RNA干扰C-erbB-2对肺腺癌细胞calu-3增殖的影响 被引量：8

1

作者 任淑华 张伟 +3 位作者 曲平 刘义 王井伟 张林 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1173-1178,共6页

背景与目的:C-erbB-2基因在人乳腺癌、卵巢癌、肺癌中扩增及过量表达,与肿瘤恶性程度增高、转移能力增强、化疗抵抗密切相关,且与预后不良有关。RNA干扰(RNA interfering,RNAi)是一种新的基因治疗技术,能有效、特异性地抑制细胞内基因... 背景与目的:C-erbB-2基因在人乳腺癌、卵巢癌、肺癌中扩增及过量表达,与肿瘤恶性程度增高、转移能力增强、化疗抵抗密切相关,且与预后不良有关。RNA干扰(RNA interfering,RNAi)是一种新的基因治疗技术,能有效、特异性地抑制细胞内基因表达。本实验研究靶向C-erbB-2基因的siRNA(small interferingRNA)对C-erbB-2过表达的肺腺癌细胞calu-3增殖的影响。方法:化学合成的靶向C-erbB-2基因siRNA在脂质体的介导下转染calu-3细胞,观察转染前后细胞表型的改变;通过逆转录聚合酶链反应(reversetranscription-polymerasechainreaction,RT-PCR)和流式细胞术检测转染前后细胞中C-erbB-2mRNA和蛋白水平的变化,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法评价对calu-3细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测细胞周期的变化和细胞凋亡情况。结果:靶向C-erbB-2基因siRNA降低了calu-3细胞中C-erbB-2mRNA和蛋白的表达,转染C-erbB-2siRNA48h后calu-3细胞出现C-erbB-2蛋白表达下调。C-erbB-2蛋白阳性率为(25.04±1.56)%,与未转染对照组、空载体组、非特异性siRNA组比较[(98.24±2.23)%、(95.67±1.98)%和(94.79±0.87)%]有显著性差异(P<0.01)。同时C-erbB-2siRNA对calu细胞增殖有抑制作用,使细胞周期阻滞于G0/G1期[C-erbB-2siRNA组(56.6±3.6)%,未转染对照组(45.5±3.2)%,P<0.01],并能诱导细胞凋亡。结论:化学合成的靶向C-erbB-2基因siRNA能有效抑制C-erbB-2基因在calu-3细胞中的表达,并对calu-3细胞增殖有抑制作用。 展开更多

关键词 肺肿瘤 基因治疗 RNA干扰 C-ERBB-2 SIRNA calu-3细胞

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长春瑞滨诱导人肺癌Calu-3细胞凋亡及机制 被引量：5

2

作者 张涛 张峰 +3 位作者 周勇安 王云杰 程庆书 刘锟 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期207-210,共4页

目的　观察长春瑞滨 (VRB)诱导人肺癌Calu 3细胞凋亡时Bcl 2和半胱天冬酶 3的表达有无变化。方法　以不同浓度的VRB( 2 0 ,40和 60 μmol·L-1)作用于体外培养的人肺癌Calu 3细胞 2 4h后 ,TUNEL法和吖啶橙染色法观察肺癌细胞凋亡形... 目的　观察长春瑞滨 (VRB)诱导人肺癌Calu 3细胞凋亡时Bcl 2和半胱天冬酶 3的表达有无变化。方法　以不同浓度的VRB( 2 0 ,40和 60 μmol·L-1)作用于体外培养的人肺癌Calu 3细胞 2 4h后 ,TUNEL法和吖啶橙染色法观察肺癌细胞凋亡形态学特征 ;流式细胞仪检测肺癌细胞凋亡率和肺癌细胞Bcl 2蛋白表达水平 ;以半胱天冬酶 3荧光分析检测试剂盒测定肺癌细胞半胱天冬酶 3活性。结果　VRB( 2 0 ,40和60 μmol·L-1)处理细胞 2 4h ,TUNEL法及吖啶橙染色均观察到典型的凋亡细胞形态学特征。流式细胞仪检测VRB处理的肺癌细胞凋亡率分别为 ( 3 .1±0 .6) % ,( 7.8± 1 .2 ) %和( 1 9.6± 4.3 ) % ,较对照组 (凋亡率为 0 )显著增高且呈剂量依赖性 (P <0 .0 1 ) ;Bcl 2蛋白阳性表达细胞率分别为 ( 3 7.6±6.9) % ,( 2 5 .4±6.2 ) %和( 8.4±2 .5 ) % ,较对照组 ( 4 8.3±7.1 ) %显著降低且呈剂量依赖性 (P <0 .0 5 ) ;肺癌细胞半胱天冬酶 3活性分别为 ( 3 3 2± 1 6) ,( 4 1 7± 1 1 )和 ( 63 1± 2 7)μmol·L-1·h-1,较对照组 ( 1 95±1 2 ) μmol·L-1·h-1显著增高且呈剂量依赖性(P <0 .0 1 )。结论　VRB可以诱导肺癌细胞凋亡 ,抑制Bcl 2表达及增强半胱天冬酶 展开更多

