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幽门螺杆菌cagT蛋白的表达、纯化及免疫原性研究 被引量：4
1
作者 丁红雷 潘竞 +5 位作者 张卫军 张怡 罗萍 解庆华 毛旭虎 邹全明 《西南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期46-50,共5页
为了解析cagT蛋白的结构,进而了解cagT基因在幽门螺杆菌致病中的作用,应用PCR技术从幽门螺杆菌26695菌株基因组中扩增cagT基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)载体,转化宿主细胞E.coliBL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋... 为了解析cagT蛋白的结构,进而了解cagT基因在幽门螺杆菌致病中的作用,应用PCR技术从幽门螺杆菌26695菌株基因组中扩增cagT基因,T/A法克隆,连接至pET-28a(+)载体,转化宿主细胞E.coliBL21(DE3),IPTG诱导目的蛋白表达,亲和层析法纯化目的蛋白,免疫家兔制备抗体并鉴定其抗原性.成功克隆cagT基因,重组cagT基因片段的测序结果与GenBank上公布的序列相同.重组cagT蛋白以可溶和包涵体两种形式表达,免疫家兔所得的抗体滴度为1∶32.结果构建了高效表达cagT蛋白的重组载体pET-28a(+)-cagT,表达的蛋白具有良好的免疫原性,为后续的结构和功能研究奠定了基础. 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 cagt基因 基因克隆 Ⅳ型分泌系统
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幽门螺杆菌Ⅳ型分泌系统cagT基因的克隆表达及其重组蛋白对SGC-7901细胞增殖和分泌细胞因子功能的影响 被引量：2
2
作者 崔蕾蕾 邵世和 +5 位作者 李良菊 王华 母润红 鞠小丽 董苏荣 钟桥 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期452-458,共7页
【目的】初步研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）NCTC 11637 cagT（HP0532）基因对SGC-7901细胞增殖和白细胞介素-8（IL-8）分泌的影响。【方法】应用PCR技术从H．pylori基因组DNA中扩增cagT编码基因片段，将其定向插入p... 【目的】初步研究幽门螺杆菌（Helicobacter pylori，H．pylori）NCTC 11637 cagT（HP0532）基因对SGC-7901细胞增殖和白细胞介素-8（IL-8）分泌的影响。【方法】应用PCR技术从H．pylori基因组DNA中扩增cagT编码基因片段，将其定向插入pQE30载体中，双酶切鉴定筛选阳性克隆。测序分析确认后，IPTG诱导表达，表达蛋白以Ni^2＋-NTA柱进行纯化，并经Western blot鉴定，纯化的蛋白作用于SGC-7901细胞，提取细胞总RNA，RT-PCR扩增IL-8，并用MTT法检测蛋白对细胞增殖的影响。【结果】成功克隆了cagT基因，全长843bp（GenBank登录号为EF114758），编码280个氨基酸，与GenBank公布的其他H．pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97％-99％。工程菌诱导后SDS-PAGE显示新生表达蛋白带，相对分子质量约为32kDa，经Ni^2＋-NTA柱纯化后可获得纯度为98％重组蛋白。经透析复性后的蛋白（终浓度10μg／mL）作用于SGC-7901细胞后，可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达。不同浓度CagT蛋白与SGC-7901细胞作用，细胞增殖的程度随着蛋白浓度的增加逐渐降低，细胞的增殖受到抑制。【结论】CagT蛋白可刺激SGC-7901细胞IL-8的表达，并抑制细胞增殖，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 cagt 表达 白细胞介素-8 增殖
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cagT——幽门螺杆菌cag致病岛的“底座”
3
作者 丁红雷 陈思琪 +1 位作者 毛旭虎 邹全明 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期711-715,共5页
毒素相关基因致病岛(cagPAI)是幽门螺杆菌的一个IV型分泌系统,由28～30个蛋白质组成。cagT是cagPAI的一个重要结构蛋白,位于cagPAI针尖状结构的基底部,作为此IV型分泌系统的"底座",与cagY蛋白一起构成了cagPAI的结构框架。将c... 毒素相关基因致病岛(cagPAI)是幽门螺杆菌的一个IV型分泌系统,由28～30个蛋白质组成。cagT是cagPAI的一个重要结构蛋白,位于cagPAI针尖状结构的基底部,作为此IV型分泌系统的"底座",与cagY蛋白一起构成了cagPAI的结构框架。将cagT基因敲除,则cagPAI结构消失,阻断了效应分子cagA进入宿主上皮细胞和IL-8的分泌。cagT还可与其他cagPAI蛋白质相互作用,协同转运cagA进入宿主细胞,引起宿主细胞的损伤。 展开更多
关键词 cagt 幽门螺杆菌 IV型分泌系统 结构蛋白 致病岛
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幽门螺杆菌NCTC11637 cagT基因的克隆及序列分析
4
