国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备CAR-T细胞的性能对比

1

作者 魏献政 张书瑜 +5 位作者 金钰航 王璞 王旭 郑骏年 刘丹 施明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第5期492-497,共6页

目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案。方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激... 目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案。方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激活T细胞,T细胞激活72 h后使用CAR慢病毒感染制备CAR-T细胞。分别在慢病毒感染后的第2、4、7天计数,监测CAR-T细胞增殖情况;感染5 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞阳性率;感染8 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞的CD4/CD8分型情况和PD1+TIM3+耗竭细胞比例。结果:国产CD3/CD28激活磁珠与进口磁珠制备的CAR-T细胞CD4/CD8分型相似,CAR-T细胞阳性率略低于进口磁珠(53.7%vs 57.9%),但CAR-T细胞扩增较进口磁珠增加1倍左右,耗竭水平仅为进口磁珠的一半(4.21%vs 7.91%)。此外,国产磁珠的使用量低于进口磁珠,有利于降低CAR-T细胞研发和生产成本。结论:国产CD3/CD28激活磁珠用于制备CAR-T细胞总体性能不劣于进口磁珠,有潜力作为进口磁珠的备用或替代方案。 展开更多

关键词 cd3/cd28激活磁珠 CAR-T细胞制备 性能对比 国产替代

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抑制性削减技术研究CD3/CD28单抗共刺激人T淋巴细胞基因差异表达 被引量：1

2

作者 李新平 陈曦 +3 位作者 王丽娜 李创宏 张文龙 张淼涛 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1609-1613,共5页

为了研究参与人T细胞活化、增殖、信号转导的相关基因,以正常人初始T细胞作为对照样本,以抗人CD3抗体联合抗人CD28抗体激发的人T细胞作为试验样本,进行抑制性削减杂交。结果筛选到43个侯选克隆,对其单向测序后,经过与GenBank同源序列比... 为了研究参与人T细胞活化、增殖、信号转导的相关基因,以正常人初始T细胞作为对照样本,以抗人CD3抗体联合抗人CD28抗体激发的人T细胞作为试验样本,进行抑制性削减杂交。结果筛选到43个侯选克隆,对其单向测序后,经过与GenBank同源序列比较,证实了6个克隆参与了T细胞活化增殖和信号转导的下游通路,分别为CCND2、Rho A、IRF4、FKSG44、EBP、PRPPS2;13个克隆所可能编码的基因与T细胞活化、分裂增殖、分化有关,另外24个克隆在GenBank无法查到对应的同源基因,可能代表了新基因。对这些基因的进一步研究,有助于阐释T细胞活化、增殖的信号转导机制,为了解体内活化T细胞参与的生理和病理过程,具有一定的指导意义。 展开更多

关键词 抑制性削减杂 T细胞活化 信号转导 cd3抗体 cd28抗体

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肺腺癌患者外周血CD28-T淋巴细胞中PD-1的表达及临床意义

3

作者 李苓 王国田 刘娣 《医学检验与临床》 2025年第7期40-45,共6页

目的:研究肺腺癌患者外周血CD28T淋巴细胞中PD-1的表达情况,探讨其在肺腺癌进展中的作用。方法:采用流式细胞术分别检测40例肺腺癌患者和42例健康者外周血中淋巴细胞、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)CD28^(-)、CD8^(+)CD28^(-)T淋... 目的:研究肺腺癌患者外周血CD28T淋巴细胞中PD-1的表达情况,探讨其在肺腺癌进展中的作用。方法:采用流式细胞术分别检测40例肺腺癌患者和42例健康者外周血中淋巴细胞、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)CD28^(-)、CD8^(+)CD28^(-)T淋巴细胞的表达,计算CD4^(+)/CD8^(+)比值,检测PD-1在CD4^(+)CD28^(-)、CD8^(+)CD28^(-)T淋巴细胞中的表达。结果:与健康人群相比,肺腺癌患者外周血单个核细胞中淋巴细胞、淋巴细胞中CD8^(+)T细胞百分比显著降低,CD4^(+)CD28^(-)PD-1+、CD8^(+)CD28^(-)PD-1+T细胞表达上调、CD4^(+)/CD8^(+)比值升高;此外,两组间CD3^(+)、CD4^(+)T淋巴细胞表达无统计学意义,CD28在CD4^(+)及CD8^(+)细胞中的表达无差异。结论:肺腺癌患者外周血CD28^(-)淋巴细胞中PD-1的表达显著升高,提示其可能与肺腺癌的发生发展和免疫治疗疗效评估密切相关。 展开更多

