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骨疏康颗粒含药血清调节线粒体稳态改善地塞米松诱导的C2C12肌管细胞萎缩
1
作者 魏巍 刘洪飞 +6 位作者 戚晓楠 刘彦彤 王德羽 于智同 乔春林 王世轩 滕海 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第22期5682-5693,共12页
背景:骨疏康颗粒是一种中药复方制剂,临床上常用于治疗骨质疏松症等骨骼相关疾病,但它在调控肌肉代谢中的作用尚不明确。目的:探究骨疏康颗粒含药血清对地塞米松诱导的C2C12肌细胞萎缩的抑制效果。方法:①体内实验:选取3月龄雌性SD大鼠3... 背景:骨疏康颗粒是一种中药复方制剂,临床上常用于治疗骨质疏松症等骨骼相关疾病,但它在调控肌肉代谢中的作用尚不明确。目的:探究骨疏康颗粒含药血清对地塞米松诱导的C2C12肌细胞萎缩的抑制效果。方法:①体内实验:选取3月龄雌性SD大鼠36只,随机分为3组,每组12只,模型组大鼠肌肉注射地塞米松(2.5mg/kg),1次/d,连续给药1周,随后正常饲养3周;骨疏康组大鼠造模后灌胃0.48g/kg骨疏康颗粒混悬液,1次/d,连续3周;空白组未造模,灌胃等量蒸馏水,1次/d,连续4周。末次给药2h后,取左侧大鼠股骨及腓肠肌标本进行苏木精-伊红染色,提取右侧腓肠肌及股骨组织RNA,通过实时荧光定量PCR检测线粒体功能、自噬及炎症相关基因mRNA表达水平。②体外实验:培养C2C12细胞并用体积分数2%马血清诱导其分化为肌管细胞。将分化后的肌管细胞分为对照组、模型组和骨疏康含药血清组。通过4umol/L地塞米松孵育48h构建肌肉萎缩模型,其中骨疏康组在地塞米松处理24h后加入体积分数10%的骨疏康含药血清再干预24h。CCK-8检测细胞活力,流式细胞术检测活性氧水平,透射电镜观察细胞超微结构变化;Westernblot检测线粒体功能相关蛋白、自噬相关蛋白及抗氧化相关蛋白表达水平。结果与结论:①苏木精-伊红染色显示,与模型组相比,骨疏康组大鼠肌肉纤维结构恢复较好;实时荧光定量PCR进一步验证了骨疏康颗粒对线粒体功能和自噬相关基因具有上调作用,支持其通过多靶点机制缓解肌肉萎缩。②流式细胞术和CCK-8结果显示,地塞米松处理后C2C12细胞活性氧水平显著升高(P<0.05),细胞活力显著降低(P<0.05);透射电镜观察发现地塞米松诱导细胞超微结构紊乱,细胞器数量明显减少,线粒体呈现萎缩模糊状态,并伴随大量自噬小体及细胞质空泡的出现;Westernblot结果表明,地塞米松处理后线粒体功能相关蛋白线粒体外膜转位酶20、热休克蛋白60表达显著降低,自噬相关蛋白LC3和Beclin-1异常表达(P<0.05),沉默信息调节因子1表达显著降低(P<0.05),提示地塞米松破坏了线粒体稳态并抑制了自噬功能。经过骨疏康颗粒含药血清处理后,活性氧水平显著降低(P<0.05),细胞活力显著升高(P<0.05);透射电镜观察显示细胞超微结构有所改善,线粒体形态相对恢复;Westernblot结果显示,线粒体外膜转位酶20、热休克蛋白60、沉默信息调节因子1的表达显著上调(P<0.05),LC3和Beclin-1表达恢复至正常水平(P<0.05),表明骨疏康颗粒含药血清在改善线粒体功能、降低氧化应激以及调控自噬方面发挥了积极作用。 展开更多
关键词 c2c12细胞 肌管细胞 地塞米松 骨疏康颗粒 线粒体稳态 含药血清 肌肉减少症 自噬小体
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毛喉素调控ERK和Akt信号通路促进C2C12成肌细胞分化
2
作者 黄柳艳 张文烯 +3 位作者 陈淑雯 余诗美 戴忠 左长清 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第5期1114-1121,共8页
背景:毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花中提取到的二萜类天然化合物,对骨骼肌的修复具有重要的调节作用。但毛喉素对C2C12骨骼肌细胞成肌分化的调控作用尚未得到充分探索。目的:研究毛喉素对C2C12成肌细胞系分化的影响,并探讨其潜在的分子机制... 背景:毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花中提取到的二萜类天然化合物,对骨骼肌的修复具有重要的调节作用。但毛喉素对C2C12骨骼肌细胞成肌分化的调控作用尚未得到充分探索。目的:研究毛喉素对C2C12成肌细胞系分化的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法:在C2C12细胞生长过程中分别加入0,0.1,0.25,0.5,1,5,10,20μmol/L毛喉素进行处理,CCK-8和qRT-PCR检测细胞增殖情况。在诱导C2C12细胞成肌分化过程中分别加入0,0.25,0.5,1μmol/L毛喉素进行处理,免疫荧光染色及qRT-PCR检测C2C12细胞成肌分化状况;Western blot检测影响成肌分化的相关信号通路蛋白的表达水平。结果与结论:①高浓度(>1μmol/L)毛喉素处理后,C2C12细胞的活力下降,细胞增殖被抑制。②与0μmol/L组比较,成肌诱导4 d时,qRT-PCR结果显示毛喉素能够上调Myh2、Myh4、Myomaker的表达,但是下调Myh7的表达;免疫荧光染色结果表明,毛喉素处理后C2C12细胞的融合指数和肌管直径均增加,肌管的数量增多。③Western blot结果表明成肌分化诱导2 d时,毛喉素处理明显抑制细胞外信号调节激酶1/2磷酸化蛋白表达水平,促进蛋白激酶B磷酸化蛋白表达;毛喉素处理会显著上调成肌分化转录因子肌细胞生成素蛋白表达水平。④结果表明,毛喉素可能通过调控细胞外信号调节激酶1/2及蛋白激酶B信号传导促进C2C12骨骼肌细胞成肌分化。 展开更多
