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益气养阴化瘀汤调节CB2R/β-arrestin-2通路相关的自噬保护糖尿病心肌病模型小鼠的心功能
1
作者 章睿 郑萤萤 戴圣伟 《浙江中西医结合杂志》 2025年第4期305-312,共8页
目的探讨益气养阴化瘀汤对糖尿病心肌病(DCM)模型小鼠心脏功能和心肌组织炎症的影响,并阐明其通过大麻素受体2(CB2R)/抑制蛋白β2(β-arrestin-2)通路调节自噬的机制。方法动物实验:C57BL/6小鼠20只,按随机数字表法分为对照组、模型组... 目的探讨益气养阴化瘀汤对糖尿病心肌病(DCM)模型小鼠心脏功能和心肌组织炎症的影响,并阐明其通过大麻素受体2(CB2R)/抑制蛋白β2(β-arrestin-2)通路调节自噬的机制。方法动物实验:C57BL/6小鼠20只,按随机数字表法分为对照组、模型组、低剂量中药组和高剂量中药组,每组5只。采用高脂饮食和链脲佐菌素诱导小鼠DCM模型。低、高剂量中药组造模成功后分别给予益气养阴化瘀汤14.35、28.70 mg/(kg·d)灌胃,对照组、模型组小鼠予生理盐水2 mL/(kg·d)灌胃,各组均干预6周。检测各组小鼠血糖水平。超声心动图评估各组小鼠心脏功能。苏木精-伊红(HE)染色检测小鼠心肌组织病理变化。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测小鼠心肌组织炎症因子白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。蛋白质印迹(WB)检测CB2R/β-arrestin-2、腺苷酸激酶(AMPK)/雷帕霉素靶蛋白(mTOR)通路以及自噬相关蛋白CB2R、β-arrestin-2、螯合体1(p62)、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ/Ⅱ(LC3Ⅰ/Ⅱ)、B淋巴细胞瘤-2基因同源结构域蛋白(Beclin-1)、磷酸化腺苷酸激酶(p-AMPK)/AMPK和磷酸化雷帕霉素靶蛋白(p-mTOR)/mTOR表达水平。细胞实验:将小鼠原代心肌细胞随机分为对照组、模型组、CB2R过表达组、对照载体组。WB检测各组小鼠心肌细胞CB2R、β-arrestin-2、p62、LC3Ⅰ/Ⅱ、Beclin-1表达水平。结果动物实验:与模型组比较,干预后低、高剂量中药组小鼠血糖[(21.17±2.70)mmol/L、(14.15±1.94)mmol/L比(25.53±3.45)mmol/L,P<0.05或P<0.01]显著降低,超声心动图心脏射血分数(EF)[(80.89±4.45)%、(74.89±4.11)%比(63.31±6.45)%,P<0.01]、缩短分数(FS)[(34.78±4.15)%、(41.51±1.99)%比(25.13±2.16)%,P<0.01]显著升高,左室内径(LVIDd)[(3.75±0.36)mm、(3.55±0.46)mm比(4.35±0.25)mm,P<0.01]显著降低,小鼠心肌组织炎症因子IL-1β[(32.80±1.95)pg/mL、(15.00±2.50)pg/mL比(44.05±7.26)pg/mL,P<0.05]、IL-6[(79.84±10.51)pg/mL、(57.17±4.46)pg/mL比(93.37±9.18)pg/mL,P<0.05]、TNF-α[(52.30±8.22)pg/mL、(40.62±6.32)pg/mL比(69.60±10.54)pg/mL,P<0.05]均显著降低。HE染色显示,模型组小鼠心肌纤维排列紊乱,胶原含量明显增加,心肌细胞肥大增粗,可见较多炎症细胞浸润;低、高剂量中药组小鼠心肌组织上述病理改变较模型组明显改善。WB结果显示,与模型组比较,低、高剂量中药组小鼠心肌组织Beclin-1[(0.51±0.17)、(0.69±0.21)比(0.23±0.11),P<0.05]、p-AMPK/AMPK[(0.25±0.06)、(0.53±0.11)比(0.19±0.10),P<0.05]表达水平显著升高,LC3Ⅰ/Ⅱ[(6.15±0.21)、(2.38±0.34)比(6.43±0.38),P<0.05]、p62[(2.17±0.19)、(1.43±0.11)比(3.12±0.31),P<0.05]、p-mTOR/mTOR[(3.05±0.22)、(1.44±0.17)比(3.73±0.18),P<0.05]表达水平显著降低,CB2R[(0.38±0.13)、(0.49±0.10)比(0.26±0.05),P<0.05]、β-arrestin-2[(0.67±0.11)、(0.81±0.12)比(0.46±0.08),P<0.05]蛋白表达水平显著升高。