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CBM2蛋白的高密度自诱导
被引量:
6
1
作者
马闪闪
韩来闯
+2 位作者
刘亚娟
刘猛
刘亮伟
《中国农学通报》
2015年第18期140-145,共6页
为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3)E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果。ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTG LB培养基菌体的4.4倍。SDS-PAGE显示200μL ZYM-5052菌体细...
为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3)E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果。ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTG LB培养基菌体的4.4倍。SDS-PAGE显示200μL ZYM-5052菌体细胞含有82.3μg CBM2,占细胞总蛋白55.3%;等量IPTG LB菌体细胞含有16.6μg CBM2,占细胞总蛋白25.7%。取不同培养时间等量等同OD600的ZYM-5052菌体进行SDS-PAGE,结果显示单位细胞中蛋白量随着培养时间而增加。所以高密度自诱导不仅提高了细胞生长密度、而且提高了单位细胞中蛋白表达量。自诱导方案用于表达葡聚糖酶,与IPTG LB菌体相比,自诱导菌体OD600是其2.3倍,酶活性是其4.5倍。该研究为提高外源蛋白表达量提供了较为简单、普适的高密度自诱导方案。
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关键词
cbm2
高密度
自诱导
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职称材料
题名
CBM2蛋白的高密度自诱导
被引量:
6
1
作者
马闪闪
韩来闯
刘亚娟
刘猛
刘亮伟
机构
河南农业大学生命科学学院
出处
《中国农学通报》
2015年第18期140-145,共6页
基金
国家自然科学基金"基于结构分析的嗜热CBM拆分-易位-组合融合对木聚糖酶稳定性-活性影响"(31371831)
"基于pH相关氨基酸定位分析的双功能木聚糖酶耐酸性突变研究"(30972123)
文摘
为提高外源蛋白表达量,以pET20b载体、BL21(DE3)E.coli宿主细胞,比较了乳糖和IPTG对CBM2(碳水化合物结合结构域)蛋白表达量的诱导效果。ZYM-5052自诱导培养基菌体OD600是IPTG LB培养基菌体的4.4倍。SDS-PAGE显示200μL ZYM-5052菌体细胞含有82.3μg CBM2,占细胞总蛋白55.3%;等量IPTG LB菌体细胞含有16.6μg CBM2,占细胞总蛋白25.7%。取不同培养时间等量等同OD600的ZYM-5052菌体进行SDS-PAGE,结果显示单位细胞中蛋白量随着培养时间而增加。所以高密度自诱导不仅提高了细胞生长密度、而且提高了单位细胞中蛋白表达量。自诱导方案用于表达葡聚糖酶,与IPTG LB菌体相比,自诱导菌体OD600是其2.3倍,酶活性是其4.5倍。该研究为提高外源蛋白表达量提供了较为简单、普适的高密度自诱导方案。
关键词
cbm2
高密度
自诱导
Keywords
cbm2
high density
self-inducing
分类号
Q556 [生物学—生物化学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
CBM2蛋白的高密度自诱导
马闪闪
韩来闯
刘亚娟
刘猛
刘亮伟
《中国农学通报》
2015
6
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