期刊文献+
共找到37篇文章
< 1 2 >
每页显示 20 50 100
‘砀山酥梨’褐皮芽变木质素含量及相关酶活性与CCoAOMT表达量分析 被引量:22
1
作者 李晓峰 李雪 +4 位作者 贾兵 刘莉 叶振风 衡伟 朱立武 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期828-836,共9页
为了探讨‘砀山酥梨’芽变品系‘锈酥’果皮褐色形成机理,采用分光光度法测定盛花后25、50、75、100、125、150和175d果皮中木质素含量和相关酶活性变化;从构建的‘锈酥’正向SSH-cDNA文库中筛选出与木质素生物合成密切相关的CCoAOMT-E... 为了探讨‘砀山酥梨’芽变品系‘锈酥’果皮褐色形成机理,采用分光光度法测定盛花后25、50、75、100、125、150和175d果皮中木质素含量和相关酶活性变化;从构建的‘锈酥’正向SSH-cDNA文库中筛选出与木质素生物合成密切相关的CCoAOMT-EST,通过实时荧光定量PCR测定了‘砀山酥梨’和‘锈酥’果皮中CCoAOMT的相对表达量。结果表明:‘锈酥’果皮发育前期木质素增量较大,且木质素增量累计比‘砀山酥梨’高12.2%;‘砀山酥梨’和‘锈酥’果皮中PAL、4CL、CAD酶活性均在花后75d达到最大值,而POD酶活性则在花后125d出现高峰;二者果皮中4种酶活性变化趋势基本一致,但‘锈酥’果皮中均相对较高;‘锈酥’果皮中的PAL和4CL酶活性与木质素增量变化均呈显著正相关,而‘砀山酥梨’则未呈现出此规律;在果实生长发育各个时期,‘锈酥’果皮中CCoAOMT相对表达量均高于‘砀山酥梨’。因此推测,‘锈酥’果皮褐色形成与果皮中木质素积累及相关酶活性提高有关,果皮中CCoAOMT的增量表达是‘锈酥’果实褐皮形成的重要原因之一。 展开更多
关键词 果皮颜色 木质素 酶活性 ccoaomt 荧光定量PCR
原文传递
抑制CCoAOMT表达对烟草木质素生物合成的影响 被引量:15
2
作者 刘惠荣 赵华燕 +3 位作者 魏建华 邵金旺 朱至清 宋艳茹 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第8期921-924,共4页
通过农杆菌介导法将毛白杨CCoAOMTcDNA反向导入烟草。PCR、PCR Southern和Northern点杂交检测表明 ,CCoAOMTcDNA已反向整合到烟草基因组中并在转录水平表达。将转基因株系移栽温室 3个月后 ,以Klason法测下部茎木质素含量。与对照相比 ... 通过农杆菌介导法将毛白杨CCoAOMTcDNA反向导入烟草。PCR、PCR Southern和Northern点杂交检测表明 ,CCoAOMTcDNA已反向整合到烟草基因组中并在转录水平表达。将转基因株系移栽温室 3个月后 ,以Klason法测下部茎木质素含量。与对照相比 ,大部分转基因株系木质素含量均有不同程度的下降 ,其中下降最多达 37%,表明抑制植物内源CCoAOMT的表达可有效地降低木质素含量。 展开更多
关键词 抑制 ccoaomt 表达 烟草 木质素 生物合成 毛白杨 环保型制浆树种
在线阅读 下载PDF
Cloning of cDNA Encoding CCoAOMT from Populus tomentosa and Down-regulation of Lignin Content in Transgenic Plant Expressing Antisense Gene 被引量:22
3
作者 魏建华 赵华燕 +2 位作者 张景昱 刘惠荣 宋艳茹 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2001年第11期1179-1183,共5页
