丽娟 《滨州医学院学报》 2025年第3期271-273,共3页
目的研究CD 59基因在重度子痫前期孕产妇胎盘组织与正常孕产妇胎盘组织中的表达有无差异。方法选取住院分娩的孕产妇46例作为研究对象,其中重度子痫前期孕产妇23例为重度子痫前期组,正常妊娠晚期孕产妇23例为对照组。使用实时荧光定量PC... 目的研究CD 59基因在重度子痫前期孕产妇胎盘组织与正常孕产妇胎盘组织中的表达有无差异。方法选取住院分娩的孕产妇46例作为研究对象,其中重度子痫前期孕产妇23例为重度子痫前期组,正常妊娠晚期孕产妇23例为对照组。使用实时荧光定量PCR技术检测两组孕产妇胎盘组织中CD 59基因的表达水平。结果重度子痫前期孕产妇胎盘组织CD 59基因的表达水平明显低于正常妊娠晚期孕产妇(P<0.05)。结论CD 59基因在重度子痫前期孕产妇胎盘组织中表达明显降低,CD 59基因的表达可能与重度子痫前期的发生发展存在一定联系。 展开更多
关键词 子痫前期 CD 59 荧光定量PCR技术 胎盘
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血型CD59基因在胰腺癌中的表达及临床意义 被引量：2
5
作者 周仁龙 黄国清 +1 位作者 李凌波 唐丹丹 《临床输血与检验》 CAS 2024年第1期101-109,共9页
目的运用生物信息学技术分析CD59血型基因在胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)中的表达水平以及临床意义。方法通过GEPIA、UALCAN和HPA数据库分析PAAD中CD59的mRNA和蛋白表达水平。通过TIMER数据库分析CD 59在PAAD中与免疫细胞浸... 目的运用生物信息学技术分析CD59血型基因在胰腺癌(pancreatic adenocarcinoma,PAAD)中的表达水平以及临床意义。方法通过GEPIA、UALCAN和HPA数据库分析PAAD中CD59的mRNA和蛋白表达水平。通过TIMER数据库分析CD 59在PAAD中与免疫细胞浸润的相关性。通过UALCAN数据库分析CD59参与信号通路影响PAAD的进展。通过STRING数据库分析CD59表达与上下游蛋白的相互作用。基于单因素Cox,多因素Cox回归结果分析CD59血型与PAAD预后相关。结果与癌旁组织相比,CD59在PAAD中的mRNA和蛋白表达水平显著升高(P<0.05),与CD59低表达PAAD患者相比,高表达CD59的患者预后差。CD59在PAAD中表达水平与CD8+T细胞,巨噬细胞、中性粒细胞、树突状细胞呈正相关(P<0.05)。基于单因素Cox和多因素Cox回归分析高表达CD 59是PAAD预后危险因素。KEGG富集分析占主导地位的是补体和凝血级联通路,GO富集分析占主导地位的是蛋白质加工的调控信号通路。结论CD59血型基因在PAAD中呈现高表达,与PAAD的发生、发展和预后不良相关,有望作为PAAD诊断、预后判断和治疗靶点。 展开更多
关键词 胰腺癌 生物信息学 CD59基因 数据库
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补体调节因子与视神经脊髓炎谱系疾病的研究进展
6
作者 韩梦雨 金明 《海南医学院学报》 CAS 北大核心 2024年第16期1276-1280,共5页
视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种获得性、异质性神经眼科交叉性罕见免疫性疾病,特异性高发于视神经和脊髓等中枢神经系统部位,有严重的致残致盲性。虽然补体在NMOSD发病中的重要性已被证实,但膜补体调节因子在NMOSD发病机制中的关键... 视神经脊髓炎谱系疾病(NMOSD)是一种获得性、异质性神经眼科交叉性罕见免疫性疾病,特异性高发于视神经和脊髓等中枢神经系统部位,有严重的致残致盲性。虽然补体在NMOSD发病中的重要性已被证实,但膜补体调节因子在NMOSD发病机制中的关键调控作用尚不完全清楚,论述其在NMOSD发病中的生理和病理作用,可能成为解释NMOSD中枢发病的重要原因之一。本文重点回顾近些年来与NMOSD发病相关的补体调节因子CD46、CD55和CD59的研究进展,试图分析、综述补体调节因子在NMOSD发病机制中的作用现状及未来发展前景。 展开更多
关键词 视神经脊髓炎谱系疾病 补体调节因子 CD46 CD55 CD59
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糖基化CD59在妊娠期糖尿病精准诊断中的研究进展
7