关键词 肺腺癌 外周血 淋巴细胞 cd3 cd4 cd8 cd28 PD-1

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抗CD28抗体协同刺激增强抗CD3抗体体外激活T淋巴细胞并降低TGF-β的表达 被引量：8

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作者 骆群 吕明 +1 位作者 于鸣 黎燕 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2006年第3期547-551,共5页

为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β(TGF-β)表达等相关免疫学指标。结果表明,在抗CD2... 为了探讨体外激活T淋巴细胞的方法及活化后T淋巴细胞的免疫学特征,利用抗CD3、抗CD28抗体在体外刺激健康人外周血单个核细胞PBMNC,检测淋巴细胞转化,CD8+CD25+细胞比例和肿瘤生长因子β(TGF-β)表达等相关免疫学指标。结果表明,在抗CD28抗体的协同作用下,抗CD3抗体的刺激活性明显提高,CD8+CD25+细胞比例明显增加,TGF-β的表达下调。结论:抗CD28抗体协同刺激可以提供第二信号,使T淋巴细胞充分活化。 展开更多

关键词 抗cd3抗体 抗cd28抗体 TGF-Β T细胞

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CD3和CD28单克隆抗体联合作用对CIK细胞及其亚群增殖及功能的影响 被引量：7

5

作者 李玉 韩娇玲 +7 位作者 张震 王菲 李红 黄建敏 赵璇 杨黎 黄岚 张毅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期255-260,共6页

目的:探讨CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞及其亚群增殖及功能的影响。方法:采集2014年6月至2015年6月在郑州大学第一附属医院接受生物细胞治疗的20例肿瘤患者(肾癌6例,肺癌5例,肝... 目的:探讨CD3和CD28单克隆抗体联合作用对细胞因子诱导的杀伤(cytokine-induced killer,CIK)细胞及其亚群增殖及功能的影响。方法:采集2014年6月至2015年6月在郑州大学第一附属医院接受生物细胞治疗的20例肿瘤患者(肾癌6例,肺癌5例,肝癌、乳腺癌和恶性黑素瘤各2例,胆囊癌、淋巴瘤和卵巢癌各1例)的外周血,每例外周血均分为4组(对照组,单用CD3单抗组,单用CD28单抗组,CD3和CD28单抗联合作用组)进行CIK细胞的诱导培养。用CFSE染色检测CIK细胞的增殖能力;ELISA检测CIK细胞分泌细胞因子IFN-γ、TNF-α和IL-2的水平;磁珠分选CIK细胞亚群CD4+、CD8+和CD56+细胞,然后用ELISA检测对CIK细胞亚群分泌IFN-γ、TNF-α和IL-2能力的影响。结果:CD3/CD28单抗联合作用(PI=59.35)对CIK细胞的增殖能力的影响与单独使用CD3单抗(PI=64.4)相比效果并不明显,但是可以刺激CIK细胞分泌较高水平的IFN-γ和TNF-α[IFN-γ:(384.6±263.1)vs(201.5±271.5)pg/ml,P=0.0361;TNF-α:(4.795±1.251)vs(2.835±0.443)pg/ml,P=0.0265];进一步分析发现,两单抗的联合作用可增强亚群细胞CD8+分泌IFN-γ、CD56+分泌IL-2和TNF-α的活性,从而起到对淋巴细胞功能的增强作用。结论:CD3与CD28单抗联合作用不能增强CIK的增殖能力,但可以在一定程度上增强CIK细胞的功能,在肿瘤的细胞免疫治疗应用中具有一定的潜力。 展开更多

关键词 cd3单克隆抗体 cd28单克隆抗体 细胞因子诱导的杀伤细胞 IFN-Γ TNF-α IL-2 肿瘤免疫治疗

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CD8^+CD28^-Ts、CD3^+CD56+NKT细胞在B细胞非霍奇金淋巴瘤患者外周血中分布的分析 被引量：4

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作者 史艳侠 张晓实 +2 位作者 刘冬耕 管忠震 姜文奇 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第z1期1437-1442,共6页

