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RNA干涉抑制宫颈癌CaSki细胞株HPV16 E6基因的研究 被引量:27
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作者 牛晓宇 彭芝兰 王和 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1257-1262,共6页
背景与目的:研究表明宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)E6、E7癌基因密切相关,于是人们采用核酶或HPVE6、E7反义寡核苷酸抑制其表达来治疗宫颈癌,虽然取得了一定的效果,但仍面临基因抑制效率低、维持时间短、工... 背景与目的:研究表明宫颈癌的发生发展与人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)E6、E7癌基因密切相关,于是人们采用核酶或HPVE6、E7反义寡核苷酸抑制其表达来治疗宫颈癌,虽然取得了一定的效果,但仍面临基因抑制效率低、维持时间短、工作量大、耗费多等问题。本研究采用最新的RNA干扰技术干扰宫颈癌CaSki细胞中HPV16E6转录,以了解其能否特异性抑制HPV16E6基因及其时效性如何。方法:设计合成针对HPV16E6的荧光标记siRNA,借脂质体转染宫颈癌CaSki细胞,通过荧光照片计数荧光细胞占所有细胞的比例计算转染效率;测定转染后不同时间点的细胞凋亡率;RT-PCR测定HPV16E6mRNA变化,Westernblot和流式细胞仪检测转染前后蛋白表达情况。结果:相差显微镜荧光照片显示细胞转染的效率为81%。HPV16E6siRNA转染细胞后24h、48h、5天凋亡率分别为7.7%、11.8%和37.4%,转染9天时凋亡率下降至12.6%。RT-PCR扩增结果显示,细胞转染前HPV16E6mRNA的量与siRNA阴性对照比较没有显著性差异,但转染后24h、48h、5天和9天分别减少了77%、83%、59%和41%;而作为内对照的β-actinmRNA在转染前后无变化。流式细胞仪定量测定HPV16E6蛋白,结果显示转染后24h、48h和5天,蛋白表达抑制率分别为79.7%、80.4%和71.3%;9天时抑制率有下降,但仍可达57. 展开更多
关键词 RNA干扰 HPV16 E6 宫颈肿瘤 caski细胞
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掌叶半夏提取物的有效部位对CaSki的促凋亡作用机制研究 被引量:10
2
作者 李桂玲 归绥琪 +4 位作者 夏晴 陈松华 葛锡锐 林理根 叶阳 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期449-452,共4页
目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制。方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h... 目的:前期的研究已证实中药掌叶半夏提取物的有效部位(pinellia extract fraction,PE)对体外培养的宫颈癌细胞株CaSki和HeLa有促凋亡作用,通过本次研究进一步明确PE对CaSki的促凋亡作用机制。方法:采用RT-PCR方法检测0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2和Bax mRNA表达的变化,采用Western Blot检测0.15g/LPE作用24h后CaSki细胞Bcl-2、Bax蛋白表达的变化。结果:0.15g/L的PE作用24h后CaSki细胞Bcl-2 mRNA和蛋白的表达均明显下降,而Bax mRNA和蛋白的表达均明显上升。结论:PE对CaSki宫颈癌细胞株促凋亡作用之一是抑制Bcl-2基因的表达、促进Bax基因的表达。这为进一步研究PE的抗宫颈癌作用机制以及新药的研制开发奠定了一定的实验基础。 展开更多
关键词 掌叶半夏提取物的有效部位 凋亡 宫颈癌 caski细胞株 BCL-2 BAX
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莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞增殖抑制及促凋亡作用的研究 被引量:23
3
作者 高艳娥 郭金珠 +2 位作者 惠慧 王咏雪 王桂贤 《现代肿瘤医学》 CAS 2009年第10期1836-1839,共4页
目的:探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;... 目的:探讨莪术醇对人宫颈癌CASKI细胞体外增殖和凋亡的影响。方法:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml不同浓度莪术醇作用于人宫颈癌CASKI细胞后,MTT法检测CASKI细胞的增殖抑制率;流式细胞仪分析细胞周期分布及细胞凋亡率变化;电镜观察肿瘤细胞凋亡的形态学特征。结果:12.5μg/ml、25μg/ml、50μg/ml和100μg/ml的莪术醇对宫颈癌CASKI细胞均有不同程度的增殖抑制作用,在一定范围内,具有浓度-时间依赖性。流式细胞仪分析结果显示:50μg/ml、100μg/ml莪术醇作用于宫颈癌CASKI细胞24h,可阻滞细胞周期于G2/M期,并诱导部分细胞凋亡。电镜下可见凋亡细胞及凋亡小体,且100μg/ml组细胞凋亡改变较50μg/ml组更明显。结论:莪术醇能明显抑制CASKI细胞的体外增殖,且可阻滞CASKI细胞周期于G2/M期并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 莪术醇 宫颈癌 caski细胞 细胞周期 凋亡
