葛花作用于Casp3调控细胞自噬干预肝癌的机制研究 被引量：3

1

作者 李军 成果 +1 位作者 楼迪栋 张楠楠 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第3期200-210,共11页

目的:基于网络药理学和实验验证探讨葛花通过调控细胞自噬干预肝癌的作用机制。方法:通过细胞增殖、划痕实验探索葛花含药血清对HepG2细胞的影响。使用TCMSP数据库获取葛花靶点,从OMIM等数据库获得肝癌疾病靶点,从HADb数据库获得细胞自... 目的:基于网络药理学和实验验证探讨葛花通过调控细胞自噬干预肝癌的作用机制。方法:通过细胞增殖、划痕实验探索葛花含药血清对HepG2细胞的影响。使用TCMSP数据库获取葛花靶点,从OMIM等数据库获得肝癌疾病靶点,从HADb数据库获得细胞自噬基因,三者取交集后进行蛋白互作(PPI)、GO、KEGG富集分析,并筛选出Degree前15靶点。对筛选出的15个靶点进行差异表达、ROC曲线、临床相关性、生存预后、分子对接和分子动力学模拟分析。对最终筛选出来的靶点进行Western Blot验证,并检测自噬标志物LC3B的表达变化。结果:葛花含药血清可以显著抑制HepG2细胞的增殖和迁移。葛花抗肝癌的最重要靶点是Casp3,Casp3可以和葛花活性成分槲皮素(quercetin)稳定结合。与HepG2对照组相比,葛花含药血清组可显著下调Casp3蛋白表达,上调自噬标志物LC3BⅡ/LC3BⅠ。结论:葛花可通过作用于Casp3调控细胞自噬而干预肝癌。 展开更多

关键词 肝癌 葛花 细胞自噬 casp3

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CASP3与Cleaved-CASP3在肺癌中的表达及意义 被引量：21

2

作者 黄健清 梁红玲 +3 位作者 张绪超 谢至 刘海鹰 黄青 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第8期1247-1250,共4页

目的:探讨凋亡信号分子CASP3、C-CASP3在肺癌与癌旁中的表达差异及其与临床参数的关系意义。方法:制备非小细胞肺癌患者的癌与癌旁组织石蜡标本的组织芯片。采用免疫组织化学方法检测分析CASP3、C-CASP3凋亡分子在组织中的蛋白表达水平... 目的:探讨凋亡信号分子CASP3、C-CASP3在肺癌与癌旁中的表达差异及其与临床参数的关系意义。方法:制备非小细胞肺癌患者的癌与癌旁组织石蜡标本的组织芯片。采用免疫组织化学方法检测分析CASP3、C-CASP3凋亡分子在组织中的蛋白表达水平。结果:非配对的癌(n=139)与癌旁组织(n=25)中凋亡相关分子表达水平:非参数秩和检验结果提示CASP3、C-CASP3两组间比较发现在癌组织均有显著性差异的升高表达(P<0.01);双变量相关分析显示CASP3与C-CASP3之间相关性存在统计学显著性意义。凋亡分子表达与临床病理、生存因素之间的关系:C-CASP3在非鳞癌中表达高于鳞癌(P<0.05);KaplanMeir生存曲线法分析提示Ⅰ～Ⅱ期患者中CASP3表达水平与PFS存在负相关趋势(P=0.094)。结论:肺癌组织较癌旁组织凋亡分子表达均上调,CASP3可能成为可进行药物干预的分子标志物和靶点。C-CASP3在非鳞癌中表达高于鳞癌,在非鳞癌组织类型亚群患者中CASP3更可能作为潜在的干预靶点激活为C-CASP3而促进肿瘤细胞凋亡。CASP3可能是PFS的独立预后因子。 展开更多

关键词 肺肿瘤 凋亡 组织芯片 casp3

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CASP3基因R101H多态性与法洛四联症的相关性 被引量：1

3

作者 邱广蓉 刘培燕 +2 位作者 姜红堃 刘红波 孙开来 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期856-858,共3页

目的探讨CASP3基因R101H多态性与法洛四联症(TOF)的相关性。方法选择TOF患儿112例(TOF组)。男69例,女43例;年龄(4.27±1.93)岁。同时选取200名健康体检儿童为健康对照组。男102例,女98例;年龄(5.68±2.17)岁。采用病例对照研究... 目的探讨CASP3基因R101H多态性与法洛四联症(TOF)的相关性。方法选择TOF患儿112例(TOF组)。男69例,女43例;年龄(4.27±1.93)岁。同时选取200名健康体检儿童为健康对照组。男102例,女98例;年龄(5.68±2.17)岁。采用病例对照研究,应用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)进行CASP3基因R101H位点(NCBI SNP ID:rs146285839)多态性检测,分析基因型频率和等位基因频率在病例组和对照组的分布,比较不同基因型与TOF患病风险的关系。应用SPSS 15.0软件进行统计学分析。结果在312例样本中,CASP3基因R101H多态位点存在C/T多态。R101H多态位点基因型频率在TOF组与健康对照组中的分布存在统计学差异(χ2=9.752,P=0.008),等位基因频率在TOF组与健康对照组中的分布亦存在统计学差异(χ2=11.682,P=0.001),且T等位基因携带者患TOF的风险高于C等位基因携带者(OR=1.854,95%CI 1.298～2.647)。结论 CASP3基因R101H多态性与TOF具有明显的相关性,具有T等位基因的个体TOF患病风险增高,CASP3基因可能是TOF的遗传易感基因。 展开更多

关键词 法洛四联症 casp3基因 多态性

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高三尖杉酯碱通过上调casp3和casp8表达发挥对骨肉瘤细胞系的抑制作用 被引量：6