cDNA encoding caffeoyl CoA O-methyltransferase (CCoAOMT) from Chinese white poplar ( Populus tomentosa Carr.) was cloned by RT-PCR and sequenced. Northern analysis displayed that the CCoAOMT was expressed specifically... cDNA encoding caffeoyl CoA O-methyltransferase (CCoAOMT) from Chinese white poplar ( Populus tomentosa Carr.) was cloned by RT-PCR and sequenced. Northern analysis displayed that the CCoAOMT was expressed specifically in the developing secondary xylem and its expression was coincident with lignification. The antisense CCoAOMT cDNA was transformed into P. tremula x P. alba mediated by Agrobacterium tumefaciens ( Smith et Townsend) Conn. Transgenic plants were identified with PCR, PCR-Southern and Southern analysis. Lignin content in 5- to 6-month-old transgenic plants was measured. One of the transgenic lines had significant reduction of 17.9% in Klason lignin content as compared with that of untransformed poplar. The results demonstrate that antisense repression of CCoAOMT is an efficient way to reduce lignin content for improving pulping property in engineered trees. 展开更多
关键词 RT-PCR Populus tomentosa ccoaomt antisense RNA LIGNIN
在线阅读 下载PDF
赤桉CCoAOMT亚家族的基因克隆及可变剪接分析 被引量:7
4
作者 谷振军 章怀云 +6 位作者 张党权 谢耀坚 何含杰 陈丽莉 彭宽 刘果 杨丹 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第5期62-69,共8页
通过同源克隆策略和RACE技术获得赤桉CCoAOMT亚家族2个成员的全长cDNA序列。CCoAOMT1基因的全长cDNA序列为1 020 bp,其中可读框ORF长度为738 bp,5’-UTR为106 bp,3’-UTR为176 bp;CCoAOMT2基因的全长cDNA序列为1 047 bp,其中可读框ORF... 通过同源克隆策略和RACE技术获得赤桉CCoAOMT亚家族2个成员的全长cDNA序列。CCoAOMT1基因的全长cDNA序列为1 020 bp,其中可读框ORF长度为738 bp,5’-UTR为106 bp,3’-UTR为176 bp;CCoAOMT2基因的全长cDNA序列为1 047 bp,其中可读框ORF长度为741 bp,5’-UTR为125 bp,3’-UTR为158bp。CCoAOMT1和CCoAOMT2基因都由5个外显子组成,主要的区别在于前者第1个内含子存在5’端可变剪接位点,形成2条不同长度的mRNA,一条的ORF长度为738 bp,而另一条比前者缺失了42 bp,但不影响其余氨基酸的读码框顺序。赤桉CCoAOMT1基因在茎段中可变剪接发生在5—9月间,是桉树一年中树高和直径增长最快的阶段,这个可变剪接可能与组织器官生长发育有关。蛋白质三维结构分析表明,CCoAOMT能形成正确的酶活性中心与底物结合位点。抑制CCoAOMT基因表达,降低桉树木质素对于减少制浆造纸工业污染具有重要意义。 展开更多
关键词 桉树 木质素 ccoaomt亚家族 基因克隆 可变剪接 生物信息学注释
在线阅读 下载PDF
‘砀山酥梨’果实CCoAOMT基因的克隆与表达分析 被引量:7
5
作者 王丹阳 高付永 +4 位作者 孙炜 芮伟康 Khanizadeh Shahrokh 张绍铃 陶书田 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期33-40,共8页