关键词 长春瑞滨 肿瘤细胞 培养的 凋亡 蛋白 BCL-2 半胱天冬酶-3 癌 肺细胞 calu-3

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鼻脑递送:葛根素在嗅神经鞘细胞的摄取及在Calu-3细胞的转运研究（英文） 被引量：4

3

作者 杨冰 杜守颖 +7 位作者 陆洋 张紫薇 高艳 喻刚艳 谭佳威 白洁 李鹏跃 武慧超 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期2159-2165,共7页

目的:建立鼻腔给药直接通路与间接通路体外模型,考察微乳对葛根素在嗅神经鞘细胞(OECs)的摄取和在Calu-3细胞单层的转运影响并探讨作用机制。方法:原代培养OECs,传代培养Calu-3细胞分别模拟穿细胞途径直接通路和细胞旁路途径间接通路。... 目的:建立鼻腔给药直接通路与间接通路体外模型,考察微乳对葛根素在嗅神经鞘细胞(OECs)的摄取和在Calu-3细胞单层的转运影响并探讨作用机制。方法:原代培养OECs,传代培养Calu-3细胞分别模拟穿细胞途径直接通路和细胞旁路途径间接通路。通过MTT实验考察葛根素溶液和微乳的细胞毒性。分别考察葛根素在Calu-3细胞单层的转运和OECs中的摄取。免疫组化考察微乳对Calu-3单层的紧密连接蛋白影响。结果:原代培养嗅神经鞘细胞并通过差速贴壁和阿糖胞苷纯化,得到的纯化细胞可作为体外嗅神经通路模型。葛根素溶液在Calu-3细胞模型的转运PAPP值为(1.19±0.11)(A→B)和(1.21±0.06)(B→A)。葛根素微乳的转运PAPP值显著高于葛根素溶液,PAPP值为(1.64±0.08)(A→B)和(1.86±0.17)(B→A)。OECs对溶液中葛根素的摄取在30min达到平衡,浓度为0.095mg/g,对微乳中葛根素的摄取60min达到平衡,浓度为0.352mg/g,显著高于葛根素溶液组。结论:本实验建立的Calu-3和OECs细胞模型可以在体外分别模拟鼻脑递送直接通路和间接通路,微乳可促进葛根素在体外鼻脑递送模型的转运,其作用机制与打开Calu-3细胞间紧密连接,增加葛根素细胞旁路转运。 展开更多

关键词 鼻-脑转运 葛根素微乳 calu-3 OECS 紧密连接蛋白

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CALU(rs2307040)基因多态性与华法林稳定剂量的关系研究 被引量：2

4

作者 刘寅强 杨百晖 +2 位作者 夏健明 张学玉 张桂敏 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第23期3857-3859,共3页

目的:探讨CALU(rs2307040)基因型在中国汉族人群中的分布情况及其基因多态性与瓣膜置换术后华法林稳定剂量的相关性。方法:采用Snapshot技术检测226例研究对象CALU(rs2307040)位点基因型,研究其基因型及等位基因频率;比较其中176例瓣膜... 目的:探讨CALU(rs2307040)基因型在中国汉族人群中的分布情况及其基因多态性与瓣膜置换术后华法林稳定剂量的相关性。方法:采用Snapshot技术检测226例研究对象CALU(rs2307040)位点基因型,研究其基因型及等位基因频率;比较其中176例瓣膜置换术患者基因多态性与华法林稳定剂量的相关性。结果:226例研究对象,CALU(rs2307040)位点基因型AA、AG和GG分别有0、40和186例,各占0%、17.7%和82.3%,A和G等位基因的频率分别为8.8%和91.2%;176例瓣膜置换术后患者服用华法林达稳定状态,AA型未检出,AG组与GG组比较,华法林日维持剂量、INR值和PT值均无显著统计学差异。结论:中国汉族人群CALU(rs2307040)基因多态性可能不是瓣膜置换术后华法林个体剂量差异的影响因素。 展开更多

关键词 华法林 calu 基因多态性 瓣膜置换术

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高效液相色谱法测定苯环喹溴铵在Calu-3细胞中的摄取 被引量：4

5

作者 邓万定 金方 张启明 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1187-1190,共4页

目的建立苯环喹溴铵反相高效液相色谱法,研究其在Calu-3细胞上的摄取特征。方法色谱条件:Discovery C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(0.27%磷酸二氢钾,0.3%三乙胺,稀磷酸调节pH至3.0)(35∶65),流速为1.0mL·min-1,... 目的建立苯环喹溴铵反相高效液相色谱法,研究其在Calu-3细胞上的摄取特征。方法色谱条件:Discovery C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-水(0.27%磷酸二氢钾,0.3%三乙胺,稀磷酸调节pH至3.0)(35∶65),流速为1.0mL·min-1,检测波长210 nm,柱温25℃。考察了药物浓度、时间对BCQB在Calu-3细胞上摄取的影响。结果 BCQB在0.010 2～1.022 0μg·mL-1内呈良好的线性关系(r=0.999 8),最低定量限为0.010 2μg·mL-1。BCQB在Calu-3细胞中的摄取30 min达峰,后Calu-3细胞中BCQB的含量逐渐下降。浓度处于20～500μmol·L-1之间时,Calu-3细胞对BCQB的摄取量逐渐增加,浓度达到500μmol·L-1后,随着剂量的增加BCQB的摄取量变化不明显。结论该法快速、灵敏、简单。BCQB可被Calu-3细胞迅速摄取,随着剂量的增加,BCQB在Calu-3细胞中的摄取存在饱和现象。 展开更多