背景及目的:目前认为B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)常伴随免疫抑制,CD8+CD28-Ts(Ts)细胞和CD3+CD56+NKT(NKT)是新鉴定的新型免疫抑制性调节细胞,在肿瘤的免疫抑制及免疫逃逸机制中起重要作用,但它们在B细胞淋巴瘤患者外周血的分布情况及... 背景及目的:目前认为B细胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)常伴随免疫抑制,CD8+CD28-Ts(Ts)细胞和CD3+CD56+NKT(NKT)是新鉴定的新型免疫抑制性调节细胞,在肿瘤的免疫抑制及免疫逃逸机制中起重要作用,但它们在B细胞淋巴瘤患者外周血的分布情况及其免疫抑制中的作用目前尚不清楚。本文通过分析两者在化疗前及化疗后B-NHL患者外周血中比例及变化规律,初步探讨它们在B-NHL的免疫抑制作用及其影响因素,为有效干预患者的免疫功能提供参考。方法:应用流式细胞仪检测79例治疗前的B-NHL患者、经4～6周期化疗后完全缓解(CR)的18例患者、30例健康志愿者外周静脉血中NKT及Ts细胞的比例。结果:在79例治疗前B-NHL患者的外周血中,Ts细胞比例为(18.19±5.03)%,较正常对照组(11.20±3.49)%明显增高(P<0.01);NKT的比例为(6.08±3.29)%,亦较正常对照组的(3.52±1.56)%明显增高(P<0.01)。Ts在不同临床分期的患者之间无显著性差异P>0.05;Ⅰ期为(17.56±4.10)%、Ⅱ期为(18.05±5.64)%、Ⅲ期为(18.14±5.58)%、Ⅳ期为(18.95±4.64)%;在不同恶性程度的患者之间亦无显著性差异P>0.05;低度恶性为(17.81±5.24)%、中度恶性为(18.37±4.83)%、高度恶性为(18.31±5.93)%;在治疗前(18.64±4.55)%和CR后(19.42±4.95) 展开更多

关键词 非霍奇金淋巴瘤 T细胞亚群 cd8+cd28-T cd3+cd56+NKT

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CD28单抗对CD3-AK细胞增殖作用和杀伤效果

7

作者 赵满仓 魏文青 +1 位作者 刘晶 刘杰 《中国热带医学》 CAS 2012年第7期872-873,共2页

目的探讨CD28单抗对细胞增殖效果及细胞毒作用,分析CD28单抗对CD3-AK肿瘤杀伤活性的调节作用。方法制备CD28单克隆抗体,诱导CD3-AK细胞,用倒置显微镜观察细胞数量和形态,用MTT法测定CD3-AK细胞对骨髓瘤细胞的抑制率。结果CD3-AK细胞加入... 目的探讨CD28单抗对细胞增殖效果及细胞毒作用,分析CD28单抗对CD3-AK肿瘤杀伤活性的调节作用。方法制备CD28单克隆抗体,诱导CD3-AK细胞,用倒置显微镜观察细胞数量和形态,用MTT法测定CD3-AK细胞对骨髓瘤细胞的抑制率。结果CD3-AK细胞加入CD28单抗,细胞数量明显增多(t=10.6,P<0.05);对肿瘤细胞的杀伤活性明显增高。结论CD28单抗与CD3单抗联合,具有较强的协同作用,能有效提高CD3-AK的肿瘤杀伤活性。 展开更多

关键词 cd28 单克隆抗体 cd3-AK 骨髓瘤细胞

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输血前后CD3/28双抗体活化外周血单个核细胞后细胞因子的变化

8

作者 骆群 于洋 《临床输血与检验》 CAS 2006年第2期90-91,共2页

目的研究单独CD3抗体或联合CD28抗体作用于输血前后患者外周血单个核细胞(PBMC)后细胞因子的变化。方法体外T细胞培养与活化,采用酶联免疫法测定细胞因子IL-2、γ干扰素(IFN-γ)和IL-4的分泌水平。结果输血前患者PBMC单独应用CD3抗体与... 目的研究单独CD3抗体或联合CD28抗体作用于输血前后患者外周血单个核细胞(PBMC)后细胞因子的变化。方法体外T细胞培养与活化,采用酶联免疫法测定细胞因子IL-2、γ干扰素(IFN-γ)和IL-4的分泌水平。结果输血前患者PBMC单独应用CD3抗体与联用CD28抗体后,PBMC细胞因子分泌水平的变化无显著性,但输血后差异有显著性。结论CD28抗体可明显增强输血后体外活化T细胞功能,输血导致的免疫抑制作用可能与抗原提呈细胞的功能受到影响有关。 展开更多