[目的]通过克隆‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri ‘Dangshansuli’)果实中咖啡酰-辅酶AO-甲基转移酶(CCoAOMT)基因的全长序列,并对其进行生物信息学及基因表达差异分析,阐释了其在梨果实木质素合成途径的作用,以期为今后利用基因调... [目的]通过克隆‘砀山酥梨’(Pyrus bretschneideri ‘Dangshansuli’)果实中咖啡酰-辅酶AO-甲基转移酶(CCoAOMT)基因的全长序列,并对其进行生物信息学及基因表达差异分析,阐释了其在梨果实木质素合成途径的作用,以期为今后利用基因调控技术来改变果实中石细胞含量从而改善梨果实品质提供一定的理论依据。[方法]以15年生‘砀山酥梨’果实为试材,根据从NCBI数据库中搜索得到关于植物木质化的CCoAOMT基因序列与梨基因组数据库调取的序列比对,利用RT-PCR技术克隆得到了木质素生物合成途径中的一种关键酶基因PbCCoAOMT,GenBank登录号为KJ577544。[结果]该基因全长1133bp,具有1个744bp的完整开放阅读框(ORF),编码247个氨基酸。序列比对及系统进化树分析表明:CCoAOMT酶是氧甲基转移酶类,与其他植物CCoAOMT编码的蛋白序列有较高的相似性,尤其与枇杷的相似度最高,达到98.79%,且亲缘关系最近。利用荧光定量PCR技术对其在果实不同发育时期表达模式的分析发现,基因表达量呈先上升后下降的趋势,与梨果实中石细胞含量的变化趋势相似。[结论]初步认为从‘砀山酥梨’中克隆得到的PbCCoAOMT基因可能参与了梨果实中木质素的代谢。 展开更多
关键词 砀山酥梨 ccoaomt基因 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
在线阅读 下载PDF
杉木CCoAOMT基因部分cDNA克隆与序列分析 被引量:7
6
作者 蒋向辉 佘朝文 +2 位作者 许栋 张青桦 赵旺 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期24-28,共5页
利用CODEHOP设计CCoAOMT基因的简并引物,通过RT-PCR的方法,从杉木茎段中克隆到1个长度为614 bp的PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,序列通过同源性比对后显示该片段与其它植物的CCoAOMT基因具有较高的同源性.利用生... 利用CODEHOP设计CCoAOMT基因的简并引物,通过RT-PCR的方法,从杉木茎段中克隆到1个长度为614 bp的PCR产物,产物经pMD18-T载体克隆转化至DH5α大肠杆菌中,序列通过同源性比对后显示该片段与其它植物的CCoAOMT基因具有较高的同源性.利用生物信息学方法分析发现,该序列在112-651 bp片段上有一个开放性阅读框,该序列编码的是一个酸性蛋白,亲水性较弱,疏水性较强;信号肽序列为第23位至第45位,二级结构以α-螺旋(40.62%)与不规则盘绕(45.31%)为主,没有发现β转角区域. 展开更多
关键词 生物技术 杉木 ccoaomt基因 CDNA克隆 序列分析
在线阅读 下载PDF
棉花甲基化酶基因COMT和CCoAOMT的组织特异性表达分析 被引量:11
7
作者 吕萌 倪志勇 +3 位作者 王娟 李波 罗淑萍 范玲 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期713-719,共7页
本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(... 本研究利用半定量RT-PCR分析方法探索了陆地棉(Gossypium hirsutum L.)木质素合成途径中甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在不同组织和不同发育时期纤维中的表达情况。结果表明COMT1,COMT2,COMT3和CCoAOMT1,CCoAOMT2在棉花的7个组织器官(根、茎、叶、子叶、花瓣、雄蕊、胚珠)中都有表达,其中COMT1和CCoAOMT1在各组织中的表达趋势类似,COMT2,COMT3和CCoAOMT2表达趋势各异。在5~25d的棉纤维发育过程中,COMT1和COMT3表达稳定,COMT2表达量逐渐增加。而CCoAOMT基因家族的2个基因的表达量变化相对明显,CCoAOMT1在25d出现表达高峰,CCoAOMT2则在10d和15d呈现高表达量。本研究表明甲基化酶基因家族COMT和CCoAOMT在棉花的根,茎等维管组织中具有相对一致的高表达量,而在其他组织和发育纤维中则呈现出明显的组织特异性和纤维发育时期特异性。 展开更多