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树突状细胞疫苗的制备及其体外诱导细胞毒性T淋巴细胞对宫颈癌CaSki细胞的杀伤作用 被引量:8
4
作者 焦庆昉 易发平 +5 位作者 陈全 兰欢 艾青 符少月 俞垚 宋方洲 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期106-110,共5页
目的:制备树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗并观察其在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法:分离培养小鼠未成熟DCs,FCM检测小鼠未成熟DCs表面标志物CD40、CD86、主要组织... 目的:制备树突状细胞(dendritic cells,DCs)疫苗并观察其在体外诱导细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)对宫颈癌CaSki细胞的杀伤效应。方法:分离培养小鼠未成熟DCs,FCM检测小鼠未成熟DCs表面标志物CD40、CD86、主要组织相容性复合体-Ⅱ(major histocompatibility complex-Ⅱ,MHC-Ⅱ)和CD11c;将已成功构建的携带人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)16E6E7基因的重组腺病毒pAd-E6E7感染体外培养的小鼠未成熟DCs,提取CaSki细胞裂解物负载DCs,制备DC疫苗,激光共聚焦显微镜下观察pAd-E6E7感染的小鼠未成熟DCs绿色荧光蛋白表达,Western印迹法检测E6蛋白的表达;DCs疫苗诱导产生CTLs后与CaSki细胞共培养,CCK8(cell countingkit8)法检测其对CaSki细胞的杀伤效应。结果:成功分离培养了小鼠未成熟DCs,并制备获得了HPV16E6E7特异性DCs疫苗。DCs疫苗诱导产生的CTLs对CaSki细胞具有杀伤作用,pAd-E6E7感染组对CaSki的杀伤效应明显高于CaSki细胞裂解物负载组及未处理DCs组(P<0.05)。结论:以携带HPV16E6E7基因的重组腺病毒感染DCs制备基因修饰的DCs疫苗,具有诱导CTLs体外杀伤子宫颈癌CaSki细胞的作用。 展开更多
关键词 宫颈癌 疫苗 合成 人乳头瘤病毒 T淋巴细胞 细胞毒性 树突状细胞 caski细胞
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阳离子卟啉对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效应 被引量:5
5
作者 吕昌帅 丁佰娟 +2 位作者 刘洪丽 姜侃 张友忠 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第11期981-985,共5页
目的探讨阳离子卟啉(TMPyP4)对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效果和可能作用机制,为光动力学治疗(PDT)在宫颈癌动物荷瘤模型以及临床应用中提供理论依据。方法以宫颈癌细胞株Caski为研究对象,以TMPyP4为光敏剂,按照不同处理因素分为... 目的探讨阳离子卟啉(TMPyP4)对宫颈癌细胞株Caski的光动力学杀伤效果和可能作用机制,为光动力学治疗(PDT)在宫颈癌动物荷瘤模型以及临床应用中提供理论依据。方法以宫颈癌细胞株Caski为研究对象,以TMPyP4为光敏剂,按照不同处理因素分为正常对照组、单纯PDT组、单纯TMPyP4组和TMPyP4-PDT组。采用四甲基偶氮唑蓝法检测TMPyP4-PDT对宫颈癌细胞株Caski体外生长的抑制作用,光镜下观察细胞形态变化。采用Annexin V-PI双标记法检测细胞凋亡率。采用实时荧光定量PCR检测TMPyP4-PDT对Caski细胞Ki-67、MCM2、P16、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达水平的影响。结果单纯TMPyP4组和TMPyP4-PDT组对细胞增殖有明显的抑制作用(P<0.01),且呈剂量依赖性;单纯PDT组对细胞增殖的抑制作用不明显(P>0.05)。光镜下可观察到单纯PDT组贴壁细胞多,无核固缩及核碎裂样改变;单纯TMPyP4组及TMPyP4-PDT组细胞出现胞质空泡化、细胞体积缩小、细胞核碎裂及凋亡小体形成等。流式细胞术检测结果显示,TMPyP4-PDT可诱导Caski细胞凋亡,且随着药物浓度的增加,细胞凋亡百分比增加。实时荧光定量PCR检测发现,随着药物浓度的增加,Caski细胞Ki-67、MCM2、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达水平明显降低,P16 mRNA表达水平升高,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 TMPyP4-PDT对宫颈癌细胞株Caski有明显的杀伤作用,其机制可能与正性调节P16以及负性调节Ki-67、MCM2、CA-Ⅸ和NF-κB mRNA表达量有关。 展开更多