关键词 cd3抗体 cd28抗体 PBMC 细胞因子

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CD3+CD28+T细胞与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的相关性研究 被引量：1

9

作者 杨绿英 黄丽蓉 +2 位作者 贾非非 章春 胡守喜 《临床军医杂志》 CAS 2011年第6期1121-1123,共3页

目的探讨CD3+CD28+T细胞与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的相关性。方法 40例有可测量病灶的晚期非小细胞肺癌患者接受NP方案化疗,化疗前采用流式细胞术检测外周血CD3+CD28+T细胞的数值,进行有效组(CR+PR)、稳定组(SD)、进展组(PD)和正常对... 目的探讨CD3+CD28+T细胞与晚期非小细胞肺癌化疗疗效的相关性。方法 40例有可测量病灶的晚期非小细胞肺癌患者接受NP方案化疗,化疗前采用流式细胞术检测外周血CD3+CD28+T细胞的数值,进行有效组(CR+PR)、稳定组(SD)、进展组(PD)和正常对照组四组间比较,并进行疗效与CD3+CD28+T细胞值的相关性分析。结果化疗前有效组的CD3+CD28+T细胞值与对照组相比差异无统计学意义(P=0.158),稳定组和进展组均低于对照组(P=0.003,P=0.000);有效组明显高于稳定组和进展组(P=0.036,P=0.000),稳定组高于进展组(P=0.000)。疗效与CD3+CD28+T细胞数值的相关系数r=0.672(P=0.000)。结论化疗前CD3+CD28+T细胞检测值与化疗疗效有一定的相关性,化疗前CD3+CD28+T细胞数值高,则化疗效果好。 展开更多

关键词 晚期非小细胞肺癌 cd3+cd28+T细胞 化疗 疗效预测

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The effect of anti-CD28 on the CD3-AK proliferation and tumoricidal activity

10

作者 Wen qing Wei Jing Liu +1 位作者 Mancang Zhao Yan Zhang 《The Chinese-German Journal of Clinical Oncology》 CAS 2012年第8期469-471,共3页

Objective The aim of this study was to costimulate the CD3-AK cells with anti-CD28 monoclonal antibody (mAb), observe the effect of cell proliferation and cytotoxicity and explore the regulatory role of CD28 mAb on t... Objective The aim of this study was to costimulate the CD3-AK cells with anti-CD28 monoclonal antibody (mAb), observe the effect of cell proliferation and cytotoxicity and explore the regulatory role of CD28 mAb on the CD3-AK tumoricidal activity. 展开更多

关键词 cd28 monoclonal antibody (mAb) cd3-AK myeloma cell

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不同抗体激活时长对CD8^(+)T细胞表型及慢病毒转导效率的影响

11

作者 黄梅 杨诗羽 +2 位作者 林森 刘永达 袁继行 《生命科学研究》 2025年第5期383-388,共6页

为研究CD3/CD28抗体激活时长对CD8^(+)T细胞表型及慢病毒转导效率的影响,以CD3/CD28抗体分别激活初始CD8^(+)T细胞24 h、48 h或72 h,利用流式细胞术检测细胞表型变化,包括细胞的增殖状态以及表面分子CD44、CD62L和CD69的表达水平;利用... 为研究CD3/CD28抗体激活时长对CD8^(+)T细胞表型及慢病毒转导效率的影响,以CD3/CD28抗体分别激活初始CD8^(+)T细胞24 h、48 h或72 h,利用流式细胞术检测细胞表型变化,包括细胞的增殖状态以及表面分子CD44、CD62L和CD69的表达水平;利用慢病毒转导激活后的细胞,通过活细胞成像以及流式细胞术评估不同激活时长下的转导效率。结果显示:在细胞增殖方面,24 h组的CD8^(+)T细胞增殖速率显著高于48 h组和72 h组。在表面分子表达方面,24 h组CD44的表达水平显著高于未激活组,随着激活时间延长至48 h,CD44的表达进一步显著上调,但与72 h组无显著差异;CD62L的表达在未激活时处于较高水平,激活48 h时略有下调,但在未激活组以及24 h和72 h组间保持稳定水平;CD69的表达在24 h组显著高于未激活组,但24 h组、48 h组和72 h组间无显著差异。在慢病毒转导效率方面,与24 h组相比,48 h组和72 h组的慢病毒转导效率显著降低。本研究表明,24 h是较为理想的T细胞激活时长,使用CD3/CD28抗体激活初始CD8^(+)T细胞24 h,可显著提高CD8^(+)T细胞增殖、激活水平以及慢病毒转导效率。 展开更多

