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冠心舒通胶囊调节PI3K/AKT/mTOR信号通路保护H9c2心肌细胞机制研究 被引量:1
1
作者 后亚芳 刘园 +3 位作者 陆晨曦 段婷婷 任菲菲 杜霞 《陕西中医》 2025年第3期296-300,共5页
目的:本研究探讨冠心舒通胶囊基于PI3K/AKT/mTOR通路防治H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用机制。方法:建立H9c2心肌细胞H/R模型,分为对照组、模型组、冠心舒通胶囊不同浓度组。采用PI染色法(PI)和酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、... 目的:本研究探讨冠心舒通胶囊基于PI3K/AKT/mTOR通路防治H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤(H/R)的作用机制。方法:建立H9c2心肌细胞H/R模型,分为对照组、模型组、冠心舒通胶囊不同浓度组。采用PI染色法(PI)和酶标法测定乳酸脱氢酶(LDH)活性、肌酸激酶同工酶(CK-MB)含量评价模型。冠心舒通胶囊组采用梯度浓度对细胞进行预给药处理,采用CCK-8法测定细胞活性,酶标法测定LDH活性、CK-MB含量,并通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测磷酸肌醇3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的mRNA水平。结果:CCK-8法筛选出缺氧8、16 h细胞用于后续实验检测。PI染色4、8μg/ml冠心舒通胶囊组细胞活性在60%~75%;与模型组相比,经冠心舒通胶囊干预后H/R H9c2心肌细胞活性显著提升,而LDH活性、CK-MB含量降低,PI3K、AKT、mTOR的mRNA表达降低。结论:冠心舒通胶囊通过调节PI3K/AKT/mTOR信号通路抑制H9c2细胞损伤,对H/R造成的心肌损伤具有一定保护作用。 展开更多
关键词 冠心病 冠心舒通胶囊 H9c2心肌细胞 H/R模型 PI3k/AkT/mTOR信号通路 心肌损伤
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OR13C2调控PI3K/AKT通路对HeLa细胞恶性转移的影响
2
作者 李晓丹 崔建涛 +2 位作者 陈秀英 耿莉莉 王莹 《生物技术》 2025年第2期212-217,共6页
[目的]探究OR13C2在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌恶性转移的影响。[方法]通过蛋白免疫印迹和实时的荧光定量PCR检测宫颈癌组织OR13C2表达情况。将宫颈癌细胞分为pcDNA NC组、pcDNA OR13C2组和抑制剂(PI-103)组。CCK-8实验分析宫颈癌... [目的]探究OR13C2在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌恶性转移的影响。[方法]通过蛋白免疫印迹和实时的荧光定量PCR检测宫颈癌组织OR13C2表达情况。将宫颈癌细胞分为pcDNA NC组、pcDNA OR13C2组和抑制剂(PI-103)组。CCK-8实验分析宫颈癌细胞增殖能力,Transwell实验和划痕实验分析宫颈癌细胞侵袭和迁移能力,流式细胞术检测宫颈癌细胞的凋亡率,蛋白免疫印迹分析OR13C2对PI3K/AKT通路蛋白表达的影响。[结果]OR13C2在宫颈癌组织中低表达,而在宫颈癌旁组织中高表达(0.23±0.02 vs 0.97±0.07;2.01±0.05 vs 4.81±0.13;P<0.05)。OR13C2高表达后能够抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进宫颈癌细胞凋亡。此外,OR13C2高表达能够抑制PI3K/AKT的激活(0.73±0.03 vs 0.19±0.05 vs 0.26±0.08;0.72±0.08 vs 0.23±0.06 vs 0.31±0.03;P<0.05)。[结论]OR13C2在宫颈癌组织中表达减少,上调OR13C2的表达可以抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进宫颈癌HeLa细胞凋亡,此作用与OR13C2抑制PI3K/AKT通路的激活相关。 展开更多
关键词 OR13c2 宫颈癌 转移 增殖 侵袭 AkT PI3k 凋亡
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蒙药当贡-3通过激活PI3K/Akt信号通路抑制缺氧/复氧诱导的H9c2心肌细胞凋亡
3
作者 郑力榕 李洋 张海荣 《中国中医急症》 2025年第8期1327-1330,1359,共5页
