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BCKDK通过激活Wnt/β-catenin信号通路调控子宫内膜癌细胞的增殖与凋亡
1
作者 黄丽 龚豪 +1 位作者 胡珊 龚坤雪 《中南医学科学杂志》 2026年第1期39-43,90,共6页
目的探究支链α-酮酸脱氢酶激酶(BCKDK)基于Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用实时定量PCR和Western blotting法分别检测子宫内膜癌组织与癌旁组织、正常人子宫内膜上皮细胞以及子宫内膜癌细胞系HEC-1-... 目的探究支链α-酮酸脱氢酶激酶(BCKDK)基于Wnt/β-catenin信号通路对子宫内膜癌细胞增殖、凋亡的影响。方法采用实时定量PCR和Western blotting法分别检测子宫内膜癌组织与癌旁组织、正常人子宫内膜上皮细胞以及子宫内膜癌细胞系HEC-1-A和Ishikawa中BCKDK的表达水平。通过慢病毒感染技术构建BCKDK低表达的子宫内膜癌细胞模型,并采用CCK-8法分析细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡情况,Western blotting法检测CyclinD1、CDK2、caspase-3、caspase-9、Wnt3a及β-catenin等蛋白表达水平。进一步在BCKDK低表达细胞中加入Wnt/β-catenin信号通路激活剂LiCl,观察其对BCKDK抑制所引起的细胞增殖和凋亡的影响。结果子宫内膜癌组织BCKDK mRNA表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。不同分化程度、临床分期及淋巴结转移的子宫内膜癌组织中BCKDK mRNA水平比较,差异有显著性(P<0.05)。与正常人子宫内膜上皮细胞相比,HEC-1-A和Ishikawa两种子宫内膜癌细胞系中BCKDK蛋白及mRNA表达均明显上调(P<0.05)。与阴性对照组相比,shBCKDK组的BCKDK蛋白和mRNA表达、细胞活力、CyclinD1与CDK2蛋白表达、Wnt3a和β-catenin蛋白表达均显著降低,细胞凋亡率、caspase-3和caspase-9蛋白表达则显著升高;而在加入LiCl激活Wnt/β-catenin通路后,shBCKDK+LiCl组的上述所有指标变化均较shBCKDK组出现显著逆转(P<0.05)。结论BCKDK在子宫内膜癌细胞表达异常升高,下调BCKDK表达可抑制HEC-1-A、Ishikawa细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与调节Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 BCKDK 子宫内膜癌 细胞增殖 细胞凋亡 WNT/Β-catenin信号通路
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨温阳振衰颗粒对慢性心力衰竭大鼠心室重构的影响
2
作者 彭丽琪 欧长莹 +4 位作者 王贤颖 陈梦婷 魏子涵 陈新宇 唐燕萍 《湖南中医药大学学报》 2026年第1期7-13,共7页
目的基于调控无翅型MMTV整合位点家族(Wnt)/β-catenin信号通路探讨温阳振衰颗粒(WZG)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心室重构的影响。方法采用腹腔注射阿霉素(DOX)建立CHF大鼠模型。造模成功后,将大鼠随机分为模型组(CHF组)、WZG低剂量组(WZ... 目的基于调控无翅型MMTV整合位点家族(Wnt)/β-catenin信号通路探讨温阳振衰颗粒(WZG)对慢性心力衰竭(CHF)大鼠心室重构的影响。方法采用腹腔注射阿霉素(DOX)建立CHF大鼠模型。造模成功后,将大鼠随机分为模型组(CHF组)、WZG低剂量组(WZG-L组,0.72 g/kg)、WZG中剂量组(WZG-M组,1.44 g/kg)、WZG高剂量组(WZG-H组,2.88 g/kg)、依那普利组(ENP组,1.8 mg/kg),每组10只;另取10只为正常对照组(NC组)。NC组与CHF组给予等体积蒸馏水,其余各组按剂量灌胃相应药物,均连续干预4周。超声心动图检测心功能;ELISA测定血清N末端脑利钠肽前体(NT-proBNP)水平;测算左心室重量指数(LVMI)评估心室重构;Masson染色观察心肌组织病理及胶原容积分数(CVF);Western blot检测心肌组织中蓬乱蛋白1(DVL1)及β-catenin蛋白的表达。结果与NC组比较,CHF组大鼠左心室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)及LVMI升高(P<0.05,P<0.01),射血分数(EF)及左心室缩短分数(FS)降低(P<0.01),心肌纤维排列紊乱,CVF增加(P<0.01),血清NT-proBNP水平升高(P<0.01),心肌组织中DVL1、β-catenin表达上调(P<0.01)。与CHF组比较,WZG-L组、WZG-M组、WZG-H组LVIDd、LVIDs、LVMI降低(P<0.01),EF、FS提高(P<0.01),心肌病理损伤改善,CVF降低(P<0.05,P<0.01),血清NT-proBNP水平下调(P<0.01),心肌组织中DVL1、β-catenin的表达下调(P<0.05)。结论WZG可有效改善DOX诱导的CHF大鼠心肌损伤,减轻心肌纤维化,抑制心室重构,其作用机制可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白的异常表达有关。 展开更多
关键词 慢性心力衰竭 温阳振衰颗粒 心肌纤维化 心室重构 WNT/Β-catenin信号通路
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨滋阴养血强筋汤对兔膝骨关节炎及软骨细胞的作用机制
3
作者 胡昆鹏 程韶 +3 位作者 马金昕 殷志颖 朱云麒 王上增 《中医学报》 2026年第2期412-422,共11页
目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨滋阴养血强筋汤(ZYQD)治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制。方法:动物实验:36只新西兰兔随机分为对照组(Control组)、模型组(KOA组)、滋阴养血强筋汤低剂量组(L-ZYQD组,2.25 mg... 目的:基于Wnt/β-catenin信号通路探讨滋阴养血强筋汤(ZYQD)治疗膝骨关节炎(knee osteoarthritis,KOA)的作用机制。方法:动物实验:36只新西兰兔随机分为对照组(Control组)、模型组(KOA组)、滋阴养血强筋汤低剂量组(L-ZYQD组,2.25 mg·kg^(-1))、滋阴养血强筋汤中剂量组(M-ZYQD组,4.5 mg·kg^(-1))、滋阴养血强筋汤高剂量组(H-ZYQD组,9 mg·kg^(-1))及塞来昔布组(SLXB组,52 mg·kg^(-1)),每组6只。采用膝关节注射4%木瓜蛋白酶构建KOA模型,每日灌胃1次,连续4周。细胞实验:将6只兔随机分为空白血清组和含药血清组(4.5 mg·kg^(-1)),每组3只,灌胃1周,制备血清和软骨细胞。软骨细胞分为空白组、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)组、IL-1β+含药血清组、LiCl组及LiCl+含药血清组。采用番红O-固绿染色检测兔膝关节软骨组织病理变化,免疫组化法检测软骨及滑膜组织基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)和COL-2的表达水平,ELISA检测软骨组织和软骨细胞中IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)浓度,Western blot检测软骨组织和软骨细胞中Wnt-3α、β-catenin、CYC-D、MMP-3、COL-2表达水平,RT-qPCR检测软骨细胞Wnt-3α、β-catenin、MMP-3、COL-2、CYC-D、miR-155-5P基因表达水平。