关键词 陆地棉 咖啡酸-O-甲基转移酶(COMT) 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(ccoaomt) 反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR) 组织特异性表达
在线阅读 下载PDF
利用反义CCoAOMT基因培育低木质素含量毛白杨的研究 被引量:20
8
作者 赵华燕 魏建华 +3 位作者 路静 石超 王宏芝 宋艳茹 《自然科学进展》 北大核心 2004年第9期1067-1071,共5页
以造纸原料树种毛白杨 (Populustomentosa)为研究对象 ,用农杆菌介导法将与木质素合成相关的酶咖啡酰 辅酶A O 甲基转移酶 (CCoAOMT)的反义基因导入毛白杨 ,对影响植株再生和转化率的多种因子进行研究 ,建立了一套较为稳定的遗传转化... 以造纸原料树种毛白杨 (Populustomentosa)为研究对象 ,用农杆菌介导法将与木质素合成相关的酶咖啡酰 辅酶A O 甲基转移酶 (CCoAOMT)的反义基因导入毛白杨 ,对影响植株再生和转化率的多种因子进行研究 ,建立了一套较为稳定的遗传转化再生体系 .转化毛白杨的PCR South ern印迹杂交检测表明 ,反义CCoAOMT基因已整合到毛白杨基因组中 ;RT PCR和Western印迹杂交结果显示 ,内源CCoAOMT基因的表达在转录和翻译水平均受到抑制 .这些转基因毛白杨的Klason木质素含量均有不同程度的降低 .其中木质素含量下降幅度较大的株系 ,伴随其茎杆局部区域明显发红 ,呈条状或斑状分布 .以上结果表明将CCoAOMT基因用于材性改良的研究具有潜在的应用价值 . 展开更多
关键词 毛白杨 ccoaomt 农杆菌转化 转基因 木质素 毛白杨 树种
在线阅读 下载PDF
分离克隆苎麻CCoAOMT基因部分序列 被引量:6
9
作者 陈建荣 张学文 郭清泉 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期787-790,共4页
以苎麻[Boehmeria nivea(L.)Gaud]为材料,研究木质素代谢的关键酶苎麻咖啡酰辅酶A甲基转移酶基因序列。分离了高纯度RNA和DNA。以RNA为模板,用简并引物以RT-PCR的方法,克隆了苎麻CCoAOMT基因cDNA部分序列,长度为486 bp,编码162个氨基酸... 以苎麻[Boehmeria nivea(L.)Gaud]为材料,研究木质素代谢的关键酶苎麻咖啡酰辅酶A甲基转移酶基因序列。分离了高纯度RNA和DNA。以RNA为模板,用简并引物以RT-PCR的方法,克隆了苎麻CCoAOMT基因cDNA部分序列,长度为486 bp,编码162个氨基酸残基。此cDNA序列为苎麻植物中首次克隆的(caffeoyl-CoA 3-O-methyltransferase,CCoAOMT)新基因序列。GenBank注册,登录号为AY651026。以苎麻4个栽培品种基因组DNA为模板,经温度梯度PCR条件优化,获得苎麻CCoAOMT基因的部分基因组序列,GenBank注册号为AY818191(湘苎3号,922 bp)、AY822619(圆麻,915 bp)、AY822620(芦竹青,914 bp)、AY822622(青麻,914 bp)。生物信息学分析结果发现,苎麻4个栽培品种的CCoAOMT基因基因组DNA片段序列有一定的差异。 展开更多
关键词 苎麻[Boehmeria nivea(L.)Gaud] ccoaomt基因 基因克隆
在线阅读 下载PDF
反义CCoAOMT基因调控烟草木质素的生物合成 被引量:10
10
作者 黄春琼 刘国道 郭安平 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第19期8026-8027,8043,共3页