关键词 cd3/cd28抗体 激活时长 cd8^(+)T细胞 表型 慢病毒转导

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协同刺激分子CD28/CTLA-4:B7在胃癌患者中的表达及临床意义

12

作者 律洁 田玉峰 苏兆花 《国际检验医学杂志》 CAS 2008年第12期1063-1065,共3页

目的研究胃癌患者外周血共刺激分子CD28和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4 (CTLA-4,CD152)及B7分子的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常以及在胃癌发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测56例胃癌患者外周血淋巴细胞表面的CD28、... 目的研究胃癌患者外周血共刺激分子CD28和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4 (CTLA-4,CD152)及B7分子的表达水平,以探讨胃癌患者共刺激通路是否异常以及在胃癌发病机制中的作用。方法用流式细胞仪检测56例胃癌患者外周血淋巴细胞表面的CD28、CD152、CD3、CD4、CD8及B7分子的表达,并与健康对照组及胃良性肿瘤组作比较。结果胃癌患者外周血中CD3^+、CD4^+、CD3^+CD28^+、B7-1(CD80)、B7-2(CD86)的表达水平及CD4^+/CD8^+低于健康对照组及良性肿瘤组,CD3^+、CD152^+和CD8^+水平显著增高。结论胃癌患者外周血淋巴细胞低表达CD28和B7分子,高表达CTLA-4分子,导致了胃癌患者B7:CD28/CTLA-4共刺激通路异常,影响了T细胞彻底清除肿瘤细胞,从而使肿瘤逃避机体的免疫监视、免疫抑制,发生转移。 展开更多

关键词 胃肿瘤 T淋巴细胞 细胞毒性 抗原 cd28 抗原 cd8 抗原 cd4

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协同刺激信号α-CD28单抗增强肿瘤特异性CTL体内外的杀瘤活性

13

作者 黄辉 俞红 +2 位作者 郑振 熊思东 林云璐 《上海医科大学学报》 CSCD 2000年第5期335-338,共4页

目的　采用α CD2 8单抗增强α CD3单抗刺激的肿瘤特异性T细胞的杀瘤活性。方法　采用 2种方案培养FBL 3免疫的小鼠脾细胞。 (1)使用α CD3单抗 48h后 ,加入α CD3单抗和 2 0U/mlrIL 2 (α CD3 +IL 2组 ) ;(2 )α CD3单抗和α CD2 8单... 目的　采用α CD2 8单抗增强α CD3单抗刺激的肿瘤特异性T细胞的杀瘤活性。方法　采用 2种方案培养FBL 3免疫的小鼠脾细胞。 (1)使用α CD3单抗 48h后 ,加入α CD3单抗和 2 0U/mlrIL 2 (α CD3 +IL 2组 ) ;(2 )α CD3单抗和α CD2 8单抗同时使用 48h后 ,加入α CD3单抗、α CD2 8单抗和 2 0U/mlrIL 2 (α CD3+α CD2 8+IL 2组 )。3H TdR掺入法检测两组效应细胞的增殖水平。标准 4h 51Cr释放法检测两组效应细胞的杀伤活性。在培养第 12天 ,每只荷瘤小鼠过继转输 1× 10 7CTL ,观察小鼠的存活期。结果　α CD3 +IL 2组、α CD3+α CD2 8+IL 2组细胞的3H TdR掺入量分别为 8.36× 10 4 、1.31× 10 5,后者明显高于前者。在培养 12d时 ,效靶比为 12 .5∶1时 ,α CD3+IL 2组细胞对FBL 3的特异性杀伤活性为 35 .6 % ,α CD3 +α CD2 8+IL 2组细胞对FBL 3的特异性杀伤活性为 49.5 %。分别过继转输两组效应细胞治疗荷瘤小鼠 ,荷瘤小鼠的平均存活期分别为 16 .7和 2 0 .8d。结论　协同刺激信号α CD2 展开更多