结果:动物实验:KOA组兔软骨表面粗糙不平,软骨细胞排列紊乱;与KOA组比较,ZYQD各剂量组兔膝关节软骨病理形态得到改善。与Control组比较,KOA组兔膝关节软骨和滑膜组织中COL-2表达水平降低、MMP-3表达水平升高(P<0.05)。与KOA组比较,ZYQD各剂量组与SLXB组兔膝关节软骨和滑膜组织中COL-2表达水平升高、MMP-3表达水平降低(P<0.05)。与Control组比较,KOA组兔Mankin评分升高(P<0.05);与KOA组比较,ZYQD各剂量组与SLXB组兔Mankin评分降低(P<0.05)。与Control组比较,KOA组兔血清IL-1β、TNF-α浓度升高(P<0.05)。与KOA组比较,ZYQD各剂量组与SLXB组兔血清IL-1β、TNF-α浓度降低(P<0.05)。与Control组比较,KOA组兔膝关节软骨Wnt-3α、β-catenin、CYC-D蛋白表达水平升高(P<0.05);与KOA组比较,ZYQD各剂量组与SLXB组兔膝关节软骨Wnt-3α、β-catenin、CYC-D蛋白表达水平降低(P<0.05)。细胞实验:与空白组比较,IL-1β组和LiCl组软骨细胞IL-1β、TNF-α浓度升高(P<0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+含药血清组软骨细胞IL-1β、TNF-α浓度降低(P<0.05);与LiCl组比较,LiCl+含药血清组软骨细胞IL-1β、TNF-α浓度降低(P<0.05)。与空白组比较,IL-1β组和LiCl组软骨细胞Wnt-3α、MMP-3、CYC-D蛋白表达水平升高、COL-2蛋白表达水平降低(P<0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+含药血清组软骨细胞Wnt-3α、MMP-3、CYC-D蛋白表达水平降低、COL-2蛋白表达水平升高(P<0.05);与LiCl组比较,LiCl+含药血清组软骨细胞Wnt-3α、MMP-3、CYC-D蛋白表达水平降低、COL-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。与空白组比较,IL-1β组和LiCl组软骨细胞Wnt-3α、β-catenin、CYC-D、miR-155-5P基因表达水平升高、COL-2基因表达水平降低(P<0.05);与IL-1β组比较,IL-1β+含药血清组软骨细胞Wnt-3α、β-catenin、MMP-3、CYC-D、miR-155-5P基因表达水平降低、COL-2基因表达水平升高(P<0.05);与LiCl组比较,LiCl+含药血清组软骨细胞Wnt-3α、β-catenin、MMP-3、CYC-D、miR-155-5P基因表达水平降低、COL-2基因表达水平升高(P<0.05)。结论:滋阴养血强筋汤可能通过调控Wnt/β-catenin信号通路改善KOA软骨退变。 展开更多
关键词 滋阴养血强筋汤 膝骨关节炎 WNT/Β-catenin信号通路 软骨细胞 miR-155-5P 炎症反应 IL-1Β
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SIRT7在炎症微环境下经Wnt/β-catenin通路调控hPDLSCs成骨分化
4
作者 孙金熠 王勤英 +6 位作者 陈河林 曾筱 李英 孟茂花 李文杰 罗云彩 董强 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2026年第1期18-24,共7页
目的:研究SIRT7在炎症环境下调控hPDLSCs成骨分化的机制。方法:分离培养hPDLSCs,将hPDLSCs进行成骨诱导0、7、14d后,RT-qPCR和westernblot检测Runx2、OCN、ALP及SIRT7表达。取P3代hPDLSCs,分为NC组、炎症组(A组)、炎症+OE-Control组(B组... 目的:研究SIRT7在炎症环境下调控hPDLSCs成骨分化的机制。方法:分离培养hPDLSCs,将hPDLSCs进行成骨诱导0、7、14d后,RT-qPCR和westernblot检测Runx2、OCN、ALP及SIRT7表达。取P3代hPDLSCs,分为NC组、炎症组(A组)、炎症+OE-Control组(B组)、炎症+OE-SIRT7组(C组)、炎症+KD-Control组(D组)、炎症+KD-SIRT7组(E组)、炎症+OE-SIRT7+DKK1组(F组)、炎症+KD-SIRT7+LiCl组(G组);Westernblot检测IL-1β和IL-6蛋白表达;检测ALP活性;茜素红染色检测矿化结节形成;RT-qPCR和WB检测成骨相关因子、SIRT7、Wnt3a及β-catenin蛋白表达。结果:与成骨分化诱导0d相比,成骨诱导7、14d后hPDLSCs中SIRT7的mRNA和蛋白表达升高;与NC组相比A组hPDLSCs中Runx2、OCN、ALP和SIRT7的mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.05);过表达SIRT7可抑制hPDLSCs中炎症因子分泌水平(P<0.05);沉默SIRT7后则相反。过表达SIRT7可提高炎症微环境下hPDLSCs的ALP活性、矿化结节数量和Runx2、OCN、ALP、Wnt3a、β-catenin的mRNA和蛋白表达水平(P<0.05);沉默SIRT7后则相反。结论:SIRT7通过激活Wnt/β-catenin信号通路逆转炎症微环境对hPDLSCs成骨分化抑制作用。 展开更多
关键词 SIRT7 牙周膜干细胞 成骨分化 牙周炎 WNT/Β-catenin通路
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米诺地尔酊基于Wnt/β-catenin信号通路治疗雄激素性脱发的药效及机制研究
5
作者 吴美超 姜鹏爽 +3 位作者 高晓冉 刘翊 刘冰 石云 《中国美容医学》 2026年第1期9-13,共5页
目的:探讨米诺地尔酊基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路治疗雄激素性脱发(AGA)的药效及作用机制。方法:小鼠随机分为对照组、AGA组、米诺地尔酊组、DKK-1(Wnt/β-catenin通路抑制剂)组、米诺地尔酊+DKK-1组,每组12只。除对照组外,其... 目的:探讨米诺地尔酊基于Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)通路治疗雄激素性脱发(AGA)的药效及作用机制。方法:小鼠随机分为对照组、AGA组、米诺地尔酊组、DKK-1(Wnt/β-catenin通路抑制剂)组、米诺地尔酊+DKK-1组,每组12只。除对照组外,其他组小鼠均通过连续14 d每天向脱毛区涂抹1次0.1 ml 8%丙酸睾酮诱导AGA模型。建模第1天各组开始给药处理,1次/天,持续60 d。检测小鼠脱毛区毛发覆盖率、毛发重量、毛发长度;HE染色观察小鼠脱毛区皮肤组织中毛囊状态;qRT-PCR检测小鼠脱毛区皮肤组织中胰岛素样生长因子(IGF-1)、血管内皮生长因子(VEGF)mRNA表达;ELISA检测小鼠脱毛区皮肤组织中双氢睾酮、睾酮、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性;Western blot检测小鼠脱毛区皮肤组织中Wnt3a、β-catenin蛋白。结果:与对照组相比,AGA组小鼠皮肤组织中毛囊大多数位于表皮,毛囊数量少,脱毛区毛发覆盖率、毛发重量、毛发长度降低,脱毛区皮肤组织中双氢睾酮、睾酮水平、ROS、MDA水平升高,脱毛区皮肤组织中IGF-1、VEGF mRNA表达、SOD活性及Wnt3a、β-catenin蛋白降低(P<0.05);与AGA组相比,米诺地尔酊组小鼠毛囊均位于真皮层,毛囊数量增多,脱毛区毛发覆盖率、毛发重量、毛发长度降低,脱毛区皮肤组织中双氢睾酮、睾酮水平、ROS、MDA水平降低,脱毛区皮肤组织中IGF-1、VEGF mRNA表达、SOD活性及Wnt3a、β-catenin蛋白升高,DKK-1组小鼠上述指标变化与米诺地尔酊组相反(P<0.05);DKK-1逆转了米诺地尔酊对AGA小鼠雄激素水平及氧化应激的影响。结论:米诺地尔酊可能通过激活Wnt/β-catenin通路降低雄激素水平,抑制氧化应激,进而改善小鼠AGA。 展开更多