4

作者 钟厚成 朱宇凡 +1 位作者 杨敏 魏任雄 《生物骨科材料与临床研究》 CAS 2022年第4期8-15,共8页

目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对骨肉瘤细胞的抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法使用不同浓度的高三尖杉酯碱处理骨肉瘤细胞系(143b及U2-OS),通过CCK-8实验检测HHT对骨肉瘤细胞的抗肿瘤作用,集落形成实验检测骨肉瘤细胞的克... 目的探讨高三尖杉酯碱(HHT)对骨肉瘤细胞的抗肿瘤作用,并探讨其可能的作用靶点和机制。方法使用不同浓度的高三尖杉酯碱处理骨肉瘤细胞系(143b及U2-OS),通过CCK-8实验检测HHT对骨肉瘤细胞的抗肿瘤作用,集落形成实验检测骨肉瘤细胞的克隆能力,划痕实验检测骨肉瘤细胞的迁移能力,Transwell实验检测骨肉瘤细胞的侵袭能力,流式细胞学技术检测骨肉瘤细胞的凋亡率。并通过荧光定量PCR(qPCR)实验检测经过HHT处理后骨肉瘤细胞内基因表达情况的改变,并找出HHT作用于骨肉瘤细胞内可能的靶点和机制。结果CCK-8实验证实HHT对骨肉瘤细胞143b和U2-OS的增殖具有明显的抑制作用;集落形成实验、划痕实验、Transwell实验分别证实了HHT对骨肉瘤细胞143b和U2-OS的克隆能力、迁移能力、侵袭能力存在显著的抑制作用;流式细胞学技术证实了HHT能提高骨肉瘤细胞143b和U2-OS的凋亡率;RT-qPCR实验表明HHT可以显著上调casp3和casp8的表达,验证了HHT可能是通过调控casp3和casp8进而对骨肉瘤的增殖凋亡、侵袭及转移等发挥作用。结论casp3和casp8是HHT作用于骨肉瘤细胞的靶点,HHT通过上调casp3和casp8的表达来发挥对骨肉瘤细胞的抑制作用。 展开更多

关键词 高三尖杉酯碱 骨肉瘤 casp3 casp8 143b U2-OS

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湖羊CASP3基因的序列分析及其在临床型乳腺炎乳腺组织中的表达特征 被引量：5

5

作者 尹德恩 李讨讨 +6 位作者 蒋海涛 王霞 安雪姣 陈娜娜 杨航 康凌云 马友记 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2022年第1期12-19,共8页

半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3,CASP3)是半胱氨酸蛋白酶家族(caspase,CASP)中的重要成员,处于细胞凋亡有序级联反应下游,是多种凋亡刺激信号传递的汇聚点,其活化也成为凋亡进入不可逆阶段的标志。然而,目前有关CASP3基因在绵羊乳腺炎发生... 半胱氨酸蛋白酶3(caspase 3,CASP3)是半胱氨酸蛋白酶家族(caspase,CASP)中的重要成员,处于细胞凋亡有序级联反应下游,是多种凋亡刺激信号传递的汇聚点,其活化也成为凋亡进入不可逆阶段的标志。然而,目前有关CASP3基因在绵羊乳腺炎发生过程中的调控机制尚不清楚。因此,本试验以湖羊作为试验动物,基于课题组前期转录组测序获得的湖羊CASP3基因CDS序列,采用生物信息学方法对其编码蛋白的理化性质、结构以及不同物种之间的同源性等进行了分析,并利用RT-qPCR、Western blot和免疫组织化学染色方法检测了CASP3基因在健康和患临床型乳腺炎湖羊乳腺组织中的表达与定位特征差异。生物信息学分析显示湖羊CASP3蛋白为亲水性稳定蛋白,其蛋白结构无跨膜区,属于非分泌蛋白,在进化过程中具有高度保守性。RT-qPCR与蛋白免疫印迹结果显示,在健康和临床型乳腺炎乳腺组织中均存在CASP3基因的表达,且临床型乳腺炎乳腺组织中CASP3 mRNA和蛋白的相对表达量极显著(P<0.01),高于健康组。免疫组织化学结果显示CASP3蛋白在健康乳腺组织中主要分布于乳腺上皮细胞中,而在临床型乳腺炎乳腺组织中主要分布于基质细胞和乳腺上皮细胞。提示CASP3 mRNA和蛋白在临床型湖羊乳腺组织中表达均上调,这为进一步研究CASP3基因在绵羊乳腺炎发病机制中的调控作用提供基础信息。 展开更多

关键词 湖羊 乳腺炎 半胱氨酸蛋白酶3基因(casp3) 表达 定位

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几种天然产物与CASP3靶点的相互作用机制探索 被引量：20

6

作者 张静晓 刘晓洁 +2 位作者 杨春 陈盼盼 张丽雷 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 2017年第11期1824-1828,共5页

目的:研究几种中药有效成分与CASP3靶点的相互作用,分析其作用机理及结构特征,为CASP3抑制剂的开发提供参考。方法:基于前期研究,本文选择几种天然产物的有效成分,采用分子对接和分子动力学方法模拟其与CASP3靶点之间的相互作用,通过作... 目的:研究几种中药有效成分与CASP3靶点的相互作用,分析其作用机理及结构特征,为CASP3抑制剂的开发提供参考。方法:基于前期研究,本文选择几种天然产物的有效成分,采用分子对接和分子动力学方法模拟其与CASP3靶点之间的相互作用,通过作用力分析配体和靶点的作用机制。结果:筛选出的丹参酮IIA和野黄芩苷与CASP3靶点的结合能力较强,通过分子动力学方法分别获取了丹参酮IIA和野黄芩苷与CASP3结合的理论稳定结构。丹参酮IIA与CASP3中的Phe256、Ser205、Trp206等4个氨基酸残基具有疏水作用,形成1个氢键。野黄芩苷与CASP3靶点中的Ser249、Trp214、Trp206等9个氨基酸残基具有疏水作用,形成了7个稳定性不同的氢键,其中静电相互作用是其结合更为稳定的主要原因。结论:丹参酮IIA和野黄芩苷能与CASP3靶点形成较为稳定的结合结构,探索相似的结构有利于设计更有效的CASP3抑制剂。 展开更多