关键词 苯环喹溴铵 calu-3细胞 高效液相色谱法 摄取

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CFTR对肺腺癌细胞Calu-3迁移影响的研究

6

作者 李亚秋 苏晓薇 +3 位作者 黄孙卉 许冬明 郝嘉南 郝利铭 《东北师大学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期116-120,共5页

采用常规培养肺腺癌细胞Calu-3的方法,利用MTT和CCK-8法确定囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的激活剂(Genistein)和抑制剂(CFTRinh-172)的最适浓度,用CFTR激活剂和抑制剂的最佳... 采用常规培养肺腺癌细胞Calu-3的方法,利用MTT和CCK-8法确定囊性纤维化跨膜传导调节因子(cystic fibrosis transmembrane conductance regulator,CFTR)的激活剂(Genistein)和抑制剂(CFTRinh-172)的最适浓度,用CFTR激活剂和抑制剂的最佳浓度分别处理Calu-3细胞,然后采用划痕实验观测了培养48h后Calu-3细胞迁移的差异.结果表明:MTT法检测激活剂的最佳浓度为25μmol/L;CCK-8法检测抑制剂的最佳浓度为10μmol/L;划痕实验检测得出25μmol/L激活剂组细胞迁移数量((74.2±5.79)个)与对照组细胞迁移数量((134.1±10.04)个)相比具有显著性差异(P=0.00<0.01);10μmol/L抑制剂组细胞迁移数量((148.3±17.70)个)与对照组细胞迁移数量((134.1±10.04)个)相比无显著性差异(P=0.27>0.05).激活剂通过促进CFTR氯离子通道的开放,抑制了肺腺癌肿瘤细胞Calu-3的迁移. 展开更多

关键词 CFTR calu-3细胞 迁移

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Calu-3细胞内琥珀酸脱氢酶活性及表达的双重染色法研究

7

作者 郝利铭 苏晓薇 +2 位作者 于欣宇 姜文华 王宝刚 《吉林医学》 CAS 2017年第7期1203-1205,共3页

目的:利用Calu-3细胞探讨肿瘤细胞琥珀酸脱氢酶活性及表达双重染色技术。方法:体外培养Calu-3细胞,将细胞爬片分为三部分,第一部分采用氯化硝基四唑氮蓝法对细胞进行琥珀酸脱氢酶活性染色,并分别孵育40 min、1 h和2 h。第二部分进行该... 目的:利用Calu-3细胞探讨肿瘤细胞琥珀酸脱氢酶活性及表达双重染色技术。方法:体外培养Calu-3细胞,将细胞爬片分为三部分,第一部分采用氯化硝基四唑氮蓝法对细胞进行琥珀酸脱氢酶活性染色,并分别孵育40 min、1 h和2 h。第二部分进行该酶的免疫组织化学染色。第三部分进行琥珀酸脱氢酶的组织化学和免疫组织化学的双重染色。在光学显微镜下观察并比较琥珀酸脱氢酶活性及表达染色结果的差异。结果:(1)相比于孵育40 min和1h的细胞,孵育2 h的细胞则反应更加充分,蓝紫色双甲臜颗粒明显增多。(2)免疫组织化学染色的细胞内出现黄棕色DAB颗粒。(3)在活性和表达双重染色中,孵育1h时蓝紫色双甲臜颗粒和DAB黄棕色颗粒较其他孵育时间的更加明显。结论:在Calu-3细胞中,琥珀酸脱氢酶活性染色时孵育2h效果较好,而在活性和表达双重染色中,孵育1h时染色效果最好。 展开更多

关键词 calu-3细胞 琥珀酸脱氢酶 双重染色法

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芍药苷、薄荷脑对葛根素在Calu-3细胞模型转运过程中膜流动性、钠-钾离子ATP酶和钙离子ATP酶的影响 被引量：2

8

作者 张林 王停 +5 位作者 杜守颖 陆洋 范志恒 马军明 谭佳威 薛宇涛 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第4期731-735,共5页