目的观察蒙药当贡-3(DG3)对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用并探寻其机制。方法构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型,模拟整体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,使用克隆形成实验观察DG3对心肌细胞的保护作用及增殖的影响,并... 目的观察蒙药当贡-3(DG3)对缺氧/复氧(H/R)诱导的H9c2心肌细胞凋亡的保护作用并探寻其机制。方法构建H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)模型,模拟整体心肌缺血/再灌注(I/R)损伤,使用克隆形成实验观察DG3对心肌细胞的保护作用及增殖的影响,并通过蛋白质印迹法(Western blotting)对关键通路相关蛋白的表达进行体外验证。非靶向代谢组学分析表征DG3干预后的代谢产物,并使用MetScape插件对代谢组学进行整合分析,酶联免疫吸附分析(ELISA)用于验证联合分析网络中的关键节点蛋白。结果Western blotting结果表明,DG3可以激活PI3K/Akt信号通路,联合分析发现对氧磷酶家族(PON)是其中的关键节点;ELISA结果表明,DG3可以上调PON家族蛋白,尤其是PON2的表达水平。结论DG3可以促进PON家族蛋白表达激活PI3K/Akt通路,通过抑制心肌细胞凋亡并促进心肌细胞增殖,进而保护H/R诱导的心肌细胞损伤。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 蒙药当贡3 H9c2细胞 PON家族蛋白 PI3k/AkT信号通路
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黄芪苷Ⅳ通过PI3K/Akt信号通路抗H_2O_2诱导的H9c2细胞氧化损伤 被引量:11
4
作者 张琦 彭洋 +2 位作者 宋君秋 吴艳娜 刘艳霞 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期955-959,共5页
目的研究黄芪苷Ⅳ对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率,DNA抽提及琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33258染色、caspase-3活性检测细胞凋亡,Western blotting检测... 目的研究黄芪苷Ⅳ对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用及其作用机制。方法建立H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤模型,MTT法检测细胞存活率,DNA抽提及琼脂糖凝胶电泳、Hoechst 33258染色、caspase-3活性检测细胞凋亡,Western blotting检测t-Akt和p-Akt蛋白的表达。结果与H2O2组比较,10、20mg/L的黄芪苷Ⅳ均显著提高细胞存活率,降低caspase-3活性,减轻细胞凋亡;且均显著上调p-Akt蛋白的表达;PI3K/Akt抑制剂LY294002部分阻断10、20 mg/L黄芪苷Ⅳ的保护作用。结论黄芪苷Ⅳ部分通过PI3K/Akt通路发挥对H2O2诱导的H9c2细胞氧化损伤的保护作用。 展开更多
关键词 黄芪苷Ⅳ H2O2 H9c2 细胞凋亡 PI3k/AkT LY294002
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PI3K/Akt在C2C12肌细胞生脂转分化中的作用 被引量:4
5
作者 齐仁立 黄晓凤 +4 位作者 吴泳江 王敬 刘虹 黄金秀 王琪 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第3期224-231,共8页
本研究的主要目的在于探明PI3K/Akt通路在肌细胞生脂转分化中的调控作用.试验培养并诱导C2C12肌细胞生脂转分化,同时使用抑制剂Wortmannin处理细胞抑制PI3K的激活,或者使用特异性siR NA转染沉默细胞内源PI3K基因的表达,观察其对肌细胞... 本研究的主要目的在于探明PI3K/Akt通路在肌细胞生脂转分化中的调控作用.试验培养并诱导C2C12肌细胞生脂转分化,同时使用抑制剂Wortmannin处理细胞抑制PI3K的激活,或者使用特异性siR NA转染沉默细胞内源PI3K基因的表达,观察其对肌细胞生脂转分化的影响.结果表明,随着C2C12细胞的生脂转分化,PI3K蛋白(P55亚基和P85亚基)和其下游效应分子Akt的磷酸化水平,在转分化前期提高而在转分化后期明显降低.使用Wortmannin处理细胞能够有效抑制PI3K/Akt激活,这导致C2C12细胞的生脂转分化明显受到抑制,细胞内脂肪生成量显著降低,生脂基因PPARγ、C/EBPα、FABP4和FATP1的表达水平均显著下调.使用特异性siR NA转染细胞显著下调PI3K基因表达水平和蛋白质含量,同样明显抑制了C2C12细胞的生脂转分化.此外,在转分化过程中抑制PI3K/Akt的活性和表达还激活了Caspase-3并导致细胞凋亡.综合上述结果可以确认PI3K/Akt的正常表达和激活是肌细胞生脂转分化必不可少的. 展开更多
关键词 c2c12细胞 生脂 PI3k Akt 转分化
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Gas6经PI3K/Akt通路对缺氧复氧诱导H9c2细胞凋亡的影响 被引量:12
6
作者 符江琳 刘承云 +2 位作者 徐晓 刘存飞 陈星霖 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1508-1512,共5页