关键词 宫颈癌细胞株caski 阳离子卟啉 光动力疗法 KI-67 MCM2 P16 CA-Ⅸ NF-κB
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南赤瓟醇提物通过PI3K/Akt/mTOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡 被引量:7
6
作者 周琴 杨小姣 +5 位作者 石孟琼 刘英 覃慧林 冯天艳 张永峰 尉小琴 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2016年第1期42-49,共8页
目的:研究南赤瓟醇提物影响PI3K/Akt/m TOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用机制。方法:用南赤瓟醇提物(0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/m L)作用Caski细胞24 h后,检测其对细胞增殖的影响;然后用南赤瓟醇提物(0.25... 目的:研究南赤瓟醇提物影响PI3K/Akt/m TOR信号通路促进人宫颈癌Caski细胞凋亡的作用机制。方法:用南赤瓟醇提物(0.062 5、0.125、0.25、0.50、1.00、2.00 mg/m L)作用Caski细胞24 h后,检测其对细胞增殖的影响;然后用南赤瓟醇提物(0.25、0.50和1.00 mg/m L)作用Caski细胞24 h后,流式细胞术测定细胞周期DNA含量及亚G_1凋亡峰,ELISA试剂盒检测Caski细胞中Caspase-9和Caspase-3活性及线粒体和胞浆中细胞色素C(Cyt C)含量,Real-time PCR测定P53、Bcl-2和Bax m RNA表达,并计算Bcl-2/Bax比值,Western blot测定PI3K、Akt、m TOR磷酸化水平(p-PI3K、p-Akt、p-m TOR),并计算p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR比值。结果:南赤瓟醇提物对Caski细胞生长抑制作用呈明显的剂量依赖性;南赤瓟醇提物(0.25、0.50和1.00 mg/m L)能显著抑制Caski细胞增殖,并将其阻滞于G_2/M期;可抑制pPI3K、p-Akt和p-m TOR蛋白表达水平,降低pPI3K/PI3K、p-Akt/Akt和p-m TOR/m TOR比值;上调P53和Bax m RNA表达,下调Bcl-2 m RNA及Bcl-2与Bax比值;降低线粒体中Cyt C含量,升高胞浆中Cyt C含量;增强Caspase-9和Caspase-3活性(P<0.05,P<0.01)。结论:南赤瓟醇提物诱导Caski细胞凋亡的作用机制与抑制PI3K/Akt/m TOR信号通路磷酸化有关。 展开更多
关键词 南赤瓟 宫颈癌 caski细胞 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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吉祥草中甾体皂苷RCE-4对人宫颈癌Caski细胞Ras/Erk和p16/cyclinD1/CDK4通路的影响 被引量:7
7
作者 颜为红 邹坤 +6 位作者 贺海波 张永峰 李小妹 李小琴 杨小姣 汪鋆植 邓张双 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2018年第3期247-254,共8页
目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测... 目的:研究吉祥草中甾体皂苷RCE-4影响Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路促进Caski细胞凋亡的作用机制。方法:体外培养人宫颈癌Caski细胞株,用RCE-4作为处理因素,MTT法检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞周期分布;Real-time PCR检测p16、cyclin D1和CDK4m RNA表达水平;Western blot检测Ras/Erk信号通路总蛋白和磷酸化蛋白表达水平。结果:RCE-4呈剂量依赖性抑制Caski细胞增殖,其作用24 h的IC50值为12.33μmol/L;升高G0/G1期细胞比例,降低S期细胞比例;抑制Ras、p-Raf、p-Mek1/2和p-Erk1/2蛋白表达,降低p-Raf/Raf、p-Mek1/2/Mek1/2和p-Erk1/2/Erk1/2比值,上调p16的m RNA表达,下调cyclin D1和CDK4的m RNA表达。结论:RCE-4可抑制Caski细胞的增殖,诱导细胞在G0/G1期阻滞,其诱导作用与其抑制Ras/Erk和p16/cyclin D1/CDK4信号通路激活有关。 展开更多
关键词 RCE-4 细胞周期 caski细胞 Ras/Erk信号通路 p16/cyclinD1/CDK4信号通路
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阿司匹林诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制 被引量:5