关键词 天然产物 casp3靶点 细胞凋亡 分子对接 分子动力学

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MGMT和CASP3基因多态性与胶质瘤易感性的关联研究 被引量：4

7

作者 黄冠又 张欣 +5 位作者 巫玉娟 曹楚南 蒲菊 明悦 杜永贵 甘鸿川 《贵州医药》 CAS 2017年第11期1138-1140,共3页

目的探讨MGMT和CASP3基因多态性与胶质瘤易感性的关系。方法采用病例对照研究,应用多重单碱基SNP分型技术(SNaPshot)对组织病理学确诊胶质瘤患者90例和90名健康对照人群进行基因分型,MGMT rs12917和CASP3rs4647601两种单核苷酸多态性进... 目的探讨MGMT和CASP3基因多态性与胶质瘤易感性的关系。方法采用病例对照研究,应用多重单碱基SNP分型技术(SNaPshot)对组织病理学确诊胶质瘤患者90例和90名健康对照人群进行基因分型,MGMT rs12917和CASP3rs4647601两种单核苷酸多态性进行检测及分析。结果 MGMT基因rs12917和CASP3基因rs4647601的基因型和等位基因频率在胶质瘤组和对照组中的分布差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MGMT rs12917和CASP3rs4647601位点基因多态性与胶质瘤的易感性无显著关联。 展开更多

关键词 MGMT casp3 胶质瘤 单核苷酸 多态性 易感性

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罗米地辛与阿糖胞苷联合用药在肺腺癌细胞中介导组蛋白H3K14乙酰化提高CASP3转录活性 被引量：11

8

作者 陈柯宇 贲涵芝 毛泽斌 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期319-327,共9页

肺癌发病率和病死率均居全球恶性肿瘤首位,有效的药物是治疗肺癌的关键。罗米地辛和阿糖胞苷是已经批准上市并应用于临床治疗的癌症化疗药物。这两种药物的联合用药是否在肺腺癌的治疗中发挥作用及其相关分子机制尚不明确。本研究通过MT... 肺癌发病率和病死率均居全球恶性肿瘤首位,有效的药物是治疗肺癌的关键。罗米地辛和阿糖胞苷是已经批准上市并应用于临床治疗的癌症化疗药物。这两种药物的联合用药是否在肺腺癌的治疗中发挥作用及其相关分子机制尚不明确。本研究通过MTT和克隆形成实验证实,罗米地辛和阿糖胞苷联合用药可以显著抑制肺腺癌细胞A549的生长(P<0.05)。体外Transwell细胞侵袭实验和划痕实验表明,联合用药可有效降低肺腺癌细胞的侵袭和转移能力(P<0.05)。同时,流式细胞分析显示,联合用药可以显著诱导肺腺癌细胞的凋亡(P<0.05),并且实时PCR和Western印迹结果提示,肺腺癌细胞A549在联合用药处理后,凋亡相关蛋白质CASP3的mRNA和蛋白质表达水平均明显升高。另外,通过检测联合用药后,A549细胞的组蛋白乙酰化修饰情况发现,H3K14位点乙酰化水平被明显上调,并且ChIP分析进一步显示,CASP3启动子区域组蛋白H3K14乙酰化水平在联合用药后明显增加(P<0.05)。本研究揭示了罗米地辛与阿糖胞苷联合用药能通过增强CASP3启动子区组蛋白H3K14乙酰化水平进而促进CASP3的转录和蛋白质表达,从而抑制肺腺癌细胞的生长、增殖、迁移和侵袭,促进其凋亡的分子机制。在分子和细胞水平上为罗米地辛和阿糖胞苷联合用药治疗肺腺癌提供依据,并为肺腺癌的临床治疗提供切实参考。 展开更多

关键词 罗米地辛 阿糖胞苷 H3K14乙酰化 胱天蛋白酶3 肺腺癌细胞

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当归四逆汤加吴茱萸生姜汤及其核心成分山柰酚对肝癌机制的研究