作者 王婉莹 陆小凡 +3 位作者 徐冲 张瑛 邹会玲 孙宇 《实用临床医药杂志》 CAS 2024年第4期145-148,共4页
近年来,妊娠期糖尿病(GDM)患病率显著升高,引发产妇及其子代多种不良结局,而早期诊断和良好控制血糖可显著改善妊娠结局。目前,GDM诊断主要依据口服葡萄糖耐量试验(OGTT),但临床应用时存在诸多不足。新型生物学标志物糖基化CD59是一种... 近年来,妊娠期糖尿病(GDM)患病率显著升高,引发产妇及其子代多种不良结局,而早期诊断和良好控制血糖可显著改善妊娠结局。目前,GDM诊断主要依据口服葡萄糖耐量试验(OGTT),但临床应用时存在诸多不足。新型生物学标志物糖基化CD59是一种补体调节蛋白的糖基化产物,可在体液中稳定存在,与血糖水平呈线性相关,具有测试简便、可重复性佳等优点,且已开发出可稳定使用的试剂盒,在GDM的早期诊断、标准诊断和妊娠结局预测等方面均显示出良好的价值。 展开更多
关键词 妊娠期糖尿病 糖基化CD59 精准诊断 妊娠结局 生物标志物 血糖
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肿瘤患者红细胞天然免疫分子CD35、CD59相关性研究 被引量：10
8
作者 郭峰 钱宝华 +5 位作者 花美仙 薛春燕 王雅杰 许育 张乐之 张军 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期136-137,共2页
关键词 肿瘤 红细胞 天然免疫分子 CD35 CD59 免疫反应
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CD55、CD59、CD34对AA-PNH早期诊断研究应用 被引量：13
9
作者 王永才 朱杰 +1 位作者 王敏 李晓雯 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期553-556,共4页
目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在再障阵发性血红蛋白尿综合征(AAPNH)的早期诊断中的价值,寻找AAPNH早期诊断敏感指标,进而达到早期发现、早期诊断、早期治疗的目的。方法:应用流式细胞仪测定AAPNH综合征患者的CD55、CD59、CD34抗原变... 目的:探讨CD55、CD59、CD34抗原在再障阵发性血红蛋白尿综合征(AAPNH)的早期诊断中的价值,寻找AAPNH早期诊断敏感指标,进而达到早期发现、早期诊断、早期治疗的目的。方法:应用流式细胞仪测定AAPNH综合征患者的CD55、CD59、CD34抗原变化关系,并与PNH、AA等疾病组以及正常对照组CD55、CD59、CD34抗原相互变化关系,经过统计学处理,找出相关性。结果:结果表明AAPNH、PNHCD55、CD59、CD34抗原较AA及其他疾病组及正常对照组明显减低,并与溶血试验中溶血程度呈正相关,且早于其他溶血指标。结论:CD55、CD59、CD34抗原表达率可作为PNH、AAPNH综合征早期诊断最敏感指标,并与预后转归密切相关。 展开更多
关键词 CD55 CD59 CD34 AA-PNH 诊断
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新风胶囊对活动期类风湿关节炎患者的疗效及对血小板参数 血小板CD59的影响 被引量：20
10
作者 刘健 纵瑞凯 +1 位作者 余学芳 汪元 《中华中医药学刊》 CAS 2008年第7期1368-1371,共4页
目的:观察新风胶囊对活动期类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的疗效及对血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)]、血小板CD59的影响。方法:检测60例活动期RA患者血小板参... 目的:观察新风胶囊对活动期类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)患者的疗效及对血小板参数[血小板计数(PLT)、血小板压积(PCT)、血小板平均体积(MPV)、血小板分布宽度(PDW)]、血小板CD59的影响。方法:检测60例活动期RA患者血小板参数、血小板CD59及各活动性指标(ESR、α1-AGP、CRP、RF),并将60例RA患者按随机数字表分为新风胶囊实验组35例和正清风痛宁对照组25例,治疗1个疗程后,观察两组的疗效和血小板参数、血小板CD59、各活动性指标的变化,另设正常对照组20例并检测上述指标。