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Neuropilin-1对急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞生物学特征的影响 被引量:3
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作者 刘宇宏 曹慧琴 +1 位作者 刘卉 李晓勇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第21期2623-2627,共5页
目的:探究神经菌毛素-1(NRP-1)对急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞的生物学特征的影响。方法:分别采用以下两种方法(构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株或使用NRP-1单克隆抗体)抑制NRP-1功能,通过对比抑制NRP-1功能后CCRF-CEM细胞株与正常CCRF-... 目的:探究神经菌毛素-1(NRP-1)对急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞的生物学特征的影响。方法:分别采用以下两种方法(构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株或使用NRP-1单克隆抗体)抑制NRP-1功能,通过对比抑制NRP-1功能后CCRF-CEM细胞株与正常CCRF-CEM细胞株,确定NRP-1对CCRF-CEM细胞的生物学特性的影响。结果:成功构建NRP-1敲低CCRF-CEM细胞株(NRP-1-shRNA)。两种方法抑制NRP-1功能后,细胞的增殖、迁移能力均显著降低,而细胞凋亡及对化疗药物的敏感性增加。结论:NRP-1可促进急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞增殖和细胞迁移能力,抑制细胞的凋亡和降低细胞的化疗敏感性。 展开更多
关键词 神经菌毛素-1 急性淋巴细胞白血病 ccrf-cem细胞 生物学特性
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紫杉醇诱导的人白血病CCRF-CEM多药耐药细胞模型的建立 被引量:3
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作者 朱金武 关勇彪 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期134-139,共6页
目的建立稳定的紫杉醇(paclitaxel)诱导的人肿瘤多药耐药细胞系,并对其生物学特点进行评价。方法用亚致死浓度(1/50IC50值)的紫杉醇连续诱导对化疗药物敏感的人急性T淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞,使其成为对紫杉醇耐药的CCRF-CEM/paclita... 目的建立稳定的紫杉醇(paclitaxel)诱导的人肿瘤多药耐药细胞系,并对其生物学特点进行评价。方法用亚致死浓度(1/50IC50值)的紫杉醇连续诱导对化疗药物敏感的人急性T淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞,使其成为对紫杉醇耐药的CCRF-CEM/paclitaxel细胞,同时观察CCRF-CEM/paclitaxel细胞对柔红霉素(daunorubicin)和长春碱(vinblastine)的交叉耐药;用相应的单抗和FITC标记的二抗与细胞孵育后,用流式细胞仪分别检测细胞表面和细胞总P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白1(MRP1)和肺癌耐药相关蛋白(LRP)等表达水平的变化,并用流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率的变化。结果CCRF-CEM/paclitaxel细胞传至第90代时,对紫杉醇产生了耐药,耐药倍数约为256.4倍;同时对柔红霉素和长春碱也产生了耐药,耐药倍数约为9.8和2.0倍。与CCRF-CEM细胞比较,CCRF-CEM/paclitaxel细胞表面P-gp和细胞总P-gp表达分别升高了18.8和14.4倍,MRP1和LRP分别升高了2.1和1.2倍;S期细胞比例由(48.3±1.2)%降低至(23.8±0.5)%,细胞凋亡百分率由(7.82±0.19)%减少至(2.47±0.37)%。结论成功建立了稳定的紫杉醇诱导的人CCRF-CEM/paclitaxel多药耐药细胞模型,该模型具有一般肿瘤多药耐药细胞的生物学特点。 展开更多
关键词 紫杉醇 ccrf-cem细胞 抗药性 肿瘤 P糖蛋白 多药耐药相关蛋白质类 肺癌耐药相关蛋白
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氨甲喋呤对映体体外诱导BALL-1和CCRF-CEM细胞系蛋白质表达差异
3
作者 陈洋 王慧茹 沈佐君 《临床检验杂志》 CAS CSCD 2018年第11期850-853,共4页
目的探讨氨甲喋呤对映体(methotrexate,MTX)体外诱导急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞系BALL-1和CCRF-CEM蛋白质表达的差异性。方法通过浓度递增及低剂量持续性诱导构建耐受30μmol MTX对映体[L-(+)-MTX和D-(-... 目的探讨氨甲喋呤对映体(methotrexate,MTX)体外诱导急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)细胞系BALL-1和CCRF-CEM蛋白质表达的差异性。方法通过浓度递增及低剂量持续性诱导构建耐受30μmol MTX对映体[L-(+)-MTX和D-(-)-MTX]的CCRF-CEM和BALL-1细胞系。提取耐药细胞、非耐药细胞及不加药时两种细胞的总蛋白质,利用双向凝胶电泳技术获得亲本细胞和耐药细胞的电泳结果,选择差异倍数在2倍以上且边界比较清晰的蛋白质点,经胶内原位酶解,用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)测定肽质量指纹图(PMF),将所得的结果进行生物学信息分析。结果共发现12个蛋白质点有生物学功能,包括4个热休克相关蛋白(HPSA5、HPSA8、HSPD1和DNAJA1/4)、5个与细胞增殖有关联的蛋白质(PCNA、NPM1、CORO1A、CALR和DYNC1I2)以及2个分子伴侣相关蛋白(CCT6A/B和VCP),另1个蛋白质为EON1/2,并证实其与细胞的新陈代谢有关联。结论 MTX对映体诱导耐药后细胞系蛋白质表达发生变化,可能在耐药过程中具有重要的作用。 展开更多