细胞实验:与对照载体组比较,CB2R过表达组p62[(1.25±0.28)比(1.83±0.15),P<0.05]、LC3Ⅰ/Ⅱ[(1.24±0.33)比(5.39±0.47),P<0.05]水平降低,CB2R[(0.71±0.15)比(0.19±0.10),P<0.05]、β-arrestin-2[(0.54±0.13)比(0.26±0.07),P<0.05]和Beclin-1[(0.69±0.25)比(0.27±0.04),P<0.05]表达水平升高。结论益气养阴化瘀汤能改善DCM模型小鼠心脏功能、心肌组织炎症因子及血糖水平,其机制可能与提高心肌细胞CB2R/β-arrestin-2表达,促进AMPK/mTOR诱导的自噬有关。 展开更多
关键词 小鼠 糖尿病心肌病 益气养阴化瘀汤 自噬 大麻素受体2/抑制蛋白β2 腺苷酸激酶/雷帕霉素靶蛋白
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雷公藤多苷对IgA肾病大鼠肾脏保护及肾组织CB2R/NOX4/NLRP3表达的影响 被引量：2
2
作者 陈晨晨 宋珂 +3 位作者 丁樱 赵文景 张守琳 宋纯东 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第11期2037-2041,共5页
目的探究雷公藤多苷对IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾脏保护及肾组织大麻素受体2(cannabinoids 2 receptor,CB2R)/NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体蛋白3(NOD-like receptor protein3,NLRP3... 目的探究雷公藤多苷对IgA肾病(IgA nephropathy,IgAN)大鼠肾脏保护及肾组织大麻素受体2(cannabinoids 2 receptor,CB2R)/NADPH氧化酶4(NADPH oxidase 4,NOX4)/核苷酸结合寡聚化结构域蛋白样受体蛋白3(NOD-like receptor protein3,NLRP3)表达的影响。方法“BSA+CCl 4+LPS”联合法复制IgAN大鼠模型,予雷公藤多苷干预。全自动生化分析仪检测24 h尿蛋白定量(24h-UTP)、尿红细胞计数(URBC)、血清白蛋白(ALB)、谷丙转氨酶(ALT)、血肌酐(Scr)、血尿素氮(BUN),光镜观察肾组织病理变化,免疫荧光观察系膜区IgA沉积情况;Western blot法检测肾脏组织中CB2R、NOX4、NLRP3的蛋白表达。结果与模型组相比,雷公藤多苷组大鼠肾脏病理损伤明显减轻,IgA电子致密物沉积减少;ALB水平升高,24h-UTP、URBC、ALT、Scr和BUN水平均降低;肾组织CB2R蛋白表达上升、NOX4、NLRP3蛋白表达降低。结论雷公藤多苷能有效改善IgAN大鼠肾脏损伤,其机制可能与调控CB2R/NOX4/NLRP3信号通路有关。 展开更多
关键词 IGA肾病 雷公藤多苷 cb2r/NOX4/NLRP3 内源性大麻素系统 氧化应激 炎症反应
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电针对膝骨关节炎大鼠脊髓背角CB2R、p-P38和p-ERK表达的影响 被引量：12
3
作者 李杨乐 杨锋 +3 位作者 樊静杰 郑晓慧 朱芮 郑洁 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2022年第7期60-66,共7页