结果:①与正常对照组相比,活动期RA患者PLT、PCT、MPV显著升高,CD59显著降低(P<0.01或P<0.05);两治疗组总有效率相比无显著差异,但实验组显效率显著高于对照组(P<0.05);治疗后新风胶囊组及正清风痛宁组患者ESR、α1-AGP、CRP、RF显著降低,CD59显著升高(P<0.01或P<0.05);与正清风痛宁对照组相比,新风胶囊组PLT、PCT、ESR显著降低,CD59显著升高(P<0.01或P<0.05)。②PLT、PCT与IgG、ESR、CRP、RF、关节疼痛、关节肿胀呈正相关关系,PLT还与关节压痛和晨僵时间呈正相关,与CD59呈负相关(P<0.01或P<0.05)。结论:活动期RA患者血小板参数PLT、PCT显著升高,且与CD59、ESR、CRP、RF、IgG和关节疼痛、关节肿胀、关节压痛、晨僵时间具有相关性,提示PLT、PCT可以作为反映RA活动性的一项客观指标;新风胶囊能降低活动期RA患者PLT、PCT及炎症活动指标,其机制可能与提高血小板CD59的水平,抑制过亢免疫反应有关。 展开更多
关键词 类风湿关节炎 血小板参数CD59 新风胶囊
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siRNA介导的RNAi降低了CD59对补体溶破的抵抗作用 被引量：9
11
作者 石学香 高美华 +2 位作者 李先平 张蓓 王秋波 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1164-1166,1173,共4页
目的:构建针对人CD59基因的siRNA表达载体并筛选稳定细胞系,观察CD59基因改变后对补体溶破的抵抗作用的变化,探讨CD59在肿瘤细胞免疫逃逸及相关信号转导通路中的作用。方法:应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建含特异性CD59基因的重... 目的:构建针对人CD59基因的siRNA表达载体并筛选稳定细胞系,观察CD59基因改变后对补体溶破的抵抗作用的变化,探讨CD59在肿瘤细胞免疫逃逸及相关信号转导通路中的作用。方法:应用siRNA表达载体介导的RNAi技术,构建含特异性CD59基因的重组载体,脂质体法转染A2780细胞,G418筛选建立稳定抑制的细胞克隆,RT-PCR和Western blot检测转染细胞中CD59基因的表达抑制效果,染料释放试验判断CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用的影响。结果:重组载体经PCR及限制性内切酶酶切鉴定初步成功后送测序,结果表明序列正确;重组载体转染A2780细胞,可表达绿色荧光蛋白,经G418筛选,得到抗性细胞克隆,RT-PCR和Western blot表明,稳定转染后CD59基因的mRNA和蛋白水平降低,染料释放试验表明CD59基因受抑制后对补体溶破的抵抗作用降低。结论:特异性沉默CD59基因的siRNA表达载体以及稳定抑制的细胞系构建和筛选成功,CD59基因抑制后对补体溶破的抵抗作用降低,为后续进行肿瘤细胞的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 SHRNA CD59 A2780 补体
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锚定蛋白CD59与接头分子Cbp在T细胞上的定位及功能研究 被引量：6
12
作者 高美华 姬静 +3 位作者 王冰 张蓓 张树超 秦云 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期565-569,共5页
目的研究CD59、Src羧基末端激酶结合蛋白(Cbp)在细胞膜的定位,及其在细胞活化及增殖中的相互作用。方法应用免疫荧光细胞化学技术,通过荧光显微镜分析系统对CD59、Cbp的定位进行了分析;Jurkat细胞转染pSUPER-siCD59重组质粒,并行RT-PCR... 目的研究CD59、Src羧基末端激酶结合蛋白(Cbp)在细胞膜的定位,及其在细胞活化及增殖中的相互作用。方法应用免疫荧光细胞化学技术,通过荧光显微镜分析系统对CD59、Cbp的定位进行了分析;Jurkat细胞转染pSUPER-siCD59重组质粒,并行RT-PCR和Western blot法检测转染细胞中CD59的表达及蛋白酪氨酸激酶癌基因家族(fyn)磷酸化水平。利用MTT比色法检测转染各组细胞的增殖效应。结果 CD59、Cbp主要分布在细胞膜上。转染pSUPER-siCD59重组质粒的Jurkat细胞中CD59表达量减少,磷酸化的fyn含量也随之减少,细胞增殖能力也低于其他各组。结论 CD59是一种膜蛋白,在细胞活化及增殖中与Cbp分子共同发挥作用。 展开更多