研究芍药苷、薄荷脑对葛根素在细胞模型转运过程中对Calu-3细胞膜生理功能的影响。以Calu-3细胞作为模拟鼻黏膜组织的体外细胞模型，采用荧光漂白恢复技术及超微量酶活性检测方法，考察细胞膜流动性、Na＋-K’-ATP酶和ca^2＋．ATP酶活... 研究芍药苷、薄荷脑对葛根素在细胞模型转运过程中对Calu-3细胞膜生理功能的影响。以Calu-3细胞作为模拟鼻黏膜组织的体外细胞模型，采用荧光漂白恢复技术及超微量酶活性检测方法，考察细胞膜流动性、Na＋-K’-ATP酶和ca^2＋．ATP酶活性，探索配伍药物促进葛根素转运的作用机制。结果表明，配伍低、中、高浓度薄荷脑或同时配伍低、中、高浓度芍药苷和薄荷脑时，与单独使用葛根素相比，Calu-3细胞膜荧光漂白恢复率显著升高，Na^＋-K＋-ATP酶活性未发生明显改变，Ca^2＋-ATP酶活性显著增强，由此证实薄荷脑起到主要渗透促进作用，并且其作用机制可能与增加流动性、激活Ca^2＋-ATP酶活性密切相关。 展开更多

关键词 薄荷脑 calu-3细胞 细胞膜流动性 NA+-K+-ATP酶 CA2+-ATP酶

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白头翁皂苷B4在Calu-3细胞单层中的渗透性研究 被引量：1

9

作者 狄孟华 李言 +3 位作者 李桂凤 崔京浩 王永林 杨世林 《贵州医科大学学报》 CAS 2018年第7期750-753,共4页

目的:建立白头翁皂苷B4的HPLC测定方法,研究其在单层Calu-3细胞中的渗透性。方法:色谱条件为Agilent C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)、流动相为0.1%磷酸-乙腈(71%~29%)、流速为0.8 m L/min、检测波长205 nm、柱温25℃,考察不同浓度B4在... 目的:建立白头翁皂苷B4的HPLC测定方法,研究其在单层Calu-3细胞中的渗透性。方法:色谱条件为Agilent C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)、流动相为0.1%磷酸-乙腈(71%~29%)、流速为0.8 m L/min、检测波长205 nm、柱温25℃,考察不同浓度B4在Calu-3单层细胞中的渗透情况,以卡波姆974P为促渗剂,考察卡波姆对B4渗透性的影响。结果:B4在1.5~30.0 mg/L内与峰面积呈良好线性关系(r=0.999 3),B4在Calu-3细胞的渗透性具有浓度依赖性,卡波姆的加入提高了B4的渗透量。结论:B4的渗透以细胞旁路为主要途径,而卡波姆的加入可提高细胞旁路通透性,使药物渗透量增加。 展开更多

关键词 高效液相色谱 白头翁皂苷B4 calu-3细胞 卡波姆 渗透性

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外源微直流电场对肺腺癌细胞Calu-3迁移的影响

10

作者 李莎 王晓燕 +3 位作者 赵三军 高润池 赵敏 施利民 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2017年第8期1015-1025,共11页

该文通过Time-lapse技术,以无电场作用的人肺腺癌细胞Calu-3细胞为对照组,以分别暴露于电场强度为2 V/cm、4 V/cm和6 V/cm的Calu-3细胞为实验组,研究了外源微直流电场对Calu-3迁移的影响。结果表明,Calu-3细胞可通过单细胞和群体细胞两... 该文通过Time-lapse技术,以无电场作用的人肺腺癌细胞Calu-3细胞为对照组,以分别暴露于电场强度为2 V/cm、4 V/cm和6 V/cm的Calu-3细胞为实验组,研究了外源微直流电场对Calu-3迁移的影响。结果表明,Calu-3细胞可通过单细胞和群体细胞两种形式迁移,直流电场对这两种迁移形式具有显著的影响:无电场作用时,单细胞和群体性的Calu-3随机迁移;加入直流电场后,单细胞和群体性的Calu-3朝向负极定向迁移,迁移方向性指数、迁移方向持续性指数、轨迹速度、位移速度显著高于无电场作用的对照组。电场强度为4 V/cm时,单细胞和群体性的Calu-3趋电性最明显,迁移方向最恒定。相同强度的电场作用下,Calu-3群体细胞迁移的方向性指数和方向持续性均高于单细胞迁移,但单细胞迁移的轨迹速度和位移速度快于群体细胞迁移。 展开更多

关键词 肺腺癌细胞calu-3 直流电场 单细胞迁移 群体细胞迁移 趋电性

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S100A2通过促进细胞分裂、侵袭、迁移及抑制凋亡促进Calu-6肺癌细胞株生长 被引量：3

