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NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系的稳定建立及其在体外培养B细胞中的应用
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作者 韩玉洁 梁思辛 +8 位作者 郑瑞 董昊 赵晓娟 王鹏举 李琰龙 杨建勋 杨安钢 阎博 左百乐 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期180-185,共6页
目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表... 目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表达,ELISA检测IL-2、IL-4、IL-21分泌水平,并对其作为饲养细胞与B细胞在体外共培养16 d,显微镜观察B细胞增殖情况,ELISA检测IgG分泌水平。结果:成功构建了NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系,该细胞系能够稳定表达CD40L、BAFF,分泌高水平的IL-2、IL-4、IL-21,与B细胞体外共培养16 d能够支持低密度B细胞高效扩增,并诱导B细胞分化为浆细胞,且其抗体分泌量高达517 ng/mL。结论:本研究成功构建了能够支持B细胞体外增殖与活化的饲养细胞系,为单克隆抗体制备奠定了良好基础。 展开更多
关键词 饲养细胞 cd40L BAFF NIH3T3细胞 体外培养
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CD4^(+)和CD8^(+)T细胞凋亡对乳腺癌保乳术后放疗不良反应的预测价值
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作者 王建廷 邵瑞雨 +3 位作者 王晶 李娜 熊伟 王晓红 《中国肿瘤外科杂志》 2026年第1期57-63,共7页
目的探讨CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞凋亡水平对乳腺癌保乳术后大分割放疗(HFRT)引发的乳房相关放射性不良反应的预测价值。方法收集2020年7月至2021年9月在唐山市人民医院接受保乳术后瘤床同步补量HFRT的72例患者的临床数据。根据通用... 目的探讨CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞凋亡水平对乳腺癌保乳术后大分割放疗(HFRT)引发的乳房相关放射性不良反应的预测价值。方法收集2020年7月至2021年9月在唐山市人民医院接受保乳术后瘤床同步补量HFRT的72例患者的临床数据。根据通用不良事件术语标准评估乳房相关放射性不良反应的严重程度。采集新鲜血液样本,并对样本进行8Gy X线照射处理。使用流式细胞仪分析CD4^(+)和CD8^(+)T淋巴细胞的凋亡情况。同时,从放疗前后的乳腺组织中提取样本进行免疫组化分析,评估CD4^(+)和CD8^(+)T细胞的浸润情况。Cox回归分析患者不良反应程度的影响因素。通过Spearman相关分析评估淋巴细胞凋亡与不良反应等级的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)分析CD4^(+)和CD8^(+)T细胞凋亡对预测乳房相关放射性不良反应的价值。此外,比较不同淋巴细胞凋亡水平患者的2年累积发生率,并利用多因素回归分析调整潜在的混杂因素。结果72例患者至少随访2年,≤1级和≥2级乳房相关放射性不良反应事件分别为51例(70.8%)和21例(29.2%)。不良反应≤1级患者糖尿病史占比、T_(2)分期占比低于≥2级患者,CD8^(+)T细胞放疗所致淋巴细胞凋亡(RILA)水平、CD4^(+)T细胞RILA水平高于≥2级患者,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox回归结果显示,T分期(OR=11.143,95%CI:1.703~72.908)、CD8^(+)T细胞RILA水平(OR=0.273,95%CI:0.157~0.473)、CD4^(+)T细胞RILA水平(OR=0.211,95%CI:0.103~0.431)是患者不良反应程度的独立影响因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,CD8^(+)T细胞RILA预测≥2级乳房相关放射性不良反应的曲线下面积(AUC)为0.947(95%CI:0.806~1.000),CD4^(+)T RILA的AUC为0.824(95%CI:0.654~1.000),差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析显示,CD8^(+)和CD4^(+)T RILA水平与乳房相关放射性不良反应严重程度呈负相关(r=-0.831、-0.704,P<0.01)。CD8^(+)T细胞RILA≤11.13%的患者显著高于CD8^(+)T细胞RILA>11.13%的患者(11.90%),差异具有统计学意义(P<0.05)。CD4^(+)T细胞RILA≤7.36%的患者2年累积发生率为39.39%,高于CD4^(+)T细胞RILA>7.36%的患者(20.51%),差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组化结果显示,放疗后CD8^(+)T细胞的浸润增加,并与放射性不良反应的严重程度相关。结论放疗所致CD8^(+)T淋巴细胞凋亡及其相关的免疫细胞浸润和基因表达变化对预测乳腺癌保乳术后大分割放疗乳房相关放射性不良反应具有重要价值。通过整合CD8^(+)T细胞凋亡、免疫组化数据,可进一步提升对放疗相关风险的预测能力,为个体化放疗和预防策略的制定提供参考。 展开更多
关键词 乳腺癌 保乳术 大分割放疗 cd4^(+)T细胞凋亡 cd8^(+)T细胞凋亡 不良反应
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CD4^(+)T细胞通过分泌IFN-γ促进伯氏疟原虫红内期感染虫荷的机制研究
