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CCDC67基因mRNA在甲状腺乳头状癌中的表达及临床意义 被引量：7
1
作者 殷德涛 许建辉 +4 位作者 王勇飞 李红强 张艳 江金花 王庆端 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第30期2382-2385,共4页
目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）及癌旁组织中CCDC67基因转录水平的差异及其与PTC临床病理特征的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测了48例PTC及其相对应的癌旁组织中CCDC67的转录情况;同时对甲状腺癌细胞系（TPC-1、... 目的 探讨甲状腺乳头状癌（PTC）及癌旁组织中CCDC67基因转录水平的差异及其与PTC临床病理特征的关系.方法 采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法,检测了48例PTC及其相对应的癌旁组织中CCDC67的转录情况;同时对甲状腺癌细胞系（TPC-1、SW579）CCDC67基因的转录进行了检测.结果 在TPC-1、SW579细胞系中,CCDC67mRNA表达均缺失.癌旁组织中均出现CCDC67mRNA的表达（100.0％,48/48）,而在PTC中CCDC67基因mRNA表达明显下降为39.6％（19/48） （P＜0.05）.在PTC中,Ⅰ～Ⅱ期与Ⅲ～Ⅳ期的CCDC67mRNA表达率分别为60％ （12/20）、25％ （7/28）;在有淋巴结转移的PTC中CCDC67mRNA的表达率为24.1％ （7/29）,在无淋巴结转移的PTC中CCDC67mRNA的表达率为63.2％ （12/19）;在病理分级Ⅰ级和Ⅱ级中,CCDC67mRNA的表达率分别为61.1％（11/18）和26.7％（8/30）.以上各组中差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 CCDC67mRNA表达的异常可能是引起CCDC67失活的原因,并可能与PTC的发生、发展及转移有关. 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤 癌 乳头状 ccdc67 RT-PCR
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CCDC67基因慢病毒表达载体的构建及鉴定 被引量：1
2
作者 殷德涛 许建辉 +4 位作者 王勇飞 李红强 张艳 江金花 王庆端 《中华内分泌外科杂志》 CAS 2015年第1期30-33,共4页
目的 构建CCDC67基因慢病毒表达载体，为后续转染目的细胞奠定基础，并实现在细胞中高效、稳定表达。方法 从含有CCDC67基因的cDNA文库中，利用PCR方法钓取CCDC67基因编码区片段。将目的基因与酶切载体pGV-208进行定向连接，其产物转化... 目的 构建CCDC67基因慢病毒表达载体，为后续转染目的细胞奠定基础，并实现在细胞中高效、稳定表达。方法 从含有CCDC67基因的cDNA文库中，利用PCR方法钓取CCDC67基因编码区片段。将目的基因与酶切载体pGV-208进行定向连接，其产物转化细菌感受态细胞。对长出的克隆先进行菌落PCR鉴定，再对PCR鉴定阳性的克隆进行测序和比对分析，对比正确的克隆即为构建成功的目的质粒。将构建成功的目的质粒和两种辅助包装质粒共转染293T细胞，包装成慢病毒，在荧光显微镜下观察慢病毒转染293T细胞后荧光表达情况。采用Western blot检测CCDC67及绿色荧光蛋白融合蛋白表达情况。结果 PCR产物经电泳分析表明成功获取CCDC67基因cDNA克隆，测序结果显示慢病毒转染质粒连接构建正确。荧光表达检测显示293T细胞中产生慢病毒颗粒，Western blot显示CCDC67在细胞内稳定表达。结论 成功构建CCDC67基因慢病毒表达载体，为后续转染目的细胞后从分子水平探讨CCDC67基因功能奠定了实验基础。 展开更多
关键词 ccdc67 293T细胞 慢病毒载体
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