目的观察电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠痛性行为学及脊髓背角大麻素受体2(CB2R)、p-P38、p-ERK表达的影响,探讨电针治疗KOA慢性疼痛的作用机制。方法48只SD大鼠随机分为空白组、盐水组、模型组、电针组、CB2R阻断组、CB2R阻断+电针组,每组... 目的观察电针对膝骨关节炎(KOA)大鼠痛性行为学及脊髓背角大麻素受体2(CB2R)、p-P38、p-ERK表达的影响,探讨电针治疗KOA慢性疼痛的作用机制。方法48只SD大鼠随机分为空白组、盐水组、模型组、电针组、CB2R阻断组、CB2R阻断+电针组,每组8只。除空白组和盐水组外,采用左膝关节腔注射谷氨酸钠碘乙酸制备KOA慢性疼痛模型,盐水组左膝关节腔注射生理盐水。注射后第15日,电针组于左侧“阳陵泉”“内膝眼”行电针刺激,15 min/次,1次/d,CB2R阻断组腹腔注射CB2R阻断剂,CB2R阻断+电针组腹腔注射CB2R阻断剂后行电针干预,5次为1个疗程,共2个疗程。每个疗程结束后间歇1 d进行痛性行为学评价,免疫荧光检测大鼠左侧脊髓背角CB2R表达及脊髓背角神经元CB2R、p-P38和p-ERK定位表达。结果与空白组比较,模型组大鼠左侧机械痛缩足阈和左后肢负重能力显著降低(P<0.01),左侧脊髓背角CB2R表达及CB2R/NeuN、p-P38/NeuN、p-ERK/NeuN双染阳性细胞数显著增加(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,电针组、CB2R阻断+电针组大鼠左侧机械痛缩足阈和左后肢负重能力显著升高(P<0.01),且电针组优于CB2R阻断+电针组(P<0.05,P<0.01),电针组大鼠左侧脊髓背角CB2R表达和CB2R/NeuN双染阳性细胞数显著增加(P<0.01),p-P38/NeuN和p-ERK/NeuN双染阳性细胞数显著减少(P<0.01)。结论电针“阳陵泉”“内膝眼”可抑制KOA大鼠痛性行为,其机制可能与激活脊髓背角CB2R,抑制P38/ERK信号通路激活有关。 展开更多
关键词 膝骨性关节炎 电针 疼痛 大麻素受体2 P-P38 P-ERK 大鼠
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植物大麻素2型受体(CB2R)调节剂及其对骨代谢调控作用的研究进展 被引量：4
4
作者 胡思婧 练晨霞 +4 位作者 余涛 张奇 张泉龙 张巧艳 秦路平 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第14期3540-3550,共11页
大麻素2型受体(CB2R)为G蛋白偶联受体(GPCR)的超家族成员,具有调节疼痛反应、抗炎、抗纤维化、调节骨代谢等多种生物活性。一些CB2R调节剂具有良好的调控骨代谢的作用。尽管大麻Cannabis sativa中的大麻素类成分通过作用于CB2R可发挥多... 大麻素2型受体(CB2R)为G蛋白偶联受体(GPCR)的超家族成员,具有调节疼痛反应、抗炎、抗纤维化、调节骨代谢等多种生物活性。一些CB2R调节剂具有良好的调控骨代谢的作用。尽管大麻Cannabis sativa中的大麻素类成分通过作用于CB2R可发挥多种药理作用,但常表现出精神样的副作用。因此,大麻以外植物中CB2R调节剂的发现对于寻找结构新颖的无精神样副作用的先导化合物及阐明植物药的作用机制具有重要意义。该文通过查阅、总结、归纳和分析文献:①阐述了CB2R的发现历程、结构、生理功能,特别是对骨代谢的调控作用;②总结了大麻以外的植物CB2R调节剂的化合物和植物提取物;③归纳分析了植物源的2型大麻素受体调节剂在整体动物、成骨细胞和破骨细胞对骨代谢的调节作用,以为新型CB2R调节剂的发现和抗骨质疏松药物的研发提供科学依据。 展开更多
关键词 大麻素2型受体 调节剂 药用植物 骨代谢 研究进展
原文传递
Real-Time PCR检测小鼠皮肤切创愈合过程中CB2RmRNA变化的时间规律性研究 被引量：1
5
作者 郑吉龙 章学保 官大威 《中国刑警学院学报》 2016年第2期78-80,共3页
采用Real-Time PCR检测小鼠皮肤切创愈合过程中CB2R和β-actin mRNA的时间变化规律,从而为进一步研究CB2R在皮肤损伤愈合过程中的生物学功能奠定基础,并探讨CB2R在法医实践中用于推断损伤时间的可能性。结果发现小鼠皮肤切创愈合过程中... 采用Real-Time PCR检测小鼠皮肤切创愈合过程中CB2R和β-actin mRNA的时间变化规律,从而为进一步研究CB2R在皮肤损伤愈合过程中的生物学功能奠定基础,并探讨CB2R在法医实践中用于推断损伤时间的可能性。结果发现小鼠皮肤切创愈合过程中损伤区CB2RmRNA表达特征可以为皮肤损伤时间的推断提供参考。 展开更多
