本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法...本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法量化了增殖和成脂分化关键基因的表达水平变化,利用EdU染色检测细胞增殖活力,油红O染色方法鉴定脂滴积累的状态;进一步通过String database、Bio GRID、Int Act、GeneMANIA、DAVID和Genecard数据库构建Smdt1蛋白互作网络图。结果显示,在C3H10T1/2细胞中过表达Smdt1,极显著提升了增殖标志基因Pcna、Ki67、Cdk1及Cdk4的表达,EdU阳性细胞比例反映了细胞增殖速率加快;Smdt1极显著促进成脂分化关键基因Pparγ、Fabp4、-Adipoq的表达量,显著促进了Cebpα、Cebpβ的表达量,脂滴数量变多。在C3H10T1/2细胞体系中,干扰Smdt1,与增殖紧密相关的标志基因,包括Ki67、Pcna及Cdk1,其表达水平极显著降低,Cdk4的表达也呈现显著降低的趋势,反映在EdU增殖检测中,阳性细胞数量明显减少,细胞增殖活性受到抑制。进一步干扰Smdt1后,成脂分化途径的关键调控基因Cebpα、Pparγ、Cebpβ、Fabp4、Adipoq的表达均极显著降低,细胞内脂滴的数量也显著减少,细胞成脂分化能力削弱。蛋白功能预测发现,Smdt1能够与Mcu相互作用,参与线粒体钙离子转运、摄取和稳态。本研究发现Smdt1可以促进C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化,为脂肪沉积的研究提供了新的方向。展开更多
文摘本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法量化了增殖和成脂分化关键基因的表达水平变化,利用EdU染色检测细胞增殖活力,油红O染色方法鉴定脂滴积累的状态;进一步通过String database、Bio GRID、Int Act、GeneMANIA、DAVID和Genecard数据库构建Smdt1蛋白互作网络图。结果显示,在C3H10T1/2细胞中过表达Smdt1,极显著提升了增殖标志基因Pcna、Ki67、Cdk1及Cdk4的表达,EdU阳性细胞比例反映了细胞增殖速率加快;Smdt1极显著促进成脂分化关键基因Pparγ、Fabp4、-Adipoq的表达量,显著促进了Cebpα、Cebpβ的表达量,脂滴数量变多。在C3H10T1/2细胞体系中,干扰Smdt1,与增殖紧密相关的标志基因,包括Ki67、Pcna及Cdk1,其表达水平极显著降低,Cdk4的表达也呈现显著降低的趋势,反映在EdU增殖检测中,阳性细胞数量明显减少,细胞增殖活性受到抑制。进一步干扰Smdt1后,成脂分化途径的关键调控基因Cebpα、Pparγ、Cebpβ、Fabp4、Adipoq的表达均极显著降低,细胞内脂滴的数量也显著减少,细胞成脂分化能力削弱。蛋白功能预测发现,Smdt1能够与Mcu相互作用,参与线粒体钙离子转运、摄取和稳态。本研究发现Smdt1可以促进C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化,为脂肪沉积的研究提供了新的方向。