作者 崔蕾蕾 邵世和 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第12期1433-1436,共4页
目的:克隆幽门螺杆菌(H pylori)NCTC 11637 cag T(HP0532)的编码基因,并分析其核苷酸序列.方法:应用PCR技术从H pylori基因组DNA中扩增cag T编码基因片段,克隆至pGEM-T载体后,再将其定向插入pQE30载体中,双酶切鉴定筛选阳性克隆,并进行... 目的:克隆幽门螺杆菌(H pylori)NCTC 11637 cag T(HP0532)的编码基因,并分析其核苷酸序列.方法:应用PCR技术从H pylori基因组DNA中扩增cag T编码基因片段,克隆至pGEM-T载体后,再将其定向插入pQE30载体中,双酶切鉴定筛选阳性克隆,并进行序列分析.结果:NCTC 11637 cag T基因全长843 bp(GenBank登录号为EF114758),编码280个氨基酸,与GenBank公布的其他H pylori菌株基因序列的核苷酸同源性为97%-99%.结论:成功克隆了cag T基因,为进一步研究其生物学功能奠定了基础. 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 cagt 克隆 测序
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Prevalence of cagA, cagE and cagT Genes in cag Pathogenicity Island of Helicobacter pylori StrainsIsolated from Shanghai Patients and their Clinical Implications
5
作者 LiXiao-bo LiuWen-zhong XuWei-wen 《胃肠病学》 2000年第B08期170-170,共1页
关键词 流行病学 CAGA CAGE cagt基因 致病性 H.PYLORI 上海 PCR 消化系统
暂未订购
新型航改燃气轮机技术在地面发电中的应用 被引量：5
6
作者 陈玉洁 《燃气涡轮试验与研究》 北大核心 2012年第B12期52-54,共3页
能源结构调整和人们对生态环境的日益关注,使得轻型燃气轮机备受小型冷热电厂青睐。鉴于航空发动机的技术优势,轻型燃气轮机多为航改燃气轮机的改型。详细论述了新型航改燃气轮机技术(间冷式航改燃气轮机,燃气-蒸汽联合循环,CCHP(冷热... 能源结构调整和人们对生态环境的日益关注,使得轻型燃气轮机备受小型冷热电厂青睐。鉴于航空发动机的技术优势,轻型燃气轮机多为航改燃气轮机的改型。详细论述了新型航改燃气轮机技术(间冷式航改燃气轮机,燃气-蒸汽联合循环,CCHP(冷热电联产)系统,航改燃气轮机结合的新循环技术)在地面发电中的应用,可为我国发展航改燃气轮机分布式能源系统提供参考。 展开更多
关键词 航空发动机 航改燃气轮机 间冷循环 CCHP cagt
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更新传统设计观念加速新产品开发
7
作者 王志博 《工厂建设与设计》 1997年第2期25-27,共3页
基于多年从事计算机辅助成组技术（ＣＡＧＴ）的体验，针对机械工业的难点、热点和通病，简述了一条事半功倍的新产品开发捷径———更新设计观念，以相似理论为指导，以结构合理化为基础的计算机辅助成组设计（ＧＴＣＡＤ）。
关键词 成组技术 cagt 产品开发 机械工艺
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更新传统设计观念加速新产品开发
8
作者 王志博 《成组技术与生产现代化》 1997年第3期9-11,共3页
基于多年从事计算机辅助成组技术(CAGT)的体验,针对机械工业的难点、热点和通病简述了一条事半功倍的新产品开发捷径——更新设计观念,以相似理论为指导,以结构合理化为基础的计算机辅助成组设计(GTCAD)。
关键词 成组技术 cagt GTCAD
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高墩连续梁桥满堂碗扣式支架施工安全控制研究与应用 被引量：11
9
作者 吴伟国 蒋鑫 +2 位作者 杜召华 黄浩 胡尚 《公路工程》 北大核心 2013年第6期206-212,共7页
满堂碗扣式支架具有整体拼装速度快、操作简单、整体性好、变形小等特点,在施工安全控制中,其承载能力与稳定性特别重要。通过在一座高速公路桥梁的施工监控中,根据现场受力情况建立力学计算模型,确定边界条件,使用桥梁有限元专业计算软... 满堂碗扣式支架具有整体拼装速度快、操作简单、整体性好、变形小等特点,在施工安全控制中,其承载能力与稳定性特别重要。通过在一座高速公路桥梁的施工监控中,根据现场受力情况建立力学计算模型,确定边界条件,使用桥梁有限元专业计算软件MIDAS与结构力学求解器计算对支架方案可行性进行了验算,然后在施工前进行了预压试验用以消除非弹性变形,在试验过程中采用新的测量方法进行了支架结构的变形量测,经过实测值与计算值对比确定了支架方案的可操作性。再在施工过程中再次进行监测,最终实现梁体混凝土的安全浇注。 展开更多
关键词 满堂碗扣式支架 施工 安全控制 预压试验 测量 混凝土浇注
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成组技术应用的一种新思路 被引量：3
10
作者 李英华 周兆英 +2 位作者 刘长庚 熊沈蜀 杨延楣 《机械工艺师》 CSCD 2000年第8期7-9,共3页
提出了一种应用成组技术的新思路———计算机辅助成组技术 ,设计了一套应用成组技术基本框架 ,并指明了实施它的总体步骤。
关键词 成组技术 零件编码 计算机辅助 cagt
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