GST pull-down技术验证CIPK7蛋白激酶与CBL1蛋白的相互作用 被引量：3

1

作者 黄聪琳 丁硕 +1 位作者 姜华 安黎哲 《兰州大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期828-832,共5页

采用DNA重组技术,构建pGEX-4T-3-CIPK7和pET28-CBL1蛋白表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化GST标签、His标签融合蛋白,通过GST pull-down试验验证CIPK7与CBL1之间的相互作用.成功构建了CBL1和CIPK7的重组... 采用DNA重组技术,构建pGEX-4T-3-CIPK7和pET28-CBL1蛋白表达载体,转化大肠杆菌并诱导表达目的蛋白,利用亲和层析纯化法纯化GST标签、His标签融合蛋白,通过GST pull-down试验验证CIPK7与CBL1之间的相互作用.成功构建了CBL1和CIPK7的重组质粒,经诱导表达及纯化获得了可溶性GSTCIPK7和CBL1-His融合蛋白,GST pull-down试验证实了CBL1能够与CIPK7结合.CIPK7蛋白与CBL1蛋白之间存在直接的相互作用,为进一步研究蛋白激酶CIPK7的功能奠定了基础. 展开更多

关键词 cbl1蛋白 GST pull-down CIPK7蛋白 蛋白质相互作用

在线阅读 下载PDF 职称材料

大白菜、甘蓝和黑芥CBL1基因的比较分析 被引量：1

2

作者 李化银 姜常松 +3 位作者 张一卉 高建伟 李利斌 曹齐卫 《山东农业科学》 2014年第12期1-3,共3页

CBL1基因在植物非生物逆境应答及发育过程中具有重要功能。本试验在解析大白菜、甘蓝和黑芥CBL1的基础上,对它们进行了系统地比较分析,为进一步研究CBL1基因在芸薹属植物中的分子进化和功能奠定基础。

关键词 芸薹属 cbl1 结构 进化 顺式元件

在线阅读 下载PDF 职称材料

沙冬青CBL1蛋白纯化及性质研究 被引量：4

3

作者 丁志强 尚桂军 +3 位作者 李娜 聂荣鑫 赵子华 仓怀兴 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期23-29,共7页

CBL是近年来发现的一类钙信号转导蛋白,CBL-CIPK组成的信号通路在植物应答生物和非生物刺激中发挥重要作用。其中CBL1和相应的CIPK在低钾,渗透压,干旱,机械损伤,及冻伤等环境胁迫中发挥重要作用。通过对沙冬青CBL1表面带电氨基酸定点突... CBL是近年来发现的一类钙信号转导蛋白,CBL-CIPK组成的信号通路在植物应答生物和非生物刺激中发挥重要作用。其中CBL1和相应的CIPK在低钾,渗透压,干旱,机械损伤,及冻伤等环境胁迫中发挥重要作用。通过对沙冬青CBL1表面带电氨基酸定点突变,表面赖氨酸甲基化后电荷消除证明了沙冬青CBL1(AmCBL1)在钙离子存在下的非特异性聚集是由于分子间的电荷相互作用引起,三体蛋白很可能是沙冬青CBL1蛋白发挥功能的单位。通过甲基化可以得到聚合状态均一的蛋白,为CBL1晶体生长奠定了基础。 展开更多

关键词 沙冬青 cbl1 环境胁迫 甲基化 点突变 纯化

原文传递

大豆类钙调磷酸酶B亚基GmCBL1互作候选蛋白的筛选 被引量：4

4

作者 李林蔚 张双喜 +6 位作者 周永斌 裴丽丽 陈明 李连城 马有志 刘生祥 徐兆师 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期359-363,共5页

Ca2+是非生物胁迫信号转导途径中的重要信号分子,植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBL,calcineurin B-like proteins)是一类重要的钙信号受体蛋白,主要通过与其他蛋白的特异结合传递信号,使植物形成对非生物胁迫的响应。本实验室已经获得大豆... Ca2+是非生物胁迫信号转导途径中的重要信号分子,植物类钙调磷酸酶B亚基蛋白(CBL,calcineurin B-like proteins)是一类重要的钙信号受体蛋白,主要通过与其他蛋白的特异结合传递信号,使植物形成对非生物胁迫的响应。本实验室已经获得大豆Gm CBL1基因,功能鉴定显示Gm CBL1增强了转基因拟南芥对非生物胁迫的耐性。为了进一步研究Gm CBL1的作用机理,本研究构建诱饵载体p GBKT7::Gm CBL1,利用酵母双杂交技术筛选大豆Gm CBL1的互作蛋白。通过对筛选获得的106个蛋白基因测序和Blast比对分析,并根据其可能的生理功能对这些候选蛋白归类,整理得到4类蛋白:能量代谢相关蛋白、修饰蛋白、防御蛋白、钙信号转导相关蛋白。筛选得到候选蛋白的功能预测初步表明,大豆Gm CBL1参与多条信号途径,为进一步研究探索大豆CBL介导的抗逆信号转导途径奠定了基础。 展开更多