目的:观察外源性重组人生长停滞特异性蛋白6(Gas6)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞系凋亡的影响,并初步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的关系。方法:对体外培养的H9c2细胞进行缺氧复氧(3 h/3 h),模拟大鼠心肌缺血再灌... 目的:观察外源性重组人生长停滞特异性蛋白6(Gas6)对缺氧复氧诱导的H9c2心肌细胞系凋亡的影响,并初步探讨其与磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)通路的关系。方法:对体外培养的H9c2细胞进行缺氧复氧(3 h/3 h),模拟大鼠心肌缺血再灌注模型,将细胞随机分为4组:正常对照组(control组)、缺氧/复氧组(A/R组)、缺氧/复氧+Gas6预处理组(A/R+Gas6组)及缺氧/复氧+Gas6预处理+PI3K/Akt特异性阻断剂LY294002干预组(A/R+Gas6+LY294002组)。分别采用MTT法检测心肌细胞活力,生化法检测细胞中caspase-3活性水平,Annexin V/PI双染法及流式细胞仪检测细胞凋亡率,Western免疫印迹法检测胞内磷酸化Akt(p-Akt)蛋白含量表达情况。结果:A/R组较control组细胞活力下降,caspase-3活性、凋亡率及p-Akt水平均较control组增加(P<0.05)。但经Gas6预处理后,细胞活力及p-Akt表达水平较A/R组显著增加,caspase-3活性、凋亡率均减少(P<0.05),而Gas6的这些作用能被PI3K/Akt阻断剂抑制。结论:Gas6能减少缺氧复氧诱导的H9c2细胞凋亡,此作用机制可能是通过提高Akt磷酸化水平而激活PI3K/Akt通路实现的。 展开更多
关键词 生长停滞特异性蛋白6 缺氧复氧 H9c2细胞 PI3k/AkT通路 细胞凋亡
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糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠血清SREBP-1c、SREBP-2c水平及肾组织IRS-1、PI3K、podocin、CD2AP蛋白表达影响 被引量:11
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作者 苏衍进 王郁金 +6 位作者 王琴 徐军建 赵莉 秦刚新 袁秀丽 杨锦欣 李科 《中药药理与临床》 CSCD 北大核心 2017年第5期140-143,共4页
目的:观察糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及可能机制。方法:SD大鼠采用腔注射STZ方法建立糖尿病肾病模型,对造模成功大鼠分为模型组、厄贝沙坦片组(15.75mg/kg)、糖肾一号组(1800mg/kg)、糖肾一号组(900mg/kg)、糖肾一号组(450mg/k... 目的:观察糖肾一号胶囊对糖尿病肾病大鼠的作用及可能机制。方法:SD大鼠采用腔注射STZ方法建立糖尿病肾病模型,对造模成功大鼠分为模型组、厄贝沙坦片组(15.75mg/kg)、糖肾一号组(1800mg/kg)、糖肾一号组(900mg/kg)、糖肾一号组(450mg/kg),各15只,另设正常对照组15只,连续给药8周,观察血糖、血脂、胱抑素C、SREBP-1c、SREBP-2c水平,尿微量白蛋白,肾组织IRS-1、PI3K、podocin、CD2AP蛋白表达水平。结果:与模型对照组比较,糖肾一号胶囊(900mg/kg、1800mg/kg)各组大鼠血糖、血脂、胱抑素C、尿微量白蛋白明显降低,肾脏组织IRS-1及PI3K、podocin、CD2AP蛋白表达水平明显升高,糖肾一号胶囊(450mg/kg)组升高不明显,糖肾一号胶囊(900mg/kg)组与糖肾一号胶囊(450mg/kg)比较,具有统计学意义,糖肾一号胶囊(900mg/kg)为有效剂量。结论:糖肾一号胶囊通过激活胰岛素受体底物-1(IRS-1),激活胰岛素信号传导系统,达到降糖;降低血清SREBP-1c、SREBP-2c水平,调节血脂代谢;提高肾组织podocin、CD2AP蛋白表达,改善肾足细胞损伤,降低尿蛋白,进而通过上述综合作用达到改善肾脏纤维化、硬化作用。 展开更多
关键词 糖肾一号胶囊 糖尿病肾病 SREBP-1c SREBP-2c IRS-1 PI3k PODOcIN cD2AP
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左西孟旦对缺氧复氧诱导的H9c2细胞凋亡、PTEN和PI3K/Akt信号通路的影响 被引量:5
8
作者 李晓玲 王丹 +2 位作者 肖扬 李春燕 汪砚雨 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2022年第11期942-948,共7页
[目的]研究左西孟旦对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡的影响及相关机制。[方法]体外培养H9c2细胞,将细胞分为空白对照组、H/R组、左西孟旦低剂量组、左西孟旦中剂量组、左西孟旦高剂量组。采用四甲基偶氮噻唑蓝法检测H9c2细胞增殖;流... [目的]研究左西孟旦对缺氧复氧(H/R)条件下H9c2细胞凋亡的影响及相关机制。[方法]体外培养H9c2细胞,将细胞分为空白对照组、H/R组、左西孟旦低剂量组、左西孟旦中剂量组、左西孟旦高剂量组。采用四甲基偶氮噻唑蓝法检测H9c2细胞增殖;流式细胞仪检测H9c2细胞凋亡;超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒、丙二醛(MDA)试剂盒分别检测SOD活性及MDA含量;荧光探针法检测活性氧(ROS)水平;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)及磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/丝氨酸苏氨酸蛋白激酶(Akt)信号通路蛋白表达。[结果]与空白对照组比较,H/R组H9c2细胞增殖抑制率、凋亡率、MDA含量、ROS水平、PTEN蛋白表达均显著升高(P<0.05),PCNA、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均显著降低,Bax显著升高(P<0.05)。与H/R组比较,左西孟旦低剂量组、左西孟旦中剂量组、左西孟旦高剂量组H9c2细胞增殖抑制率、凋亡率、MDA含量、ROS水平、PTEN蛋白表达均显著降低(P<0.05),PCNA、Bcl-2、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt均显著升高,Bax显著降低(P<0.05);且左西孟旦剂量越高,上述指标的相应变化越明显。[结论]左西孟旦可能通过抑制PTEN并激活PI3K/Akt信号通路,促进H/R条件下H9c2细胞增殖,抑制细胞氧化应激和凋亡。 展开更多
