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CD32b在红斑狼疮外周血细胞及肾组织的表达分析
1
作者 王静 金晓明 +3 位作者 聂英坤 毕彦忠 韩梅娇 张凤山 《哈尔滨医科大学学报》 CAS 2003年第5期395-398,共4页
目的　探讨CD32b(FcγRⅡ )在系统性红斑狼疮 (SLE)及狼疮肾炎 (LN)中的作用以及与疾病进展的关系。方法　采用免疫组化的方法对 5 8例LN患者及 19例非狼疮患者的肾活检冰冻切片组织进行了CD32b检测。结合LN的病理分型 ,对CD32b在各型... 目的　探讨CD32b(FcγRⅡ )在系统性红斑狼疮 (SLE)及狼疮肾炎 (LN)中的作用以及与疾病进展的关系。方法　采用免疫组化的方法对 5 8例LN患者及 19例非狼疮患者的肾活检冰冻切片组织进行了CD32b检测。结合LN的病理分型 ,对CD32b在各型表达的程度及表达差异进行了分析。采用流式细胞仪对 32例SLE患者及 2 0例正常人外周血的粒细胞、淋巴细胞、单核细胞的表达差异进行了分析。结果　肾组织CD32b主要表达于肾小球的内皮细胞、肾小管的上皮缘、胞浆、以及系膜细胞。Ⅳ型LN的肾小球及Ⅳ、Ⅴ型肾小管CD32b的表达较对照组明显减少 (P <0 .0 5 )。SLE患者 3种外周血细胞的CD32b的表达明显少于正常人。结论　推测CD32b在SLE的发生及LN的进展中起重要作用。 展开更多
关键词 cd32b 外周血细胞 肾组织 免疫组织化学 系统性红斑狼疮 狼疮肾炎
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狼疮肾炎肾组织CD32b表达的免疫组织化学分析
2
作者 王静 金晓明 +3 位作者 聂英坤 毕彦忠 韩梅娇 张凤山 《中华风湿病学杂志》 CAS CSCD 2003年第11期695-697,共3页
关键词 狼疮肾炎 肾组织 cd32b 表达 免疫组织化学
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分析超速离心-沉降速率法研究蛋白质-蛋白质相互作用
3
作者 常卿 褚文丹 +3 位作者 芦亚菲 杨姊 曲娜 李文奇 《生物学杂志》 北大核心 2025年第5期111-116,共6页
分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)是一种用于确定溶液中分子大小和形状的经典生物物理技术,可以根据分子之间在相互作用过程中形成的复合物的数量、大小、化学计量学和亲和力来描述它们之间的相互作用。通过AUC-SV建立免疫相关的重要标... 分析超速离心-沉降速率法(AUC-SV)是一种用于确定溶液中分子大小和形状的经典生物物理技术,可以根据分子之间在相互作用过程中形成的复合物的数量、大小、化学计量学和亲和力来描述它们之间的相互作用。通过AUC-SV建立免疫相关的重要标记分子免疫球蛋白Fc区受体IIb(CD32b)和人IgG1抗体的Fc之间的受体和配体相互作用分析的方法,并与表面等离子共振(SPR)技术和微量热泳动(MST)技术等体外相互作用分析方法进行平行比较,进一步验证了SV-AUC研究蛋白质-蛋白质相互作用的方法可靠性。 展开更多
关键词 分析超速离心-沉降速率法 蛋白质-蛋白质相互作用 免疫球蛋白Fc区受体IIb 抗体Fc片段
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猪白细胞分化抗原32B的原核表达与单克隆抗体制备
4
作者 赵治钤 郑丹阳 +1 位作者 赵谜 穆杨 《动物医学进展》 北大核心 2025年第8期32-38,共7页