关键词 MTX对映体 BALL-1 ccrf-cem 双向电泳
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A New Diterpene Extracted from Daphne Mucronata, Effects on Human K562 and CCRF-CEM Cell Lines 被引量:2
4
作者 Mehdi Hedayati Razieh Yazdanparast +2 位作者 Marjan Zarif Yeganeh Laleh Hoghooghi Rad Fereidoun Azizi 《Journal of Cancer Therapy》 2011年第1期71-75,共5页
Background: Daphne Mucronata extract has a decreasing effect on the size of breast adenocarcinoma in rats. So in this study, the effect of Daphne Mucronata purified diterpene were investigated on co culture of human m... Background: Daphne Mucronata extract has a decreasing effect on the size of breast adenocarcinoma in rats. So in this study, the effect of Daphne Mucronata purified diterpene were investigated on co culture of human monocytes and two human leukemia cell lines (K562, CCRF-CEM). Materials and Methods: Each cell line mono-layer culture, in log phase growth, was treated with 10 to 160 μL of the extract (1 g/ml leave powder) and purified compound (0.94 nM). For a comparative study, Taxol (5 to 40 μM) was used in the presence and absence of LPS. Human monocytes were isolated by adhesion method. TNF-α in cultured media were measured by sensitive biotin-streptoavidin ELISA method. Results: Fifty percent of growth inhibition was shown by 160 μL (1:100 dilution, 0.5 g of the powdered leaves/ml) of the extract and 0.94 nM of the purified component, and there was more inhibition in K562 cells (P < 0.05). Four fold increases in growth inhibition was shown in co culture of isolated human monocytes and leukemia cell lines. There was a direct relationship between monocytes TNF-α secretion and growth inhibition degree. Conclusion: Daphne Mucronata extract and its purified diterpene through increasing monocytes TNF-α releasing, potentially inhibit Leukemia cell line. 展开更多
关键词 TNF-Α LEUKEMIA DAPHNE Mucronata K562 ccrf-cem
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WWOX基因对人急性淋巴细胞性白血病细胞CCRF-CEM细胞凋亡及细胞周期的影响
5
作者 张丽娜 李明会 +2 位作者 周健 魏旭东 宋永平 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第15期2341-2345,共5页
目的:研究WWOX基因对人急性淋巴细胞性白血病细胞CCRF-CEM细胞凋亡及细胞周期的影响及分子机制。方法:体外培养CCRF-CRM细胞系,将WWOX基因转染入CCRF-CEM细胞,建立高表达WWOX的CCRF-CEM细胞,流式细胞仪法测定CCRF-CEM细胞的细胞周期和凋... 目的:研究WWOX基因对人急性淋巴细胞性白血病细胞CCRF-CEM细胞凋亡及细胞周期的影响及分子机制。方法:体外培养CCRF-CRM细胞系,将WWOX基因转染入CCRF-CEM细胞,建立高表达WWOX的CCRF-CEM细胞,流式细胞仪法测定CCRF-CEM细胞的细胞周期和凋亡,Western blot法测定WWOX基因、细胞周期和凋亡相关因子的蛋白表达,qRT-PCR法测定caspase-3的mRNA表达。结果:与对照组和空白质粒组相比,转染入WWOX的CCRF-CEM细胞的WWOX蛋白表达显著增加,G_0/G_1期的细胞比例显著增加,凋亡细胞比例显著增加;CCRF-CEM细胞中cyclin D1、cyclin E、CDK2的蛋白表达显著降低而Wnt-5α和JNK的蛋白表达显著增加,caspase-3的mRNA表达促进CCRF-CEM细胞的凋亡。结论:WWOX基因在急性淋巴细胞性白血病CCRF-CEM细胞中发挥抑癌基因作用,可以有效促进细胞凋亡并抑制细胞周期进程。 展开更多