关键词 α-cd28单抗 CTL 肿瘤 过继免疫治疗

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γ-氨基丁酸及其受体调控CD8^+T细胞活化

14

作者 樊文梅 高钰 +4 位作者 孙玉洁 马锡慧 何秀云 肖漓 石炳毅 《器官移植》 CAS CSCD 2017年第2期144-148,共5页

目的探讨γ-氨基丁酸(GABA)及受体对CD8^+T细胞增殖能力的影响。方法采用CD8^+T细胞磁珠分选试剂盒分选Balb/c小鼠脾脏的CD8^+T细胞;在CD3/CD28活化磁珠的作用下,以不同浓度的GABA刺激CD8^+T细胞,通过5-溴脱氧尿苷(Brd U)标记和流式细... 目的探讨γ-氨基丁酸(GABA)及受体对CD8^+T细胞增殖能力的影响。方法采用CD8^+T细胞磁珠分选试剂盒分选Balb/c小鼠脾脏的CD8^+T细胞;在CD3/CD28活化磁珠的作用下,以不同浓度的GABA刺激CD8^+T细胞,通过5-溴脱氧尿苷(Brd U)标记和流式细胞术检测CD8^+T细胞的增殖情况;通过实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)比较CD8^+T细胞活化前后GABA-A、GABA-B受体的表达。结果流式检测结果显示,GABA可抑制已活化的CD8^+T细胞的增殖,表现为CD152^+CD8^+T细胞明显减少;实时荧光定量PCR结果显示,仅在CD8^+T细胞活化时表达的GABA-A受体亚型为α2、α6和GABA-B受体亚型为1a;CD8^+T细胞活化后有明显增加的GABA-A受体亚型有α3、α5、β2、β3、γ1、γ2和θ,而GABA-B2R和GABA-B1b则在活化前和活化后均无表达。结论GABA可抑制已活化的CD8^+T细胞的增殖,其活化受GABA相关受体所调节,但其具体机制还有待于进一步探讨。 展开更多

关键词 cd8+T细胞 cd3/cd28 Γ-氨基丁酸 移植免疫 GABA-A受体 GABA-B受体 细胞增殖 T细胞活化 cd152

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小鼠CD4^+T细胞活化后4种microRNAs的表达分析

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作者 严佳婧 王文红 +5 位作者 许秋桂 朱波 姜扬 冯驰 汪晶莹 焦志军 《江苏大学学报（医学版）》 CAS 2016年第3期223-226,共4页

目的:研究小鼠脾脏CD4^+T淋巴细胞活化后微小RNA(microRNA,miRNA)的表达水平。方法:采用CD3/CD28免疫磁珠法刺激培养小鼠脾脏CD4+T细胞24 h,应用流式细胞术检测刺激前后CD4^+T细胞的活化率,使用实时荧光定量PCR技术分别检测培养0 h,6 h,... 目的:研究小鼠脾脏CD4^+T淋巴细胞活化后微小RNA(microRNA,miRNA)的表达水平。方法:采用CD3/CD28免疫磁珠法刺激培养小鼠脾脏CD4+T细胞24 h,应用流式细胞术检测刺激前后CD4^+T细胞的活化率,使用实时荧光定量PCR技术分别检测培养0 h,6 h,12 h以及24 h后的CD4+T细胞中miR-181d、miR-342-3p、miR-9、miR-122-3p的表达水平。结果:CD3/CD28免疫磁珠法刺激培养24 h后CD4+T细胞活化率由5.2%升高至60.9%,差异有统计学意义(t=22.01,P<0.01)。与培养0 h相比,miR-181d和miR-342-3p在经刺激培养6 h,12 h和24 h后的CD4^+T细胞中的表达水平均明显降低(P<0.05),而miR-9和miR-122-3p的表达各组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论:小鼠脾脏CD4^+T细胞活化后,miR-181d和miR-342-3p的表达明显下调。 展开更多

关键词 cd3/cd28 cd4+T细胞 microRNA 活化

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抗人卵巢癌×抗人CD3×抗CD28V_H单链三特异抗体的胞内可溶表达、纯化及体外活性测定 被引量：1

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作者 赵宝锋 王祥斌 +2 位作者 赵琦 王锁民 黄华樑 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期475-479,共5页