关键词 左西孟旦 缺氧复氧 H9c2细胞 细胞凋亡 磷酸酶及张力蛋白同源物 PI3k/AkT信号通路
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K_9(C_4H_4FN_2O_2)_2Ce(PW_(11)O_(39))_2·23H_2O诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡作用机制的研究
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作者 刘海英 潘秀丽 刘见桥 《中国现代药物应用》 2015年第13期271-273,共3页
目的阐述K9(C4H4FN2O2)2Ce(PW11O39)2·23H2O(FNd PW)诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡作用的机制。方法 MTT法检测细胞生长;吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)与电镜检测细胞形态;半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)活性试剂盒检测Casapse-3的变... 目的阐述K9(C4H4FN2O2)2Ce(PW11O39)2·23H2O(FNd PW)诱导卵巢癌细胞SKOV3凋亡作用的机制。方法 MTT法检测细胞生长;吖啶橙/溴乙锭(AO/EB)与电镜检测细胞形态;半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspase-3)活性试剂盒检测Casapse-3的变化;Western Blot法检测细胞中B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、多肽抗原(Bax)以及细胞色素C蛋白的表达。结果 FNd PW降低了卵巢癌SKOV3的细胞活力,IC50=3.56μmol/L。FNd PW能够使Bcl-2蛋白表达下调,促凋亡蛋白Bax表达上调,能够增加Caspase-3的活性,同时使细胞色素C表达上调。结论 FNd PW通过促进卵巢癌细胞系SKOV3的凋亡,从而引起细胞增殖下降,导致细胞死亡。为FNd PW可成为临床卵巢癌患者的有效治疗药物提供了实验依据。 展开更多
关键词 k9(c4H4FN2O2)2ce(PW11O39)2·23H2O 多金属氧酸盐 卵巢癌 SkOV3 凋亡
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K3[Fe(C2O4)3]·3H2O制备实验的综合化改造与教学实践
10
作者 魏小兰 邹智毅 《化学教育》 CAS 北大核心 2016年第6期28-32,共5页
对传统K3[Fe(C2O4)3]·3H2O制备实验进行改造,使其由普通制备实验升级为集制备、组成定量测定和光化学性质实验为一体的综合实验。该综合性实验共需12学时完成,在技术上集配合物制备、减压过滤、蒸发浓缩结晶、重量分析、氧化还... 对传统K3[Fe(C2O4)3]·3H2O制备实验进行改造,使其由普通制备实验升级为集制备、组成定量测定和光化学性质实验为一体的综合实验。该综合性实验共需12学时完成,在技术上集配合物制备、减压过滤、蒸发浓缩结晶、重量分析、氧化还原滴定、电导率法测定离子电荷等于一体,在理论上涉及沉淀溶解、氧化还原、配位和光致变色等多种反应类型。该综合性实验对实验设备要求低,教学过程可操作性强,综合性强。经过8年的教学实践发现,该实验能大大激发学生主动思考,拓展了学生思维跨度和深度,取得良好的教学效果。 展开更多
关键词 k3[Fe(c2O4)33H2O 制备实验 综合化改造 教学实践
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复盐K_3Fe(C_2O_4)_3·3H_2O的热分析研究
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作者 雷克林 杨海浪 《武汉科技学院学报》 2003年第5期73-76,共4页
合成复盐K3Fe(C2O4)33H2O,利用TG-DTG技术分析它们在氮气气氛中的热分解过程,并用微分法中的Achar法和积分法中的Coats-Redfern法对热分解的非等温动力学数据进行研究,推测出可能的热分解反应机理,求出反应的表观活化能。
关键词 复盐 k3Fe(c2O4)3·3H2O 热分析 动力学参数 TG-DTG技术 热重分析
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参芎葡萄糖注射液通过激活PI3K/AKT通路拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡 被引量:18
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作者 陆定艳 李靖 +6 位作者 孙佳 薛维娜 何彬 李勇军 王永林 林昌虎 刘亭 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第17期3773-3779,共7页