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作者 杨建林 韩钰 +1 位作者 周永芹 张伟 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第15期7-9,共3页
目的探讨阿司匹林对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及机制,为其用于宫颈癌的临床治疗提供依据。方法体外培养Caski细胞,分别以1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/L阿司匹林干预。采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪测定... 目的探讨阿司匹林对人宫颈癌Caski细胞体外增殖抑制作用及机制,为其用于宫颈癌的临床治疗提供依据。方法体外培养Caski细胞,分别以1.0、2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/L阿司匹林干预。采用噻唑蓝(MTT)法测定细胞增殖抑制率;流式细胞仪测定细胞周期时相改变及细胞凋亡率;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot法检测Bcl-2、Bax和Caspase-3等凋亡相关基因表达。结果阿司匹林干预后Caski细胞增殖明显受抑,且呈时间和剂量依赖性;Caski细胞G0/G1期和G2/M期比例明显下降,S期比例升高;细胞凋亡率明显升高;Bcl-2表达量减少,Bax表达增加,Caspase-3活化。结论阿司匹林在体外可抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,其机制可能为抑制肿瘤细胞DNA合成,改变其细胞周期时相分布,诱导其凋亡。 展开更多
关键词 阿司匹林 caski细胞 细胞凋亡 分子机制
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吉祥草乙酸乙酯部位对人宫颈癌Caski细胞抑制作用及COX-2基因表达与BCl-2蛋白家族关系的研究 被引量:7
9
作者 白彩虹 邹坤 +3 位作者 贺海波 王玉婷 汪鋆植 杨进 《中药药理与临床》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期45-50,共6页
目的:研究吉祥草乙酸乙酯部位对人宫颈癌Caski细胞抑制作用及可能的作用机制。方法:用不同浓度的吉祥草乙酸乙酯部位(3.125、4.6875、6.25、9.375、12.5、18.75、25.0、50.0μg/ml)处理宫颈癌Caski细胞24h后,采用MTT法检... 目的:研究吉祥草乙酸乙酯部位对人宫颈癌Caski细胞抑制作用及可能的作用机制。方法:用不同浓度的吉祥草乙酸乙酯部位(3.125、4.6875、6.25、9.375、12.5、18.75、25.0、50.0μg/ml)处理宫颈癌Caski细胞24h后,采用MTT法检测不同浓度的吉祥草乙酸乙酯部位在不同作用时间下对Caski细胞增殖率的影响;用12.5、25.0和50.0μg/ml的吉祥草乙酸乙酯部位处JEA.宫颈癌Caski细胞不同作用时间(4、8、12、24、48h)后,MTT法检测其对细胞活力的影响,Hoechst33258染色检测其对细胞凋亡的影响,RT—PCR测定COX-2、BCl-2和BaxmRNA表达,并计算BCl-2与Bax的比值。结果:吉祥草乙酸乙酯部位在3.125—50.0μg/ml浓度范围内对Caski细胞的生长抑制作用呈明显的时间.剂量依赖性,当药物浓度达到50.0μg/ml时,抑制率达到最大到58.4%,并且经IC50分析软件进行计算其IC50值为35.29μg/ml;吉祥草乙酸乙酯部位(12.5、25.0和50.0μg/ml)处理能显著抑制Caski细胞增殖,促进其凋亡(P〈0.05或P〈0.01),当药物浓度为50.0μg/ml,作用时间48h时,其抑制率高达98.9%;上调BaxmRNA表达,下调COX-2、BCl-2mRNA表达和BCI。2与Bax的比值。结论:吉祥草乙酸乙酯部位有显著的抑制Caski细胞增殖和诱导凋亡作用,其作用机制可能与其上调Caski细胞BaxmRNA表达,下调COX-2、BCl-2mRNA表达和BCl-2与Bax的比值有关。 展开更多
关键词 吉祥草乙酸乙酯部位 宫颈癌 caski细胞 凋亡 COX-2
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过表达β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)促进人宫颈癌Caski细胞的增殖和迁移 被引量:4
10
作者 姜亚运 王婷 +4 位作者 王晋蜀 夏菁 苟理尧 刘梦瑶 张彦 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1499-1502,共4页