目的　研究抗人卵巢癌 (ovariancarcinoma ,oc)×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体(singlechaintrispecificantibody,scTsAb)在大肠杆菌中的可溶表达与纯化及纯化后产物的活性测定 ,从而为其应用于卵巢癌治疗的临床研究打下... 目的　研究抗人卵巢癌 (ovariancarcinoma ,oc)×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体(singlechaintrispecificantibody,scTsAb)在大肠杆菌中的可溶表达与纯化及纯化后产物的活性测定 ,从而为其应用于卵巢癌治疗的临床研究打下基础。方法　将已构建的scTsAb表达载体转化大肠杆菌BL2 1(DE3)Star菌株 ,采用低温 (30℃ )、低剂量IPTG(0 .2mmol L)诱导 ,进行胞内可溶表达。根据抗卵巢癌三特异抗体 (ocTsAb)等电点较高 (pI9.0 ) ,而菌体蛋白大多为酸性蛋白的特点 ,利用DEAE弱阴离子交换层析(pH8.0 )进行一步纯化 ,并利用ELISA及FACS的方法检测纯化后抗卵巢癌三特异抗体的活性。结果　(1)SDS PAGE鉴定低温诱导时可溶比例达到 5 6 %。 (2 )绝大多数菌体蛋白被DEAE层析柱吸附 ,而抗卵巢癌三特异抗体在穿透液中流出 ,SDS PAGE检测纯度达到 90 %。 (3)ELISA结果显示纯化后的抗卵巢癌三特异抗体与重组CD2 8纯抗原 ,Jurkat(CD3+ )细胞膜提取抗原 ,SKOV3细胞膜提取抗原均有特异性结合。 (4 )FACS结果证明纯化后的抗卵巢癌三特异抗体与Jurkat(CD3+ )活细胞、SKOV3活细胞有特异性结合。结论　低温诱导胞内可溶表达的抗人卵巢癌×抗人CD3×抗CD2 8VH 单链三特异抗体经弱阴离子交换层析一步纯化后仍保持原有免疫学活性 。 展开更多

关键词 抗人卵巢癌 抗人cd3 抗cd28VH 三特异抗体 基因表达 体外活性 scTsAb 肿瘤

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CD28单抗对CD3AK细胞增殖及表型的影响

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作者 夏圣 许靖霞 +2 位作者 王立新 沈传来 蔡仙德 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期341-343,共3页

CD3AK细胞是用小剂量CD3单抗交联CD3分子而活化的T细胞 ,它具有较强的细胞增殖和细胞毒效能。CD2 8分子则是T细胞激活过程中所需的协同刺激分子 ,可提供T细胞活化所需的第二信号。本文利用CD2 8单抗作为CD2 8分子的配体 ,观察了CD2 8信... CD3AK细胞是用小剂量CD3单抗交联CD3分子而活化的T细胞 ,它具有较强的细胞增殖和细胞毒效能。CD2 8分子则是T细胞激活过程中所需的协同刺激分子 ,可提供T细胞活化所需的第二信号。本文利用CD2 8单抗作为CD2 8分子的配体 ,观察了CD2 8信号途径的激活对CD3AK细胞的影响。结果显示CD2 8单抗可增强CD3AK细胞的增殖活性和趋化团聚形成集落的能力 ,并优先引起CD4+T细胞的增殖。 展开更多

关键词 cd28 单克隆抗体 cd3AK细胞 细胞增殖 细胞表型

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抗 CD3 、 CD28 单抗对人 T 淋巴细胞共刺激作用的影响因素 被引量：4

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作者 王顺友 孙雨 马宝骊 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 1999年第4期229-231,共3页

以抗 Ｃ Ｄ３ 和抗 Ｃ Ｄ２８ 作为 Ｔ 细胞激活的第一和第二信号， 观察二者不同浓度， 不同作用顺序和不同作用时间对人 Ｔ淋巴细胞增殖反应的影响。结果显示单一的抗 Ｃ Ｄ３ 和抗 Ｃ Ｄ２８ 不能刺激 Ｔ 细胞增殖， 只有同时或在一... 以抗 Ｃ Ｄ３ 和抗 Ｃ Ｄ２８ 作为 Ｔ 细胞激活的第一和第二信号， 观察二者不同浓度， 不同作用顺序和不同作用时间对人 Ｔ淋巴细胞增殖反应的影响。结果显示单一的抗 Ｃ Ｄ３ 和抗 Ｃ Ｄ２８ 不能刺激 Ｔ 细胞增殖， 只有同时或在一定时间内接受二者的共同刺激才能促使 Ｔ 细胞增殖。单独接受抗 Ｃ Ｄ３ ２４ｈ 或抗 Ｃ Ｄ２８ １６ｈ 后， Ｔ 细胞对相应的另一信号刺激呈低反应性， 这一现象可能与 Ｔ细胞耐受及自身免疫病的发生有关。 展开更多