11

作者 杜歌 刘自双 +2 位作者 魏莉 刘芳芳 陈子浩 《临床肺科杂志》 2022年第6期878-883,共6页

目的S100A2作为S100钙结合蛋白家族中重要一员,已被证实与肺癌相关。本研究旨在探究S100A2对Calu-6肺癌细胞株的分裂、侵袭、迁移等生物学行为影响。方法构建过表达S100A2慢病毒载体,感染Calu-6肺癌细胞株。使用RT-PCR、Western-blot技... 目的S100A2作为S100钙结合蛋白家族中重要一员,已被证实与肺癌相关。本研究旨在探究S100A2对Calu-6肺癌细胞株的分裂、侵袭、迁移等生物学行为影响。方法构建过表达S100A2慢病毒载体,感染Calu-6肺癌细胞株。使用RT-PCR、Western-blot技术和荧光显微镜确认S100A2过表达后,以是否携带目的基因为标准,将细胞分为Calu-6/S100A2实验组、Calu-6/空载体对照组、Calu-6空细胞对照组。利用MTT、Transwell和流式细胞术实验技术,分别检测各组细胞增殖能力、细胞侵袭和迁移能力、细胞凋亡和细胞周期变化,比较各组细胞生物学行为的差异。结果MTT实验结果显示:与两组对照组相比,Calu-6/S100A2实验组细胞在12h,24h,48h,72h,96h吸光值均高(P<0.05)。Transwell技术检测细胞迁移、侵袭能力的实验结果中,48小时后,Calu-6/S100A2实验组下室细胞数目高于Calu-6空细胞对照组和Calu-6/空载体对照组(P<0.05)。流式细胞术结果显示:Calu-6/S100A2实验组细胞凋亡的平均比例低于两个对照组。相比于对照组,Calu-6/S100A2实验组细胞周期G1期缩短,S期延长(P<0.05)。结论S100A2可通过促进细胞分裂、迁移、侵袭及抑制凋亡,从而促进Calu-6肺癌细胞株生长。 展开更多

关键词 S100A2 calu-6 增殖 迁移 凋亡

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Calu-3细胞气液界面培养及暴露研究的初探 被引量：3

12

作者 李银霞 盛云华 +1 位作者 胡玥 唐黎明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第12期1914-1919,共6页

目的探索Calu-3细胞气液界面(air-liquid interface,ALI)培养条件,及其在暴露系统中暴露洁净空气的耐受性。方法在Calu-3细胞3阶段培养:培养瓶扩增、液液培养至长满Transwell膜、ALI培养后,通过细胞跨上皮电阻(trans-epithelium electri... 目的探索Calu-3细胞气液界面(air-liquid interface,ALI)培养条件,及其在暴露系统中暴露洁净空气的耐受性。方法在Calu-3细胞3阶段培养:培养瓶扩增、液液培养至长满Transwell膜、ALI培养后,通过细胞跨上皮电阻(trans-epithelium electrical resistant,TEER)的测定和紧密连接蛋白ZO-1的表达来确定细胞屏障状态;利用气液界面暴露系统将Calu-3细胞暴露在洁净空气中,暴露1、2、3、4、5、6 h,以培养箱培养的细胞作为对照,检测暴露后Calu-3细胞的活性、TEER的变化,确定基于ALI培养的Calu-3细胞在体外暴露系统中的单次最长暴露时间。结果Calu-3细胞液液培养(8±1)d长满Transwell膜,屏障形成,转为ALI培养,在ALI培养的1~18 d内屏障完整,状态稳定,可以用于暴露实验;Calu-3细胞的活性在洁净空气暴露6 h之后明显下降(P<0.01),TEER在洁净空气暴露4、5、6 h之后明显下降(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。结论ALI培养1~18 d的Calu-3细胞可以用于气液界面暴露实验;综合细胞活性和TEER的变化,Calu-3细胞在暴露系统中暴露洁净空气的单次最长暴露时间为3 h。 展开更多

关键词 气液界面暴露系统 气液界面培养 calu-3细胞 紧密连接 细胞跨上皮电阻 暴露时间

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教酒链霉菌中卡西霉素生物合成基因簇的calU3基因功能分析

13

作者 苟丽霞 杨清浅 +2 位作者 刘孟欣 汪志军 韩铁生 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期418-426,共9页

卡西霉素(calcimycin)是重要的离子载体抗生素,具有广泛的生物活性,其生物合成基因簇已从教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)NRRL3882的基因组DNA中成功克隆,但其生物合成途径尚未阐明。本研究拟分析卡西霉素生物合成途径中calU3基... 卡西霉素(calcimycin)是重要的离子载体抗生素,具有广泛的生物活性,其生物合成基因簇已从教酒链霉菌(Streptomyces chartreusis)NRRL3882的基因组DNA中成功克隆,但其生物合成途径尚未阐明。本研究拟分析卡西霉素生物合成途径中calU3基因的功能。采用PCR-targeting方法构建calU3基因中断质粒,通过接合转移和同源重组的方法构建得到教酒链霉菌NRRL3882的ΔcalU3突变株,并对突变株进行calU3基因的互补分析,通过高效液相色谱(HPLC)及液相色谱-质谱(LC-MS)分析突变株及互补菌株的代谢产物。构建calU3的表达载体,纯化得到重组CalU3蛋白,对其进行紫外/可见光的吸光谱分析。结果显示calU3基因中断的突变株丧失产生卡西霉素及N-脱甲基卡西霉素的能力,但有色唑霉素(cezomycin)的积累,互补菌株恢复野生菌株产卡西霉素的能力。CalU3蛋白具有明显的黄色,在377 nm和455 nm有特征性的吸收峰。以上结果表明calU3和卡西霉素苯并噁唑环3位取代基团的形成相关。CalU3具有FAD-NAD(P)的结合位点,可能是一个FAD-NAD(P)依赖的氧化还原酶,负责催化活化的色唑霉素中苯并噁唑环的3位羟化反应,生成3-羟基色唑霉素。本研究初步阐明了calU3基因对卡西霉素的苯并噁唑环3位的修饰功能,为全面解析卡西霉素的生物合成途径打下了坚实基础。 展开更多