关键词 米诺地尔酊 Β-连环蛋白 雄激素性脱发 雄激素 氧化应激
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中药靶向调控Wnt/β-catenin信号通路治疗糖尿病足溃疡的研究进展 被引量：1
6
作者 李金鹏 郭婕 +1 位作者 何波 陈杰 《天然产物研究与开发》 北大核心 2025年第5期974-982,956,共10页
糖尿病溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)是糖尿病常见并发症,表现为足部溃疡合并感染,治疗周期长,具有较高的致残率和病死率。目前,现代医学对DFU的治疗效果并不令人满意,随着中医药的不断发展,中医药的多靶点、多通路、多层次和多系统的... 糖尿病溃疡(diabetic foot ulcer,DFU)是糖尿病常见并发症,表现为足部溃疡合并感染,治疗周期长,具有较高的致残率和病死率。目前,现代医学对DFU的治疗效果并不令人满意,随着中医药的不断发展,中医药的多靶点、多通路、多层次和多系统的治疗优势使其在DFU的治疗中表现出来的效果越来越显著。现代研究表明,DFU的发生发展与多条信号通路相关,其中Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路与DFU的关系最为密切,通过调控相关信号蛋白与基因的表达而参与DFU的发生和发展。近年来研究发现,中药单体、提取物和复方可通过调控Wnt/β-catenin通路下游蛋白与基因的表达而发挥治疗DFU的作用,但缺乏系统的整理与归纳。基于此,文章梳理国内外相关文献,分析阐释中医药干预Wnt/β-catenin信号通路治疗DFU的作用机制,总结和归纳出靶向调控该信号通路的中药单体、提取物和复方等,以期为DFU临床治疗与药物研制提供参考。 展开更多
关键词 糖尿病足溃疡 WNT/Β-catenin信号通路 中医药 研究进展
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基于Wnt/β-catenin通路探讨葛根芩连汤对结直肠肿瘤生长的影响和机制 被引量：1
7
作者 蔡蓉 王上 +3 位作者 肖柳 周燕萍 胡作为 李云海 《科学技术与工程》 北大核心 2025年第8期3142-3151,共10页
基于Wnt/β-catenin通路探究葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)对结直肠癌的抗肿瘤作用及对胞质分裂的蛋白质调节因子1(protein regulator of cytokinesis 1,PRC1)核易位的影响。采用BALB/c裸鼠皮下接种CT26结直肠癌细胞株制备... 基于Wnt/β-catenin通路探究葛根芩连汤(Gegen Qinlian Decoction,GQD)对结直肠癌的抗肿瘤作用及对胞质分裂的蛋白质调节因子1(protein regulator of cytokinesis 1,PRC1)核易位的影响。采用BALB/c裸鼠皮下接种CT26结直肠癌细胞株制备结直肠肿瘤体内模型,分别按低(L-GQD)、中(M-GQD)及高(H-GQD)剂量连续灌药干预25 d,模型组(Control)作为空白对照,并记录裸鼠皮下肿瘤生长变化,于末次给药后取出肿瘤后观察。苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining,HE)、免疫组化(immunohistochemistry,IHC)和原位末端转移酶标记技术(terminal deoxynucleotidyl transferase-mediated dUTP nick end labeling,TUNEL)检测肿瘤的增殖和凋亡情况,并通过qRT-PCR和蛋白质免疫印迹分析(western blot,WB)检测Wnt/β-catenin信号及其下游因子的表达变化;此外,WB检测GQD对PRC1的磷酸化水平其亚细胞定位的影响。结果表明:相较于Control组,GQD以剂量依赖方式抑制体内结直肠肿瘤的生长并提高其凋亡水平;IHC结果显示GQD下调了增殖相关蛋白细胞周期蛋白D1(Cyclind1)、增殖标志物Ki-67(Ki67)和血小板-内皮细胞黏附分子(CD31)的表达(P<0.05),同时促进了凋亡相关蛋白胱天蛋白酶3(Caspase 3)和胱天蛋白酶9(Caspase 9)的表达(P<0.05);进一步发现GQD可抑制Wnt/β-catenin信号的激活,推测可能与降低PRC1磷酸化水平并增加其核保留比例有关。GQD可显著抑制结直肠肿瘤的增殖并促进其凋亡,GQD还可抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活,且可能与介导PRC1的核易位有关。 展开更多
关键词 葛根芩连汤(GQD) 结直肠癌(CRC) Wnt/β-catenin信号 蛋白质调节因子1(PRC1)
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虫草素调节Wnt/β-catenin信号通路对肩袖撕裂损伤后脂肪浸润的影响 被引量：1
8
作者 谢求恩 梁邓文 +5 位作者 吴韶 郝旭辉 梁利光 简帮祥 董俊宏 杨雷 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第3期98-106,共9页
目的:研究虫草素通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制大鼠肩袖损伤后脂肪浸润的作用及其机制,为临床治疗肩袖损伤提供理论依据。方法:SPF级雌性SD大鼠50只,随机选取10只作为正常组,采用冈上肌肌腱和肩胛上神经压迫建立肩... 目的:研究虫草素通过调控Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路抑制大鼠肩袖损伤后脂肪浸润的作用及其机制,为临床治疗肩袖损伤提供理论依据。方法:SPF级雌性SD大鼠50只,随机选取10只作为正常组,采用冈上肌肌腱和肩胛上神经压迫建立肩袖损伤修复模型,将手术成功的大鼠按照随机区组设计分为模型组、虫草素低、中、高剂量组(20、40、80 mg·kg^(-1))。治疗6周后,采用步态分析评估大鼠肢体功能;油红O染色和马松(Masson)染色观察肌肉组织病理变化情况;酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量;免疫组化(IHC)检测脂肪形成标记物氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)和CCAAT增强子结合蛋白α(C/EBPα)蛋白的表达,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测Wnt3a、Wnt10b、β-catenin mRNA和蛋白表达情况。结果:与正常组比较,模型组大鼠步幅长和爪印面积显著下降(P<0.01),湿肌质量减少比率明显升高、肌纤维横截面积明显下降(P<0.05),脂肪浸润面积比率下降、胶原纤维面积比率显著下降(P<0.01),IL-1β、IL-6和TNF-α含量明显上升(P<0.05),PPARγ、C/EBPα蛋白表达均显著升高(P<0.01),Wnt3a、Wnt10b、β-catenin mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,虫草素低、中、高剂量组大鼠步幅长和爪印面积均显著升高(P<0.01),湿肌质量减少比率明显降低、肌纤维横截面积明显升高(P<0.05),脂肪浸润面积比率和胶原纤维面积比率明显升高(P<0.05,P<0.01),IL-1β、IL-6、TNF-α含量明显下降(P<0.05,P<0.01),PPARγ、C/EBPα蛋白表达均显著降低(P<0.01),Wnt3a、Wnt10b、β-catenin mRNA和蛋白表达均明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:虫草素能显著改善大鼠肢体功能,减轻大鼠肩袖肌肉萎缩、脂肪浸润及纤维化程度,并能抑制炎症反应,其机制与调控Wnt/β-catenin信号通路相关。 展开更多