关键词 法医病理学 皮肤损伤 cb2r cb2rmRNA 损伤时间推断
原文传递
小鼠皮肤切创愈合过程中Ⅱ型大麻素受体的表达 被引量：3
6
作者 刘伟伟 官大威 +5 位作者 赵振宾 沈宇 王涛 于天水 范琰琰 胡更奕 《中国法医学杂志》 CSCD 北大核心 2011年第3期188-190,193,261,共5页
目的观察皮肤切创愈合过程中CB2R表达变化的时间规律性。方法健康小鼠50只,随机分为10组,建立皮肤切创模型,应用免疫组织化学技术及Western bloting方法检测切创后不同时间段小鼠背部正中皮肤CB2R的表达。结果免疫组织化学结果显示,对照... 目的观察皮肤切创愈合过程中CB2R表达变化的时间规律性。方法健康小鼠50只,随机分为10组,建立皮肤切创模型,应用免疫组织化学技术及Western bloting方法检测切创后不同时间段小鼠背部正中皮肤CB2R的表达。结果免疫组织化学结果显示,对照组CB2R表达于表皮、毛囊、皮脂腺、皮肌层、血管平滑肌、神经纤维外膜及神经纤维束束膜;伤后6h损伤区及周边区多核粒细胞少量表达CB2R,12～24h以单个核细胞阳性表达为主,3d以单个核细胞和梭形成纤维细胞表达为主,5～14d以梭形成纤维细胞为主。CB2R阳性细胞率于0h～3d逐渐升高,5d达最高峰,随后逐渐下降。经Western blotting检测显示,对照及各个损伤时间段都有CB2R阳性条带,其中5d为CB2R表达高峰。结论小鼠皮肤切创愈合过程中,CB2R于损伤区及周边区多核粒细胞、单个核细胞、梭形成纤维细胞中表达,并具有规律性,提示CB2R可能参与皮肤损伤愈合,并可用于皮肤损伤时间的推断。 展开更多
关键词 法医病理学 cb2r 免疫组织化学 WESTERN BLOTTING 皮肤损伤推断
原文传递
大麻素Ⅱ型受体通过AMPK-mTOR-p70S6K通路抑制泡沫细胞形成 被引量：1
7
作者 张宗祥 方迪龙 《医学研究杂志》 2022年第6期45-51,共7页
目的探究大麻素Ⅱ型受体(cannabinoid receptor 2,CB2R)在抗动脉粥样硬化中的作用和机制。方法利用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导THP-1细胞分化为THP-1巨噬细胞。通过氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipopro... 目的探究大麻素Ⅱ型受体(cannabinoid receptor 2,CB2R)在抗动脉粥样硬化中的作用和机制。方法利用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)诱导THP-1细胞分化为THP-1巨噬细胞。通过氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,oxLDL)诱导THP-1巨噬细胞形成泡沫细胞。采用油红O染色检测THP-1巨噬细胞形成泡沫细胞的情况。通过Western blot法检测THP-1巨噬细胞中NLRP3、ASC、pro-caspase-1、caspase-1、p-AMPK、AMPK、p-mTOR、mTOR、p-P70S6K和P70S6K的表达。利用酶联免疫吸附(ELISA)检测THP-1巨噬细胞IL-1β和IL-18表达变化。结果油红O染色检测显示,oxLDL成功诱导THP-1巨噬细胞形成泡沫细胞。通过Western blot法检测发现,CB2R对oxLDL诱导THP-1巨噬细胞中NLPR3炎性小体具有抑制作用;同时,ELISA检测显示CB2R通过下调THP-1巨噬细胞IL-1β和IL-18的表达来抑制NLPR3炎性小体的产生。Western blot法检测发现,CB2R降低AMPK-mTOR-p70S6K通路的p-AMPK、p-mTOR和p-P70S6K蛋白表达来调控THP-1巨噬细胞产生NLPR3炎性小体。结论CB2R发挥抗动脉粥样硬化作用,其分子机制是通过AMPK-mTOR-p70S6K通路调节NLPR3炎性小体,进而抑制THP-1巨噬细胞形成泡沫细胞。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 THP-1巨噬细胞 大麻素Ⅱ型受体 NLPR3炎性小体 AMPK-mTOR-p70S6K通路
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