关键词 cd3 cd28 T淋巴细胞 增殖 共刺激

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不同刺激物对细胞因子诱导的杀伤细胞分泌细胞因子的影响 被引量：4

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作者 李静 王菲 +5 位作者 刘艳芬 王丽萍 许钰杰 王盟 张斌 张毅 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2014年第2期166-168,共3页

目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进... 目的:探讨抗CD3单抗联合不同浓度的抗CD28单抗对细胞因子诱导的杀伤(CIK)细胞细胞因子分泌的影响。方法:取6例肿瘤患者的外周血,分离、诱导培养,获取CIK细胞。CIK细胞成熟后用1.0 mg/L抗CD3单抗分别联合0.5、1.0、2.5 mg/L抗CD28单抗进行活化,使用ELISA方法检测细胞因子IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α的分泌水平,并用胞内细胞染色法检测CD3+CD8+T细胞中IFN-γ、穿孔素的表达水平。以50μg/L佛波酯联合750μg/L离子霉素共刺激的CIK细胞作对照。结果:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗组CIK细胞IFN-γ、IL-10、IL-2、TNF-α分泌水平和胞内穿孔素表达水平差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:抗CD3单抗联合不同浓度抗CD28单抗共刺激对CIK细胞细胞因子的分泌无影响,临床上可选择1.0 mg/L抗CD3单抗联合0.5 mg/L抗CD28单抗活化淋巴细胞。 展开更多

关键词 抗cd3单抗 抗cd28单抗 细胞因子 细胞因子诱导的杀伤细胞

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NOD小鼠未成熟树突状细胞体外诱导淋巴细胞生成并扩增调节性T细胞的研究 被引量：2

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作者 李永海 张淦 +4 位作者 李明 陈栋 向莹 郭晖 张伟杰 《器官移植》 CAS 2011年第3期129-134,共6页

目的探索非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)诱导并扩增调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg)的优化方案。方法分离、培养NOD小鼠骨髓来源的imDC和淋巴细胞,并进行混合淋巴细胞培... 目的探索非肥胖糖尿病(non-obese diabetic,NOD)小鼠未成熟树突状细胞(immature dendritic cell,imDC)诱导并扩增调节性T细胞(regulatory Tcells,Treg)的优化方案。方法分离、培养NOD小鼠骨髓来源的imDC和淋巴细胞,并进行混合淋巴细胞培养,分别加入白介素(IL)-2、转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β1、抗CD3抗体和抗CD28抗体刺激淋巴细胞增殖、分化。实验分为4组:对照组(淋巴细胞+IL-2)、实验1组(淋巴细胞+imDC+TGF-β1+IL-2)、实验2组(淋巴细胞+imDC+抗CD3抗体+抗CD28抗体+IL-2)、实验3组(淋巴细胞+imDC+抗CD3抗体+抗CD28抗体+TGF-β1+IL-2)。用流式细胞仪检测各组培养3d后淋巴细胞的扩增情况及混合培养6d淋巴细胞中CD4、CD25及Foxp3的表达。结果 imDC和淋巴细胞混合培养3d后,对照组、实验1组、实验2组和实验3组增殖指数分别为(1.04±0.03)%、(1.26±0.02)%、(1.36±0.01)%和(1.55±0.02)%。实验3组的增殖指数较实验1组和实验2组明显升高(均为P<0.01)。混合培养6d后,对照组、实验1组、实验2组和实验3组的CD4+CD25+T淋巴细胞亚群所占比例分别为(2.41±0.02)%、(17.98±1.02)%、(30.67±2.68)%、(42.84±1.41)%,而CD4+CD25+T淋巴细胞中Foxp3+细胞的比例4组分别为(65.55±1.41)%、(86±1.72)%、(70.29±1.39)%、(92.3±1.99)%,实验3组的淋巴细胞CD4+CD25+、Foxp3+的表达水平较实验1组和实验2组明显升高(均为P<0.01)。结论在imDC和淋巴细胞混合培养时加入TGF-β1、抗CD3抗体、抗CD28抗体可明显刺激imDC诱导扩增Treg,是体外诱导扩增Treg的理想方案之一。 展开更多

关键词 未成熟树突状细胞 非肥胖糖尿病 小鼠 转化生长因子-β1 抗cd3抗体 抗cd28抗体 调节性T细胞

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