关键词 CD59 CBP JURKAT细胞 免疫荧光细胞化学技术
原文传递
下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响 被引量：5
13
作者 高美华 李华侨 +3 位作者 李冰 王忠 丛蓓蓓 王冰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期693-696,共4页
目的:探讨下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响。方法:运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;Real-time-PCR、Western blot筛选下调效果最好的一... 目的:探讨下调CD59对急性T系白血病细胞株Jurkat凋亡相关分子的影响。方法:运用RNAi慢病毒为载体下调急性T系白血病Jurkat细胞株CD59的表达;激光共聚焦观察转染效率及CD59分子的定位;Real-time-PCR、Western blot筛选下调效果最好的一组细胞,用其做后续的分子生物学水平的实验;Western blot检测Bcl-2、Bax、Caspase-3、Survivin蛋白表达量的变化;ELISA检测各组的细胞培养上清中IL-3、TNF-β的表达。结果:激光共聚焦观察到转染各组的转染效率在90%以上,CD59分子主要位于细胞膜;Real-time-PCR筛选得出下调A组的转染效果最好;Western blot结果显示下调A组的CD59蛋白的表达量减少最明显,将RNAi-CD59-A定义为RNAi-CD59作为实验组进行后续实验;实验组能增强Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.05),抑制Bcl-2、Survivin蛋白的表达(P<0.05);ELISA结果显示下调组IL-3表达水平降低(P<0.05),TNF-β的表达水平升高(P<0.05)。结论:下调D59基因表达可使急性T系白血病细胞株Jurkat的促凋亡分子表达增高,促增殖分子表达降低。 展开更多
关键词 CD59 凋亡 JURKAT 转染
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藻蓝蛋白对Hela细胞CD59基因表达调控作用的研究 被引量：7
14
作者 李冰 张学成 +1 位作者 高美华 褚现明 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期196-200,共5页
探讨了钝顶螺旋藻藻蓝蛋白（PC）对Hela细胞CD59基因表达的调控作用。以正常人CD59cDNA基因为模板，经PCR扩增后重组入真核表达质粒载体pALTER-MAX，然后利用阳离子脂质体（Lipfectamine-2000）将重组质粒和PcDNA共转染人子宫颈癌细胞（... 探讨了钝顶螺旋藻藻蓝蛋白（PC）对Hela细胞CD59基因表达的调控作用。以正常人CD59cDNA基因为模板，经PCR扩增后重组入真核表达质粒载体pALTER-MAX，然后利用阳离子脂质体（Lipfectamine-2000）将重组质粒和PcDNA共转染人子宫颈癌细胞（Hela）和对照用正常中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary，CHO）进行表达。用不同浓度的钝顶螺旋藻藻蓝蛋白作用于转染细胞，通过核酸分子杂交技术、免疫荧光标记法和ELISA法对细胞中CD59分子的表达进行检测。结果表明：成功构建了重组质粒pALTER-MAX．CD59，并将其导入真核细胞（Hela，CHO），经CAl8筛选获得了CD59分子高效表达的细胞克隆。用藻蓝蛋白作用于筛选出的转基因细胞，证实藻蓝蛋白可促进Hela细胞表面CD59蛋白的表达并抑制Hela细胞的增殖，而对于正常CHO细胞无明显作用。 展开更多
关键词 藻蓝蛋白 CD59 pALTER-MAX Lipfectamine-2000 PcDNA HELA CHO
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下调CD59的表达可以抑制HeLa细胞增殖并促进其凋亡 被引量：5
15
作者 高美华 李营 +3 位作者 张蓓 王冰 梁洁 李园园 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期585-587,共3页