[目的]研究木质素的生物合成及调控,降低木质素的含量或改变其组分。[方法]用农杆菌介导法将苎麻反义CCoAOMT基因导入烟草,采用PCR及Southern印迹对获得的转基因植株进行分子检测,并测定移栽3个月转基因植株Klason木质素及纤维素含量。... [目的]研究木质素的生物合成及调控,降低木质素的含量或改变其组分。[方法]用农杆菌介导法将苎麻反义CCoAOMT基因导入烟草,采用PCR及Southern印迹对获得的转基因植株进行分子检测,并测定移栽3个月转基因植株Klason木质素及纤维素含量。[结果]转基因烟草与野生型对照相比木质素平均含量降低了16.8%,纤维素平均含量升高了15.2%,并且植株生长正常。[结论]抑制植物CCoAOMT表达是反向调控转基因植物木质素生物合成的有效途径。 展开更多
关键词 苎麻 ccoaomt基因 反义RNA转化 木质素
在线阅读 下载PDF
CCoAOMT基因反义表达载体的构建及转化苎麻的研究 被引量:10
11
作者 陈建荣 张学文 +2 位作者 郭清泉 唐香山 杨友才 《晓庄学院自然科学学报》 EI CAS 北大核心 2005年第1期75-78,共4页
 采用RT PCR的方法,克隆烟草木质素合成关键酶咖啡酰甲基转移酶(CCoAOMT)基因并测序.构建CCoAOMT基因反义表达载体,通过农杆菌介导法对苎麻进行遗传转化,得到转基因植株.采用PCR方法对其进行分子检测.为利用基因工程技术,创造适合我国...  采用RT PCR的方法,克隆烟草木质素合成关键酶咖啡酰甲基转移酶(CCoAOMT)基因并测序.构建CCoAOMT基因反义表达载体,通过农杆菌介导法对苎麻进行遗传转化,得到转基因植株.采用PCR方法对其进行分子检测.为利用基因工程技术,创造适合我国国情的环保型低木质素苎麻转基因新品种奠定了基础. 展开更多
关键词 ccoaomt 反义表达载体 苎麻 构建 RT-PCR 农杆菌介导法 基因工程技术 甲基转移酶 木质素合成 PCR方法 转基因植株 遗传转化 分子检测 关键酶 新品种 环保型 烟草
在线阅读 下载PDF
苎麻CCoAOMT基因cDNA反义转化模式烟草‘WS38’ 被引量:2
12
作者 陈婕 邓晶 +2 位作者 陈建荣 徐磊 张学文 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1558-1562,共5页
苎麻咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(CCoAOMT)是其木质素合成过程的一种关键酶,运用克隆的该酶基因cDNA及植物表达载体pBI121、pWM101,分别构建了35S启动子控制的苎麻CCoAOMT基因反义cDNA基因质粒(pBI121-antiBnCCoAOMT)和cDNA全长表达质粒(pW... 苎麻咖啡酰辅酶A氧甲基转移酶(CCoAOMT)是其木质素合成过程的一种关键酶,运用克隆的该酶基因cDNA及植物表达载体pBI121、pWM101,分别构建了35S启动子控制的苎麻CCoAOMT基因反义cDNA基因质粒(pBI121-antiBnCCoAOMT)和cDNA全长表达质粒(pWM101-BnCCoAOMT),并通过根癌农杆菌介导法将其转化至模式烟草WS38,获得了转基因烟草.对转基因植株进行分子分析和组织学初步研究表明,转反义RNA基因植株叶柄木质素含量较野生烟草或转正义基因烟草叶柄木质素含量降低.说明运用反义RNA技术对CCoAOMT基因的表达进行基因工程调控,一定程度上可以对木质素的合成产生干扰,为获得低木质素或木质素组分改良的苎麻基因工程奠定基础. 展开更多
关键词 苎麻(Boehmerianivea) ccoaomt CDNA 反义RNA转化
在线阅读 下载PDF
茶树CCoAOMT基因克隆及启动子的结构分析 被引量:2
13
作者 林海燕 罗勇 +5 位作者 陈丝 禹双双 曾泽媛 刘仲华 王坤波 黄建安 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1804-1813,共10页