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作者 李航宇 高源利 +2 位作者 范永铃 徐文岳 刘太平 《陆军军医大学学报》 北大核心 2026年第2期107-115,共9页
目的 探讨CD4^(+)T细胞来源的IFN-γ在宿主抗伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.berghei)红内期感染中的作用及机制。方法 采用他莫昔芬诱导性条件敲除策略,构建仅在CD4^(+)T细胞中缺失IFN-γ基因的小鼠模型(Ifng^(fl/fl)CD4-CreER^(T2)... 目的 探讨CD4^(+)T细胞来源的IFN-γ在宿主抗伯氏疟原虫(Plasmodium berghei,P.berghei)红内期感染中的作用及机制。方法 采用他莫昔芬诱导性条件敲除策略,构建仅在CD4^(+)T细胞中缺失IFN-γ基因的小鼠模型(Ifng^(fl/fl)CD4-CreER^(T2))。而后经尾静脉感染表达萤光素酶的伯氏疟原虫ANKA株(P.berghei ANKA-luciferase),动态检测感染小鼠体内虫荷、存活率及疟原虫发育节律;流式细胞术检测脾脏髓系细胞亚群频率和数量;ELISA检测疟原虫特异性IgG和IgG2c抗体水平。结果 CD4^(+)T细胞特异性缺失IFN-γ会显著降低小鼠感染第5天原虫血症(P<0.05),但不影响生存率,也不干扰伯氏疟原虫24 h的红内期发育周期。Ifng^(fl/fl)CD4-CreER^(T2)感染小鼠血清疟原虫特异性抗体亚型IgG2c滴度减少(P<0.01)、但总IgG滴度显著升高(P<0.05)。中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞的频率和数量无统计学差异。结论 伯氏疟原虫红内期感染进程中,CD4^(+)T细胞分泌的IFN-γ可能通过促进疟原虫特异性IgG抗体向IgG2c类别转换,降低血清IgG水平,进而增强伯氏疟原虫红内期感染小鼠体内虫荷。 展开更多
关键词 cd4^(+)T细胞 干扰素-Γ 伯氏疟原虫 体液免疫
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SOX4驱动CD4^(+)T细胞向免疫抑制表型分化
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作者 张月露 陶子琦 +5 位作者 黄希 刘志洁 董译阳 周凌飞 黄梦卉 王芳 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2026年第2期97-105,共9页
目的探讨SRY-box转录因子4(SOX4)对CD4^(+)T细胞的分化以及氧化磷酸化(OXPHOS)代谢的影响。方法磁珠分选健康人外周血来源的CD4^(+)T细胞,通过CD3和CD28抗体刺激2 d后,慢病毒感染CD4^(+)T细胞分别构建SOX4过表达(SOX4-OE)组和空载体(Vec... 目的探讨SRY-box转录因子4(SOX4)对CD4^(+)T细胞的分化以及氧化磷酸化(OXPHOS)代谢的影响。方法磁珠分选健康人外周血来源的CD4^(+)T细胞,通过CD3和CD28抗体刺激2 d后,慢病毒感染CD4^(+)T细胞分别构建SOX4过表达(SOX4-OE)组和空载体(Vector)组,流式细胞术检测SOX4-OE组与Vector组CD4^(+)T细胞的表型分子[CD25、程序性死亡受体1(PD-1)、细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)、糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体(GITR)、肿瘤坏死因子受体超家族成员4(OX-40)]、转录因子叉头盒P3(FOXP3)、胞内细胞因子[转化生长因子β1(TGF-β1)、白细胞介素10(IL-10)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-4、IL-17A]以及OXPHOS相关指标[三磷酸腺苷(ATP)、活性氧(ROS)、线粒体活性氧(mtROS)、线粒体质量、线粒体呼吸链复合物]的变化;RNA测序分析SOX4-OE组与Vector组CD4^(+)T细胞的差异基因并进行京都基因与基因组百科全书(KEGG)、基因本体论(GO)、基因集富集分析(GSEA)等富集分析。结果与Vector组相比,SOX4-OE组CD4^(+)T细胞的活化表型分子CD25、GITR和抑制表型分子CTLA-4、PD-1表达比例显著增加,OX-40比例无显著差异,转录因子FOXP3表达比例显著增加;SOX4-OE组CD4^(+)T细胞的胞内细胞因子TGF-β1、IFN-γ、IL-17A比例显著高于Vector组,而IL-10比例显著低于Vector组,IL-4比例无显著差异;RNA测序分析SOX4-OE组与Vector组CD4^(+)T细胞的差异基因,通过KEGG通路分析得到OXPHOS通路显著富集;GO分析显示差异基因在免疫反应的调控、有氧电子传递链、正向调控TGF-β的产生等途径显著富集;GSEA富集分析得到相较于Vector组,SOX4-OE组CD4^(+)T细胞的TGF-β受体复合物介导的信号通路以及Sma和Mad相关蛋白2(SMAD2)/SMAD3:SMAD4异聚体转录活性上调;随着SOX4表达水平升高,CD4^(+)T细胞的ATP、线粒体呼吸链复合物水平显著升高,ROS、mtROS水平显著降低,线粒体质量无显著差异。结论SOX4促进CD4^(+)T细胞向类似于可塑性调节性T细胞(Treg)的状态分化,影响与Treg抑制功能密切相关的表型分子的表达,并且增强其氧化磷酸化代谢。 展开更多
关键词 调节性T细胞(Treg) SRY-box转录因子4(SOX4) cd4^(+)T细胞 氧化磷酸化(OXPHOS)
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Runx3调控组织驻留记忆CD8^(+)T细胞分化与功能的研究进展
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作者 邢建蕾 赵旭东 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期214-218,共5页