关键词 大豆 类钙调磷酸酶B亚基 Gmcbl1 酵母双杂交 互作蛋白

原文传递

铁皮石斛CIPK24与CBL1的互作及盐胁迫下的表达分析 被引量：2

5

作者 张婷婷 罗琴 +3 位作者 傅思毅 王健 宋希强 周扬 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第16期5326-5334,共9页

为研究铁皮石斛(Dendrobium catenatum Lindl.)应对盐胁迫的抗性机制,利用PCR技术从铁皮石斛cDNA中克隆丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因CIPK24和类钙调素B亚基蛋白基因CBL1,用生物信息学技术对其编码蛋白的进化关系进行了分析;采用实时荧光定... 为研究铁皮石斛(Dendrobium catenatum Lindl.)应对盐胁迫的抗性机制,利用PCR技术从铁皮石斛cDNA中克隆丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶基因CIPK24和类钙调素B亚基蛋白基因CBL1,用生物信息学技术对其编码蛋白的进化关系进行了分析;采用实时荧光定量PCR技术分析它们的表达模式;并构建酵母表达载体,利用酵母双杂交技术研究这两个蛋白的互作关系。结果表明,铁皮石斛CIPK24和CBL1分别与拟南芥CIPK24以及CBL1蛋白的亲缘关系最近;空间表达模式分析发现CIPK24和CBL1基因在花萼、合蕊柱等生殖器官中表达量较高,而在营养器官中表达量较低;盐处理铁皮石斛组培苗后,CIPK24在根中受盐胁迫诱导上调表达,在茎和叶中表达量变化不明显;而CBL1基因在根和叶中受盐胁迫诱导均呈现上调表达,且根中CIPK24和CBL1基因的表达模式相似。酵母双杂交结果表明铁皮石斛CIPK24和CBL1蛋白能够互作。本研究表明,根中CIPK24和CBL1通过互作可能在铁皮石斛响应盐胁迫中起到重要作用,为进一步研究铁皮石斛耐盐性提供理论参考。 展开更多

关键词 铁皮石斛(Dendrobium catenatum) CIPK24 cbl1 基因表达 蛋白互作

原文传递

胡杨CBL1蛋白溶液的DSC研究

6

作者 刘郑 鲁芳 +2 位作者 冯舵 张文杰 高伟 《中国农学通报》 CSCD 2014年第22期28-34,共7页

胡杨CBL1蛋白是一类重要的钙信号转导蛋白,在植物应对干旱、低温、高pH等环境胁迫中发挥着重要作用。通过差示扫描量热法,研究胡杨CBL1蛋白在-30~0℃与20~95℃的温度条件下的热力学性质。结果表明,虽然胡杨CBL1蛋白在应对低温环境胁迫... 胡杨CBL1蛋白是一类重要的钙信号转导蛋白,在植物应对干旱、低温、高pH等环境胁迫中发挥着重要作用。通过差示扫描量热法,研究胡杨CBL1蛋白在-30~0℃与20~95℃的温度条件下的热力学性质。结果表明,虽然胡杨CBL1蛋白在应对低温环境胁迫中发挥作用,但是胡杨CBL1蛋白本身并不具有抗冻性能,且其熔化过程中的冰晶含量与保留温度呈指数对应关系;而在加热过程中,胡杨CBL1蛋白在81.6℃左右不可逆变性,在变性之前胡杨CBL1蛋白的熵与焓增量逐渐减小,在变性之后熵与焓迅速增加,显示出胡杨CBL1蛋白具有较高的热稳定性。 展开更多

关键词 胡杨cbl1蛋白 差示扫描量热法(DSC) 熵 焓

在线阅读 下载PDF 职称材料

非生物逆境胁迫下甘蔗CBL1和CBL6基因表达分析 被引量：2

7

作者 凌秋平 曾巧英 +3 位作者 吴嘉云 胡斐 李奇伟 齐永文 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期377-385,共9页