为制备猪白细胞分化抗原32B(CD32B)的单克隆抗体(mAb),以猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆猪CD32B基因,将不含信号肽编码序列的猪CD32B胞外区基因片段插入pET-28a(+)载体构建重组表达质粒,用大肠埃希氏菌表达系统表达猪C... 为制备猪白细胞分化抗原32B(CD32B)的单克隆抗体(mAb),以猪外周血淋巴细胞总RNA为模板,采用RT-PCR方法克隆猪CD32B基因,将不含信号肽编码序列的猪CD32B胞外区基因片段插入pET-28a(+)载体构建重组表达质粒,用大肠埃希氏菌表达系统表达猪CD32B重组蛋白,SDS-PAGE和Western blot鉴定表达的目的蛋白后大量表达并用镍柱纯化。用纯化的猪CD32B重组蛋白免疫Balb/c小鼠,采用细胞融合技术制备猪CD32B的mAb,并对获得的mAb进行鉴定。结果获得了全长894 bp的猪CD32B基因和537 bp的截短基因,构建的重组质粒pET-28a-pCD32B转入BL21(DE3)感受态细胞经过IPTG诱导,获得了约25 ku的猪CD32B重组蛋白,多轮亚克隆筛选后获得了1株能稳定分泌猪CD32B mAb的杂交瘤细胞3E12,该mAb重链为IgG 2a,轻链为κ型,不仅能与原核表达的猪CD32B重组蛋白结合,IFA结果显示该mAb也能与HEK 293T细胞表达的全长猪CD32B结合,为探究CD32B在猪免疫抑制性疾病中的作用积累了材料。 展开更多
关键词 猪白细胞分化抗原32B 原核表达 蛋白纯化 细胞融合 单克隆抗体
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IgG1类抗IgE Fc单克隆抗体抑制人肥大细胞脱颗粒作用研究
5
作者 周翔鱼 曹羿堃 +4 位作者 李娜 储晨晨 华冰 王佳 张秋丽 《宁夏医学杂志》 CAS 2022年第4期305-307,F0003,共4页
目的探究IgG1类抗IgE Fc单克隆抗体对人肥大细胞脱颗粒作用的影响。方法采用骨髓杂交瘤技术制备IgG1类大鼠抗人IgE Fc单克隆抗体,ELISA法鉴定杂交瘤细胞分泌的特异性抗体亚类;进一步体外培养人LAD2肥大细胞,分别以Compound 48/80、Compo... 目的探究IgG1类抗IgE Fc单克隆抗体对人肥大细胞脱颗粒作用的影响。方法采用骨髓杂交瘤技术制备IgG1类大鼠抗人IgE Fc单克隆抗体,ELISA法鉴定杂交瘤细胞分泌的特异性抗体亚类;进一步体外培养人LAD2肥大细胞,分别以Compound 48/80、Compound 48/80+hum-IgE-Fc、Compound 48/80+anti-IgE-Fc mAb、Compound 48/80+IgE-Fc+anti-IgE-Fc mAb致敏LAD2肥大细胞48 h,Compound 48/80刺激45 min后甲苯胺蓝染色,收各组上清液,用ELISA检测HIS和TPS的释放浓度,Western blot检测各组TPS和CD32b分子表达水平。结果成功制备2株分泌IgG1类Anti-IgE-Fc mAb的杂交瘤细胞株,与对照组相比,Compound 48/80促进LAD2细胞脱颗粒效应,HIS和TPS的释放浓度明显增加(P<0.05),且肥大细胞TPS蛋白表达上调。Compound 48/80+hum-IgE-Fc及Compound 48/80+anti-IgE-Fc mAb组较Compound48/80组LAD2细胞颗粒释放浓度HIS和TPS及CD32b蛋白差异无统计学意义(P>0.05);Compound48/80联合hum-IgE-Fc和anti-IgE-Fc mAb时显著抑制肥大细胞脱颗粒反应,同时肥大细胞TPS蛋白表达下调,表面抑制性分子CD32b表达上调(P<0.05)。结论IgG1类大鼠抗人IgE Fc单克隆抗体在游离IgE-Fc存在时可抑制人肥大细胞脱颗粒,这种作用可能主要由CD32b介导。 展开更多
关键词 人肥大细胞脱颗粒 IgE Fc抗原 抗IgE Fc单克隆抗体 cd32b
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雌二醇下调系统性红斑狼疮合并妊娠患者B淋巴细胞表面部分抑制性受体的水平 被引量：2