9

作者 梁楠 李峥 +3 位作者 程紫轩 孙异强 牛杜升 黄博 《中医药导报》 2025年第7期16-24,共9页

目的:基于网络药理学、分子动力学模拟及免疫组化探究当归四逆汤加吴茱萸生姜汤(DSJWST)抗肝癌的作用机制。方法:借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)对DSJWST所含8味中药的活性成分及潜在靶点进行筛选,整合GeneCards、OMIM、TCG... 目的:基于网络药理学、分子动力学模拟及免疫组化探究当归四逆汤加吴茱萸生姜汤(DSJWST)抗肝癌的作用机制。方法:借助中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)对DSJWST所含8味中药的活性成分及潜在靶点进行筛选,整合GeneCards、OMIM、TCGA等数据库资源,获取与肝癌相关的靶点信息,再通过韦恩图分析,精准确定药物-疾病的交集基因。利用String数据库构建蛋白互作(PPI)网络,直观展示靶点间的相互作用关系,并采用Cytoscape软件的MCC算法识别DSJWST抗肝癌关键靶标,进一步筛选核心成分。通过基因本体论(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)对靶蛋白功能和相关通路进行富集分析,挖掘DSJWST抗肝癌的潜在分子机制。同时,借助Cytoscape构建“药物-核心成分-核心靶点”网络,呈现药物、成分与靶点之间的内在联系。采用Pymol插件和GROMACS 2016.4软件,开展分子对接及分子动力学模拟实验,从分子层面探究DSJWST活性成分与靶标的结合特性及稳定性。最后,通过免疫组化实验,对肝癌关键靶点表达及其与临床预后的相关性进行验证。结果:经筛选,共获得1 599个活性成分和4 124个肝癌相关靶点,确定了166个交集靶点。通过PPI网络筛选出10个关键靶标,包括IL6、TNF、STAT3、IL1B、AKT1、IFNG、TP53、NFKBIA、JUN和CASP3。KEGG富集分析显示,DSJWST治疗肝癌主要涉及AGE-RAGE信号通路、IL-17信号通路、TNF信号通路及HIF-1信号通路等。分子对接结果显示,DSJWST的10个活性组分与7个靶标的对接结合能均小于-5.0 kcal/mol,表明两者具有一定的结合活性。之后,选取结合能最高的山柰酚与CASP3进行分子动力学模拟,结果表明,在与山柰酚的结合过程中CASP3结构趋于稳定。免疫组织化学实验证实,CASP3在肝癌组织中呈低表达状态,且与良好预后相关。结论:DSJWST可能通过靶向CASP3,进而介导AGE-RAGE信号通路的激活,发挥抑制肝癌进展的作用。 展开更多

关键词 肝癌 当归四逆汤加吴茱萸生姜汤 网络药理学 分子动力学模拟 casp3

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基于网络药理学与实验验证探讨归元饮治疗干燥综合征的作用机制

10

作者 马金茗 陈月月 《广州中医药大学学报》 2025年第10期2521-2531,共11页

【目的】探讨归元饮(重用生地黄)治疗干燥综合征的作用机制。【方法】利用网络药理学相关数据库平台获取归元饮中每味药物的有效成分,并同干燥综合征进行靶标预测,通过韦恩图确定两者的共同靶点,绘制“药物-成分-靶点”网络。再次运用... 【目的】探讨归元饮(重用生地黄)治疗干燥综合征的作用机制。【方法】利用网络药理学相关数据库平台获取归元饮中每味药物的有效成分,并同干燥综合征进行靶标预测,通过韦恩图确定两者的共同靶点,绘制“药物-成分-靶点”网络。再次运用相同靶点构建蛋白相互作用(PPI)网络,然后在David平台进行基因本体论(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析,获取归元饮治疗干燥综合征的信号通路。最后通过分子对接初步验证核心成分与核心靶蛋白之间的结合能。结合文献与分子对接的结果,进行小鼠体内外实验验证。【结果】筛选得到有关归元饮的药物活性成分318个,与疾病的交集靶点148个。GO和KEGG富集分析分别获取到921个条目和159条通路。分子对接结果显示豆甾醇与天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)的结合活性最好,槲皮素、山奈酚、β-谷甾醇等其他活性成分与核心靶点具有较好的结合活性。实验验证结果显示归元饮及其活性成分豆甾醇可下调干燥综合征小鼠颌下腺组织及脂多糖(LPS)刺激颌下腺细胞中CASP3、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、白细胞介素1β(IL-1β)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶1(Caspase-1)蛋白表达水平并减少干燥综合征小鼠外周血及颌下腺细胞上清液中白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)含量。【结论】通过网络药理学与分子对接的结果得出归元饮能通过核心成分豆甾醇作用于CASP3等靶点发挥抗干燥综合征的疗效。小鼠体内外实验证明归元饮及其活性成分豆甾醇可以减轻干燥综合征小鼠患病组织及细胞炎症,其可能通过靶向CASP3从而抑制NLRP3,改善干燥综合征。 展开更多

关键词 归元饮 干燥综合征 豆甾醇 NLRP3 casp3 炎症因子 网络药理学 分子对接 实验验证 小鼠 颌下腺细胞

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CASP3和CASP7基因多态性与噪声性听力损失易感性关系 被引量：8

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作者 齐明键 高鹤 +5 位作者 曹承建 邵玉仙 谭晓华 张进霞 吴茵茵 杨磊 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期905-911,共7页

目的探讨细胞凋亡通路相关基因CASP3和CASP7多态性与中国汉族人群噪声性听力损失(NIHL)易感性之间的关联。方法研究对象来自2014年杭州市1 549名噪声接触工人听力损失的横断面调查,采用1:1配对病例对照研究,病例组为电测听双耳高频平均... 目的探讨细胞凋亡通路相关基因CASP3和CASP7多态性与中国汉族人群噪声性听力损失(NIHL)易感性之间的关联。方法研究对象来自2014年杭州市1 549名噪声接触工人听力损失的横断面调查,采用1:1配对病例对照研究,病例组为电测听双耳高频平均听阈>25 d B(A)的工人,对照组为性别、年龄、接噪工龄、工作岗位与病例匹配且双耳所有频段听阈均≤25 d B(A)的工人,共272对。PCR-LDR法检测2个SNP位点的基因型。采用多因素条件logistic回归模型分析SNP位点与NIHL的关联,并以叉生分析计算基因-环境交互作用。结果χ~2检验分析发现,CASP3基因rs1049216等位基因(C、T)频率组间分布有统计学差异(OR=0.68,95%CI=0.50~0.93),而基因型频率组间差异无统计学意义(P>0.05);CASP7基因rs10787498等位基因及基因型频率组间分布均无统计学意义(P>0.05);多因素条件logistic回归显示,CASP3基因rs1049216中,与野生基因型CC相比,突变基因型(CT+TT)为NIHL的保护因素(调整OR=0.65,95%CI=0.43~0.97);叉生分析表明rs1049216位点与文化程度、睡眠时间存在交互作用(P≤0.001),NIHL的危险性降低(OR值变小)。结论 CASP3基因rs1049216位点可能与中国汉族人群NIHL易感性有关,且可能与文化程度、睡眠时间存在交互作用。 展开更多