目的探讨β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)的高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖和迁移的影响。方法含ICAT基因腺病毒(Ad ICAT)感染Caski细胞,采用实时定量PCR检测ICAT mRNA水平,Western blot法检测ICAT蛋白水平;MTT法检测各组细胞增殖能力... 目的探讨β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT)的高表达对人宫颈癌Caski细胞增殖和迁移的影响。方法含ICAT基因腺病毒(Ad ICAT)感染Caski细胞,采用实时定量PCR检测ICAT mRNA水平,Western blot法检测ICAT蛋白水平;MTT法检测各组细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞周期,TranswellTM小室迁移实验检测细胞迁移能力。结果 Ad ICAT感染后,Caski细胞的ICAT mRNA和蛋白水平均显著增加;过表达ICAT后,促进Caski细胞的增殖,S期细胞比例明显增加,细胞迁移能力增强。结论 Caski细胞过表达ICAT后,促进其增殖和迁移。 展开更多
关键词 caski细胞 β联蛋白和T细胞因子抑制物(ICAT) 增殖 迁移 细胞周期
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角质细胞生长因子及其受体在CaSki细胞中的表达及其作用 被引量:3
11
作者 陆琳 王东 +4 位作者 胡丽娜 陈斌 贾海军 李金科 王登凤 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第5期836-838,共3页
目的确定角质细胞生长因子(KGF)及受体(KGFR)在CaSki细胞中的表达及KGF对CaSki细胞增殖、迁移的影响。方法取对数增长期的CaSki细胞,ELISA和Western blot确定KGF及KGFR在CaSki细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞... 目的确定角质细胞生长因子(KGF)及受体(KGFR)在CaSki细胞中的表达及KGF对CaSki细胞增殖、迁移的影响。方法取对数增长期的CaSki细胞,ELISA和Western blot确定KGF及KGFR在CaSki细胞中的表达;3H-TdR掺入试验测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞增殖的影响;Millicell测定KGF、KGF抗体对CaSki细胞迁移的影响。结果1KGF、KGFR在CaSki细胞中有表达;2人重组KGF因子对CaSki细胞的增殖、迁移有促进作用(P<0.05);3用KGF抗体中和CaSki细胞自分泌的KGF后,CaSki细胞的增殖、迁移减弱(P<0.05)。结论KGF和KGFR在CaSki细胞中有表达;人重组KGF及CaSki细胞自分泌KGF对CaSki细胞的增殖、迁移均有促进作用。 展开更多
关键词 caski KGF KGFR 增殖 迁移
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不同温度热疗对宫颈癌Caski细胞坏死和凋亡的分析 被引量:5
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作者 周菊梅 唐劲天 +3 位作者 廖遇平 王晓文 杜乐辉 张莹莹 《中国微创外科杂志》 CSCD 2009年第3期254-257,共4页
目的探讨不同温度热疗对宫颈癌Caski细胞坏死和凋亡的影响。方法采用水浴对宫颈癌Caski细胞行43℃,45℃,47℃实验组和37℃对照组热疗,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和坏... 目的探讨不同温度热疗对宫颈癌Caski细胞坏死和凋亡的影响。方法采用水浴对宫颈癌Caski细胞行43℃,45℃,47℃实验组和37℃对照组热疗,四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)检测细胞增殖抑制率,流式细胞仪测定细胞凋亡和坏死率,免疫组化检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果45℃,47℃组的细胞增殖抑制率在24h、48h、72h、96h分别为76.11%±5.32%、81.08%±4.03%、74.71%±3.78%、72.16%±4.75%和88.57%±3.77%、91.33%±2.43%、91.09%±1.17%、92.05%±1.67%,明显高于43℃组的26.57%±3.46%、25.49%±2.76%、22.80%±3.16%、26.87%±4.01%(q=10.41,18.23,14.53,13.57,P<0.05;q=14.41,21.62,16.03,16.01,P<0.05)。45℃与47℃组细胞增殖抑制率在24h、72h、96h的差异无显著性(q=3.01,1.49,2.44,P>0.05)。45℃组的细胞凋亡率最高,为12.82%±1.77%,与其他各组之间的差异具有显著性(F=18.69,P<0.05)。47℃组的细胞坏死率最高,为39.15%±5.67%,各组之间的差异均有显著性(F=69.16,P<0.05)。PCNA的表达随着温度的增加而降低,45℃,47℃组的平均光密度值(average optical density,AOD)分别是0.22±0.02、0.21±0.01,与37℃对照组0.28±0.02相比差异具有显著性(q=4.75,5.76,P<0.05)。结论45℃及以上的热疗能够明显抑制Caski细胞的增殖,增加凋亡和坏死率,降低PCNA的表达。 展开更多
关键词 热疗 caski细胞 细胞凋亡 PCNA蛋白