目的采用RNA干扰与噬菌体肽库展示技术2种方法干预宫颈癌HeLa细胞CD59的表达,以探讨比较2种CD59低表达方式对HeLa细胞增殖与凋亡的影响。方法将10μg/mL的CD59短肽封条作用于HeLa细胞8 h后,联合CD59干扰质粒pSUPER-siCD59稳定转染HeLa... 目的采用RNA干扰与噬菌体肽库展示技术2种方法干预宫颈癌HeLa细胞CD59的表达,以探讨比较2种CD59低表达方式对HeLa细胞增殖与凋亡的影响。方法将10μg/mL的CD59短肽封条作用于HeLa细胞8 h后,联合CD59干扰质粒pSUPER-siCD59稳定转染HeLa细胞系,采用MTT法检测各组细胞增殖率的变化,采用TUNEL染色、annexin V-PE/7-AAD染色结合流式细胞术检测细胞凋亡。结果 CD59短肽封条组与pSUPER-siCD59质粒稳定转染细胞组HeLa细胞增殖明显弱于对照组,TUNEL及流式细胞术检测结果显示2组处理细胞均存在细胞凋亡现象,且短肽封条的效果要好于pSUPER-siCD59质粒。结论下调CD59表达能抑制其细胞增殖并促进其凋亡,且短肽封条效果要优于CD59 RNA干扰质粒。 展开更多
关键词 CD59 RNA干扰 短肽封条 HELA细胞 增殖 凋亡
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外周血粒细胞CD55,CD59和FLAER检测在贫血及PNH诊断中的意义 被引量：9
16
作者 杨柯 郭晓宇 +2 位作者 欧剑锋 白海 潘耀柱 《现代检验医学杂志》 CAS 2017年第3期6-10,共5页
目的探讨CD55,CD59和嗜水气单胞菌毒素变异体(FLAER)检测在各类贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者诊断中的临床意义。方法选取2009年1月~2017年3月期间收集的30例健康对照,22例PNH,33例再生障碍性贫血(AA),37例缺铁性贫血(IDA),4... 目的探讨CD55,CD59和嗜水气单胞菌毒素变异体(FLAER)检测在各类贫血及阵发性睡眠性血红蛋白尿症(PNH)患者诊断中的临床意义。方法选取2009年1月~2017年3月期间收集的30例健康对照,22例PNH,33例再生障碍性贫血(AA),37例缺铁性贫血(IDA),45例巨幼细胞性贫血(MA),30例溶血性贫血(HA)和31例骨髓增生异常综合征(MDS)患者,用多参数流式细胞仪同时检测外周血粒细胞CD55,CD59和FLAER阴性细胞比例,代表检出的PNH克隆数。结果 PNH,AA和MDS组FLAER检出率均高于CD55和CD59,但只有AA患者差异有统计学意义(X^2=7.759,5.518,P=0.005,0.019<0.05)。PNH和AA组CD55,CD59和FLAER阴性细胞比例均显著高于正常对照组及其他贫血组(t=2.163~17.890,P=0.000~0.038<0.05)。PNH组FLAER阴性细胞比例高于CD59,CD59高于CD55,差异均具有统计学意义(t=2.503~6.308,P=0.000~0.016<0.05)。结论 CD55,CD59和FLAER在PNH诊断及与其他贫血性疾病鉴别诊断中具有重要价值,尤其是存在微小PNH克隆的MDS和AA患者,FLAER优于CD59,CD59优于CD55。 展开更多
关键词 CD55 CD59 嗜水气单胞菌毒素变异体 贫血 阵发性睡眠性血红蛋白尿
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下调Cbp分子促进GPI锚固蛋白CD59参与T细胞活化 被引量：6
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作者 姬静 高美华 +3 位作者 王冰 张蓓 张树超 王娟 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1019-1023,共5页