关键词 casp3 CASP7 噪声性听力损失 单核苷酸多态性

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理中汤干预MAPK通路治疗脾胃虚寒型胃溃疡大鼠的机制研究 被引量：4

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作者 仇婧玥 喻昶 +7 位作者 熊萌 任保平 仲美琪 周顺华 王晓娟 高晴 曾梅艳 宋厚盼 《中药药理与临床》 北大核心 2025年第4期2-9,共8页

目的:基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路探讨理中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡(GU)模型大鼠的药效作用及分子机制。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、艾司奥美拉唑4 mg/kg组、理中汤3.75、7.5 g/kg组。在15 d内,采用“... 目的:基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路探讨理中汤治疗脾胃虚寒型胃溃疡(GU)模型大鼠的药效作用及分子机制。方法:将60只SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型对照组、艾司奥美拉唑4 mg/kg组、理中汤3.75、7.5 g/kg组。在15 d内,采用“苦寒泻下+饮食失节+劳倦过度+吲哚美辛”法构建GU脾胃虚寒证大鼠模型。观察大鼠整体状态及鼻唇、舌象、爪趾色泽改变;观测大鼠胃黏膜溃疡指数(UI)和溃疡抑制率(CI);HE染色法观察大鼠胃黏膜病理改变并评分;ELISA法测定大鼠血清中白细胞介素17(IL-17)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)含量和胃组织中胃蛋白酶活性;微滴式数字PCR法和免疫荧光法检测大鼠胃组织中MAPK通路关键信号分子丝裂原活化蛋白激酶15(MAPK15)、P38丝裂原活化蛋白激酶(P38 MAPK)、基质金属蛋白酶3(MMP3)与半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)基因及蛋白表达。结果:理中汤可有效改善GU脾胃虚寒证大鼠胃黏膜损伤。相较于正常大鼠,模型大鼠胃黏膜溃疡指数显著升高(P<0.01),胃黏膜上皮细胞严重水肿、脱落,可见大量炎性细胞浸润(P<0.01);血清中IL-17、TNF-α、MDA含量及胃蛋白酶活力显著升高(P<0.01),GSH含量显著下降(P<0.01),胃组织Mapk15、P38 Mapk与Mmp3基因、蛋白表达显著上调(P<0.01),Casp3基因、蛋白表达下调(P<0.01);与模型对照组比较,理中汤各组大鼠胃黏膜溃疡指数明显降低(P<0.05),理中汤7.5 g/kg组CI达86.95%;镜下病理评分明显下降(P<0.05);血清IL-17、TNF-α、MDA含量和胃蛋白酶活力显著降低(P<0.01),GSH含量显著升高(P<0.01);胃组织Mapk15、P38 Mapk与Mmp3基因、蛋白表达显著下调(P<0.01);Casp3基因、蛋白表达显著上调(P<0.01)。结论:理中汤对GU脾胃虚寒证大鼠疗效显著,可促进溃疡愈合,其干预机制可能与调控MAPK信号通路,抑制氧化应激,消除炎症,促进胃黏膜修复有关。 展开更多

关键词 理中汤 胃溃疡 脾胃虚寒证 炎症反应 氧化应激 丝裂原活化蛋白激酶 基质金属蛋白酶3 半胱氨酸-天冬氨酸蛋白酶3

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CASP3基因单核苷酸多态性与中国儿童川崎病的相关性研究 被引量：17

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作者 彭茜 陈昌辉 +7 位作者 吴青 李波 廖静 罗彩丹 胡小平 郑植 邓燕 张渝 《中华医学遗传学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期180-184,共5页

目的分析半胱氨酸蛋白酶3基因（caspase-3，CASP3）多态性与中国儿童川崎病（Kawasaki disease，KD）临床表型的潜在相关性，以寻找中国儿童KD发生发展的高风险分子标记。方法采用病例对照研究，实验组包括238例KD患儿，对照组包含年龄... 目的分析半胱氨酸蛋白酶3基因（caspase-3，CASP3）多态性与中国儿童川崎病（Kawasaki disease，KD）临床表型的潜在相关性，以寻找中国儿童KD发生发展的高风险分子标记。方法采用病例对照研究，实验组包括238例KD患儿，对照组包含年龄与性别组成匹配的364名非KD儿童。同时应用聚合酶链式反应一限制性片段长度多态性与DNA测序技术，对研究对象的CASP3基因包括功能性单核苷酸多态位点（single nucleotide polymorphism，SNP）rs113420705在内的3个多态位点进行基因分型，分别比较KD组与对照组、继发与不继发冠状动脉损伤（coronary artery lesions，CALs）以及静脉注射免疫球蛋白（intravenous immunoglobulin，IVIG）治疗敏感与抗性情况下这些SNP位点等位基因与基因型频率。结果KD组中rs113420705的T等位基因频率与该等位基因携带者频率均显著高于对照组。在3种常见的单倍型中，2种包含SNPrs113420705风险等位基因的单倍型更常见于KD患者组。3个SNP位点的等位基因、基因型与次等位基因携带者频率在继发与不继发CALs患者组，以及IVIG治疗敏感与不敏感患者组之间差异均无统计学意义。结论cASP3基因rs113420705与中国人群川崎病的发生存在显著的相关性，提示该SNP的风险等位基因有希望成为判断中国儿童川崎病易患性的分子遗传标记。CASP3基因风险单倍型的证实为该基因在KD发生中的作用提供了新的证据。 展开更多