探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,An... 探究参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2诱导H9c2细胞凋亡的机制。体外培养H9c2细胞,预先给予体积分数1. 7%,3. 4%,6. 8%的参芎葡萄糖注射液处理H9c2细胞,再给予H2O2诱导细胞凋亡。MTS法检测细胞存活率,AO/EB荧光染色观察细胞凋亡的形态学变化,Annexin/PI法检测细胞凋亡率,基因芯片技术检测细胞表达谱的变化,荧光定量PCR技术(qRTPCR)检测PIK3CA,Bcl-2,Bax,caspase-3,GAPDH mRNA的表达,Western blot法检测PIK3CA,AKT,P-AKT,Bcl-2,Bax,caspase-3蛋白的表达水平,用试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和丙二醛(MDA)含量。结果显示,不同浓度的参芎葡萄糖注射液可显著提高H2O2诱导的H9c2细胞存活率(P<0. 01),明显逆转H2O2诱导的细胞凋亡情况(P<0. 01)。芯片实验发现,参芎葡萄糖注射液处理后,H9c2细胞有138个基因表达发生改变,其中与PI3K/AKT通路相关的PIK3CA差异表达倍数较高,为3. 59倍。qRT-PCR和Western blot结果表明,参芎葡萄糖注射液可下调H2O2处理后H9c2细胞中caspase-3的mRNA和蛋白表达水平(P<0. 01),上调PIK3CA和Bcl-2的mRNA和蛋白的表达水平(P<0. 01),并上调AKT蛋白的磷酸化水平(P<0. 01)。在PI3K/AKT通路抑制剂LY294002作用下,参芎葡萄糖注射液拮抗H2O2细胞损伤作用显著降低。结果表明,参芎葡萄糖注射液可能是通过调控PI3K/AKT信号通路来抑制H2O2诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 参芎葡萄糖注射液 H9c2细胞 细胞凋亡 基因芯片 PI3k/AkT通路
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丝氨酸和3-磷酸甘油酸脱氢酶抑制剂对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响
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作者 詹硕 刘轶群 +4 位作者 韩枫 王建荣 朱铭钰 王琴 黄振武 《卫生研究》 北大核心 2025年第3期488-494,共7页
目的 评估丝氨酸补充和3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)抑制剂NCT503对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响。方法 将C2C12细胞分为4组:空白对照组、高硒对照组、丝氨酸干预组和NCT503干预组。处理48 h后... 目的 评估丝氨酸补充和3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)抑制剂NCT503对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响。方法 将C2C12细胞分为4组:空白对照组、高硒对照组、丝氨酸干预组和NCT503干预组。处理48 h后,所有细胞均接受胰岛素刺激15 min。测量胰岛素刺激前后细胞培养液中的葡萄糖浓度,并通过Western Blot检测硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1, GPX1)、硒蛋白N(selenoprotein N, SELENON)、丝氨酸合成与代谢酶PHGDH、丝氨酸羟甲基转移酶1(hydroxy-methyltransferases 1, SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)、蛋氨酸合成酶(methionine synthase, MS)以及信号因子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、Ser 473磷酸化的Akt1激酶、Thr 308磷酸化的Akt1激酶和磷脂酰肌醇3激酶的表达水平。结果 与高硒对照组相比,丝氨酸干预组或NCT503干预组C2C12细胞对胰岛素敏感性有所改善,表现为胰岛素刺激前后培养液中葡萄糖差值增大(P<0.05)。与高硒对照组相比,丝氨酸干预组C2C12细胞内丝氨酸合成酶(PHGDH)与代谢酶(SHMT1和MS)的表达均下调(P<0.05)。与高硒对照组相比,NCT503干预组C2C12细胞只有部分丝氨酸代谢酶(SHMT1和MS)表达下调(P<0.05)。结论 外源性丝氨酸和PHGDH抑制剂均可以缓解高硒诱导C2C12细胞内异常的糖代谢,但丝氨酸是人体天然成分且可以反馈抑制丝氨酸合成的关键酶PHGDH。 展开更多
关键词 c2c12细胞 胰岛素抵抗 丝氨酸合成通路 3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH) 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白-蛋白激酶B-磷脂酰肌醇3激酶(mTOR-AkT-PI3k)信号通路 丝氨酸 NcT503
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基于PI3K/Akt/mTOR信号通路的三七总皂苷调控自噬抗H9c2细胞缺氧/复氧损伤机制研究 被引量:14