关键词 虫草素 肩袖损伤 Wnt/β-连环蛋白(β-catenin) 脂肪浸润
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壮医莲花针拔罐逐瘀法对带状疱疹后神经痛小鼠Wnt3a/β-catenin通路的影响 被引量：1
9
作者 赖菁菁 向军军 +6 位作者 韩海涛 李婕 黄瑾明 陈秋霞 李秀娟 李伟茜 李美康 《陕西中医》 2025年第4期435-439,共5页
目的:探讨壮医莲花针拔罐逐瘀法对带状疱疹后神经痛(PHN)小鼠行为学变化的影响及其对Wnt3a/β-catenin通路效应机制。方法:40只KM小鼠随机分为对照组、模型组、加巴喷丁组、壮医莲花针拔罐逐瘀组(壮医组),每组10只。采用树脂毒素(RTX)制... 目的:探讨壮医莲花针拔罐逐瘀法对带状疱疹后神经痛(PHN)小鼠行为学变化的影响及其对Wnt3a/β-catenin通路效应机制。方法:40只KM小鼠随机分为对照组、模型组、加巴喷丁组、壮医莲花针拔罐逐瘀组(壮医组),每组10只。采用树脂毒素(RTX)制作PHN小鼠模型,观察干预后各组小鼠行为学机械痛觉阈值(PWT)、热痛觉阈值(TWL)的变化;ELISA检测N-甲基-D-天冬氨酸受体2B亚单(NR2B)、神经激肽-1(NK-1)含量;免疫组化及WB检测Wnt3a、Axin2因子表达。结果:造模后,与对照组相比,模型组PWT降低,TWL升高,提示模型构建成功;与模型组相比,加巴喷丁组和壮医组分别在第3、4节点行为学测试PWT显著升高,TWL显著降低(均P<0.05);与加巴喷丁组相比,壮医组在第6次节点PWT显著升高,TWL显著降低(均P<0.05)。与对照组相比,PHN组NR2B、NK-1表达显著升高(均P<0.05);与模型组相比,加巴喷丁组和壮医组NR2B、NK-1表达明显降低(均P<0.05)。与对照组相比,模型组Wnt3a表达升高,Axin2表达降低(均P<0.05);与模型组相比,加巴喷丁组与壮医组Wnt3a表达显著降低,Axin2表达升高(均P<0.05)。结论:壮医莲花针拔罐逐瘀法治疗PHN可能通过抑制或阻断Wnt3a/β-catenin通路,抑制神经递质释放,从而减轻痛觉过敏发挥镇痛作用。 展开更多
关键词 带状疱疹后神经痛 壮医莲花针拔罐逐瘀法 Axis抑制蛋白2 N-甲基-D-天冬氨酸受体2B 神经激肽1 Wnt3a/β-catenin通路
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矾冰纳米乳调节Wnt/β-catenin通路对糖尿病型肛瘘术后创面愈合的影响 被引量：1
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作者 陆文洪 刘丽芳 +1 位作者 王真权 罗雯鹏 《湖南中医药大学学报》 2025年第5期810-817,共8页
目的 观察矾冰纳米乳对糖尿病型肛瘘术后大鼠创面愈合及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其促进创面修复的作用机制。方法 将72只SPF级SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、矾冰纳米乳组和湿润烧伤膏组(每... 目的 观察矾冰纳米乳对糖尿病型肛瘘术后大鼠创面愈合及Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路相关蛋白表达的影响,探讨其促进创面修复的作用机制。方法 将72只SPF级SD雌性大鼠随机分为假手术组、模型组、矾冰纳米乳组和湿润烧伤膏组(每组18只),均建立糖尿病大鼠模型。除假手术组外,其余各组再建立糖尿病肛瘘术后创面模型。模型组每天予局部覆盖生理盐水纱条,矾冰纳米乳组每天予局部覆盖矾冰纳米乳纱条,湿润烧伤膏组每天予局部覆盖湿润烧伤膏纱条,连续干预21 d。分别于第7、14、21天观察各组大鼠体质量、精神状态、活动能力及创面愈合率;HE染色检测创面组织病理变化及毛细血管计数;Western blot检测创面组织中Wnt1、β-catenin、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、癌基因C-myc(C-myc)、血管内皮生长因子(VEGF)、血管内皮生长因子受体2(VEGFR2)及糖原合酶激酶3β(GSK-3β)蛋白表达水平。结果 与假手术组比较,模型组大鼠体质量、创面愈合率降低(P<0.05);组织炎症浸润增加,毛细血管计数减少(P<0.05);第21天Wnt1、β-catenin、Cyclin D1、C-myc蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),VEGF、VEGFR2和GSK-3β表达水平下降(P<0.01)。与模型组比较,矾冰纳米乳组与湿润烧伤膏组大鼠体质量、创面愈合率上升(P<0.01);炎症细胞减少、毛细血管计数增加(P<0.05);第21天Wnt1、β-catenin、C-myc、Cyclin D1、VEGF与VEGFR2蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),GSK-3β表达水平下降(P<0.01)。结论 矾冰纳米乳可能通过激活Wnt/β-catenin通路的相关蛋白,从而改善创面组织病理状态,促进创面愈合。 展开更多
关键词 矾冰纳米乳 WNT/Β-catenin信号通路 糖尿病 肛瘘 术后创面
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Adar3通过激活Wnt/β-catenin信号通路促进巨噬细胞M2极化缓解病毒性心肌炎
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作者 张梦莹 李志 +4 位作者 裴纬亚 万淑君 李雪琴 吕坤 朱小龙 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期769-777,共9页
目的探讨RNA特异性腺苷脱氨酶3(Adar3)调控巨噬细胞极化在柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VM)中的作用及机制。方法体外培养鼠源的骨髓巨噬细胞(BMDM),以γ干扰素(IFN-γ)/脂多糖(LPS)或白细胞介素4(IL-4)分别将其诱导成M1/M2型... 目的探讨RNA特异性腺苷脱氨酶3(Adar3)调控巨噬细胞极化在柯萨奇病毒B3(CVB3)诱导的病毒性心肌炎(VM)中的作用及机制。方法体外培养鼠源的骨髓巨噬细胞(BMDM),以γ干扰素(IFN-γ)/脂多糖(LPS)或白细胞介素4(IL-4)分别将其诱导成M1/M2型巨噬细胞,采用实时荧光定量PCR检测各组细胞Adar1、2、3的表达水平。设计、合成针对Adar3基因的siRNA,瞬时转染M2型巨噬细胞,实时荧光定量PCR检测M2巨噬细胞极化相关标志基因精氨酸酶1(Arg1)、类几丁质酶3样分子3(YM1/Chi3l3)、类抵抗素分子α(RELMα/FIZZ1)的mRNA水平。RNA测序分析Adar3影响的信号通路,实时荧光定量PCR和Western blot法检测Wnt/β联蛋白(β-catenin)信号通路表达水平。设计、合成Adar3的过表达腺相关病毒,尾静脉注射感染小鼠,三周后构建心肌炎小鼠模型,一周后检测小鼠心脏巨噬细胞表型和功能及VM的多个指标(超声心动图、体质量、病理学及血清学等),和Wnt/β-catenin信号通路蛋白水平。结果与M0型巨噬细胞相比,M2型巨噬细胞中Adar3表达水平显著增加,转染Adar3 siRNA后,M2型巨噬细胞的Arg1、YM1、FIZZ1的mRNA水平下调。RNA测序显示,149个基因表达上调,349个基因表达下调。京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,表达验证显示Adar3影响Wnt/β-catenin信号通路。体内实验显示,过表达Adar3能够减轻VM小鼠心脏功能障碍。心脏中的M1巨噬细胞比例减少,M2巨噬细胞比例增多,同时Adar3的过表达激活了Wnt/β-catenin信号通路。结论Adar3通过激活巨噬细胞中Wnt/β-catenin信号通路促进巨噬细胞向M2型极化,以此缓解VM。 展开更多