关键词 川崎病 冠状动脉损伤 静脉滴注免疫球蛋白 半胱氨酸蛋白酶3基因 单核苷酸 多态性

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CASP3基因一个新的功能性SNP rs72689236与川崎病相关性的Meta分析 被引量：15

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作者 彭茜 陈昌辉 +1 位作者 吴青 杨元 《中国当代儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期477-483,共7页

目的综合分析半胱氨酸蛋白酶3基因(CASP3)一个新的功能性单核苷酸多态位点(SNP)rs72689236与川崎病发生发展的相关性。方法国内外数据库中检索川崎病与CASP3基因相关性研究的文献,根据纳入与排除标准筛选文献,获取2012年11月以前公开发... 目的综合分析半胱氨酸蛋白酶3基因(CASP3)一个新的功能性单核苷酸多态位点(SNP)rs72689236与川崎病发生发展的相关性。方法国内外数据库中检索川崎病与CASP3基因相关性研究的文献,根据纳入与排除标准筛选文献,获取2012年11月以前公开发表的病例-对照研究与家系传递不平衡研究(TDT)的资料,结合作者的相关研究结果,评价质量后采用RevMan 5.1软件进行Meta分析。结果川崎病患者中rs72689236的A等位基因频率显著增高(P<0.001,OR=1.34,95%CI:1.24～1.46)。rs72689236风险等位基因A的携带者(AG+AA)相较于GG个体,患病风险增加约44%(P<0.001,OR=1.44,95%CI:1.27～1.65)。该SNP的风险等位基因A增加了川崎病并发冠状动脉损伤的风险(P=0.01,OR=1.51,95%CI:1.10～2.07),携带风险等位基因A的川崎病患者相比于非携带者,并发冠状动脉损伤的风险增加约59%(P=0.05,OR=1.59,95%CI:1.00～2.53)。未发现该SNP与川崎病患者静脉注射免疫球蛋白(IVIG)疗效相关联的证据。结论 CASP3基因功能性SNP rs72689236的A等位基因增加了川崎病的发生风险,该SNP的风险等位基因有可能作为川崎病并发冠状动脉损伤的易感遗传标记。目前还没有足够的证据提示该SNP对川崎病的重要治疗手段IVIG的疗效存在影响,需要更多的相关研究以进一步评价其应用于临床个体化治疗方案选择的可行性。 展开更多

关键词 川崎病 冠状动脉损伤 静脉注射免疫球蛋白 半胱氨酸蛋白酶3基因 META分析

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血浆半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3在醛固酮诱导的主动脉瘤小鼠中的表达及其机制研究

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作者 阿依妮格尔·阿布力米提 骆秦 +1 位作者 党毓婕 李南方 《中国社区医师》 2025年第17期1-4,共4页

目的:探讨血浆半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)在醛固酮诱导的主动脉瘤小鼠中的表达及其机制。方法:选取9个月龄雄性C57BL/6小鼠45只,随机分为对照组、模型组和治疗组,每组15只。对照组正常进食饮水。模型组泵注醛固酮500μg/(kg·... 目的:探讨血浆半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(CASP3)在醛固酮诱导的主动脉瘤小鼠中的表达及其机制。方法:选取9个月龄雄性C57BL/6小鼠45只,随机分为对照组、模型组和治疗组,每组15只。对照组正常进食饮水。模型组泵注醛固酮500μg/(kg·d),饮用含0.9%氯化钠和0.2%氯化钾混合溶液。治疗组在模型组基础上灌胃螺内酯20 mg/(kg·d),喂养4周。比较三组小鼠血压、血浆CASP3水平,观察主动脉超声成像特征。结果:造模前、造模2周后,三组收缩压、舒张压对比,差异无统计学意义(P>0.05)。造模4周后,三组收缩压对比,差异无统计学意义(P>0.05)。造模4周后,模型组舒张压高于对照组和治疗组(P<0.05);对照组与治疗组对比,差异无统计学意义(P>0.05)。高分辨率超声成像系统显示,对照组胸主动脉管腔直径均匀,血管壁内膜光滑,中膜弹性纤维连续完整。模型组主动脉壁回声不均匀,中膜与外膜分界模糊,可见散在低回声区(提示水肿或炎症浸润),胸主动脉管腔呈节段性扩张,部分区域可见血管壁变薄、搏动幅度异常,提示主动脉瘤样改变。治疗组主动脉壁层次清晰,血管壁结构正常,搏动幅度接近生理状态。模型组CASP3表达水平高于对照组和治疗组(P<0.05);对照组和治疗组CASP3表达水平对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:醛固酮可通过上调血浆CASP3表达水平参与主动脉瘤形成,螺内酯可通过下调CASP3表达水平发挥心血管保护作用,提示CASP3可能为主动脉瘤治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 醛固酮 主动脉瘤 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 细胞凋亡

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β-谷甾醇对增生性瘢痕成纤维细胞作用机制的网络药理学分析 被引量：10

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作者 左俊 马少林 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2024年第2期216-223,共8页