关键词 卡西霉素 生物合成 氧化还原酶 FAD依赖 calu3

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没食子儿茶素没食子酸酯对小鼠Lewis肺癌增殖以及A549与Calu-3肺癌增殖的抑制作用

14

作者 伊利夏提.肖开提 李学军 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第8期585-589,共5页

目的观察没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对小鼠Lewis肺癌增殖的抑制作用,并在细胞水平比较没食子儿茶素没食子酸酯对A549与Calu-3两种肺癌细胞增殖和凋亡的影响,初步分析可能的机制。方法利用C57BL/6J Lewis肺... 目的观察没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin gallate,EGCG)对小鼠Lewis肺癌增殖的抑制作用,并在细胞水平比较没食子儿茶素没食子酸酯对A549与Calu-3两种肺癌细胞增殖和凋亡的影响,初步分析可能的机制。方法利用C57BL/6J Lewis肺癌自发转移模型研究没食子儿茶素没食子酸酯(12.5、25、50 mg.kg-1口服给药,21 d)对Lewis肺癌增殖的抑制作用。采用WST-8方法检测5、10、50、100μmol.L-1的没食子儿茶素没食子酸酯对人源非小细胞肺癌Calu-3细胞及A549细胞增殖的抑制作用。利用TUNEL细胞凋亡检测试剂盒以及PI染色方法观察没食子儿茶素没食子酸酯对Calu-3细胞和A549细胞(Ki-Ras突变)的促凋亡作用。结果没食子儿茶素没食子酸酯剂量依赖性地抑制皮下移植Lewis肺癌的增殖;采用WST-8检测法观察到没食子儿茶素没食子酸酯对Calu-3细胞增殖呈剂量依赖性的抑制,而对A549细胞抑制作用较弱;TUNEL方法研究结果显示,没食子儿茶素没食子酸酯通过促凋亡作用抑制Calu-3细胞增殖;细胞计数结果表明,给予不同剂量的没食子儿茶素没食子酸酯之后,Calu-3细胞数呈剂量依赖性减少,A549细胞数目无显著性变化。结论没食子儿茶素没食子酸酯能够抑制Lewis肺癌增殖,并剂量依赖性的抑制Calu-3细胞的增殖,而对A549细胞增殖无明显抑制作用。 展开更多

关键词 没食子儿茶素没食子酸酯 A549人肺癌细胞系 calu-3人肺癌细胞系 肿瘤细胞增殖

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RNA干扰VEGFR-2表达对Calu-1细胞增殖、迁移、侵袭力及放射效应影响 被引量：2

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作者 刘毅 刘亮 +6 位作者 胡晨曦 周莉华 乔云 王磊 刘彬 陈晖 蒋晓东 《中华放射肿瘤学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第6期714-718,共5页

目的：研究VEGFR？2对肺癌细胞系Calu？1细胞增殖、迁移、侵袭及联合放射后凋亡率影响，并探讨其可能机制。方法 siRNA敲低Calu？1细胞中的VEGFR？2基因，借助实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测VEGFR？2表达水平的变化；将细胞分为对照组... 目的：研究VEGFR？2对肺癌细胞系Calu？1细胞增殖、迁移、侵袭及联合放射后凋亡率影响，并探讨其可能机制。方法 siRNA敲低Calu？1细胞中的VEGFR？2基因，借助实时荧光定量PCR和蛋白印迹法检测VEGFR？2表达水平的变化；将细胞分为对照组、VEGF组、VEGFR？2基因敲低组和基因敲低加VEGF组。利用CCK8法、细胞划痕实验及Transwell实验分别检测细胞增殖、迁移和侵袭能力变化，利用蛋白印迹法检测VEGFR？2及下游相关信号通路蛋白表达水平变化；各组细胞联合放射后，检测细胞凋亡。结果 RNA干扰VEGFR？2后Calu？1细胞中VEGFR？2的mRNA水平和蛋白水平均降低（ P＝0．001、0．000）；RNA干扰VEGFR？2后Calu？1细胞的增殖、迁移、侵袭能力均降低（ P＝0．000、0．000、0．031）；RNA干扰VEGFR？2后Calu？1细胞中Akt、ERK 1／2、p38的蛋白磷酸化水平均降低（ P＝0．336、0．986、0．553）；RNA干扰VEGFR？2后联合放射后Calu？1细胞的凋亡率增加（ P＝0．012），RNA干扰VEGFR？2后HIF？1α蛋白表达被抑制（ P＝0．016）。结论 VEGFR？2基因表达敲低后显著抑制了Calu？1细胞的多项生理功能，并提高了放射后细胞凋亡率。 展开更多