茶树咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)是甲基化EGCG生物合成的一种重要酶,为探明CCoAOMT基因的表达调控规律,进一步解析甲基化EGCG生物合成的调控机制。本研究采用同源克隆法获得了茶树CCoAOMT的cDNA全长序列,采用染色体步移技术(Geno... 茶树咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)是甲基化EGCG生物合成的一种重要酶,为探明CCoAOMT基因的表达调控规律,进一步解析甲基化EGCG生物合成的调控机制。本研究采用同源克隆法获得了茶树CCoAOMT的cDNA全长序列,采用染色体步移技术(Genome walking)获得了该基因的启动子序列,并对其序列进行了生物信息学分析。结果表明,CCo AOMT全长cDNA为1 000 bp,其中开放阅读框长735 bp,编码245个氨基酸,含有caffeoyl-CoA O-methyltransferase和SAM功能结构域;进一步分离得到CCoAOMT基因上游调控序列1 624 bp,发现其含启动子核心元件TATA-box、CAAT-box及5'UTR Py-rich stretch (高水平转录顺式作用元件)、MYB (干旱诱导时的MYB结合位点)、G-box、GAG-motif、GATA-motif、GT1-motif、Sp1 (光响应元件)、CGTCA-motif、TGACG-motif (茉莉酸甲酯响应元件)等重要顺式作用元件。由结果推测,CCoAOMT基因在转录水平受各类转录因子的调控,该结论为进一步研究CCoAOMT基因的转录调控机制提供了理论指导。 展开更多
关键词 茶树 ccoaomt 基因克隆 启动子
原文传递
反义CCoAOMT基因转化烟草调控木质素生物合成 被引量:3
14
作者 王玲 田敏 +1 位作者 段红平 彭芳 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2011年第2期62-64,共3页
通过农杆菌介导法将美洲黑杨CCoAOMT cDNA反向导入烟草,获得一批转基因抗性植株。经PCR检测,证明CCoAOMT基因已成功反义转入到烟草植株中。通过对转基因植株和对照植株木质素含量的对比分析,大部分转基因株系木质素含量均有不同程度下降... 通过农杆菌介导法将美洲黑杨CCoAOMT cDNA反向导入烟草,获得一批转基因抗性植株。经PCR检测,证明CCoAOMT基因已成功反义转入到烟草植株中。通过对转基因植株和对照植株木质素含量的对比分析,大部分转基因株系木质素含量均有不同程度下降,下降最多的达9.2%。 展开更多
关键词 ccoaomt基因 木质素 烟草
在线阅读 下载PDF
杉木CCoAOMT蛋白的生物信息学分析与同源模建 被引量:5
15
作者 周猛 洑香香 +3 位作者 童春发 施季森 杨立伟 王桂凤 《生物信息学》 2008年第2期62-64,74,共4页
利用生物信息学方法分析了杉木CCoAOMT蛋白的氨基酸组成、等电点、疏水/亲水区、二级结构等蛋白质性质,并同欧洲云杉、拟南芥和水稻的蛋白进行了对比,并用生物信息学软件对其空间结构进行了模拟,同时对模建结果进行了结构质量的分析与... 利用生物信息学方法分析了杉木CCoAOMT蛋白的氨基酸组成、等电点、疏水/亲水区、二级结构等蛋白质性质,并同欧洲云杉、拟南芥和水稻的蛋白进行了对比,并用生物信息学软件对其空间结构进行了模拟,同时对模建结果进行了结构质量的分析与检测。结果表明:该蛋白共有255个氨基酸,等电点为5.56,二级结构中α螺旋占37.65%,β折叠片占19.61%,无规卷曲占42.75%。三维结构检测表明此模型的结构符合立体化学规则。 展开更多
关键词 杉木 ccoaomt蛋白 生物信息学 同源模建
在线阅读 下载PDF
巨龙竹木质素合成关键基因CCoAOMT的克隆及表达分析 被引量:2
16
作者 陈凌娜 郭晓娟 杨汉奇 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期476-484,共9页
咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT,caffeoyl-CoA O-methyltransferase)是木质素合成过程中关键酶之一。研究通过逆转录PCR(RT-PCR)从巨龙竹(Dendrocalamus sinicus L.C.Chia&J.L.Sun)发育早期的竹笋中克隆了CCoAOMT基因(DsCCoAOMT)... 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT,caffeoyl-CoA O-methyltransferase)是木质素合成过程中关键酶之一。