背景:目前针对增生性瘢痕有效的预防和治疗措施仍然有限。而大多数植物中草药不良反应小且来源丰富,为预防和治疗增生性瘢痕提供了新的思路和方法。目的:通过网络药理学和分子对接技术探讨植物来源β-谷甾醇作用于增生性瘢痕成纤维细胞... 背景:目前针对增生性瘢痕有效的预防和治疗措施仍然有限。而大多数植物中草药不良反应小且来源丰富,为预防和治疗增生性瘢痕提供了新的思路和方法。目的:通过网络药理学和分子对接技术探讨植物来源β-谷甾醇作用于增生性瘢痕成纤维细胞的潜在分子机制,并通过细胞学实验进行初步验证。方法:通过网络药理学方法,利用相关数据库及软件筛选β-谷甾醇的药物靶点,获取增生性瘢痕相关疾病靶点,取交集得到β-谷甾醇作用于增生性瘢痕的潜在作用(交集)靶点,使用Cytoscape软件和STRING数据库构建“药物-靶点-疾病”网络和蛋白质互作网络(PPI),同时筛选出PPI中核心作用靶点。通过DAVID数据库对交集靶点进行GO生物学功能和KEGG通路富集分析,结合文献分析进一步确立与交集靶点关系密切的信号通路及核心靶点基因,应用AutoDock软件对β-谷甾醇和核心靶点蛋白进行分子对接。采用体外细胞实验验证β-谷甾醇对人增生性瘢痕成纤维细胞增殖、凋亡、细胞周期分布和核心靶点基因mRNA表达的影响。结果与结论:①β-谷甾醇和增生性瘢痕的交集靶点共56个,PPI网络中筛选出10个核心靶点:酪氨酸激酶(SRC)、丝裂原活化蛋白激酶3(MAPK3)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)、载脂蛋白E(APOE)、雌激素受体1(ESR1)、固醇调节元件结合转录因子1(SREBF1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)、C-反应蛋白(CRP)、细胞间黏附分子1(ICAM1)和过氧化氢酶(CAT)。②结合文献报道和KEGG通路、GO功能分析结果,进一步认定MAPK信号通路与交集靶点关系密切,确定MAPK3(即为ERK1-MAPK)、CASP3、P53和肿瘤坏死因子为其核心靶点。③分子对接结果提示β-谷甾醇与核心靶点蛋白结合良好。④细胞实验结果表明,100μmol/L的β-谷甾醇能抑制增生性瘢痕成纤维细胞增殖,降低线粒体膜电位、诱导细胞凋亡(P<0.01),使G1期细胞占比增加,S期细胞占比减少(P<0.05),同时上调CASP3、P53和肿瘤坏死因子mRNA表达(P<0.05),并下调MAPK3 mRNA表达(P<0.001)。⑤上述数据证实,β-谷甾醇可能通过激活肿瘤坏死因子通路,上调CASP3和P53的表达,诱导增生性瘢痕成纤维细胞凋亡,同时抑制ERK-MAPK通路使细胞周期阻滞从而降低增生性瘢痕成纤维细胞增殖活性。 展开更多

关键词 增生性瘢痕 成纤维细胞 Β-谷甾醇 细胞凋亡 MAPK3(ERK1-MAPK) 肿瘤坏死因子 casp3 P53 网络药理学 细胞周期

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青藤碱抗肝癌作用机制研究 被引量：14

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作者 王高峰 张强 张利娟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期688-692,共5页

目的:探讨青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株的增生和转移能力的多靶向作用机制。方法:运用噻唑蓝还原法(MTT)来检测青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株的抗增殖作用,而同时运用Transwell法来检测药物对于细胞转移能力的作用变化;间接荧光标记法测定... 目的:探讨青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株的增生和转移能力的多靶向作用机制。方法:运用噻唑蓝还原法(MTT)来检测青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株的抗增殖作用,而同时运用Transwell法来检测药物对于细胞转移能力的作用变化;间接荧光标记法测定经过不同浓度的青藤碱作用后,细胞内活性氧水平的变化;利用酶抑制动力学方法,研究青藤碱对逆转录酶的抑制作用;再通过逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹的实验来检测Hep G2细胞中凋亡蛋白水平的变化。结果:青藤碱对Hep G2人肝癌细胞株具有抗侵袭及转移的治疗作用。MTT检测结果显示青藤碱对于Hep G2人肝癌细胞抗增殖作用明显,半抑制浓度IC50为(15.35±2.43)μmol/L;而Transwell法的结果显示青藤碱对癌细胞有较好的抗转移能力;青藤碱是一种有效的逆转录酶抑制剂,IC50为(21.32±2.43)μmol/L;荧光标记法检测细胞内活性氧水平随青藤碱呈浓度依赖性升高;蛋白水平测定显示青藤碱上调Hep G2人肝癌细胞CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达。结论:青藤碱可能是通过上调CASP3、CASP9、CAV1和下调SOX2的表达,进而抑制人肝癌细胞的增殖和转移,调节相关信号通路,最终在分子水平证明青藤碱对Hep G2人肝癌细胞的抑制作用。 展开更多

关键词 青藤碱 HEPG2人肝癌细胞 活性氧水平 逆转录酶 casp3 CASP9 CAV1 SOX2

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针刺、神经生长因子对脑瘫幼鼠智力及脑海马细胞凋亡基因的影响 被引量：7

18

作者 林世坚 祁岩超 柴铁劬 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2014年第1期33-36,共4页