关键词 病毒性心肌炎(VM) Adar3 巨噬细胞极化 WNT Β-catenin
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基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方改善ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉内皮细胞间质转化的作用机制
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作者 吕美君 贾连群 +3 位作者 闵冬雨 宋囡 王杰 张琦 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第1期159-164,I0003,共7页
目的基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方对ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉EndMT的作用机制。方法24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只;C57BL/6J小鼠8只作为空白常对照组。ApoE~(-/-)小鼠... 目的基于ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路探讨化瘀祛痰方对ApoE~(-/-)AS小鼠主动脉EndMT的作用机制。方法24只ApoE~(-/-)小鼠随机分为模型组、化瘀祛痰方组、辛伐他汀组,每组8只;C57BL/6J小鼠8只作为空白常对照组。ApoE~(-/-)小鼠给予高脂饲料喂养制备AS模型,C57BL/6J小鼠给予普通饲料喂养。12周后,开始灌胃,空白对照组和模型组灌胃等容积生理盐水,化瘀祛痰方组灌胃化瘀祛痰方20 g/(kg·d),辛伐他汀组灌胃辛伐他汀混悬液2.275 mg/(kg·d),每日1次,给药4周。采用全自动生化分析仪检测血清血脂水平;苏木精-伊红染色法(HE)观察主动脉病理组织形态表现;免疫荧光法检测主动脉EndMT程度;实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测主动脉转录因子E盒结合锌指蛋白1(ZEB1)、TWIST mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血管内皮钙粘蛋白(VE-Cadherin)、ZEB1、TWIST、Akt1、p-Akt1、β-catenin、p-β-catenin、TGF-β1、Smad2及p-Smad2蛋白表达水平。结果与空白对照组相比,模型组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平显著升高,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平显著下降(P<0.05);主动脉内壁不平整光滑,可见多量的泡沫细胞聚集,形成粥样斑块,斑块附着处血管内膜明显增厚且结构紊乱,管腔中可见脱落的斑块碎;主动脉α-SMA、VE-Cadherin双染色阳性细胞明显增多,α-SMA蛋白表达水平明显升高,VE-Cadherin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);主动脉转录因子ZEB1、TWIST mRNA及蛋白表达水平明显升高(P<0.05);主动脉TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平明显升高(P<0.05),肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉p-Akt1及p-β-catenin蛋白表达水平明显降低(P<0.05);化瘀祛痰方干预后,小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著下降,HDL-C水平显著升高(P<0.05);主动脉内壁欠光滑,可见少量内皮细胞脱落,管壁厚度明显减轻;主动脉α-SMA、VE-Cadherin双染色阳性细胞明显减少,α-SMA蛋白表达水平明显降低,VE-Cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.05);主动脉转录因子ZEB1、TWIST mRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05);主动脉TGF-β1、p-Smad2蛋白表达水平明显降低(P<0.05),肝脏ApoA-Ⅰ、主动脉p-Akt1及p-β-catenin蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论化瘀祛痰方能够显著改善ApoE~(-/-)AS小鼠EndMT,其作用机制可能与调控ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路,调节EndMT相关转录因子,进而调节EndMT基因表达有关。 展开更多
关键词 化瘀祛痰方 动脉粥样硬化 内皮细胞间质转化 ApoA-Ⅰ/Akt1/β-catenin/TGF-β通路
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基于Wnt/β-catenin信号通路的针灸效应研究进展
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作者 罗芳丽 孙路强 +3 位作者 王司琦 侯雨君 李瑛 周思远 《辽宁中医杂志》 北大核心 2025年第8期197-202,I0006,共7页
Wnt/β-catenin信号通路对细胞增殖、分化凋亡、组织稳态和干细胞维持至关重要,该通路的异常调控与许多疾病的发生发展密切相关。越来越多的研究证据表明针灸可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路中基因或蛋白的表达量,从而影响疾病的进... Wnt/β-catenin信号通路对细胞增殖、分化凋亡、组织稳态和干细胞维持至关重要,该通路的异常调控与许多疾病的发生发展密切相关。越来越多的研究证据表明针灸可以通过调控Wnt/β-catenin信号通路中基因或蛋白的表达量,从而影响疾病的进展,但其具体机制尚未阐述清楚。作者通过检索近10年来针灸调控Wnt/β-catenin信号通路的文献资料,综述了Wnt/β-catenin信号通路在针灸治病过程中的调节机制,分析针灸防治疾病的机制机理,为今后针灸临床治疗和试验研究提供参考和新的研究方向。 展开更多
关键词 针灸 WNT/Β-catenin信号通路 针灸效应 研究进展
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基于Wnt/β-catenin信号通路探讨超声引导下椎间孔电针对脊髓损伤的影响