Runt相关转录因子(Runxs)家族在细胞整个发育过程中参与谱系特异性基因、细胞分化和功能的调控。其中,Runx3在多种免疫细胞的分化中发挥重要作用。Runx3不仅能够在胸腺T细胞发育中调控CD8^(+)T细胞的谱系选择,而且对外周CD8^(+)T各亚群... Runt相关转录因子(Runxs)家族在细胞整个发育过程中参与谱系特异性基因、细胞分化和功能的调控。其中,Runx3在多种免疫细胞的分化中发挥重要作用。Runx3不仅能够在胸腺T细胞发育中调控CD8^(+)T细胞的谱系选择,而且对外周CD8^(+)T各亚群的分化及功能的发挥也起重要调控作用。越来越多的研究表明,组织驻留记忆CD8^(+)T(T_(RM))细胞是高度活化的T淋巴细胞,不经血液再循环,而稳定地存在于人类和小鼠的广泛组织中,能够对再感染提供快速有效的反应。同时,T_(RM)存在于各种肿瘤组织中,包括肺癌、乳腺癌、卵巢癌等,在肿瘤的免疫监视中发挥重要作用。本文简要回顾了Runx3对T_(RM)细胞分化和功能的调控,尤其是Runx3对肿瘤中T_(RM)细胞的调控功能,为后续相关研究提供理论参考。 展开更多
关键词 RUNX3 cd8^(+)T细胞分化功能 组织驻留记忆cd8^(+)T细胞(T_(RM))
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中医药调控CD4^(+)T细胞亚群防治动脉粥样硬化的研究进展
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作者 叶晨 刘悦 +3 位作者 杨欢 盖巧稚 徐月 李珂珂 《广州医药》 2026年第1期24-29,共6页
动脉粥样硬化(AS)是一种起始于炎症介导的内皮损伤的慢性血管疾病,其本质是免疫炎症驱动的病理过程,是众多心血管疾病的病理基础。CD4^(+)T细胞亚群[包括辅助性T细胞1型(T helper 1 cell,Th1)、Th2、Th17、调节性T细胞等]通过分泌特异... 动脉粥样硬化(AS)是一种起始于炎症介导的内皮损伤的慢性血管疾病,其本质是免疫炎症驱动的病理过程,是众多心血管疾病的病理基础。CD4^(+)T细胞亚群[包括辅助性T细胞1型(T helper 1 cell,Th1)、Th2、Th17、调节性T细胞等]通过分泌特异性细胞因子参与AS的炎症反应,其中促炎性CD4^(+)T细胞与抗炎性CD4^(+)T细胞的抗炎功能失衡是推动斑块进展的关键环节,在AS斑块形成与发展中起关键作用。近年来,多项研究表明某些中药单体、经典复方及其有效成分,具有多靶点、多层次机制调控CD4^(+)T细胞分化及功能,这些作用共同减轻血管内皮炎症反应、抑制巨噬细胞泡沫化及平滑肌细胞迁移等,延缓AS斑块形成与发展,为AS防治提供了新思路,展现了中医药在该领域的研究展现出独特优势与广阔前景,本文综述了中医药通过干预CD4^(+)T细胞亚群平衡防治AS的最新研究进展,及其影响相关细胞因子网络及关键信号通路的作用机制,为开发具有多靶点协同优势的创新中药与中西医结合治疗方案提供了关键理论依据与实践方向。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 cd4^(+)T细胞 免疫调节 中医药
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流式细胞仪对孕产妇HIV抗体初筛阳性CD4^(+)T淋巴细胞计数一致性分析
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作者 李俊娥 何光勇 +3 位作者 孙逆 谢妙娟 熊金明 周德 《分子诊断与治疗杂志》 2026年第1期158-160,164,共4页
目的探究流式细胞仪对孕产妇免疫缺陷病毒(HIV)抗体初筛阳性CD4^(+)T淋巴细胞计数一致性。方法选择2022年6月至2023年12月云南省妇幼保健院检验科150例孕产妇的HIV抗体初筛阳性样本进行评估,分别采用国产和进口的流式细胞仪。借助SPSS2... 目的探究流式细胞仪对孕产妇免疫缺陷病毒(HIV)抗体初筛阳性CD4^(+)T淋巴细胞计数一致性。方法选择2022年6月至2023年12月云南省妇幼保健院检验科150例孕产妇的HIV抗体初筛阳性样本进行评估,分别采用国产和进口的流式细胞仪。借助SPSS20.0和MedCalc两款软件,通过t检验、Pearson相关分析及一般线性回归分析等方法。结果国产和进口流式细胞仪检测CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)的绝对数值比较差异无统计学意义(t=0.456、1.671、1.421,P>0.05)。两种机型间检测结果高度相关,回归方程中X系数接近1,不同细胞数验证检测结果一致性(P<0.05)。对比BD与CytoFLUX检测CD4^(+)细胞绝对数表现,相关系数r均在0.9以上,两机型在分层检测时也具有良好相关性(r=0.95、0.91、0.96,P<0.05)。Bland-Altman分析显示,流式细胞仪在检测CD4^(+)细胞绝对数时,BD机型与国产机型之间的差异随CD4^(+)细胞数值的增加而增大。低值样本组、高值样本组、质控全血组的变异系数均低于8%。结论CytoFLUX流式细胞仪在孕产妇HIV抗体初步筛查中表现出色,无论是国产还是进口的型号,对于检测孕产妇HIV抗体初筛阳性患者的血样中的CD3^(+)、CD4^(+)和CD8^(+)绝对数,均展现出了卓越的精确度和稳定性。 展开更多
关键词 流式细胞 孕产妇 HIV抗体初筛 cd4^(+)T淋巴细胞计数
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JMJD3表观调控CD4^(+)T细胞功能在类风湿性关节炎中的作用及机制
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作者 王清泰 江华 +4 位作者 宋甲宝 余孙兴 朱爱兰 王喆诤 魏建威 《医疗装备》 2025年第9期4-9,共6页
目的探究组蛋白去甲基化酶JMJD3在类风湿性关节炎(RA)患者CD4^(+)T细胞中的表达及其对免疫细胞功能的调控作用。方法选择2022年1月至2024年11月医院收治的60例RA患者血液样本作为RA组,另选择同期60名健康体检者血液样本为对照组。采用CD... 目的探究组蛋白去甲基化酶JMJD3在类风湿性关节炎(RA)患者CD4^(+)T细胞中的表达及其对免疫细胞功能的调控作用。方法选择2022年1月至2024年11月医院收治的60例RA患者血液样本作为RA组,另选择同期60名健康体检者血液样本为对照组。采用CD4^(+)T细胞分离与培养、实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)、免疫印迹(Western Blot)和流式细胞术等多种实验技术,分析JMJD3在RA患者CD4^(+)T细胞中的表达及对CD4^(+)T细胞活化、增殖和凋亡的影响。结果RA组CD4^(+)T细胞中JMJD3的表达高于对照组,表达水平与疾病活动性评分(DAS28)呈正相关。抑制JMJD3的活性后,CD4^(+)T细胞表面分子CD44表达下降,CD62L、CD25表达上升;抑制JMJD3后CD4^(+)T细胞的增殖受阻,凋亡细胞数量增加。结论JMJD3在维持RA患者免疫细胞功能和活力方面的具有关键作用,且具有作为新的药物靶点的潜力。 展开更多