6
作者 方揆 徐英英 陈细玲 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1541-1543,共3页
目的观察血清雌二醇对系统性红斑狼疮(SLE)合并妊娠患者B淋巴细胞表面抑制性受体CD72、CD32b、白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)表达的影响。方法提取40例SLE合并妊娠患者和10例健康妊娠妇女的B淋巴细胞,采集妊娠第5、6、7周外周血... 目的观察血清雌二醇对系统性红斑狼疮(SLE)合并妊娠患者B淋巴细胞表面抑制性受体CD72、CD32b、白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)表达的影响。方法提取40例SLE合并妊娠患者和10例健康妊娠妇女的B淋巴细胞,采集妊娠第5、6、7周外周血中雌二醇刺激B细胞进行培养。ELISA检测B淋巴细胞表面抑制性受体CD72、CD32b、LAIR-1表达水平。结果正常妊娠女性在孕5、6、7周时雌二醇浓度逐渐增加,而CD72、CD32b、LAIR-1无明显变化;分离SLE妊娠妇女B淋巴细胞,经(500、1000、1500)U/L雌二醇体外刺激后,B细胞CD72、CD32b、LAIR-1随着雌二醇剂量的增加逐渐降低,且低于正常妊娠妇女对照组。结论雌二醇可下调SLE合并妊娠患者B淋巴细胞CD72、CD32b、LAIR-1的表达。 展开更多
关键词 雌二醇 系统性红斑狼疮 妊娠 CD72 cd32b 白细胞相关免疫球蛋白样受体1(LAIR-1)
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FcγRⅡB_1介导的信号传导异常与SLE患者B细胞的过度活化 被引量：4
7
作者 彭克军 肖林生 +1 位作者 费樱 王树人 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期769-771,共3页
目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患者B细胞表面功能分子表达的特征及其功能状态,评价以FcγRⅡB1(CD32)为代表的B细胞自身抑制调节机制在SLE发病中的作用。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞(PBMC),并以免疫磁珠法(M... 目的:观察系统性红斑狼疮(SLE)患者B细胞表面功能分子表达的特征及其功能状态,评价以FcγRⅡB1(CD32)为代表的B细胞自身抑制调节机制在SLE发病中的作用。方法:采用Ficoll密度梯度离心法分离出人外周血单个核细胞(PBMC),并以免疫磁珠法(MACS)分离纯化B细胞。采用荧光分光光度法检测B细胞受不同激活物刺激后细胞内钙([Ca2+]i)的反应。用ELISA法检测B细胞与刺激物共同培养后所分泌IgG的量。采用流式细胞术及间接免疫荧光染色法,检测B细胞膜表面CD32、CD19及IgM的表达水平。结果:(1)以羊抗人μ链的F(ab′)2片段及完整IgG分别刺激SLE患者B细胞时,其[Ca2+]i反应的比值显著低于类风湿性关节炎(RA)患者(P<0.05)及正常人对照(P<0.01)。(2)分别用葡萄球菌A蛋白(SPA)单独刺激与SPA和羊抗人μ链的完整IgG抗体共同刺激SLE患者的B细胞所分泌的IgG的比值,明显低于RA患者及正常人对照组(P<0.05)。(3)SLE患者与RA患者及正常对照组B细胞上CD19、CD32及IgM的表达无统计学意义(P>0.05)。结论:SLE患者B细胞上CD32抑制性信号传导的异常,可能是导致B细胞过度活化的重要机制。 展开更多
关键词 SLE B细胞 [Ca^2+] FcγRⅡB1(CD32)
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