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题名CD318单克隆抗体的制备及应用检测
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作者
晁珂
王子阳
赵杰
杨梅佳
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机构
郑州大学第一附属医院互联网医疗系统与国家工程实验室
中国人民武装警察部队河南省总队医院门诊部
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出处
《细胞与分子免疫学杂志》
北大核心
2025年第9期818-826,共9页
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基金
国家自然科学青年基金(82203028)。
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文摘
目的制备CD318特异性单克隆抗体并对其特异性、亲和力及在免疫学检测中的应用进行鉴定,为CD318的抗体药物研发奠定基础。方法表达并纯化CD318蛋白,作为抗原免疫小鼠,筛选抗血清效价较高的小鼠,经过细胞融合和单克隆筛选,制备CD318的特异性单克隆抗体。对获得的单克隆抗体的特异性、亲和力及其在免疫学实验中的应用进行检测。构建靶向CD318/CD3双特异性抗体,检测其对T淋巴细胞杀伤功能的影响。结果获得13株单克隆抗体,其中效价最好、特异性最强和用途最广泛的杂交瘤细胞株的克隆号为13-8-G2,抗体为IgG1,轻链为kappa型;轻链可变区大小为318 bp,重链可变区大小为357 bp,亲和常数约为7.68×10^(9),可分别在流式细胞术和免疫荧光中用于对CD318的特异检测,用获得的CD318单克隆抗体可变区构建的靶向CD318/CD3双特异性抗体,可增强T淋巴细胞杀伤功能。结论成功制备并获得了亲和力高、特异性好的CD318单克隆抗体,为CD318靶点的成药性抗体开发奠定了基础。
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关键词
单克隆抗体
cd318
制备
鉴定
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Keywords
monoclonal antibody
cd318
preparation
identification
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分类号
R392
[医药卫生—免疫学]
R392-33
[医药卫生—免疫学]
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