关键词 类风湿性关节炎 JMJD3 表观调控 cd4^(+)T细胞
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耗竭CD4^(+)T细胞改善抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎小鼠血脑屏障损伤
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作者 邱钦杰 刘嘉茹 +2 位作者 金聪丽 王岩 周海红 《广东医科大学学报》 2026年第1期68-76,共9页
目的探讨耗竭CD4^(+)T细胞对抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎小鼠血脑屏障功能的影响。方法将24只8周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为4组,每组6只,分别为正常组(背部皮下注射磷酸盐缓冲液)、抗NMDAR脑炎模型组(简称模型组,背部皮下注射G... 目的探讨耗竭CD4^(+)T细胞对抗N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR)脑炎小鼠血脑屏障功能的影响。方法将24只8周龄雌性C57BL/6J小鼠随机分为4组,每组6只,分别为正常组(背部皮下注射磷酸盐缓冲液)、抗NMDAR脑炎模型组(简称模型组,背部皮下注射GluN1_(356-385)多肽)、抗NMDAR脑炎模型干预组(简称模型干预组,抗NMDAR脑炎模型小鼠腹腔注射抗CD4单克隆抗体)、抗NMDAR脑炎模型对照组(简称模型对照组,抗NMDAR脑炎模型小鼠腹腔注射同型对照抗体)。通过细胞免疫荧光法检测模型小鼠血清抗GluN1亚基抗体,以验证造模成功;Western blot检测脑组织紧密连接蛋白带状闭合蛋白1(ZO-1)、Claudin-5、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及小胶质细胞M1极化标志蛋白CD68表达变化;免疫荧光法检测小胶质细胞形态学改变;旷场实验、新物体识别实验检测小鼠行为学改变。结果与正常小鼠相比,模型小鼠血清抗GluN1亚基抗体为阳性,表明抗NMDAR脑炎模型小鼠构建成功。与正常组相比,模型组小鼠脑组织紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5表达显著下降,海马小胶质细胞分支数量显著增加且最长分支长度明显缩短,小胶质细胞M1极化标志蛋白CD68表达显著上调(P<0.001或0.05)。与模型对照组相比,模型干预组小鼠在耗竭CD4+T细胞后,其运动和焦虑水平未受影响(P>0.05);新物体识别能力显著提升(P<0.05);脑组织紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-5表达明显增加(P<0.05);小胶质细胞分支数量显著减少且分支长度显著增长(P<0.001);小胶质细胞M1极化标志蛋白CD68表达显著降低(P<0.01)。结论耗竭CD4^(+)T细胞能够修复抗NMDAR脑炎小鼠血脑屏障紧密连接损伤,改善认知功能障碍,促进海马小胶质细胞由促炎的M1极化转化为抗炎的M2极化。 展开更多
关键词 抗N-甲基-D-天冬氨酸受体脑炎 血脑屏障 cd4^(+)T细胞 小胶质细胞
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载脂蛋白B与载脂蛋白A1比值及CD4^(+)T细胞因子在颅内外大动脉粥样硬化性狭窄中的作用
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作者 常红恩 苏天佑 安红伟 《西部医学》 2026年第1期120-126,共7页
目的探讨血清载脂蛋白B(ApoB)与载脂蛋白A1(ApoA1)比值以及CD4^(+)T淋巴细胞分泌的多种细胞因子水平与缺血性脑血管病(ICVD)患者颅内外大动脉粥样硬化性狭窄之间的相关性。方法纳入2023年1月-2023年9月在本院接受数字减影血管造影(DSA)... 目的探讨血清载脂蛋白B(ApoB)与载脂蛋白A1(ApoA1)比值以及CD4^(+)T淋巴细胞分泌的多种细胞因子水平与缺血性脑血管病(ICVD)患者颅内外大动脉粥样硬化性狭窄之间的相关性。方法纳入2023年1月-2023年9月在本院接受数字减影血管造影(DSA)检查的ICVD患者163例,记录患者的基础临床数据、DSA检查结果以及血清ApoB、ApoA1及CD4^(+)T细胞因子(IL-4、IL-6、IL-10、IL-12、IL-21)水平。研究分析ApoB/ApoA1比值和CD4^(+)T细胞因子水平与脑动脉狭窄程度、侧支循环代偿分级、随访3个月mRS评分以及临床危险因素之间的相关性。结果狭窄组患者的血清ApoB/ApoA1比值、IL-4、IL-6水平显著高于正常组,而IL-10水平显著低于正常组(均P<0.05);中度和重度狭窄组患者的血清ApoB/ApoA1比值显著高于轻度狭窄组,重度狭窄组IL-4、IL-6水平显著高于中度狭窄组,且重度狭窄组的IL-10水平显著低于轻度和中度狭窄组(均P<0.05);预后不良组患者的血清ApoB/ApoA1比值、IL-6水平显著高于预后良好组。多因素回归分析表明ApoB/ApoA1比值、IL-4、IL-6是ICVD患者发生颅内外动脉狭窄的独立危险因素。ROC曲线分析显示ApoB/ApoA1比值、IL-4、IL-6及其三者联合对ICVD患者颅内外大动脉粥样硬化性狭窄有一定的预测价值,且三者联合预测效果更优。结论ApoB/ApoA1比值、IL-4、IL-6水平与ICVD患者颅内外大动脉粥样硬化性狭窄密切相关,可作为ICVD患者颅内外大动脉粥样硬化性狭窄的预测生物标志物。 展开更多