目的：观察针刺和神经生长因子（NGF）对脑瘫模型幼鼠智力恢复以及脑海马组织BCL-2、BAX、Casp3基因mRNA表达的影响。方法：采用缺血缺氧（HIBD）的方法制备幼鼠脑瘫的模型，幼鼠出生后7d称重、实验分组、造模。实验分为5组：正常组、... 目的：观察针刺和神经生长因子（NGF）对脑瘫模型幼鼠智力恢复以及脑海马组织BCL-2、BAX、Casp3基因mRNA表达的影响。方法：采用缺血缺氧（HIBD）的方法制备幼鼠脑瘫的模型，幼鼠出生后7d称重、实验分组、造模。实验分为5组：正常组、假手术组、模型组、单纯针刺组、针刺＋NGF组。术后3～15d按计划给予相应干预。术后18d取材，用荧光定量PCR（SYBRGreenI染料法）检测其脑海马组织BCL-2、BAX、Casp3基因mRNA表达：用TUNEL法检测其脑皮质神经细胞凋亡情况。结果：与模型组相比，单纯针刺组和针刺＋NGF组幼鼠的脑细胞抗凋亡BCL-2基因mRNA表达A值均数更高；BAX、Casp3基因mRNA表达A值均数更低：脑皮质组织细胞凋亡指数均数更低，且针刺＋NGF组凋亡指数比单纯针刺组更低。结论：在抗脑神经细胞凋亡方面．针刺对HIBD幼鼠都有明显的治疗作用，加用NGF后效果更好。 展开更多

关键词 脑性瘫痪 针刺 神经生长因子 BCL一2 BAX casp3

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四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎大鼠的实验研究 被引量：21

19

作者 沈金明 封蕾 +2 位作者 陈杰 吴煜 于建农 《新中医》 CAS 2017年第9期12-15,共4页

目的:通过膝骨关节炎大鼠模型研究四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎(KOA)大鼠的作用机制。方法:8周龄SD大鼠27只,随机分为正常对照组、KOA模型组、四妙散组,KOA模型组和四妙散组采用前交叉韧带切除法制作KOA模型,手术6周后... 目的:通过膝骨关节炎大鼠模型研究四妙散调节软骨细胞凋亡与自噬治疗膝骨关节炎(KOA)大鼠的作用机制。方法:8周龄SD大鼠27只,随机分为正常对照组、KOA模型组、四妙散组,KOA模型组和四妙散组采用前交叉韧带切除法制作KOA模型,手术6周后四妙散组以四妙散药液灌胃,正常对照组和KOA模型组以生理盐水灌胃。连续灌胃4周后取膝关节软骨组织,采用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术测定凋亡细胞所占比例,采用荧光定量PCR检测关节软骨组织中凋亡和自噬相关基因表达水平。结果:与正常对照组比较,KOA模型组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著升高,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著升高,自噬相关蛋白LC3的表达显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与KOA模型组比较,四妙散组大鼠关节软骨细胞凋亡率显著降低,关节软骨细胞中凋亡相关蛋白Fadd、Casp3的表达显著降低,自噬相关蛋白LC3的表达显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:软骨细胞凋亡是KOA发病中的重要因素,该凋亡可能通过FADD-CASP3途径发挥作用。软骨细胞自噬作用的激活可抑制细胞凋亡,可能是延缓及控制KOA进展的一个新机制,四妙散可能通过该机制发挥治疗作用。 展开更多

关键词 四妙散 膝骨关节炎 细胞凋亡 FAS相关死亡结构域蛋白(Fadd) 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(casp3) 自噬相关基因Beclin 1(Becn 1) 微管相关蛋白1轻链3(LC3) 动物实验 大鼠

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金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞增殖和转移的抑制作用 被引量：2

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作者 张晓文 程敏 +2 位作者 王学军 冀玉良 周春生 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期72-75,19,共5页

目的:观察金钗石斛菲醌对人卵巢浆液性囊腺癌细胞系HO-8910PM的增生和转移能力的影响,检测其对卵巢癌增生和转移相关基因CASP3,CASP9,CAV-1和SOX2的分子水平表达,从而研究金钗石斛菲醌在细胞和分子水平对卵巢癌的治疗作用以及其相关分... 目的:观察金钗石斛菲醌对人卵巢浆液性囊腺癌细胞系HO-8910PM的增生和转移能力的影响,检测其对卵巢癌增生和转移相关基因CASP3,CASP9,CAV-1和SOX2的分子水平表达,从而研究金钗石斛菲醌在细胞和分子水平对卵巢癌的治疗作用以及其相关分子机制。方法:运用噻唑蓝还原法(MMT)方法来检测金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞HO-8910PM的抗增殖作用,而同时运用Transwell法来检测药物对于细胞的转移能力的作用变化。再通过逆转录聚合酶链式反应和蛋白质印迹的实验来检测HO-8910PM细胞中凋亡与转移相关基因的表达变化以及蛋白水平的变化。结果:实验结果证明金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞具有抗侵袭以及转移的治疗作用。MTT检测结果显示金钗石斛菲醌在3μmol/L和10μmol/L对于卵巢癌细胞的抑增殖作用显著,而transwell法的结果也表明了其在3μmol/L和10μmol/L对癌细胞的抗转移能力。其治疗效果与阳性顺铂10μmol/L治疗组在统计学意义上相近。而mRNA,蛋白水平测定,表明金钗石斛菲醌在3μmol/L对人卵巢癌细胞通过上调CASP3,CASP9,CAV1和下调SOX2的表达,从而调节相关信号通路,最终在分子水平证明金钗石斛菲醌对人卵巢癌细胞增殖和转移的抑制作用。结论:金钗石斛菲醌通过上调CASP3,CASP9,CAV1和下调SOX2的表达,进而抑制人卵巢癌细胞的增殖和转移。 展开更多

关键词 金钗石斛菲醌 人卵巢癌细胞 casp3 CASP9 CAV1 SOX2

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