关键词 毛喉素 成肌分化 c2c12细胞 ERK1/2 Akt 骨骼肌 肌细胞生成素 细胞增殖
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SR9009联合吲哚丙酸通过核因子κB信号通路减轻C2C12成肌细胞的炎症反应 被引量：2
3
作者 姬慧慧 蒋旭 +7 位作者 张志敏 邢运虹 王亮亮 李娜 宋雨庭 罗旭光 崔慧林 曹锡梅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第6期1220-1229,共10页
背景:钟基因Rev-erbα参与调节炎症,但激活Rev-erbα会增加心脑血管疾病风险。为降低相关风险,探索Rev-erbα激动剂SR9009联合其他药物来减轻骨骼肌成肌细胞炎症,奠定治疗炎症相关性骨骼肌萎缩的理论基础。目的:探讨脂多糖刺激C2C12成... 背景:钟基因Rev-erbα参与调节炎症,但激活Rev-erbα会增加心脑血管疾病风险。为降低相关风险,探索Rev-erbα激动剂SR9009联合其他药物来减轻骨骼肌成肌细胞炎症,奠定治疗炎症相关性骨骼肌萎缩的理论基础。目的:探讨脂多糖刺激C2C12成肌细胞时吲哚丙酸、SR9009与核因子κB信号通路的关系。方法:①1μg/mL脂多糖刺激C2C12成肌细胞,RNA转录组测序结合KEGG通路富集分析信号通路。②CCK-8法检测C2C12成肌细胞活性,筛选吲哚丙酸的最佳给药浓度;然后将细胞分为空白对照组、脂多糖(1μg/mL)组、SR9009(10μmol/L)+脂多糖组、吲哚丙酸(80μmol/L)+脂多糖组、吲哚丙酸+SR9009+脂多糖组,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素6水平,RT-qPCR检测白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体4、CD14 mRNA表达,Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。③siRNA敲减Rev-erbα,RT-qPCR评估敲减效率,检测白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达。结果与结论:①与空白对照组比较,脂多糖时间依赖性抑制成肌细胞融合形成肌管,白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达水平升高,细胞上清液中白细胞介素6水平显著升高;KEGG通路分析支持脂多糖刺激激活核因子κB信号通路。②吲哚丙酸浓度>80μmol/L时抑制C2C12成肌细胞活性;吲哚丙酸和SR9009通过抑制核因子κB信号通路发挥抗炎作用,降低白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体4、CD14 mRNA表达水平,p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达比值低于脂多糖组。SR9009联合吲哚丙酸显著降低脂多糖诱导的炎症,Toll样受体4、CD14、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA表达水平进一步下调,p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达比值显著低于吲哚丙酸+脂多糖组和SR9009+脂多糖组。③Rev-erbα随脂多糖刺激时间依赖性升高;siRNA敲减Rev-erbα效率达58%以上,成功敲减Rev-erbα后添加脂多糖,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA表达较脂多糖组显著上调。④结果说明,Rev-erbα可以作为调节炎症反应的靶点,SR9009靶向激活Rev-erbα联合吲哚丙酸能抑制核因子κB信号通路显著减轻C2C12成肌细胞的炎症反应,联合抗炎效果优于单独干预。 展开更多
关键词 Rev-erbα SR9009 吲哚丙酸 脂多糖 核因子ΚB信号通路 c2c12成肌细胞
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骨髓间充质干细胞来源的外泌体抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩 被引量：1