CBLs蛋白是植物一类特殊的Ca^(2+)信号感受器,在植物遭受逆境胁迫过程中发挥重要的调节作用。文章利用NCBI数据库信息获得2个甘蔗CBL家族基因,分别为SsCBL1和SsCBL6。SsCBL1基因包含一个完整的642 bp的完整开放阅读框,编码213个氨基酸;S... CBLs蛋白是植物一类特殊的Ca^(2+)信号感受器,在植物遭受逆境胁迫过程中发挥重要的调节作用。文章利用NCBI数据库信息获得2个甘蔗CBL家族基因,分别为SsCBL1和SsCBL6。SsCBL1基因包含一个完整的642 bp的完整开放阅读框,编码213个氨基酸;SsCBL6基因包含一个完整的672 bp完整开放阅读框,编码223个氨基酸。通过生物信息学分析方法对SsCBL1和SsCBL6基因编码蛋白结构进行分析。结果显示两者均无跨膜结构域并且都包含4个EF-hand结构域。进化树分析显示SsCBL1和SsCBL6与其他植物的CBL1和CBL6亲缘关系较近,具有较高的保守性。实时荧光定量PCR检测结果发现,这两个基因在低氮、低磷、低钾、干旱、盐和ABA胁迫过程中其表达均发生变化。SsCBL1基因在干旱和盐胁迫过程中,表达量上调幅度较大,而SsCBL6基因在低钾、干旱和盐处理时表达量上调幅度大。实时定量分析结果表明SsCBL1和SsCBL6基因在多种胁迫下发挥重要的调控作用。 展开更多

关键词 甘蔗 cbl1 CBL6 非生物逆境胁迫

原文传递

冠心病患者血清cathepsin B、CBLL1水平变化及其对主要不良心血管事件的预测价值

8

作者 杨铠榕 安荣 +2 位作者 李智 郭娅娅 茂建梅 《疑难病杂志》 2025年第6期656-660,共5页

目的探讨冠心病患者血清组织蛋白酶B(cathepsin B)、CBL原癌基因样1(CBLL1)水平变化及其对主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取2019年1月—2023年7月延安大学附属医院心血管内科收治的冠心病患者196例为研究对象,随访12个月,... 目的探讨冠心病患者血清组织蛋白酶B(cathepsin B)、CBL原癌基因样1(CBLL1)水平变化及其对主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取2019年1月—2023年7月延安大学附属医院心血管内科收治的冠心病患者196例为研究对象,随访12个月,失访3例,根据是否发生MACE将冠心病患者分为MACE组46例和非MACE组147例。采用酶联免疫吸附试验检测血清cathepsin B水平,实时荧光聚合酶链反应检测血清CBLL1相对表达量;Pearson分析血清cathepsin B、CBLL1水平与冠状动脉病变、心肌损伤程度的相关性;多因素Logistic回归分析冠心病患者发生MACE的影响因素;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清cathepsin B、CBLL1水平对冠心病患者发生MACE的预测价值。结果MACE组血清cathepsin B、CBLL1水平高于非MACE组(t/P=19.522/<0.001、22.809/<0.001);冠心病患者血清cathepsin B、CBLL1水平与冠状动脉病变支数、冠状动脉狭窄率、Gensini评分、肌钙蛋白I(cTnI)、B型脑钠肽(BNP)均呈正相关(cathepsin B:r/P=0.462/<0.001、0.391/<0.001、0.501/<0.001、0.341/0.001、0.329/0.003;CBLL1:r/P=0.377/<0.001、0.320/0.008、0.419/<0.001、0.322/0.006、0.306/0.013);多因素Logistic回归分析显示,冠状动脉多支病变、cathepsin B高、CBLL1高是冠心病患者随访期间发生MACE的独立危险因素[OR(95%CI)=2.125(1.133~3.987)、1.997(1.121~3.562)、1.685(1.126~2.524)];血清cathepsin B、CBLL1水平及二者联合预测冠心病患者随访期间发生MACE的AUC分别为0.764、0.790、0.887,二者联合预测的AUC大于单独预测(Z/P=2.591/<0.001、2.170/0.005)。结论冠心病患者血清cathepsin B、CBLL1水平增高与随访期间发生MACE有关,二者联合可有效预测MACE风险。 展开更多