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雷公藤内酯醇对人宫颈癌CaSki细胞株的体外作用研究 被引量:4
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作者 宁维翾 周英 +1 位作者 顾江红 王联欢 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期225-227,共3页
目的探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT比色法检测不同浓度(0、5、10、20ng/ml)TPL作用24、48、72h后对CaSki细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,细胞免疫化学法检测Ki... 目的探讨雷公藤内酯醇(TPL)对人宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡的影响及其作用机制。方法采用MTT比色法检测不同浓度(0、5、10、20ng/ml)TPL作用24、48、72h后对CaSki细胞增殖的影响,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化,细胞免疫化学法检测Ki-67及p53蛋白表达的改变。结果倒置相差显微镜观察可见TPL处理后细胞皱缩变圆变粗糙,体积缩小,且不断地脱落悬浮于培养液中,数量减少,细胞间隙增大,且随药物浓度增加及作用时间延长,这种变化趋于明显。5、10、20ng/ml TPL在体外对CaSki细胞的生长具有抑制作用,且呈剂量、时间依赖方式(P<0.01)。免疫细胞化学检测显示TPL作用后CaSki细胞Ki-67及p53蛋白表达下调,且呈剂量、时间依赖方式(P<0.01)。结论 TPL可抑制CaSki细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制癌细胞Ki-67及p53蛋白表达有关。 展开更多
关键词 雷公藤内酯caski细胞 细胞增殖 细胞凋亡 KI-67抗原 肿瘤抑制蛋白质P53
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DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖和凋亡影响的研究 被引量:5
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作者 刘岿然 赵敏 张淑兰 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2011年第10期758-761,共4页
目的:通过观察DEK基因沉默后对CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡影响,探讨DEK原癌基因siRNA对宫颈癌细胞的影响和机制。方法:将DEK siRNA真核表达载体转入CaSki细胞,转染48 h后,采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期... 目的:通过观察DEK基因沉默后对CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡影响,探讨DEK原癌基因siRNA对宫颈癌细胞的影响和机制。方法:将DEK siRNA真核表达载体转入CaSki细胞,转染48 h后,采用MTT法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变情况。结果:与对照组和未转染组相比,转染psiRNA-hHDEK组CaSki细胞增殖的抑制率和凋亡率均增高,分别为53.2%和(13.84±3.19)%,P值分别为0.038和0.002;psiRNA-hHDEK转染组G0/G1期细胞比率(82.65±5.23)较对照组(74.36±7.49)和未转染组(70.25±5.11)增多,差异有统计学意义,P=0.003;psiRNA-hH-DEK转染组细胞增殖指数(17.35%)明显低于未转染组(29.75%)和对照组细胞(25.64%),差异有统计学意义,P=0.02。结论:DEK基因抑制可能诱导CaSki细胞凋亡,并能影响肿瘤细胞内DNA的复制和合成,抑制细胞的正常分裂,从而抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 caski细胞 基因 DEK 细胞凋亡 细胞增殖 比色法 流式细胞术
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加温对宫颈癌CaSki细胞Survivin表达影响的研究 被引量:3
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作者 周菊梅 杜乐辉 +3 位作者 王晓文 赵凌云 金和坤 唐劲天 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2011年第10期762-764,共3页