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作者 吴韦贤 陈斌 +3 位作者 刘晶 王丽 陈斐臻 吴燕玲 《中国针灸》 北大核心 2025年第10期1442-1449,共8页
目的:观察超声引导下椎间孔电针对脊髓损伤(SCI)模型大鼠神经细胞凋亡及运动功能的影响,探讨其可能作用机制。方法:将36只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、超声引导下电针组,每组12只。假手术组暴露脊髓后即缝合伤口,不做打击;其... 目的:观察超声引导下椎间孔电针对脊髓损伤(SCI)模型大鼠神经细胞凋亡及运动功能的影响,探讨其可能作用机制。方法:将36只SPF级SD大鼠随机分为假手术组、模型组、超声引导下电针组,每组12只。假手术组暴露脊髓后即缝合伤口,不做打击;其余组均应用改良的Allen's脊髓损伤打击法造模。造模成功后的第1、3、7、14天,超声引导下电针组在超声引导下于T9/T10、T10/T11椎间孔行电针干预,避免损伤脊髓,疏密波,频率2 Hz/100 Hz,电流1~2 mA。第1、3、7、14天干预结束后,评定大鼠Basso-Beattie-Bresnahan(BBB)评分,行斜板实验检测大鼠后肢抓力。干预结束后,采用HE染色法观察大鼠脊髓形态,TUNEL染色法检测大鼠脊髓神经细胞凋亡情况,ELISA法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量,Western blot法检测大鼠脊髓无翼型相关整合位点-4(Wnt-4)、β-连环蛋白(β-catenin)、细胞髓细胞瘤病毒原癌基因同源物(c-Myc)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax)、Bcl-2、神经元核(NeuN)蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测大鼠脊髓Wnt-4、β-catenin、c-Myc、Bax、Bcl-2、NeuN mRNA表达。结果:与假手术组比较,模型组各时点BBB评分降低(P<0.05),斜板角度减小(P<0.05);与模型组比较,超声引导下电针组第3、7、14天干预结束后BBB评分升高(P<0.05),第1、3、7、14天干预结束后斜板角度增加(P<0.05)。与假手术组比较,模型组脊髓结构紊乱,炎性细胞、坏死神经元增多;脊髓凋亡神经细胞数量增多(P<0.05);血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量升高(P<0.05);脊髓Wnt-4、β-catenin、c-Myc、Bax蛋白及mRNA表达升高(P<0.05),Bcl-2、NeuN蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。与模型组比较,超声引导下电针组脊髓炎性细胞减少;凋亡神经细胞数量减少(P<0.05);血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量降低(P<0.05);脊髓Wnt-4、β-catenin、Bcl-2、NeuN蛋白及mRNA表达升高(P<0.05),c-Myc、Bax蛋白及mRNA表达降低(P<0.05)。结论:超声引导下椎间孔电针可改善SCI模型大鼠运动功能,可能通过调控Wnt-4/β-catenin信号通路相关分子表达,抑制神经细胞凋亡和炎症反应实现。 展开更多
关键词 脊髓损伤 椎间孔电针 超声引导 WNT/Β-catenin信号通路
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艾司氯胺酮通过调节脊髓背角星形胶质细胞活化和Wnt/β-catenin通路在小鼠慢性疼痛中的作用机制研究
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作者 黄芳 王萍 +1 位作者 章征兵 胡强 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第10期1483-1491,共9页
目的本研究旨在探讨艾司氯胺酮对慢性疼痛小鼠脊髓背角星形胶质细胞活化的影响,并分析其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选取了40只C57BL/6J品系的小鼠,随机分为5组:假手术(sham)组、疼痛模型(model)组、艾司氯胺酮低剂量(L-Es)... 目的本研究旨在探讨艾司氯胺酮对慢性疼痛小鼠脊髓背角星形胶质细胞活化的影响,并分析其对Wnt/β-catenin信号通路的影响。方法选取了40只C57BL/6J品系的小鼠,随机分为5组:假手术(sham)组、疼痛模型(model)组、艾司氯胺酮低剂量(L-Es)组、艾司氯胺酮中剂量(M-Es)组、艾司氯胺酮高剂量(H-Es)组。除了sham组外,其他组均采用坐骨神经分支选择性损伤法建立慢性疼痛小鼠模型。各组接受相应药物处理,并测定其机械撤退阈值(MWT)和热撤退潜伏期(TWL)。此外,通过免疫组织化学方法检测脊髓中抗胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达水平;采用免疫荧光技术观察小鼠脊髓背角星形胶质细胞的激活情况;使用ELISA检测脊髓中的炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平;通过qRT-PCR分析小鼠脊髓中Wnt3a、β-catenin、Cyclin D1的mRNA表达水平;利用Western Blot评估小鼠脊髓中Wnt3a、β-catenin和Cyclin D1蛋白的表达情况。结果与sham组相比,model组小鼠的MWT和TWL显著降低(均P<0.001);IL-1β、IL-6、TNF-α的水平及GFAP蛋白的表达水平显著升高(均P<0.001),且GFAP与Iba-1存在共表达现象。Wnt3a、β-catenin和Cyclin D1的mRNA及蛋白表达均显著升高(均P<0.001)。与model组相比,艾司氯胺酮各剂量组小鼠的MWT和TWL均显著升高,且存在剂量依赖性(均P<0.001);炎症因子IL-1β、IL-6、TNF-α的水平及GFAP蛋白的表达显著降低(P<0.001);GFAP与Iba-1不存在共表达现象;Wnt3a、β-catenin和Cyclin D1的mRNA及蛋白(P<0.001)表达均显著下降。结论艾司氯胺酮能够抑制星形胶质细胞的激活和炎症反应,从而减轻慢性疼痛,其作用机制可能涉及对Wnt/β-catenin信号传导途径的调节。 展开更多
关键词 艾司氯胺酮 星形胶质细胞 WNT/Β-catenin通路 慢性疼痛
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芪芍通痹胶囊对腰椎间盘退行性改变模型大鼠Wnt/β-catenin通路的影响
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作者 薛玉满 徐西林 +4 位作者 韩巍 许嘉犇 许文婷 刘泽霖 张晓峰 《中医杂志》 北大核心 2025年第1期79-88,共10页