4
作者 柯义兵 丁永宏 +3 位作者 阿布都克热木·达吾提 郭浩然 兰志杰 王勇平 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期50-56,共7页
目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2... 目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2C12细胞成肌分化。(4)将肌管细胞分为对照组(Control,2%马血清培养基培养48 h)、地塞米松组(DEX、浓度为10μmol·L^(-1)的DEX干预肌管48 h)、外泌体组(EXOs、外泌体干预肌管48 h)、外泌体抑制剂组(GW4869、10μmol的GW4869干预BMSCs后提取的外泌体干预肌管48 h)。48 h后测量各组肌管直径,CCK-8法检测各组细胞活力,Western blot检测各组肌肉萎缩及成肌分化相关蛋白的表达量。结果BMSCs呈长梭形,BMSCs-EXOs在透射电镜下为圆形的双层膜结构,直径约200 nm,且高表达CD9、CD63和CD81。相比于Control组,DEX组细胞活性降低(P<0.01),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低;相比于DEX组,BMSCs-EXOs组细胞活性升高(P<0.01),肌管细胞直径增加(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显下调,MYOD(P<0.01)蛋白表达升高;相比于BMSCs-EXOs组,BMSCs-EXOs(GW4869)组细胞活性降低(P<0.05),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.05)的表达上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低。结论骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BMSCs-EXOs)可抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 外泌体 地塞米松 肌管 肌肉萎缩 c2c12
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EPA/DHA干预的C2C12肌管细胞对3T3-L1脂肪细胞脂质代谢的作用 被引量：1
5
作者 杨娴 曾欢婷 +1 位作者 毛联智 毛丽梅 《营养学报》 北大核心 2025年第1期60-67,共8页
目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预... 目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预结束后,撤掉干预液,将干预后的肌管细胞在transwell小室中与成熟的脂肪细胞共培养24h。用油红O定量脂肪细胞内的脂质蓄积情况,用PCR法测定脂肪细胞的脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,Hsl)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ的共激活物1α(PPARG coactivator 1 alpha,Pgc-1α)、解偶联蛋白-1(uncoupling protein-1,Ucp-1)和固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,Srebp-1c)基因mRNA表达水平,用Western blot检测脂肪细胞腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine5’-monophosphate(AMP)-activatedproteinkinase,AMPK)与信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的蛋白表达。结果经100、200、400μmol/L EPA干预的肌管细胞可以显著降低脂肪细胞的脂质蓄积(P<0.05或P<0.001),而DHA干预后的肌管细胞则没有显著的改善脂质蓄积的作用;经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著上调脂肪细胞脂肪分解基因Atgl和Hsl的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂质氧化基因Ucp-1和Pgc-1α的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提升脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.05或P<0.01),而一定浓度DHA干预的肌管细胞则是可以显著降低脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.01);经所有浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-STAT3/STAT3的比值(P<0.01),对p-AMPK/AMPK比值变化的影响则没有显著性;经200、400μmol/L DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-AMPK/AMPK的比值(P<0.01),但是p-STAT3/STAT3比值的变化没有显著性意义。