关键词 小分子干扰核糖核酸 血管内皮生长因子受体2 calu-1细胞系 放射效应

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吸入毒性评价体外连续流暴露系统的评价及应用

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作者 李银霞 盛云华 +1 位作者 胡玥 唐黎明 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第2期391-398,共8页

目的评价体外气液界面(ALI)连续流暴露系统,为吸入毒理学体外研究提供参考数据,并用此系统结合Calu-3细胞ALI培养模型对化合物柠檬烯的吸入毒性进行初步评价。方法荧光素钠(Na-flu)剂量法辅以石英微量天平法(QCM)来评估ALI连续流暴露系... 目的评价体外气液界面(ALI)连续流暴露系统,为吸入毒理学体外研究提供参考数据,并用此系统结合Calu-3细胞ALI培养模型对化合物柠檬烯的吸入毒性进行初步评价。方法荧光素钠(Na-flu)剂量法辅以石英微量天平法(QCM)来评估ALI连续流暴露系统的沉积量和孔间均一性;采用ALI连续流暴露系统将柠檬烯气溶胶暴露于ALI培养的Calu-3细胞模型3 h,暴露剂量为高、中、低(0.213、0.104、0.0645μg·cm^(-2)),洁净空气暴露作为阴性对照组,24 h后检测暴露后细胞的活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、跨上皮电阻值(TEER)、黏蛋白MUC5AC与炎症因子基因表达,来评价柠檬烯的吸入毒性。 结果 ALI连续流暴露系统荧光素钠的沉积量为(0.085±0.007) μg/30 min/孔,在经过多次调试后,孔间均一性从最初的26%优化至10%以下;与对照组相比,柠檬烯气溶胶暴露后细胞活性以及 IL-8 基因表达无明显变化、细胞 IL-6 基因表达上升;中暴露剂量的柠檬烯促使细胞释放LDH>10%、细胞肿瘤坏死因子 TNF-α 基因表达下降;高暴露剂量的柠檬烯降低细胞TEER值,损害细胞屏障功能、细胞黏蛋白 MUC5AC 基因表达增加。 结论 ALI连续流暴露系统调试过后可以用于吸入毒性体外研究;高、中暴露剂量的柠檬烯具有吸入毒性。 展开更多

关键词 气液界面暴露 连续流暴露系统 沉积量 孔间均一性 柠檬烯 calu-3细胞

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S100A6对人肺癌细胞株Calu-6分化的影响研究 被引量：1

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作者 王婷 牛蔓 张奕 《实用心脑肺血管病杂志》 2022年第9期76-79,共4页

目的 探讨S100A6对人肺癌细胞株Calu-6分化方向的影响。方法 本实验时间为2021年6月至2022年2月,将15只8~10周龄BALB/c裸鼠采用简单随机法分为S100A6实验组7只、空载体组4只、空白对照组4只。在前期实验基础上构建S100A6过表达慢病毒、... 目的 探讨S100A6对人肺癌细胞株Calu-6分化方向的影响。方法 本实验时间为2021年6月至2022年2月,将15只8~10周龄BALB/c裸鼠采用简单随机法分为S100A6实验组7只、空载体组4只、空白对照组4只。在前期实验基础上构建S100A6过表达慢病毒、空载体慢病毒,将S100A6过表达慢病毒、空载体慢病毒及空细胞分别注射到S100A6实验组、空载体组、空白对照组裸鼠右前背部。第2周开始每周测量裸鼠的肿瘤体积,5周后处死裸鼠,取出肿瘤组织。采用免疫组化印记法检测肿瘤组织中甲状腺转移因子(TTF)-1、天冬氨酸蛋白酶A(NapsinA)、P40、CK5/6、P63的表达情况。结果 第2、3、4、5周三组裸鼠肿瘤体积比较,差异有统计学意义(P<0.05);其中S100A6实验组裸鼠肿瘤体积小于空载体组和空白对照组(P<0.05)。三组肿瘤组织中TTF-1、NapsinA、P40、CK5/6均表达阳性,S100A6实验组、空载体组、空白对照组肿瘤组织中P63表达阳性率分别为7/7、3/4、3/4。结论 S100A6可抑制人肺癌细胞株Calu-6增殖,对人肺癌细胞株Calu-6向肺腺癌或肺鳞癌分化方向未见影响。 展开更多

关键词 肺肿瘤 肺腺癌 癌 鳞状细胞 S100A6 calu-6 生物标记 肿瘤 免疫组织化学

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基于AI的5G室内分布系统规划研究

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作者 孙开宇 王晓楠 《数字通信世界》 2025年第2期33-35,共3页