关键词 WWOX ccrf-cem细胞 急性淋巴细胞性白血病 凋亡 细胞周期
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Cancerous multi-drug resistance is reduced by Leptomycin B treatment in CCRF-CEM/Taxol cellsCancerous multi-drug resistance is reduced by Leptomycin B treatment in CCRF-CEM/Taxol cells
6
作者 Jin-Wu Zhu Yong-Xiang Zhang Yong-Biao Guan 《Health》 2012年第10期845-855,共11页
Objectives: Multi-drug resistance (MDR) to chemotherapy remains a major obstacle to overcome in the successful treatment of patients with cancers. It was recently discovered that Leptomycin B (LMB) reduces the paclita... Objectives: Multi-drug resistance (MDR) to chemotherapy remains a major obstacle to overcome in the successful treatment of patients with cancers. It was recently discovered that Leptomycin B (LMB) reduces the paclitaxel-induced MDR in CCRF-CEM/Taxol cells. However, the mechanism remains unclear. Here we sought to explore the mechanism of LMB to reduce the MDR induced by paclitaxel. Results: LMB has remarkable cytotoxic effects in both sensitive CCRF-CEM and resistant CCRF-CEM/Taxol cell lines. The paclitaxel-induced MDR was reduced by 0.013 μm of LMB. Lower concentration of LMB regulated cell cycle progress, in situ expressions of P-gp, MRP1, and LRP, expression of CRM1, and localization of P-gp and CRM1 in CCRF-CEM/taxol cells. Study Design: Cytotoxicity of LMB on cancerous cell lines was determined by MTT assay. Cell cycle progress and in situ expressions of P-gp, MRP1, and LRP were analyzed by flow cytometry. Expression of CRM1 in the cells was examined by Western blot. And co-localization between P-gp and CRM1 was determined by laser confocal microscopy. Conclusion: The paclitaxel-induced MDR of CCRFCEM/Taxol cells was reduced by lower concentration of LMB. The mechanisms might be related to decreasing in situ expression of drug transporter proteins, promoting cell cycle progress, and altering co-localization between P-gp and CRM1 in the resistant cells. 展开更多
关键词 Leptomycin B ccrf-cem Multi-Drug Resistance CRM1 PACLITAXEL
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人参皂苷rg5通过调节PI3K信号通路抑制急性白血病细胞的生长 被引量:1
7
作者 桂长清 许力 马娜 《齐齐哈尔医学院学报》 2025年第4期317-320,共4页
目的 探讨人参皂苷rg5(G-rg5)抗T细胞急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞的作用及机制。方法 采用CCK8法检测不同浓度G-rg5对CCRF-CEM细胞的增殖抑制作用,采用流式细胞术分析G-rg5对CCRF-CEM细胞的细胞凋亡的影响;通过Western blot检测G-rg... 目的 探讨人参皂苷rg5(G-rg5)抗T细胞急性淋巴细胞白血病CCRF-CEM细胞的作用及机制。方法 采用CCK8法检测不同浓度G-rg5对CCRF-CEM细胞的增殖抑制作用,采用流式细胞术分析G-rg5对CCRF-CEM细胞的细胞凋亡的影响;通过Western blot检测G-rg5对CCRF-CEM细胞PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白的表达。结果 CCK-8增殖试验显示,细胞活力随着G-rg5浓度的增高而降低。细胞凋亡率随着用药浓度的增加而增加。G-rg5处理的CCRF-CEM细胞P-PI3K、P-AKT、P-mTOR蛋白表达显著降低,BCL-2下调明显,BAX上调,Bcl-2/BAX比值下降,而非磷酸化的PI3K、AKT和mTOR蛋白未发现显著变化。结论 研究表明,G-rg5可以抑制ALL细胞的增殖,诱导细胞凋亡,这可能受到PI3K信号通路的调控。G-rg5可能是临床ALL治疗的潜在药物。 展开更多