目的探讨芪芍通痹胶囊治疗腰椎间盘退行性改变(IDD)的可能作用机制。方法75只SD大鼠随机分为对照组,模型组,芪芍通痹低、高剂量组,芪芍通痹高剂量+激动剂组,每组15只。除对照组外,其余各组采用纤维环穿刺法制备大鼠IDD模型。造模后芪芍... 目的探讨芪芍通痹胶囊治疗腰椎间盘退行性改变(IDD)的可能作用机制。方法75只SD大鼠随机分为对照组,模型组,芪芍通痹低、高剂量组,芪芍通痹高剂量+激动剂组,每组15只。除对照组外,其余各组采用纤维环穿刺法制备大鼠IDD模型。造模后芪芍通痹低、高剂量组大鼠给予芪芍通痹胶囊0.2、0.8 g/(kg·d)灌胃;芪芍通痹高剂量+激动剂组给予芪芍通痹胶囊0.8 g/(kg·d)和SKL2001溶液10 mg/(kg·d)灌胃;对照组、模型组给予10 ml/(kg·d)蒸馏水灌胃,各组均每天1次,连续灌胃4周。最后一次给药后采用X射线和MRI检测各组IDD程度;HE染色、番红O-固绿染色观察椎间盘组织形态;免疫组化染色法观察椎间盘组织蛋白多糖、Ⅱ型胶原(COLⅡ)、基质金属蛋白酶3(MMP-3)蛋白水平;Western Blot法检测椎间盘髓核组织细胞外基质(ECM)相关蛋白[蛋白多糖、COLⅡ、MMP-3、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶13(MMP-13)]、衰老相关蛋白(P53、P21、P16)、凋亡相关蛋白[B细胞淋巴瘤/白血病2(BCL-2)、BCL-2相关X蛋白(BAX)、剪切型天冬氨酸-半胱氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase-3)]、Wnt/β-catenin通路相关蛋白[Wnt3a、糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、β-catenin]水平;RT-qPCR检测椎间盘组织Wnt3a、GSK-3β、β-catenin mRNA表达。结果与模型组比较,芪芍通痹低、高剂量组大鼠椎间盘高度指数(DHI)升高,MRI Pfirrmann分级降低,IDD程度明显减轻,椎间盘髓核和纤维环结构完整性升高,髓核细胞数量增多,椎间盘髓核组织中蛋白多糖、COLⅡ、BCL-2、GSK-3β蛋白水平升高,MMP-3、MMP-9、MMP-13、P53、P21、P16、BAX、Cleaved Caspase-3、Wnt3a、β-catenin蛋白水平降低,Wnt3a、β-catenin mRNA表达降低,GSK-3βmRNA表达升高(P<0.05);与芪芍通痹低剂量组比较,芪芍通痹高剂量组大鼠DHI升高,MRI Pfirrmann分级降低(P<0.05),IDD程度进一步减轻,椎间盘髓核和纤维环结构完整性更高,髓核细胞数量进一步增多,椎间盘髓核组织中蛋白多糖、COLⅡ、BCL-2、GSK-3β蛋白水平升高,MMP-3、MMP-9、MMP-13、P53、P21、P16、BAX、Cleaved Caspase-3、Wnt3a、β-catenin蛋白水平降低,Wnt3a、β-catenin mRNA表达降低,GSK-3βmRNA表达升高(P<0.05);与芪芍通痹高剂量组比较,芪芍通痹高剂量+激动剂组DHI降低,MRI Pfirrmann分级升高(P<0.05),IDD程度明显加重,椎间盘髓核和纤维环结构完整性降低,髓核细胞数量减少,椎间盘髓核组织蛋白多糖、COLⅡ、BCL-2、GSK-3β蛋白水平降低,MMP-3、MMP-9、MMP-13、P53、P21、P16、BAX、Cleaved Caspase-3蛋白水平升高,GSK-3βmRNA表达降低(P<0.05)。结论芪芍通痹胶囊能够抑制IDD大鼠椎间盘髓核细胞衰老、凋亡和ECM降解,其可能通过抑制Wnt/β-catenin通路发挥作用。 展开更多
关键词 腰椎间盘退行性改变 髓核细胞 WNT/Β-catenin通路 芪芍通痹胶囊
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木犀草素调控Wnt/β-catenin轴对肝癌细胞迁移和侵袭的影响
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作者 杨培伟 马素平 +2 位作者 刘光伟 陈欣菊 赵文霞 《中医药学报》 2025年第9期26-32,共7页
目的:观察木犀草素对肝癌细胞MHCC97H和Huh7迁移和侵袭作用的影响,并从Wnt/β-catenin信号通路探讨其调控机制。方法:木犀草素处理肝癌细胞24 h,通过细胞划痕和Transwell小室侵袭实验检测木犀草素对肝癌细胞株迁移和侵袭能力的影响;West... 目的:观察木犀草素对肝癌细胞MHCC97H和Huh7迁移和侵袭作用的影响,并从Wnt/β-catenin信号通路探讨其调控机制。方法:木犀草素处理肝癌细胞24 h,通过细胞划痕和Transwell小室侵袭实验检测木犀草素对肝癌细胞株迁移和侵袭能力的影响;Western blot和RT-PCR技术检测肝癌细胞株中迁移和侵袭相关ICAM-1、RHOC、MMP2和MMP9的表达,以及Wnt/β-catenin信号通路中关键蛋白/基因Wnt1、β-catenin和GSK3β的表达情况;BABL/C裸小鼠尾静脉注射MHCC97H细胞构建肝癌肝肺转移模型,HE染色观察肝脏和肺组织的病理变化和转移灶情况;RT-PCR检测Wnt/β-catenin信号通路以及迁移和侵袭相关基因的表达情况。结果:与对照组比较,木犀草素能抑制MHCC97H和Huh7细胞增殖,细胞划痕愈合进程明显减缓、细胞侵袭数目明显减少,迁移侵袭相关MMP2、ICAM-1、RHOC、Wnt1、β-catenin、GSK3β表达水平明显降低,差异具有统计学意义(P<0.05,P<0.01),对MMP-9的表达无明显影响(P>0.05)。体内实验中,肝和肺组织形态学检查显示,模型组可见明显的肿瘤细胞增生,肿瘤细胞呈弥散致密排列、有不同程度有丝分裂活性;木犀草素组的肿瘤组织可见明显的细胞坏死和凋亡,肝、肺转移灶的数目明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.01)。木犀草素组肝组织迁移侵袭相关MMP2、ICAM-1、Wnt1、β-catenin和GSK3β的表达水平明显降低(P<0.01),MMP-9的表达无明显变化(P>0.05)。结论:木犀草素在体外和体内水平上可以抑制肝癌细胞株的迁移和侵袭相关ICAM-1、RHOC、MMP2的表达,降低HCC中Wnt1、β-catenin和GSK3β的表达,表明通过抑制Wnt/β-catenin信号通路活化可能是木犀草素调控HCC迁移和侵袭的重要机制之一。 展开更多
关键词 木犀草素 迁移 侵袭 WNT/Β-catenin 作用机制
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右归丸活性成分对成骨-破骨共育体系Wnt/β-catenin、OPG/RANKL/RANK通路相关因子mRNA表达的影响
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作者 章建华 裘佳韦 +2 位作者 商佳璐 叶怡馨 尹华 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第7期3456-3463,共8页
目的:明确右归丸活性成分乌头碱类、松脂醇葡萄糖苷、肉桂酸等对成骨(OB)-破骨(OC)共育体系Wnt/β-catenin、OPG/RANKL/RANK通路相关因子LRP6、LRP5、β-catenin等mRNA表达的调控作用。方法:分别用MC3T3-E1和RAW264.7诱导培养OB和OC并... 目的:明确右归丸活性成分乌头碱类、松脂醇葡萄糖苷、肉桂酸等对成骨(OB)-破骨(OC)共育体系Wnt/β-catenin、OPG/RANKL/RANK通路相关因子LRP6、LRP5、β-catenin等mRNA表达的调控作用。方法:分别用MC3T3-E1和RAW264.7诱导培养OB和OC并进行鉴定,以Transwell共培养建立OB-OC共育体系;分别制备右归丸活性成分乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、松脂醇二葡萄糖苷、肉桂酸的单体干预液,并采用RT-qPCR法检测细胞中LRP6、LRP5、β-catenin、TCF7、Fzd2、OPG、TRAF6、NFATc1、c-Fos、MMP9、CTSK、Car2 mRNA的表达。结果:成功诱导OB和OC,并建立OB-OC共育体系;右归丸活性成分中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、松脂醇二葡萄糖苷、肉桂酸能上调OB-OC共育体系中Wnt/β-catenin通路LRP6、LRP5、β-catenin、TCF7、Fzd2 mRNA表达水平;次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、松脂醇二葡萄糖能上调OPG/RANKL/RANK通路OPG mRNA表达水平;乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱、苯甲酰新乌头原碱、松脂醇二葡萄糖苷、肉桂酸能抑制OPG/RANKL/RANK通路TRAF6、NFATc1、c-Fos、MMP9、CTSK、Car2 mRNA水平的表达。结论:右归丸活性成分可以通过调控Wnt/β-catenin、OPG/RANKL/RANK通路相关因子的基因表达,促进骨形成,抑制骨吸收,重建骨代谢平衡,起到治疗骨质疏松肾阳虚证的作用。 展开更多