研究通过逆转录PCR(RT-PCR)从巨龙竹(Dendrocalamus sinicus L.C.Chia&J.L.Sun)发育早期的竹笋中克隆了CCoAOMT基因(DsCCoAOMT),基因全长cDNA序列为777 bp,编码258个氨基酸,理论分子量28.85 kD,等电点为5.35,蛋白质结构预测的结果显示该蛋白含有丰富的α-螺旋和无规则卷曲。系统进化分析表明,巨龙竹CCoAOMT基因与禾本科植物CCoAOMT基因同源性最高,亲缘关系最近;与非禾本科单子叶植物的亲缘关系次之,然后是裸子植物,与双子叶植物的亲缘关系最远,说明CCoAOMT基因在双子叶植物和单子叶植物之间的差异可能在被子植物进化之前就已经存在。DsCCoAOMT基因密码子偏好性分析的结果显示,该基因选择偏性较强且偏好以G/C结尾;密码子使用频率比较结果发现,DsCCoAOMT基因在微生物中异源表达分析时采用酵母表达系统更为合适,而模式植物拟南芥、烟草、番茄与巨龙竹CCoAOMT密码子使用频率差异较小,尤其烟草、番茄可能是该基因进行转基因功能验证时最为理想的受体。实时荧光定量PCR分析巨龙竹不同组织及竹笋发育过程中DsCCoAOMT基因表达水平的结果显示,该基因在巨龙竹不同组织中的表达具有明显差异,竹笋中表达量最高,茎秆中次之,叶片中最少;随着竹笋的发育,DsCCoAOMT基因的表达量上调并在竹笋发育中期维持较高水平,表明DsCCoAOMT基因可能在巨龙竹快速生长中发挥重要调节作用。本研究的结果为进一步阐明DsCCoAOMT基因的功能和作用机制奠定了基础。 展开更多
关键词 巨龙竹 ccoaomt 基因克隆 生物信息学分析 基因表达
原文传递
白桦反义CCoAOMT基因调控木质素生物合成 被引量:5
17
作者 姚连梅 胡晓晴 +3 位作者 周菲 郑要强 王国东 刘雪梅 《植物研究》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期123-130,共8页
白桦是我国北方重要的造林树种,但其中的高木质素含量严重制约了它作为造纸资源植物的开发利用。本文利用RACE技术获得了白桦咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因全长ORF序列,并构建了白桦CCoAOMT基因的反义表达载体,通过农杆菌介... 白桦是我国北方重要的造林树种,但其中的高木质素含量严重制约了它作为造纸资源植物的开发利用。本文利用RACE技术获得了白桦咖啡酰辅酶A-3-O-甲基转移酶(CCoAOMT)基因全长ORF序列,并构建了白桦CCoAOMT基因的反义表达载体,通过农杆菌介导法将其导入到白桦中。PCR检测表明反义CCoAOMT基因已整合到白桦的基因组中。对转化植株的半定量PCR检测显示转基因株系的CCoAOMT基因表达量下降;Wiesner染色发现,与野生型相比,转基因植株木质素含量有所下降。对七年生的转基因白桦和野生型对照进行了化学成分分析,结果表明转基因白桦的苯醇抽提物和Klason木质素显著减少,聚戊糖含量升高。上述结果暗示BpCCoAOMT基因参与白桦木质素的合成,反义表达该基因后木质素含量减少,更易于去除。白桦CCoAOMT基因对木质素的合成起重要作用,这为培育低木质素含量的制浆新品种白桦奠定了基础。 展开更多
关键词 ccoaomt基因 反义RNA 白桦 木质素 Wiesner染色 转基因
在线阅读 下载PDF
青杨CCoAOMT基因的克隆及其生物信息学分析 被引量:4
18
作者 刘红梅 胡尚连 +2 位作者 卢学琴 曹颖 任鹏 《湖北农业科学》 北大核心 2014年第11期2670-2674,共5页
以一年生青杨(Populus cathayana Rehd.)嫩茎为试材,利用RT-PCR技术克隆青杨CCoAOMT基因,并对其进行生物信息学分析。结果表明,该基因cDNA序列全长为747 bp,是一个编码248个氨基酸的多肽,蛋白分子量为27.67 kD,等电点为5.19,将该基因命... 以一年生青杨(Populus cathayana Rehd.)嫩茎为试材,利用RT-PCR技术克隆青杨CCoAOMT基因,并对其进行生物信息学分析。结果表明,该基因cDNA序列全长为747 bp,是一个编码248个氨基酸的多肽,蛋白分子量为27.67 kD,等电点为5.19,将该基因命名为PcCCoAOMT,其编码的蛋白质为是亲水性蛋白质;氨基酸序列和结构分析表明,CCoAOMT有一个保守区域;系统进化分析表明,PcCCoAOMT与毛果杨的PtCCoAOMT基因具有很高的同源性(87%),该基因功能可能与青杨木质素的生物合成有关。 展开更多