随着5G技术的迅速发展,室内分布系统(Indoor Distribution System,IDS)在满足高数据传输需求和提供优质用户体验方面显得尤为重要。然而,由于楼宇环境的复杂性,传统的规划方法难以精确识别弱覆盖区域并进行有效部署。本文提出了一种基... 随着5G技术的迅速发展,室内分布系统(Indoor Distribution System,IDS)在满足高数据传输需求和提供优质用户体验方面显得尤为重要。然而,由于楼宇环境的复杂性,传统的规划方法难以精确识别弱覆盖区域并进行有效部署。本文提出了一种基于人工智能(AI)的5G室内分布系统规划方法,通过结合大数据分析方法和机器学习技术,更加精准地识别弱覆盖楼宇,评估楼宇价值,并制定优先覆盖策略。相关研究旨在为5G室分网络的规划提供有力支持,提升网络性能和用户体验。 展开更多

关键词 5G 室内分布系统 人工智能 弱覆盖识别 楼宇价值评估

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吸入毒理云暴露系统的阳性验证体系的摸索

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作者 李银霞 盛云华 +1 位作者 胡玥 唐黎明 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1591-1598,共8页

目的探索云暴露系统用于吸入毒理体外暴露实验的可行性。方法采用高、中、低(800、400、200 mg·L^(-1))3个浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)通过云暴露系统对气液界面(air-liquid interface,ALI)培养的Calu-3细胞进行暴露,磷... 目的探索云暴露系统用于吸入毒理体外暴露实验的可行性。方法采用高、中、低(800、400、200 mg·L^(-1))3个浓度的脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)通过云暴露系统对气液界面(air-liquid interface,ALI)培养的Calu-3细胞进行暴露,磷酸盐缓冲液(phosphate buffer solution,PBS)暴露作阴性对照组,暴露1次,另取高浓度LPS溶液暴露5次,暴露结束后3 h和24 h分别检测Calu-3细胞的活性、乳酸脱氢酶(LDH)释放量、跨上皮电阻值(TEER)、黏蛋白MUC5AC以及炎症因子IL-6、IL-8、TNF-α表达。结果与PBS阴性对照组相比,高、中、低3种浓度的LPS气液界面暴露于Calu-3细胞模型后,细胞的活性、LDH释放量无显著变化,但细胞电阻值降低,细胞的屏障功能受损;随着暴露浓度的升高,LPS促进细胞黏蛋白MUC5AC的表达,使细胞IL-6、IL-8表达下降,TNF-α表达上升;随着暴露频率的增加,LPS会抑制黏蛋白的表达,使IL-6表达上升;暴露频率增加的同时延长暴露后的检测时间会使细胞IL-8、TNF-α表达上升。结论ALI云暴露的方式可以有效反映细胞对阳性受试物的反应,此体外暴露方法可以用于后续暴露实验来评价化合物的吸入毒性。 展开更多

关键词 云暴露系统 气液界面暴露 脂多糖 calu-3细胞 阳性反应 吸入毒性

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基于“鼻-脑”通路细胞模型组探索相对分子质量及粒径因素对药物制剂经鼻入脑的影响 被引量：2

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作者 杨冰 陆洋 +2 位作者 杜守颖 李鹏跃 张翼 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第22期5748-5753,共6页

目的基于"鼻-脑"通路体外细胞模型,探索药物制剂经鼻入脑的影响因素。方法将Calu-3细胞与嗅神经鞘细胞(OECs)细胞共培养,构建"鼻-脑"通路细胞模型组。以荧光素异硫氰酸酯右旋葡萄糖苷(FD)和荧光纳米银粒子(AgNPs)... 目的基于"鼻-脑"通路体外细胞模型,探索药物制剂经鼻入脑的影响因素。方法将Calu-3细胞与嗅神经鞘细胞(OECs)细胞共培养,构建"鼻-脑"通路细胞模型组。以荧光素异硫氰酸酯右旋葡萄糖苷(FD)和荧光纳米银粒子(AgNPs)为模型药物,探索药物相对分子质量(Mw)因素及制剂粒径因素对药物经鼻入脑的影响。结果 FD随Mw增大其跨细胞单层膜转运表观渗透系数(Papp)减小;OECs对不同Mw FD的摄取在90 min后摄取量趋于饱和,随其Mw增大,相同摄取时间OECs摄取量有明显下降趋势。不同粒径荧光AgNPs在"鼻-脑"多通路细胞模型组Calu-3单层的Papp随纳米粒的粒径增大而减小,粒径<40 nm,其在Calu-3的转运特性表现为中等吸收(1×10-6<Papp<10×10-6),粒径>60 nm,其转运特性为难吸收(Papp<1×10-6);OECs对不同粒径荧光AgNPs的摄取在60min趋于饱和且随其粒径增大,相同摄取时间OECs摄取量有明显下降趋势。结论药物Mw大小及纳米制剂的粒径对于药物经鼻转运入脑具有重要影响,Mw<4 000的药物,粒径<40 nm的纳米粒子具有更好转运和摄取特性。 展开更多

关键词 “鼻-脑”多通路细胞模型组 药物转运与摄取 OECs细胞 calu-3细胞 荧光素异硫氰酸酯右旋葡萄糖苷 荧光纳米银

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