关键词 颅内外动脉狭窄 动脉粥样硬化 载脂蛋白B 载脂蛋白A1 cd4^(+)T细胞因子
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自身免疫性肝炎患者肝组织中CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性T细胞的免疫学表型研究 被引量:1
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作者 张华扬 李奕康 +3 位作者 钱其炜 王绮夏 尤征瑞 马雄 《国际消化病杂志》 2025年第1期38-43,共6页
目的探究CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性T(DN T)细胞在自身免疫性肝炎(AIH)患者肝组织中的免疫学表型及功能。方法选择2021年9月至2022年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院接受肝移植手术的6例AIH患者作为研究对象(设为AIH组),获取术... 目的探究CD3^(+)CD4^(-)CD8^(-)双阴性T(DN T)细胞在自身免疫性肝炎(AIH)患者肝组织中的免疫学表型及功能。方法选择2021年9月至2022年12月于上海交通大学医学院附属仁济医院接受肝移植手术的6例AIH患者作为研究对象(设为AIH组),获取术中肝组织标本;另选取6位健康肝移植捐赠者的肝组织标本设为对照组。采用激光共聚焦技术和流式细胞术探究2组肝组织中DN T细胞的频率及免疫学特性。结果AIH组肝内DN T细胞占CD3+T细胞的比例显著低于对照组[(10.35±6.89)%比(27.31±14.43)%],且DN T细胞中CD69阳性细胞占比显著高于对照组[(74.82±15.74)%比(55.45±10.29)%],差异均有统计学意义(P均<0.05)。AIH组肝内DN T细胞中CCR5、CD69和颗粒酶B(Gz-B)阳性细胞占比均显著低于CD8+T细胞[(8.43±4.88)%比(45.58±17.55)%、(7.54±4.66)%比(37.07±11.18)%、(6.15±4.36)%比(38.85±23.69)%],差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论AIH患者的肝内DN T细胞频率和杀伤能力均降低,这可能与患者肝组织内的免疫微环境紊乱有关。 展开更多
关键词 cd3^(+)cd4^(-)cd8^(-)双阴性T细胞 自身免疫性肝炎 免疫
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免疫调控受体PD-1和TIGIT在HIV感染者/HIV患者CD3^+CD4^-T细胞表达研究 被引量:6
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作者 刘婷婷 尹晓婉 +6 位作者 张子宁 丁海波 付帅 赵雯 唐甜 王晓楠 姜拥军 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期217-222,共6页
深入了解免疫调控受体程序性死亡分子1(programmed death 1,PD-1)和T细胞免疫球蛋白及免疫酪氨酸样抑制基序(T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT)在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者/HIV患者外周血C... 深入了解免疫调控受体程序性死亡分子1(programmed death 1,PD-1)和T细胞免疫球蛋白及免疫酪氨酸样抑制基序(T cell immunoglobulin and ITIM domain,TIGIT)在人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者/HIV患者外周血CD3^+CD4^-T细胞的表达情况及其与疾病进展的关系。用流式细胞仪检测24例未治疗的HIV感染者/HIV患者外周血CD3^+CD4^-T细胞表面PD-1和TIGIT的表达百分比、CD4+T细胞绝对值计数,实时荧光定量PCR检测HIV病毒载量,并与20例HIV抗体阴性者表达情况比较(HIV-negative normal control,NC)。结果发现HIV感染者/HIV患者CD3^+CD4^-T细胞表面TIGIT受体表达百分数较健康对照组明显增高(P<0.000 1),与CD4+T细胞绝对计数呈负相关(r=-0.450 4,P=0.027 1),与病毒载量呈正相关(r=0.621 4,P=0.001 2);HIV感染者CD3^+CD4^-T细胞PD-1受体表达百分数较健康对照组明显增高(P<0.000 1),与CD4+T细胞绝对计数呈负相关(r=-0.455,P=0.0255);PD-1和TIGIT共表达的CD3^+CD4^-T细胞百分数在HIV感染者/HIV患者中表达明显增高(P<0.000 1)。HIV感染机体后,CD3^+CD4^-T细胞PD-1受体和TIGIT受体表达百分数均明显增高,且与HIV疾病进展密切相关。 展开更多
关键词 HIV/AIDS cd3+cd4-t细胞 PD-1 TIGIT
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硬脂酸通过CD36影响酮病奶牛CD4^(+)T细胞IL-17的表达
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作者 季子崴 李思瑶 +5 位作者 张海鑫 李紫薇 张上明珠 杨威 徐闯 张冰冰 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第3期602-610,共9页