关键词 青杨(Populus cathayana Rehd ) ccoaomt基因 克隆 生物信息学
在线阅读 下载PDF
光皮桦BlCCoAOMT基因的克隆、表达及单核苷酸变异分析 被引量:4
19
作者 俞子承 倪飞 +3 位作者 江成 黄华宏 林二培 童再康 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期870-879,共10页
咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)是植物木质素合成过程中的一个关键酶,对木质素组成和结构有重要的作用。为探究BlCCoAOMT基因在木质素合成中的作用,本研究从光皮桦中克隆了该基因,并分析其基因结构和表达模式,以及在73个基因型中的... 咖啡酰辅酶A-O-甲基转移酶(CCoAOMT)是植物木质素合成过程中的一个关键酶,对木质素组成和结构有重要的作用。为探究BlCCoAOMT基因在木质素合成中的作用,本研究从光皮桦中克隆了该基因,并分析其基因结构和表达模式,以及在73个基因型中的单核苷酸多态性(SNP)。结果表明,BlCCoAOMT基因cDNA全长1 114 bp,含有一个744 bp的完整ORF,编码一个由247个氨基酸残基组成的蛋白;该编码蛋白包含高等植物CCoAOMT所有的8个典型保守基序。BlCCoAOMT在木质化茎段中优势表达,且随着木质化程度提高而逐渐增强,表明BlCCoAOMT可能参与光皮桦木质素的生物合成;在拉弯处理的6 h到7 d间,该基因在应拉区发育木质部中的表达显著下调,与应拉木木质素含量的下降相符。共检测到BlCCoAOMT基因有119个SNP位点,平均每14 bp就有1个SNP位点,其中在外显子区域存在26个SNP位点,表明不同基因型中存在丰富SNP变异;在不同群体间BlCCoAOMT基因的分化程度无显著差异,且非同义突变和同义突变的位点的比值均小于1,表明在演化进程中主要受到了纯化选择压力。本研究结果为深入解析光皮桦木质素合成分子机制及后续分子标记辅助育种提供了理论依据。 展开更多
关键词 光皮桦 ccoaomt基因 基因克隆 表达模式 单核苷酸多态性
在线阅读 下载PDF
珙桐DiCCoAOMT1基因的克隆及生物信息学分析 被引量:3
20
作者 吴小波 李梅 +4 位作者 李萌 董旭杰 彭继庆 胥雯 曹福祥 《中南林业科技大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第7期96-102,共7页
种子休眠期长是导致珙桐自然繁殖力低下的重要原因之一。珙桐内果皮在发育后期快速木质化形成坚硬而致密的结构,可能是决定种子休眠时间的重要因素,而这一过程的调控机制尚不明确。本研究小组前期通过对珙桐内果皮发育的4个时期进行转... 种子休眠期长是导致珙桐自然繁殖力低下的重要原因之一。珙桐内果皮在发育后期快速木质化形成坚硬而致密的结构,可能是决定种子休眠时间的重要因素,而这一过程的调控机制尚不明确。本研究小组前期通过对珙桐内果皮发育的4个时期进行转录组测序,发现CCo AOMT基因家族与内果皮快速木质化关系密切。本研究从转录组中筛选到11个珙桐CCo AOMT基因家族基因,并利用生物信息学方法对筛选到的基因进行表达模式、序列特征、细胞定位和系统进化分析。分析显示,11个珙桐CCo AOMT基因根据表达模式可分为2种类型,筛选其中6个表达差异显著的CCo AOMT基因进一步分析其表达规律,最后确定其中差异表达最显著的Cluster-149.63013序列进行克隆及生物信息学分析。结果表明,该基因开放阅读框全长为744 bp,编码247个氨基酸,其氨基酸序列含有植物甲基化酶所共有的A、B、C基序及CCo AOMT蛋白特有的标志性序列D、E、F、G和H,其氨基酸序列与辣椒的CCo AOMT蛋白同源性最高,将其命名为Di CCo AOMT1。本研究克隆得到的Di CCo AOMT1基因可能是珙桐内果皮木质素快速积累的关键调控基因。 展开更多
关键词 珙桐 ccoaomt基因 木质素 种子休眠
在线阅读 下载PDF
上一页 1 2 下一页 到第
使用帮助 返回顶部