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野猪CAPN7基因的克隆、表达和变异分析 被引量：3
1
作者 杨秀芹 郭丽娟 +1 位作者 马建章 刘娣 《Zoological Research》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期503-508,共6页
钙蛋白酶是细胞质中主要的蛋白水解酶,在肌肉生长、蛋白转化及嫩化过程中发挥复杂的作用。该研究利用RT-PCR、生物信息学方法克隆野猪(Sus scrofa ussuricus)CAPN7cDNA并进行序列分析,利用相对定量RT-PCR方法研究其组织表达情况和利用PC... 钙蛋白酶是细胞质中主要的蛋白水解酶,在肌肉生长、蛋白转化及嫩化过程中发挥复杂的作用。该研究利用RT-PCR、生物信息学方法克隆野猪(Sus scrofa ussuricus)CAPN7cDNA并进行序列分析,利用相对定量RT-PCR方法研究其组织表达情况和利用PCR-SSCP方法对其进行变异分析。结果表明,野猪CAPN7基因编码区全长2442bp,预期编码813个氨基酸残基,多肽链中存在着calpain家族的催化结构域和催化活性中心;野猪CAPN7不同程度地表达于所检测的12种组织中,在6、9月龄野家杂交猪肌肉组织中的相对表达量高于同一时期的大白猪肌肉组织;所检测到的3种基因型在野猪、民猪和杜洛克中的分布存在着极显著差异。该研究为进一步揭示calpain7的功能提供了分子生物学基础。 展开更多
关键词 野猪 capn7 克隆 序列分析 组织表达 钙蛋白酶
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CAPN7促进人子宫内膜间质细胞增殖的初步研究 被引量：1
2
作者 刘红玉 朱丽华 +3 位作者 沈晓月 金晓艳 颜桂军 孙海翔 《中国优生与遗传杂志》 2013年第2期27-31,38,共6页
目的子宫内膜异位症是引起育龄妇女不孕的主要疾病之一,研究表明子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞增殖增强,但具体机制不清。我们研究发现半胱氨酸蛋白酶CAPN 7在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织中表达显著增高,本研究旨在探... 目的子宫内膜异位症是引起育龄妇女不孕的主要疾病之一,研究表明子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞增殖增强,但具体机制不清。我们研究发现半胱氨酸蛋白酶CAPN 7在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织中表达显著增高,本研究旨在探讨CAPN 7对子宫内膜间质细胞增殖的影响。方法提取正常育龄妇女及子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织总蛋白,通过Western Blotting检测CAPN 7蛋白表达。制备Ad-GFP-CAPN 7重组腺病毒,采用CCK-8增殖试剂盒和Western Blotting结合腺病毒介导的CAPN 7基因过表达及小干扰RNA介导的CAPN 7基因沉默实验,研究CAPN 7对人子宫内膜间质细胞增殖的影响。结果 CAPN 7蛋白在子宫内膜异位症患者在位子宫内膜组织中的表达明显高于正常育龄妇女子宫内膜组织;成功获得滴度为3.5×1010ifu/mL的重组GFP-CAPN 7腺病毒,人子宫内膜间质细胞感染该腺病毒后,可表达带有绿色荧光蛋白的CAPN 7融合蛋白;伴随CAPN 7蛋白表达量的增加子宫内膜间质细胞中CyclinD3蛋白的表达增加,同时显著增加细胞的增殖能力;基因沉默子宫内膜间质细胞中内源性CAPN 7表达后,子宫内膜间质细胞中CyclinD3蛋白的表达降低且增殖能力降低15%。结论 CAPN 7通过调控细胞周期蛋白CyclinD3的表达促进人子宫内膜间质细胞的增殖。 展开更多
关键词 capn7 人子宫内膜间质细胞 增殖
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靶向TUG1的mir-29c-3p通过调节CAPN7的表达影响膀胱癌细胞的迁移和侵袭 被引量：8
3
作者 余淦 周辉 +2 位作者 许凯 孟丽荣 郎斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1325-1331,共7页
目的探讨长链非编码RNATUG1影响膀胱癌细胞迁移和侵袭的机制。方法逆转录实时定量PCR检测膀胱癌组织和细胞中TUG1和mir-29c-3p的表达水平。在膀胱癌细胞系T24细胞中利用RNA干扰技术下调TUG1的表达后Transwell检测细胞的迁移和侵袭能力... 目的探讨长链非编码RNATUG1影响膀胱癌细胞迁移和侵袭的机制。方法逆转录实时定量PCR检测膀胱癌组织和细胞中TUG1和mir-29c-3p的表达水平。在膀胱癌细胞系T24细胞中利用RNA干扰技术下调TUG1的表达后Transwell检测细胞的迁移和侵袭能力的变化,并检测CAPN7的表达水平。在膀胱癌细胞系T24细胞中利用mir-29c-3p类似物过表达mir-29c-3p后在转录及转录后水平检测CAPN7的表达变化。功能回复试验验证CAPN7及TUG1对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响。结果TUG1和mir-29c-3p在膀胱癌细胞和组织中分别表达升高(P=0.01)及减低(P<0.01),同时它们的表达呈现负相关关系(P=0.0109,r^2=0.4295)。TUG1表达下调后可以抑制膀胱癌细胞T24的迁移和侵袭能力(P<0.01)。mir-29c-3p过表达后可以下调CAPN7的表达水平,CAPN7的表达水平与TUG1在膀胱癌中呈正相关关系(P=0.0139,r2=0.4081),荧光素酶报告试验验证了mir-29c-3p可同时靶向调节TUG1及CAPN7,功能回复试验验证了TUG1可以正向调节CAPN7的表达及其对膀胱癌细胞迁移和侵袭的影响(P<0.01)。结论靶向TUG1的mir-29c-3p可通过调节CAPN7的表达影响膀胱癌细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 膀胱癌 TUG1 迁移 侵袭 capn7 miR-29c-3p
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