采集健康、酮病奶牛外周血液并分离出CD4^(+)T细胞,Western blot检测脂质合成相关蛋白脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl coenzyme A carboxylase 1,ACC1)、白细胞分化抗原36(cluster of differentiatio... 采集健康、酮病奶牛外周血液并分离出CD4^(+)T细胞,Western blot检测脂质合成相关蛋白脂肪酸合成酶(fatty acid synthase,FASN)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl coenzyme A carboxylase 1,ACC1)、白细胞分化抗原36(cluster of differentiation 36,CD36)及钙库操纵性钙离子内流(store-operated calcium entry,SOCE)相关蛋白ORAIl、ORAI2、ORAI3、STIM1、STIM2表达;流式细胞术检测IL-17表达。从1日龄犊牛脾脏分离CD4^(+)T细胞用于体外培养,细胞处理分为阴性对照siRNA处理组(Ctrl组)、沉默CD36(siCD36)组、硬脂酸(stearic acid,SA)组、SA+siCD36组。使用75 pmol/L阴性对照siRNA转染Ctrl组和SA组细胞48 h,然后用200μmol/L SA刺激SA组细胞24 h;使用75 pmol/L CD36 siRNA转染siCD36组和SA+siCD36组细胞48 h,然后用200μmol/L SA刺激SA+siCD36组细胞24 h。Western blot检测FASN、ACC1、CD36、钙释放激活钙调节因子1(calucium release-activated calcium channel protein 1,CRCM1,也称ORAI1),ORAI2、ORAI3、基质相互作用分子1(slromal interaction molecule 1,STIM1)、STIM2蛋白表达;流式细胞术检测IL-17表达。结果显示,与健康奶牛相比,酮病奶牛外周血CD4^(+)T细胞中IL-17表达显著升高(P<0.01);并上调了FASN、CD36、STIM1(P<0.05)及ACC1、ORAI2、ORAI3、STIM2的蛋白水平(P<0.01)。体外试验结果显示,相比于Ctrl组,SA组上调了CD36、ACC1、ORAI3(P<0.05)以及FASN、STIM1的蛋白表达(P<0.01),IL-17表达显著升高(P<0.05);相比于SA组,SA+siCD36组下调了STIM1、ORAI1(P<0.05)及CD36、ACC1、FASN、ORAI2的蛋白表达(P<0.01),IL-17表达降低(P<0.05)。结果表明,SA通过CD36促进酮病奶牛CD4^(+)T细胞脂质合成并激活SOCE通道,促进IL-17表达。 展开更多
关键词 硬脂酸 cd36 cd4^(+)T细胞 IL-17 酮病 奶牛
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Foxp3转染小鼠CD4^+CD25^-T细胞抑制树突状细胞功能 被引量:4
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作者 周浩 黎纬明 +2 位作者 张敏 刘峥嵘 邹萍 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 2008年第1期164-169,共6页
为了研究Foxp3基因表达与CD4+T细胞免疫活性的关系,用逆转录病毒转染Foxp3基因,在幼稚CD4+CD25-T细胞内强制性表达FOXP3蛋白,进而研究转染后的CD4+CD25-T细胞对树突状细胞的免疫共刺激分子和免疫功能的影响,并通过Transwell试验研究转染... 为了研究Foxp3基因表达与CD4+T细胞免疫活性的关系,用逆转录病毒转染Foxp3基因,在幼稚CD4+CD25-T细胞内强制性表达FOXP3蛋白,进而研究转染后的CD4+CD25-T细胞对树突状细胞的免疫共刺激分子和免疫功能的影响,并通过Transwell试验研究转染Foxp3的CD4+CD25-T细胞对树突状细胞的作用是否依赖于细胞之间的直接接触。结果表明:通过逆转录病毒载体转染,成功建立了表达Foxp3的CD4+CD25-T细胞模型,转染后1周Foxp3阳性表达的T细胞比例为38%。强制性表达Foxp3的CD4+CD25-T细胞可以在体外发挥免疫抑制作用,可以诱导树突状细胞表面免疫共刺激分子CD80和CD86表达水平的下调。体外淋巴细胞增殖试验结果表明,Foxp3转染小鼠CD4+CD25-T细胞可以抑制树突状细胞对异基因淋巴细胞的活化。结论:转染Foxp3的CD4+CD25-T细胞对树突状细胞发挥的作用依赖于细胞之间的直接接触。 展开更多
关键词 FOXP3 cd4^+T细胞 转染 树突状细胞
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妊娠早期外周血和蜕膜CD4^+CD25^+FoxP3^+/CD127^-T细胞检测及意义 被引量:2
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作者 蒋国静 邱丽华 +2 位作者 许文君 林其德 祝捷 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期327-330,共4页
目的研究妊娠早期外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的数量变化,并探讨相关性。方法17例原因不明复发性流产(URSA)患者(URSA组)和20名正常健康早孕者(对照组)于人工流产时分别采集外周血和蜕膜组织,Ficoll密度... 目的研究妊娠早期外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的数量变化,并探讨相关性。方法17例原因不明复发性流产(URSA)患者(URSA组)和20名正常健康早孕者(对照组)于人工流产时分别采集外周血和蜕膜组织,Ficoll密度梯度离心法分离单个核细胞悬液,分别加入CD4-PE-Cy5.5、CD25-FITC或CD25-APC和细胞表面标记CD127-PE或细胞内标记FoxP3-PE,流式细胞仪检测样本中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞的百分比,并进行线性相关分析。结果与对照组比较,URSA组蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞百分比明显降低(均P<0.05);两组间外周血CD4+CD25+FoxP3+和CD4+CD25+CD127-T细胞百分比比较差异无统计学意义。组内比较显示,两组外周血和蜕膜组织中CD4+CD25+FoxP3+与CD4+CD25+CD127-T细胞百分比比较,差异均无统计学意义(均P(0.05)。相关分析显示,两组CD4+CD25+FoxP3+与CD4+CD25+CD127-T细胞的百分比在外周血(r=0.9858,r=0.6870)和蜕膜组织(r=0.6089,r=0.9583)均呈显著正相关(均P(0.05)。结论URSA的发生可能与蜕膜CD4+CD25+调节性T细胞数量减少有关,而外周血CD4+CD25+调节性T细胞可能不参与URSA的免疫发病机制。细胞表面标记CD127可能成为鉴定和分离CD4+CD25+调节性T细胞的一种新的特异性标记物。 展开更多