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作者 王飘 郑晴 +3 位作者 胡婷 张海银 许言午 包怡敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2021年第8期87-92,共6页
目的探讨三七总皂苷(PNS)能否通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬从而减轻H9c2细胞缺氧/复氧损伤机制。方法将H9c2细胞分为正常组、缺氧/复氧(A/R)组、A/R+PNS组、A/R+PNS+雷帕霉素(Rapa)组、A/R+Rapa组、A/R+羟氯喹(HCQ)组、A/R+3-甲... 目的探讨三七总皂苷(PNS)能否通过PI3K/Akt/mTOR信号通路调控自噬从而减轻H9c2细胞缺氧/复氧损伤机制。方法将H9c2细胞分为正常组、缺氧/复氧(A/R)组、A/R+PNS组、A/R+PNS+雷帕霉素(Rapa)组、A/R+Rapa组、A/R+羟氯喹(HCQ)组、A/R+3-甲基腺嘌呤(3-MA)组。通过缺氧6 h、复氧2 h建立H9c2细胞A/R模型。CCK-8法检测细胞存活率,乳酸脱氢酶(LDH)检测试剂盒检测细胞损伤,Western blot检测自噬相关蛋白Atg5、p62、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白PI3K、Akt、mTOR的表达,荧光法观察细胞自噬流。结果与正常组比较,A/R组H9c2细胞存活率明显下降,细胞损伤率明显升高(P<0.05),自噬相关蛋白Atg5、Beclin-1表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显升高(P<0.05),自噬体和自噬溶酶体数量显著增加,自噬流显著增强(P<0.05);与A/R组比较,用PNS预处理后,H9c2细胞存活率明显上升,细胞损伤率明显降低(P<0.05),自噬相关蛋白Atg5、Beclin-1表达和LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值明显降低(P<0.05),p62蛋白表达明显升高,与自噬抑制剂HCQ、3-MA作用相似,荧光结果显示,PNS对自噬流有明显抑制作用(P<0.05);PNS预处理后p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达明显升高(P<0.05)。结论PNS能有效减轻H9c2细胞A/R损伤,其机制与激活PI3K/Akt/mTOR信号通路从而抑制自噬流相关。 展开更多
关键词 三七总皂苷 缺氧/复氧损伤 自噬 PI3k/Akt/mTOR信号通路 H9c2细胞
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基于mitoKATP/PI3K/mTOR探讨芪参益气滴丸影响H9C2心肌细胞损伤后钙稳态及炎性环境的机制 被引量:6
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作者 詹玲君 秦伟彬 +4 位作者 何贵新 莫霄云 张清伟 林琳 玉黎燕 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第9期2087-2090,共4页
目的基于mitoKATP/PI3K/mTOR探讨芪参益气滴丸的心肌保护作用及其线粒体钙稳态调控机制研究,并从细胞分子水平进行深层次验证。方法SD大鼠进行灌胃给药,连续灌胃7天,于最后一天1h取血后离心取上清,后续实验分组为5组,分别对过氧化氢处... 目的基于mitoKATP/PI3K/mTOR探讨芪参益气滴丸的心肌保护作用及其线粒体钙稳态调控机制研究,并从细胞分子水平进行深层次验证。方法SD大鼠进行灌胃给药,连续灌胃7天,于最后一天1h取血后离心取上清,后续实验分组为5组,分别对过氧化氢处理大鼠H9C2心肌细胞进行处理后流式检测细胞表面标记物CD80、CD86、CD11b,ELISA检测细胞炎症因子,WB检测相关蛋白表达情况。结果不同浓度芪参益气滴丸含药血清对过氧化氢处理大鼠H9C2心肌细胞CD80、CD86和CD11b表达下调,与模型组相比,不同浓度芪参益气滴丸含药血清5HD对过氧化氢处理大鼠H9C2心肌细胞CD80和CD11b表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组相比,芪参益气滴丸各组IL-1β、TNF-α表达下调,IL-10表达上调,差异具有统计学意义(P<0.05)。与对照组相比,模型组PI3K、AKt、mTOR、iNOS、RyR2、Cav1、Arg1、SERCA2α蛋白表达上调。与模型组相比,芪参益气滴丸各组PI3K、AKt、mTOR、iNOS、RyR2、Cav1、Arg1、SERCA2α蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论芪参益气滴丸在AMI后发挥心肌改善作用与mi-toKATP/PI3K/mTOR及其线粒体钙稳态调控机制有着密切联系。 展开更多
关键词 mitokATP/PI3k/mTOR H9c2 芪参益气滴丸 钙稳态 机制研究
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冠醚配合物:[K(DB18C6)]_2[Co(NCS)_4]C_3H_6O的合成与结构研究
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作者 贺媛 李大成 +1 位作者 窦建民 马寿欣 《聊城师院学报(自然科学版)》 2002年第2期16-18,共3页