目的采用RNA干扰技术构建针对Cbp基因的pSUPER-siCbp重组载体,以建立其高效转染表达体系。方法设计针对Cbp基因的寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSUPER载体中并进行鉴定。采用电转染方法转染Jurkat细胞,荧光显微镜观察GFP基因表达,并行RT-... 目的采用RNA干扰技术构建针对Cbp基因的pSUPER-siCbp重组载体,以建立其高效转染表达体系。方法设计针对Cbp基因的寡核苷酸序列,克隆至线性化的pSUPER载体中并进行鉴定。采用电转染方法转染Jurkat细胞,荧光显微镜观察GFP基因表达,并行RT-PCR和Western blot检测转染细胞中Cbp的表达。利用噻唑蓝(MTT)比色法检测转染重组载体前后各组Jurkat细胞的增殖效应;应用ELISA检测细胞上清中白介素2(IL-2)的变化水平,比较各组差异。结果经过限制性内切酶双酶切分析、DNA PCR和DNA测序鉴定,证实重组质粒pSUPER-siCbp的序列正确。转染重组质粒的Jurkat细胞,可表达绿色荧光蛋白,转染J2-pSUPER-siCbp重组质粒的Jurkat细胞中Cbp基因表达量明显低于其他各组;其细胞增殖能力,IL-2分泌高于其他各组。结论成功构建了靶向人Cbp基因的pSUPER-siCbp载体,转染Jurkat细胞中Cbp表达降低,为以后的CD59与Cbp在T细胞信号转导通路中相互作用研究奠定了基础。 展开更多
关键词 SHRNA CBP CD59 JURKAT细胞 真核表达载体
原文传递
脂筏微域内CD59趋引CBP蛋白介导T细胞下游信号的转导研究 被引量：6
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作者 丛蓓蓓 高美华 +2 位作者 王冰 王丽娜 邵志伟 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期1-6,共6页
目的探讨Cbp(Csk-binding protein)在Jurkat细胞中的过表达对其生物学功能的作用以及GPI锚定蛋白CD59通过Cbp对细胞的效应机制。方法构建Cbp-EGFP慢病毒载体,转染建立稳定的过表达Cbp-EGFP的Jurkat细胞株。采用免疫荧光技术,通过共聚焦... 目的探讨Cbp(Csk-binding protein)在Jurkat细胞中的过表达对其生物学功能的作用以及GPI锚定蛋白CD59通过Cbp对细胞的效应机制。方法构建Cbp-EGFP慢病毒载体,转染建立稳定的过表达Cbp-EGFP的Jurkat细胞株。采用免疫荧光技术,通过共聚焦显微镜观察CD59、Cbp的表达及定位关系;检测CD59抗体刺激前后细胞的增殖效率及细胞凋亡情况;Western blot检测Jurkat细胞中信号转导通路相关蛋白分子的变化。结果共聚焦显微镜下可见CD59、Cbp定位于胞膜上,在抗体刺激后,Cbp组与对照组均出现明显的荧光高亮聚集现象。转染Cbp-EGFP后细胞增殖速率明显降低(P<0.05),而中晚期凋亡现象显著高于阴性对照组(P<0.05)。CD59单抗作用前后相比,酪氨酸激酶蛋白(Fyn、Lck、ZAP-70)的表达量均有所下降,而Csk的表达量增加。结论 Cbp过表达能有效抑制Jurkat细胞的增殖,GPI锚固蛋白CD59可通过Cbp分子调控细胞信号转导通路中重要蛋白酪氨酸激酶的表达,进而影响Jurkat细胞的生物学活性。 展开更多
关键词 CD59 CBP T淋巴细胞 信号转导
原文传递
CD59在T细胞LAT脂筏内移位及跨膜信号转导中的作用 被引量：5
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作者 高美华 秦云 +2 位作者 王冰 张蓓 张树超 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期301-304,共4页
目的用前期构建好的LAT-EGFP质粒转染Jurkat细胞,探讨单克隆抗体交联CD59前后CD59与接头蛋白分子LAT在Jurkat细胞活化转导中的相关作用。方法采用电转染的方法转染Jurkat细胞,抗体交联CD59后共聚焦显微镜下观察细胞膜上LAT-EGFP分子分... 目的用前期构建好的LAT-EGFP质粒转染Jurkat细胞,探讨单克隆抗体交联CD59前后CD59与接头蛋白分子LAT在Jurkat细胞活化转导中的相关作用。方法采用电转染的方法转染Jurkat细胞,抗体交联CD59后共聚焦显微镜下观察细胞膜上LAT-EGFP分子分布的变化;利用噻唑蓝(MTT)比色法检测CD59抗体交联前后Jurkat细胞的增殖效应;用Western blot技术检测CD59抗体交联前后LAT磷酸化情况。结果共聚焦显微镜下可观察到CD59抗体交联后LAT-EGFP由散在分布为主变为点簇状分布为主;CD59抗体交联刺激组Jurkat细胞增殖能力增加;Western blot结果表明CD59抗体交联后LAT磷酸化水平增加。结论抗体交联CD59能使接头蛋白分子LAT进入脂筏,并增强T细胞信号转导效应。 展开更多
关键词 CD59 LAT JURKAT细胞 信号转导
原文传递
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