关键词 cd4+cd25+T细胞 FoxP3 cd127 外周血 蜕膜组织 复发性流产
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血清ficolin-3、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值联合NLR在肺炎支原体肺炎合并EB病毒感染患儿预后评估中的临床价值研究
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作者 孙晖 李秀娥 +2 位作者 郑小维 张燕 任莉 《中国临床新医学》 2025年第8期859-863,共5页
目的研究血清纤维胶凝蛋白-3(ficolin-3)、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值联合中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在肺炎支原体肺炎(MPP)合并EB病毒(EBV)感染患儿预后评估中的临床价值。方法回顾性分析2021年1月至2023年5月西北大学附属第一... 目的研究血清纤维胶凝蛋白-3(ficolin-3)、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值联合中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)在肺炎支原体肺炎(MPP)合并EB病毒(EBV)感染患儿预后评估中的临床价值。方法回顾性分析2021年1月至2023年5月西北大学附属第一医院收治的146例MPP合并EBV感染患儿的临床资料。于患儿入院后(治疗前)检测血清ficolin-3、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值及NLR。患儿出院后随访12个月,根据患儿预后情况将其分为预后良好组(100例)和预后不良组(46例)。采用多因素logistic回归分析MPP合并EBV感染患儿预后的影响因素。通过受试者工作特征(ROC)曲线分析ficolin-3、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值、NLR对MPP合并EBV感染患儿预后的预测效能。结果与预后良好组比较,预后不良组发热时间较长,肺部阴影≥2/3肺叶占比、重症占比较高,C反应蛋白、ficolin-3水平及NLR较高,CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值较低,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的ficolin-3水平及NLR,较低的CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值以及重症MPP、肺部阴影≥2/3肺叶是MPP合并EBV感染患儿预后不良的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,ficolin-3、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值、NLR可预测MPP合并EBV感染患儿预后不良(P<0.05),且三者联合检测的预测效能[AUC(95%CI)=0.874(0.837~0.911)]优于单项指标(P<0.05)。结论血清ficolin-3、CD4^(+)/CD8^(+)T淋巴细胞比值、NLR联合检测有助于预测MPP合并EBV感染患儿的预后。 展开更多
关键词 纤维胶凝蛋白-3 cd4^(+)/cd8^(+)T淋巴细胞比值 中性粒细胞与淋巴细胞比值 肺炎支原体肺炎 EB病毒 预后
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BHB通过ROS-NLRP3途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞吞噬功能
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作者 程宛彤 迟杨 +1 位作者 孙旭东 徐闯 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第7期1493-1501,共9页
旨在探究β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHB)是否通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)-NLRP3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3)途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞的吞噬功能。提取产后健康奶牛血液... 旨在探究β-羟丁酸(β-hydroxybutyric acid,BHB)是否通过活性氧(reactive oxygen species,ROS)-NLRP3(NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3)途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞的吞噬功能。提取产后健康奶牛血液中CD14^(+)单核细胞进行培养,转染沉默NLRP3小干扰RNA后加入3 mmol/L的BHB;用10 nmol/L NLRP3抑制剂MCC950(CP-456773)或10 mmol/L的ROS清除剂N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl cysteine,NAC)预处理单核细胞后再添加3 mmol/L的BHB处理24 h。通过免疫印迹法检测NLRP3蛋白表达水平;采用流式细胞术和免疫荧光测定单核细胞的吞噬能力。结果显示,si-NLRP3+BHB处理组与si-Control+BHB组相比,单核细胞吞噬功能显著升高,而NLRP3蛋白表达量显著降低。与DMSO+BHB组相比,MCC950+BHB组的单核细胞吞噬功能明显升高。此外,与DMSO+BHB组相比,MCC950+BHB处理组单核细胞中的NLRP3蛋白表达显著降低。与PBS+BHB组相比,添加ROS清除剂NAC处理后,单核细胞吞噬能力明显升高,而NLRP3蛋白表达量显著降低。结果表明,BHB通过ROS-NLRP3途径抑制奶牛CD14^(+)单核细胞的吞噬功能。因此,调控NLRP3炎症小体的活化可能是改善围产期奶牛单核细胞吞噬功能障碍的有效方法。 展开更多