合成了二苯并18冠6冠醚配合物:[K(DB18C6)]2[Co(NCS)4]C3H6O,并通过元素分析、红外光谱及X-射线单晶衍射对结构进行了分析.配合物为:单斜晶系、空间群C2/C.晶体学数据:a=2.051(8),b=1.517 4(7),c=1.912 5(8)nm,β=92.422(8)... 合成了二苯并18冠6冠醚配合物:[K(DB18C6)]2[Co(NCS)4]C3H6O,并通过元素分析、红外光谱及X-射线单晶衍射对结构进行了分析.配合物为:单斜晶系、空间群C2/C.晶体学数据:a=2.051(8),b=1.517 4(7),c=1.912 5(8)nm,β=92.422(8)°,V=5.927(4)nm3,Z=4,Dcalc=1.352 g·cm-3,F(000)=2 516,R1=0.061,wR=0.126 5.配合物由两个[K(DB18C6)]+配阳离子、一个[Co(NCS)4]2-配阴离子和一个C3H6O分子组成.四个硫氰酸根的氨原子与钴原子配位,[Co(NCS)4]2-为四面体构型.K+除与冠醚环6个氧原子成键外还与丙酮氧原子配位成键. 展开更多
关键词 冠醚配合物 [k(DB18c6)]2[co(NcS)4]c3H6O 二苯并18冠6 钴配合物 合成 晶体结构 配位性能
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Apelin-13通过PI3K/Akt信号通路抑制尼古丁诱导的H9c2细胞凋亡 被引量:3
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作者 张海增 全慧 +4 位作者 单晓琼 田秋云 张福坤 范小芳 龚永生 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期1352-1358,共7页
目的:研究小分子活性肽apelin-13对尼古丁诱导的心肌细胞凋亡的作用,探讨其可能的调节机制。方法:建立尼古丁诱导的大鼠H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组相比,... 目的:研究小分子活性肽apelin-13对尼古丁诱导的心肌细胞凋亡的作用,探讨其可能的调节机制。方法:建立尼古丁诱导的大鼠H9c2细胞凋亡模型,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达。结果:(1)与正常对照组相比,尼古丁组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),凋亡相关蛋白Bax和cleaved caspase-3的表达显著上调, Bcl-2、p-Akt、p-PI3K和APJ蛋白的表达显著下调(P<0.01);(2)与尼古丁组相比,apelin-13+尼古丁组细胞的凋亡率明显降低(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达显著降低(P<0.01), Bcl-2、p-Akt、p-PI3K和APJ蛋白的表达显著升高(P<0.01);(3)与apelin-13+尼古丁组相比,apelin-13+尼古丁+PI3K/Akt抑制剂LY294002组细胞凋亡率明显增加(P<0.01),Bax和cleaved caspase-3的表达显著增加(P<0.01), Bcl-2、p-Akt和p-PI3K蛋白的表达显著下调(P<0.01)。结论:Apelin-13通过PI3K/Akt信号通路抑制尼古丁诱导的H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 APELIN-13 尼古丁 细胞凋亡 H9c2细胞 PI3k/AkT信号通路
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蒙花苷通过PI3K-Akt/m-TOR信号通路保护H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤 被引量:12
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作者 张敏敏 陈文 刘冲 《中药材》 CAS 北大核心 2020年第6期1445-1450,共6页
目的:探索蒙花苷对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用机制,并探寻抑制心肌细胞凋亡可能的信号通路。方法:H9c2心肌细胞分为正常细胞对照组、缺氧复氧损伤模型组、不同浓度蒙花苷(12.50、25.00、50.00、100.00、200.00μg/mL)组、LY294... 目的:探索蒙花苷对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的保护作用机制,并探寻抑制心肌细胞凋亡可能的信号通路。方法:H9c2心肌细胞分为正常细胞对照组、缺氧复氧损伤模型组、不同浓度蒙花苷(12.50、25.00、50.00、100.00、200.00μg/mL)组、LY294002(50.00μg/mL)组、蒙花苷(50.00μg/mL)+LY294002(50.00μg/mL)组,共9组。检测相应组别细胞增殖活力和心肌细胞中MDA、SOD、LDH水平;采用Western blot检测PI3K/Akt/mTOR通路中关键蛋白的表达情况。结果:细胞增殖活力检测结果显示蒙花苷对细胞无毒性;H9c2心肌细胞缺氧复氧各4 h后,与正常对照组比较,模型组LDH、MDA水平显著升高,SOD水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,蒙花苷组p-PI3K表达及Akt磷酸化程度及凋亡蛋白Bcl-2表达显著升高,Bax表达显著降低(P<0.05)。蒙花苷对缺氧复氧损伤H9c2细胞的保护作用可被抑制剂LY294002抑制。结论:蒙花苷可通过PI3K/Akt/m-TOR信号通路抑制H9c2细胞凋亡。 展开更多