关键词 冠心病 主要不良心血管事件 组织蛋白酶B CBL原癌基因样1 预测价值

暂未订购

急性缺血性脑卒中患者血清CBLL1、MMP3水平与静脉溶栓后出血转化及预后的关联性研究 被引量：5

9

作者 穆晓春 靳洪文 佘碧霞 《中国临床新医学》 2024年第10期1136-1140,共5页

目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清CBL原癌基因样1(CBLL1)、基质金属蛋白酶3(MMP3)水平与静脉溶栓后出血转化(HT)及预后的关联性。方法招募2020年1月至2022年12月于黑龙江省第三医院接受静脉溶栓治疗的AIS患者264例,根据静脉溶栓... 目的探讨急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清CBL原癌基因样1(CBLL1)、基质金属蛋白酶3(MMP3)水平与静脉溶栓后出血转化(HT)及预后的关联性。方法招募2020年1月至2022年12月于黑龙江省第三医院接受静脉溶栓治疗的AIS患者264例,根据静脉溶栓后HT发生情况将其分为HT组(42例)和非HT组(222例)。比较两组临床资料、治疗前血清CBLL1、MMP3水平及治疗后3个月的预后情况。采用多因素logistic回归分析AIS患者静脉溶栓后发生HT的影响因素。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CBLL1、MMP3水平预测AIS患者静脉溶栓后HT发生及预后情况的效能。结果与非HT组相比,HT组美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、血清CBLL1、MMP3水平以及预后不良[改良Rankin量表(mRS)评分≥3分]发生率更高,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素logistic回归分析结果显示,较高的NIHSS评分[OR(95%CI)=1.298(1.028~1.639)]以及血清CBLL1[OR(95%CI)=1.320(1.023~1.704)]、MMP3[OR(95%CI)=1.406(1.103~1.793)]水平是促进AIS患者静脉溶栓后发生HT的独立危险因素(P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清CBLL1、MMP3水平联合检测可有效预测AIS患者静脉溶栓后HT发生[AUC(95%CI)=0.936(0.892~0.965),P<0.001]及预后情况[AUC(95%CI)=0.941(0.901~0.985),P<0.001]。结论AIS患者血清CBLL1、MMP3水平升高与静脉溶栓后HT发生及预后不良有关,有助于临床医师识别高危患者,及早干预。 展开更多

关键词 急性缺血性脑卒中 CBL原癌基因样1 基质金属蛋白酶3 静脉溶栓 出血转化 预后

暂未订购

泛癌中CBLL1的差异表达、预后及其免疫细胞浸润的相关性分析

10

作者 甘佳宜 汪佳星 +1 位作者 曾雨露 庞丽红 《中国科技期刊数据库 医药》 2024年第10期202-207,共6页

分析m6A甲基转移酶Cbl原癌基因E3泛素蛋白连接酶样1基因(Hakai,CBLL1)在泛癌中的表达及对肿瘤微环境的影响。方法 从tcga的癌症基因组图谱数据库中获取了多种不同的癌症病例,并利用生物信息学技术研究了CBLL1基因在不同类型的肿瘤中的... 分析m6A甲基转移酶Cbl原癌基因E3泛素蛋白连接酶样1基因(Hakai,CBLL1)在泛癌中的表达及对肿瘤微环境的影响。方法 从tcga的癌症基因组图谱数据库中获取了多种不同的癌症病例,并利用生物信息学技术研究了CBLL1基因在不同类型的肿瘤中的表现以及其对预后的影响。探讨CBLL1在肿瘤微环境相关细胞浸润方面的影响。结果 CBLL1基因在大多数恶性肿瘤中表达上调,导致了直肠癌、肾透明细胞癌患者远期总生存率及无进展生存期延长;肾上腺皮质癌、膀胱尿路上皮癌及头颈癌患者远期PFS更短。在直肠癌、肾透明细胞癌、膀胱尿路上皮癌和头颈癌中,CBLL1的表达水平与多种免疫细胞浸润水平及抑制性免疫检查点基因的表达水平相关(P<0.05)。结论 CBLL1基因表达水平上调与直肠癌、肾透明细胞癌、膀胱尿路上皮癌和头颈癌的不良预后相关,可能通过抑制免疫浸润及增加抑制性免疫检查点基因的表达水平发挥作用。 展开更多