关键词 ccrf-cem细胞 人参皂苷-Rg5 凋亡 PI3K/AKT/mTOR通路
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氨甲喋呤对映体对急性淋巴细胞白血病的不同抑制效应 被引量:1
8
作者 张培 索美芳 +2 位作者 陈洋 何晓东 沈佐君 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期378-381,共4页
目的探讨氨甲喋呤单体[L-(+)MTX、D-(-)MTX]及其不同比例对映体混合体[(±)MTX,D∶L=1∶9-9∶1]对急性淋巴细胞白血病细胞系(BALL-1、CCRF-CEM)抑制作用的差异。方法用氨甲喋呤单体及其混合体作用于BALL-1和CCRF-CEM细胞,... 目的探讨氨甲喋呤单体[L-(+)MTX、D-(-)MTX]及其不同比例对映体混合体[(±)MTX,D∶L=1∶9-9∶1]对急性淋巴细胞白血病细胞系(BALL-1、CCRF-CEM)抑制作用的差异。方法用氨甲喋呤单体及其混合体作用于BALL-1和CCRF-CEM细胞,MTT比色法分析其细胞增殖抑制率;荧光显微镜观察细胞形态学变化;碘化丙啶(PI)单染流式细胞术检测细胞周期;DNA梯度电泳检测其细胞凋亡水平。结果与对照组相比,MTX对映体对BALL-1、CCRF-CEM细胞的抑制生长呈现浓度和时间依赖性,其抑制强度依次为(±)MTX(D∶L=1∶9-2∶8)〉L-(+)MTX〉D-(-)MTX;细胞周期出现S期的阻滞,DNA梯度电泳检测出现凋亡条带;亲本BALL-1、L-(+)MTX/BALL-1、D-(-)MTX/BALL-1间差异有统计学意义(P〈0.01)。亲本CCRF-CEM、L-(+)MTX/CCRF-CEM、D-(-)MTX/CCRF-CEM的细胞周期间差异亦有统计学意义(P〈0.01)。结论 MTX对映体对BALL-1、CCRF-CEM细胞的增殖抑制作用具有化学结构的立体选择性。 展开更多
关键词 氨甲喋呤 对映体 BALL-1细胞 ccrf-cem细胞
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Aptamer-based and DNAzyme-linked colorimetric detection of cancer cells 被引量:2
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作者 Xiaoli Zhu Ya Cao +1 位作者 Zhiqiang Liang Genxi Li 《Protein & Cell》 SCIE CSCD 2010年第9期842-846,共5页
This paper reports a novel method to detect human leukemic lymphoblasts(CCRF-CEM cells).While the aptamer of the cancer cells was employed as the recognition element to target cancer cells,peroxidaseactive DNAzyme was... This paper reports a novel method to detect human leukemic lymphoblasts(CCRF-CEM cells).While the aptamer of the cancer cells was employed as the recognition element to target cancer cells,peroxidaseactive DNAzyme was used as the sensing element to produce catalysis-induced colorimetric signals.The elegant architecture integrating the aptamer and DNAzyme made it feasible to detect cancer cells easily and rapidly by the color change of the substrate for DNAzyme.Experimental results showed that 500 cells can well indicate the cancer,while as control,250,000 Islet Island Beta cells only show tiny signals,suggesting that the method proposed in this paper has considerable sensitivity and selectivity.Furthermore,since it does not require expensive apparatus,or modification or label of DNA chains,the method we present here is also costeffective and conveniently operated,implying potential applications in future cancer diagnosis. 展开更多
关键词 ccrf-cem acute leukemia cells APTAMER DNAZYME COLORIMETRY
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