关键词 蒙花苷 H9c2 细胞凋亡 PI3k/Akt/m-TOR信号通路
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检测VKORC1、CYP2C9^(*)3基因多态性指导急性肺血栓栓塞症患者华法林抗凝治疗的价值 被引量:2
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作者 邓文 周燕虹 +2 位作者 刘丹 李为民 陈勃江 《西部医学》 2021年第5期682-686,共5页
目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1(VKORC1)、细胞色素P450酶2C9^(*)3(CYP2C9^(*)3)基因多态性检测在指导急性肺血栓栓塞症(PTE)患者接受华法林抗凝治疗中的临床价值。方法回顾性收集2016年1月~2018年12月四川大学华西医院呼吸与危... 目的探讨维生素K环氧化物还原酶复合物1(VKORC1)、细胞色素P450酶2C9^(*)3(CYP2C9^(*)3)基因多态性检测在指导急性肺血栓栓塞症(PTE)患者接受华法林抗凝治疗中的临床价值。方法回顾性收集2016年1月~2018年12月四川大学华西医院呼吸与危重症医学科住院接受华法林抗凝治疗的411例成人PTE患者为研究对象。根据是否行VKORC1、CYP2C9^(*)3基因多态性检测并据此制定华法林初始剂量及调整方案分为指导组(基因检测指导组,n=119)和对照组(常规处理组,n=292)。以开始使用华法林到国际标准化比值(INR)第一次达标(2-3)的时间(d)为主要观察指标;以稳定时(INR 2-3)的华法林维持剂量为次要观察指标,比较两组差异。随访两组自接受华法林抗凝开始到第6个月末时的不良反应。结果基因多态性,VKORC1以AA野生型多见(n=89,74.8%);其次为GA杂合突变型(n=29,24.4%);纯合突变GG型仅1例(0.8%)。CYP2C9^(*)3野生型(AA型)为106例(89.1%);杂合突变(AC型)13例(10.9%)。从两个基因多态性组合看,VKORC1 AA型合并CYP2C9^(*)3 AA型81例,占68.1%,即大部分患者两个基因均为野生型;其次为VKORC1 GA型合并CYP2C9^(*)3 AA型24例(20.2%);VKORC1、CYP2C9^(*)3均突变的5例(4.20%)。指导组INR达到目标范围的时间为(7.96±4.02)d,对照组INR达标的时间为(7.68±3.58)d,二者无统计学差异(P>0.05);指导组达到目标INR的华法林维持剂量为(5.30±0.99)mg,对照组的华法林维持剂量为(5.22±0.64)mg,二者无显著性差异(P>0.05)。两组患者出现死亡、大出血、新发血栓的不良事件发生率均无统计学意义(均P>0.05)。结论VKORC1、CYP2C9^(*)3基因多态性检测在指导急性PTE患者接受华法林抗凝治疗中的意义有限。 展开更多
关键词 肺血栓栓塞症 维生素k环氧化物还原酶复合物1 细胞色素P450酶2c9^(*)3 基因多态性 华法林
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miR-486-5p对C2C12细胞IGF-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路的影响 被引量:2
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作者 郭晓萍 陈时锦 +2 位作者 张名媛 蒋钦杨 兰干球 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期481-488,共8页
本文旨在研究miR-486-5p对C2C12细胞IGF-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路的影响,探讨miR-486-5p在C2C12细胞中对胰岛素信号通过基因的调控机制。利用构建好的miR-486-5p过表达和抑制慢病毒载体,通过脂质体转染法分别在C2C12细胞上过表达和抑制m... 本文旨在研究miR-486-5p对C2C12细胞IGF-1-PI3K/AKT-mTOR信号通路的影响,探讨miR-486-5p在C2C12细胞中对胰岛素信号通过基因的调控机制。利用构建好的miR-486-5p过表达和抑制慢病毒载体,通过脂质体转染法分别在C2C12细胞上过表达和抑制miR-486-5p的表达,利用荧光定量PCR法检测miR-486-5p过表达和抑制效率,同时检测过表达和抑制miR-486-5p后IGF-1、INSR、IRS1、PI3K、PI3KR1、PDK1、AKT1、PTEN、Fox O1、m TOR、4EBP1基因的mRNA变化。荧光定量PCR结果显示24 h过表达倍数和抑制效率分别为2.8倍和35%,48 h过表达倍数和抑制效率分别为1.4倍和15%。过表达miR-486后,24 h和48 h时INSR、PDK1、PTEN、AKT1、FoxO1、4EBP1基因均显著下调;抑制miR-486后,24 h时4EBP1显著上调,48 h时IGF-1显著上调,4EBP1显著下调。本研究表明过表达miR-486-5p后胰岛素信号通路基因的表达受到抑制,抑制miR-486-5p后胰岛素信号通路基因的表达上升,这可能是肥胖患者血清miR-486-5p升高损害胰岛素信号引起葡萄糖摄取能力降低,从而导致胰岛素抵抗发生的原因。 展开更多
关键词 miR-486-5p IGF-1-PI3k/AkT-mTOR信号通路 c2c12细胞
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