关键词 Cbl原癌基因E3泛素蛋白连接酶样1 生物信息学 泛癌 肿瘤微环境 免疫浸润

原文传递

Seminar联合CBL教学法在神经康复临床教学中的应用 被引量：5

11

作者 叶琳琳 解焕鑫 +2 位作者 张甜甜 杨晓龙 曹磊 《中国病案》 2024年第10期83-86,共4页

目的探讨Seminar联合CBL教学法在神经康复临床教学中的应用效果,为康复科教学改革提供依据。方法选择在某院康复医学科进行神经康复学习的学生进行研究,将2022年4月11日-2022年7月29日间采用传统教学方法的50名学生设为对照组;将2023年4... 目的探讨Seminar联合CBL教学法在神经康复临床教学中的应用效果,为康复科教学改革提供依据。方法选择在某院康复医学科进行神经康复学习的学生进行研究,将2022年4月11日-2022年7月29日间采用传统教学方法的50名学生设为对照组;将2023年4月12日-2023年7月28日间采用Seminar联合CBL教学法的学生38名设为实验组,两组的教学内容及授课教师均相同。比较两组学生的神经康复考试成绩、课程满意度以及思维能力评分。结果在神经康复理论和实践成绩评估中,实验组病例采集与康复处方制定成绩、康复评定成绩、康复理论成绩、康复技能成绩的平均分由对照组的(72.48±5.90)分、(71.70±5.69)分、(76.56±4.78)分和(78.86±6.15)分提升至(85.11±5.63)分、(84.32±6.3)分、(86.39±4.43)分和(84.58±8.13)分,差异具有统计学意义(P<0.05)。课程满意度问卷调查显示,实验组在课程的深度和广度、课程的教授形式、课程的教学效果、课程激发学习兴趣、课程提高学习积极性、课程增强理论知识理解、课程增强协作能力、课程可以开拓视野、课程提高了操作能力、课程提高了诊疗能力这十个方面满意度达到95%~100%,高于对照组(42%~62%),差异具有统计学意义(P<0.05)。学生思维能力量表表明,实验组学生的思维能力量表总分(283.97±14.02)显著高于对照组学生的思维能力量表总分(245.10±29.43),并且在寻求真相、开放思想、分析能力、系统化能力、批判性思维自信心、求知欲、认知成熟度维度方面均优于对照组(t=-7.513~-2.453,P<0.05)。结论Seminar联合CBL教学模式有助于神经康复临床教学中学生成绩和教学满意度的提高,提高教学效果,提升学生的临床思维能力,激发学习兴趣,具有一定的应用价值。 展开更多

关键词 神经康复 教学改革 Seminar教学 CBL教学1

原文传递

微信平台翻转课堂联合CBL教学法在心外科住院医师规范化培训中的应用 被引量：16

12

作者 赖小刚 孙畅 +1 位作者 张晓慧 赵科研 《中国病案》 2023年第3期88-90,共3页

目的 探讨微信平台翻转课堂联合基于案例式学习(case-basedlearning,CBL)教学法在心外科住院医师规范化培训教学中的应用效果。方法 选取某三甲医院心外科2019年2月1日-2020年4月30日参与住院医师规范化培训118名学员为研究对象,根据心... 目的 探讨微信平台翻转课堂联合基于案例式学习(case-basedlearning,CBL)教学法在心外科住院医师规范化培训教学中的应用效果。方法 选取某三甲医院心外科2019年2月1日-2020年4月30日参与住院医师规范化培训118名学员为研究对象,根据心外科教学模式的不同分为对照组(n=58)和观察组(n=60)。对照组采用传统教学法,观察组采用微信平台翻转课堂联合CBL教学法。培训结束后进行客观知识考核和问卷课程满意度调查,比较2组教学效果。结果 观察组学员的临床技能操作和病例分析成绩均高于对照组(91.10±4.51分与83.21±5.44分和89.25±3.22分与81.40±2.85分),差异具有统计学意义;2组学员基础理论知识无统计学差异(87.35±2.59分与86.48±2.99分)。观察组在激发学习热情、锻炼临床思维等6个方面培训效果及总体教学模式的满意度(85.00%与63.79%)均高于对照组,差异具有统计学意义。结论 微信平台翻转课堂联合CBL教学法能有效提高心外科住院医师规范化培训的教学质量并提高教学满意度。 展开更多

关键词 住院医师规范化培训 翻转课堂 微信平台 CBL教学法1

原文传递