目的:探讨不同温度热疗后宫颈癌CaSki细胞中Survivin的表达。方法:采用实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹法,检测45℃、47℃实验组和37℃对照组宫颈癌CaS-ki细胞中Survivin的表达。结果:SurvivinmRNA在37℃、45℃和47℃处理后24 h的表达... 目的:探讨不同温度热疗后宫颈癌CaSki细胞中Survivin的表达。方法:采用实时荧光定量PCR技术和蛋白质印迹法,检测45℃、47℃实验组和37℃对照组宫颈癌CaS-ki细胞中Survivin的表达。结果:SurvivinmRNA在37℃、45℃和47℃处理后24 h的表达倍数分别为1、0.707±0.089和0.814±0.068,F=114.48,P<0.001。Survivin蛋白在对照组呈高表达,在45℃和47℃的表达明显减弱甚至完全缺失,F=14 355.4,P<0.001。结论:>45℃的热疗可以在mRNA的水平抑制宫颈癌CaSki细胞中Survivin表达,导致Survivin蛋白表达降低甚至完全缺失。 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 caski细胞 微管相关蛋白质类 高温 诱发 聚合酶链反应
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维生素C诱导人宫颈癌Caski细胞凋亡及其分子机制的研究 被引量:4
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作者 杨建林 韩钰 +1 位作者 周永芹 张伟 《生命科学研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期143-147,共5页
为了研究维生素C对人宫颈癌Caski细胞体外抑制、诱导凋亡的作用及其分子机制,使用不同剂量维生素C处理人宫颈癌Caski细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测Cas-ki细胞周期变化;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DN... 为了研究维生素C对人宫颈癌Caski细胞体外抑制、诱导凋亡的作用及其分子机制,使用不同剂量维生素C处理人宫颈癌Caski细胞,采用噻唑蓝(MTT)法检测药物对细胞增殖的抑制作用;流式细胞仪检测Cas-ki细胞周期变化;琼脂糖电泳法观察凋亡细胞DNA Ladder现象;Western blot检测凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax和E6的表达以及Caspase 3的激活;荧光染色观察细胞线粒体膜电位的改变.分析发现,维生素C可显著抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,呈现明显的时间和剂量依赖性;将细胞阻滞于S期;诱导细胞凋亡,下调Bcl-2和E6、上调Bax蛋白表达,促进Caspase3活化,降低线粒体膜电位.表明维生素C在体外可有效抑制人宫颈癌Caski细胞增殖,诱导细胞凋亡. 展开更多
关键词 维生素C caski细胞 凋亡机制
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花椒抗宫颈癌Caski细胞作用及其机制的初步研究 被引量:13
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作者 袁太宁 肖长义 汪鋆植 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期1119-1120,共2页
目的研究花椒挥发油抗宫颈癌Caski细胞作用及其可能的机制。方法花椒挥发油按不同时间(24,48,72 h)及不同浓度(0.5~8 mg/ml)分别处理Caski细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期。结果4 mg/ml花椒挥发... 目的研究花椒挥发油抗宫颈癌Caski细胞作用及其可能的机制。方法花椒挥发油按不同时间(24,48,72 h)及不同浓度(0.5~8 mg/ml)分别处理Caski细胞,MTS法分析细胞的增殖速度,用流式细胞仪测定细胞凋亡及细胞周期。结果4 mg/ml花椒挥发油处理Caski细胞72h可显著地抑制Caski细胞增殖,1 mg/ml花椒挥发油处理Caski细胞72 h即可导致亚凋亡峰的出现,且G0/G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少。结论花椒挥发油可抑制Caski细胞增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 花椒 caski细胞 细胞凋亡
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抗HPV16核酶对宫颈癌CaSKi细胞放疗敏感性的影响 被引量:4
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作者 饶智国 张积仁 +2 位作者 郑燕芳 周惠 屈良鹄 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2002年第2期149-152,共4页