关键词 BHB NLRP3炎症小体 cd14^(+)单核细胞 吞噬功能 奶牛
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αβ-TCR^+CD3^+CD4^-CD8^-双阴性T细胞:一种新发现的免疫调节T细胞 被引量:16
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作者 张竹虚 张丽 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期5-8,共4页
免疫系统对自身或异体抗原产生免疫耐受的主要机制之一 ,是免疫调节T细胞的抑制性调节反应。此理论已在数种进行器官移植和自身免疫研究的动物模型中被证实。现已明确 ,免疫调节T细胞由多种不同的细胞亚型所组成。最近发现 ,一种新的抗... 免疫系统对自身或异体抗原产生免疫耐受的主要机制之一 ,是免疫调节T细胞的抑制性调节反应。此理论已在数种进行器官移植和自身免疫研究的动物模型中被证实。现已明确 ,免疫调节T细胞由多种不同的细胞亚型所组成。最近发现 ,一种新的抗原特异性αβ TCR+ CD4 CD8 免疫调节T细胞 (双阴性T细胞 ,DNT )能够抑制具有相同T细胞受者特异性的CD8+和CD4 + T细胞 ,从而抑制异体皮肤移植的排斥反应。有关DN调节T细胞及其独特抑制机制的研究 ,对于了解受者如何获得针对供体移植器官的特异性耐受 ,及正确理解如何保持对自身抗原的外周免疫耐受 。 展开更多
关键词 αβ-tCR^+cd^3+cd4^-cd8^ 双阴性T细胞 免疫调节T细胞 移植耐受
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人Foxp3基因真核载体的构建及在CD4^+CD25^-T细胞中的表达和功能
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作者 彭克军 王秋林 +2 位作者 张庆莲 段佳慧 郑崛村 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2011年第18期3279-3282,共4页
目的:构建人Foxp3基因的真核表达载体并转染人CD4+CD25-T细胞,观察其在CD4+CD25-T细胞中的表达及功能。方法:构建人Foxp3基因pEGFP-N1真核表达载体,经酶切及双向测序鉴定基因序列的正确性。通过电穿孔法将重组载体转入人CD4+CD25-T细胞... 目的:构建人Foxp3基因的真核表达载体并转染人CD4+CD25-T细胞,观察其在CD4+CD25-T细胞中的表达及功能。方法:构建人Foxp3基因pEGFP-N1真核表达载体,经酶切及双向测序鉴定基因序列的正确性。通过电穿孔法将重组载体转入人CD4+CD25-T细胞中,利用荧光显微镜及流式细胞术检测转染效率,采用3H-TdR掺入法检测转染细胞对单个核细胞增殖能力的影响。结果:酶切及测序鉴定pEGFP-N1-Foxp3重组质粒基因序列完全正确,转染的CD4+CD25-T细胞Foxp3阳性表达率为23.7%,并显著抑制了单个核细胞的增殖能力。结论:成功构建了pEGFP-N1-Foxp3真核表达载体,并使转染的CD4+CD25-T细胞具有调节性T细胞的功能。 展开更多
关键词 FOXP3 真核载体 转染 cd4+cd25-t细胞
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国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备CAR-T细胞的性能对比
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作者 魏献政 张书瑜 +5 位作者 金钰航 王璞 王旭 郑骏年 刘丹 施明 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第5期492-497,共6页
目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案。方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激... 目的:比较国产与进口CD3/CD28激活磁珠制备的CAR-T细胞的性能差异,为国内CAR-T细胞研发和生产提供备用或替代方案。方法:以进口CD3/CD28激活磁珠︰CD3+T细胞比例为1∶1的成熟方案作为研究对照,国产磁珠设置1∶2、1∶1和2∶1的比例梯度激活T细胞,T细胞激活72 h后使用CAR慢病毒感染制备CAR-T细胞。分别在慢病毒感染后的第2、4、7天计数,监测CAR-T细胞增殖情况;感染5 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞阳性率;感染8 d后采用流式细胞术检测CAR-T细胞的CD4/CD8分型情况和PD1+TIM3+耗竭细胞比例。结果:国产CD3/CD28激活磁珠与进口磁珠制备的CAR-T细胞CD4/CD8分型相似,CAR-T细胞阳性率略低于进口磁珠(53.7%vs 57.9%),但CAR-T细胞扩增较进口磁珠增加1倍左右,耗竭水平仅为进口磁珠的一半(4.21%vs 7.91%)。此外,国产磁珠的使用量低于进口磁珠,有利于降低CAR-T细胞研发和生产成本。结论:国产CD3/CD28激活磁珠用于制备CAR-T细胞总体性能不劣于进口磁珠,有潜力作为进口磁珠的备用或替代方案。 展开更多
关键词 cd3/cd28激活磁珠 CAR-t细胞制备 性能对比 国产替代
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