关键词 右归丸活性成分 成骨-破骨共育体系 Wnt/β-catenin通路 OPG/RANKL/RANK通路 mRNA
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RBM15通过ATAD3A调控Wnt/β-catenin通路对宫颈癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响
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作者 张春年 何静 +2 位作者 肖娟 顾丽琴 韩贤华 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第10期1036-1043,共8页
目的:探讨RNA结合蛋白15(RBM15)通过三磷酸腺苷酶家族蛋白3A(ATAD3A)调控Wnt/β-catenin通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:利用TCGA数据库分析宫颈癌组织中RBM15 mRNA表达水平及其与患者预后的关系。收集2024年1月至10月期... 目的:探讨RNA结合蛋白15(RBM15)通过三磷酸腺苷酶家族蛋白3A(ATAD3A)调控Wnt/β-catenin通路对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:利用TCGA数据库分析宫颈癌组织中RBM15 mRNA表达水平及其与患者预后的关系。收集2024年1月至10月期间在赣州市人民医院手术切除的32例宫颈癌组织及癌旁组织标本,以及宫颈癌细胞HeLa、MS-751、C-33A和SiHa,通过免疫组化、WB法检测宫颈癌组织和细胞中RBM15的表达水平。利用SRAMP在线数据库筛选ATAD3A mRNA的m^(6)A修饰位点。通过RNA免疫沉淀实验、RNA衰变实验及挽救实验鉴定RBM15与ATAD3A mRNA的相互作用。采用RNA干扰技术和病毒感染技术,在宫颈癌HeLa和SiHa细胞敲低或过表达RBM15和ATAD3A,qPCR和WB法检测mRNA和蛋白表达,CCK-8法、划痕实验和Transwell实验检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。结果:宫颈癌组织中RBM15 mRNA和蛋白阳性率均显著高于癌旁组织(均P<0.001)。宫颈癌HeLa、MS-751、C-33A和SiHa细胞RBM15蛋白表达水平显著高于正常宫颈细胞Ect1/E6E7(均P<0.01)。RBM15 mRNA高表达组患者5年无进展生存率低于低表达组患者(P<0.01)。宫颈癌组织中ATAD3A的表达水平显著高于癌旁组织(P<0.001),RBM15 mRNA与ATAD3A mRNA呈正相关(r=0.601,P<0.05)。ATAD3A mRNA的501、5312、12137位点存在高可信度的m^(6)A修饰位点。HeLa、SiHa细胞中过表达RBM15后,ATAD3A mRNA和蛋白表达升高,而敲低RBM15后,ATAD3A mRNA和蛋白表达降低(均P<0.001)。RNA免疫沉淀实验显示,与IgG组相比,RBM15抗体的免疫沉淀中ATAD3A mRNA显著富集(均P<0.001)。MeRIP-qPCR实验显示,ATAD3A mRNA 501、5312、12137位点均存在明显的m^(6)A甲基化富集(均P<0.001)。RNA衰变实验显示,敲低RBM15能降低HeLa、SiHa细胞ATAD3A mRNA的半衰期和稳定性(均P<0.001)。敲低HeLa、SiHa细胞RBM15的表达,显著抑制癌细胞的增殖、迁移及侵袭,Wnt/β-catenin通路相关蛋白Wnt3、β-catenin、vimentin表达均显著降低(均P<0.001);而过表达ATAD3A可完全逆转上述抑制作用(均P<0.001)。结论:RBM15通过m^(6)A修饰ATAD3A mRNA调控Wnt/β-catenin信号通路,从而促进宫颈癌细胞增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 RNA结合蛋白15 三磷酸腺苷酶家族蛋白3A 宫颈癌 增殖 迁移 侵袭 WNT/Β-catenin通路
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基于Wnt/β-catenin通路探讨三七复方对D-半乳糖致衰老大鼠肾脏的抗氧化作用及机制
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作者 王祯 李亚金 +5 位作者 沈奕玮 王倍翔 董媛媛 金振辉 王玉英 王景霞 《中医药导报》 2025年第12期1-7,共7页
目的:评价三七复方对肾脏的抗氧化及保护作用,并探究基于Wnt/β-catenin通路的抗氧化延缓衰老的作用机制。方法:将72只雄性SD大鼠按照体质量随机分为空白组、模型组、维生素E组、三七复方低剂量组、三七复方中剂量组、三七复方高剂量组... 目的:评价三七复方对肾脏的抗氧化及保护作用,并探究基于Wnt/β-catenin通路的抗氧化延缓衰老的作用机制。方法:将72只雄性SD大鼠按照体质量随机分为空白组、模型组、维生素E组、三七复方低剂量组、三七复方中剂量组、三七复方高剂量组,每组12只。除空白组外,其余各组大鼠连续4周腹腔注射D-半乳糖以制备衰老大鼠模型。造模期间,空白组、模型组大鼠每天灌胃蒸馏水,维生素E组大鼠灌胃维生素E溶液,三七复方低、中、高剂量组大鼠分别灌胃低、中、高剂量三七复方药液,连续4周。给药期间每日观察大鼠精神状态和毛色,每周检测大鼠体质量。给药结束后观测大鼠肾脏系数、肾一般损伤情况(包括肾功能指标BUN、Cr、UA)、肾脏氧化应激水平(过氧化产物MDA、8-OHdG)、抗氧化系统指标(T-SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力、T-AOC、GSH/GSSG)、肾组织形态结构(HE观察)以及肾组织中Wnt/β-catenin通路相关蛋白(Wnt4、GSK-3β、p-GSK-3β、β-catenin、c-Myc)相对表达量。结果:使用D-半乳糖造模后,与空白组相比,大鼠肾脏系数降低、肾功能减退、过氧化产物(MDA和8-OHdG)含量明显升高、肾中抗氧化指标(T-SOD活力、GSH-Px活力、CAT活力、T-AOC、T-GSH/GSSG比值)明显降低,肾脏组织内Wnt4、p-GSK3β、β-catenin和c-Myc蛋白表达量增加,GSK3β蛋白表达量下降,p-GSK3β/GSK3β上升;与模型组相比,三七复方组大鼠肾功能显著改善,氧化损伤减轻,机体抗氧化能力提高,肾脏组织内Wnt4、p-GSK3β、β-catenin和c-Myc蛋白表达量减少,p-GSK3β/GSK3β降低。结论:三七复方能够通过抑制D-半乳糖致衰老模型大鼠的氧化应激反应,减轻机体氧化损伤,减轻肾损伤,起到延缓衰老的作用。三七复方可能通过抑制Wnt/β-catenin通路,促进β-catenin的降解,减少β-catenin进入细胞核与TCF/LEF结合,抑制TCF/LEF调控的c-Myc基因表达,减少ROS的产生,降低机体氧化损伤,起到抗氧化延缓衰老的作用。 展开更多
关键词 衰老 抗氧化 三七复方 WNT/Β-catenin通路 氧化应激 大鼠
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