背景与目的:人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)是宫颈癌最主要的致病因素,E6是主要的致癌基因之一;高危HPV基因型,如HPV16的E6蛋白表达水平是维持宫颈癌恶性表型的必要条件。而放射治疗是目前宫颈癌治疗的标准和有效的方法。本研... 背景与目的:人乳头瘤病毒(humanpapillomavirus,HPV)是宫颈癌最主要的致病因素,E6是主要的致癌基因之一;高危HPV基因型,如HPV16的E6蛋白表达水平是维持宫颈癌恶性表型的必要条件。而放射治疗是目前宫颈癌治疗的标准和有效的方法。本研究旨在探讨抗HPV16E6核酶(ribozyme)对宫颈癌CaSKi细胞放疗敏感性的影响。方法:以脂质体法将抗HPV16E6-ribozyme、空载体质粒分别导入CaSKi细胞,命名为CaSKi-R、CaSKi-P细胞。点杂交检测核酶在细胞中的表达,Northern杂交检测3种细胞中E6基因的表达。用克隆形成试验检测3种细胞对放疗的敏感性,Annexine/PI双标法检测细胞凋亡率,流式细胞术检测bcl-2、p53、bax蛋白表达。结果:点杂交证实核酶能在CaSKi-R细胞中稳定表达,Northern杂交证实CaSKi-R中E6表达较CaSKi-P、CaSKi中明显降低。CaSKi-R细胞生长速度较CaSKi-P、CaSKi明显减慢(P<0.01);CaSKi-R细胞对X射线的敏感性较CaSKi-P、CaSKi明显增加,克隆形成率明显下降(P<0.05),CaSKi-R细胞照射前后的凋亡率较X射线照射后CaSKi-P、CaSKi明显增加(P<0.01);CaSKi-R细胞p53、bax蛋白表达较CaSKi-P、CaSKi明显升高,bcl-2明显减少(P<0.01)。结论:转染抗HPV16E6-ribozyme的CaSKi-R细胞出现一定程度的生长抑制,且对放射治疗的敏感性增加? 展开更多
关键词 核酶 乳头瘤病毒 子宫颈肿瘤 放射治疗 放射增敏 放射敏感性 HPV16核酶 caski细胞 影响
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南赤瓟醇提物对裸鼠宫颈癌Caski移植瘤的抑制作用 被引量:3
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作者 王爱玲 王海燕 +5 位作者 覃慧林 冯天艳 贺海波 杨小姣 邓为 汪鋆植 《三峡大学学报(自然科学版)》 CAS 2015年第3期108-112,共5页
探讨了南赤瓟醇提物对裸鼠宫颈癌Caski移植瘤的抑制作用,并在此基础上探寻其可能的机制.将0.3mL Caski(4×107个/mL)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,接种2次,间隔时间1周,建立裸鼠宫颈癌Caski移植瘤模型.将移植瘤裸鼠随机分为... 探讨了南赤瓟醇提物对裸鼠宫颈癌Caski移植瘤的抑制作用,并在此基础上探寻其可能的机制.将0.3mL Caski(4×107个/mL)细胞悬液接种于裸鼠右侧后腿背部皮下,接种2次,间隔时间1周,建立裸鼠宫颈癌Caski移植瘤模型.将移植瘤裸鼠随机分为模型组、南赤瓟醇提物组(200和400mg/kg)组,每组5只,每天给药1次,连续给药4周,停药次日处死裸鼠,测量裸鼠体重、移植瘤体积、瘤重,计算抑瘤率;光镜下观察移植瘤组织形态学变化;Annexin V-FITC/PI染色测定细胞凋亡率,荧光定量PCR测定Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9mRNA表达,并计算Bcl-2与Bax比值.结果表明南赤瓟醇提物可显著降低移植瘤体积和抑瘤率,上调Bax和Caspase-3、Caspase-9mRNA表达,下调Bcl-2mRNA表达和Bcl-2与Bax比值,与模型组比较具有显著性差异(P<0.05或P<0.01).南赤瓟醇提取物对人宫颈癌Caski细胞移植瘤生长具有明显抑制作用,其作用机制与调节Bcl-2、Bax和Caspase-3、Caspase-9基因表达有关. 展开更多
关键词 南赤瓟醇提物 caski细胞 裸鼠 移植瘤 凋亡
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载体介导的RNAi技术抑制宫颈癌CaSki细胞E7基因的表达 被引量:2
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作者 王丹青 彭芝兰 +1 位作者 牛晓宇 李大可 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期6-8,48,共4页
目的探讨H PV 16E 7特异性小干扰RNA(s iRNA)表达载体对宫颈癌C aSk i细胞E 7基因的抑制作用。方法构建H PV 16 E 7特异性s iRNA表达载体,利用脂质体转染C aSk i细胞,以荧光定量RT-PCR及W esternb lot检测其对E 7 mRNA及蛋白表达的影响... 目的探讨H PV 16E 7特异性小干扰RNA(s iRNA)表达载体对宫颈癌C aSk i细胞E 7基因的抑制作用。方法构建H PV 16 E 7特异性s iRNA表达载体,利用脂质体转染C aSk i细胞,以荧光定量RT-PCR及W esternb lot检测其对E 7 mRNA及蛋白表达的影响。结果3种表达载体P 1、P 2、P 3均能抑制C aSk i细胞E 7基因mRNA和蛋白的表达,其中载体P 1抑制作用最强,在转染后3周,对E 7 mRNA和蛋白的抑制率分别为92.86%和81.0%。结论H PV 16E 7 s iRNA表达载体能有效地抑制宫颈癌C aSk i细胞E 7基因的表达。 展开更多
关键词 HPV16E7 小干扰RNA表达载体 宫颈癌 caski细胞 RNA干扰
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