结论EPA和DHA在适宜浓度均可以促进肌管细胞提高脂肪细胞的脂质分解和脂质氧化,EPA干预的肌管细胞还可以一定程度提高脂质合成,DHA干预的肌管细胞可以一定程度降低脂质合成;EPA干预后的肌管细胞可能通过STAT3通路改善脂质代谢,DHA干预后的肌管细胞可能通过AMPK通路改善脂质代谢。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 c2c12肌管细胞 3T3-L1脂肪细胞 脂质代谢 STAT3/AMPK信号通路 细胞共培养
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过表达Bmal1通过增强Wnt信号传导促进C2C12成肌细胞增殖与分化
6
作者 蒋旭 姬慧慧 +5 位作者 宋雨庭 王亮亮 李娜 孙俊红 崔慧林 曹锡梅 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第3期278-288,共11页
目的探讨过表达Bmal1对C2C12成肌细胞增殖与分化的影响及可能机制。方法慢病毒介导成肌细胞过表达Bmal1,RT-qPCR和Western blot检测肌调节因子的表达;RNA转录组测序结合聚类分析及相关实验探究过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化过程中Wnt... 目的探讨过表达Bmal1对C2C12成肌细胞增殖与分化的影响及可能机制。方法慢病毒介导成肌细胞过表达Bmal1,RT-qPCR和Western blot检测肌调节因子的表达;RNA转录组测序结合聚类分析及相关实验探究过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化过程中Wnt信号通路和细胞周期调节因子的表达;抑制剂XAV939阻断Wnt信号通路,观察XAV939对过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化的影响。结果过表达Bmal1促进成肌细胞增殖,表现为S相分数、DNA增殖指数升高,EdU阳性细胞比例及β-catenin核转位率增加;诱导成肌分化,过表达Bmal1促进肌管融合,上调MyoD、myogenin、Myh3的表达。聚类分析和实验支持过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化过程中Wnt信号传导增强,其下游细胞周期调节因子表达上调;XAV939(5μmol/L)显著下调过表达Bmal1成肌细胞Tcf1、c-Jun的表达,持续抑制过表达Bmal1成肌细胞的肌管融合,下调MyoD、myogenin、Myh3的表达。结论Bmal1可作为骨骼肌损伤修复的靶点,过表达Bmal1通过增强Wnt信号传导促进成肌细胞增殖与分化。 展开更多
关键词 BMAL1 WNT信号通路 XAV939 增殖 分化 c2c12成肌细胞
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乐果对C2C12细胞内质网应激及成肌分化的影响
7
作者 康国静 陈嘉伟 +4 位作者 邹辉 顾建红 袁燕 卞建春 刘学忠 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第1期121-128,共8页
本试验用不同浓度(0、0.3、0.6、0.9 mmol/L)的乐果(DIM)处理C2C12细胞24 h,采用CCK-8检测细胞活力,光镜及透射电镜观察细胞形态及超微结构,Western-blot检测Bip、PERK/e IF2α通路相关蛋白及成肌分化相关蛋白MyOD、MyOG、My HC的表达... 本试验用不同浓度(0、0.3、0.6、0.9 mmol/L)的乐果(DIM)处理C2C12细胞24 h,采用CCK-8检测细胞活力,光镜及透射电镜观察细胞形态及超微结构,Western-blot检测Bip、PERK/e IF2α通路相关蛋白及成肌分化相关蛋白MyOD、MyOG、My HC的表达水平。结果显示,与0 mmol/L组相比,0.3 mmol/L组的细胞活力、Bip及PERK/e IF2α通路相关蛋白表达水平、成肌分化相关蛋白的蛋白表达水平均无显著差异。随DIM浓度升高,细胞活力极显著降低(P<0.01);细胞形态发生改变,死细胞增多,细胞超微结构受损明显;Bip及PERK/e IF2α通路相关蛋白表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)升高;成肌分化相关蛋白的表达水平显著(P<0.05)或极显著(P<0.01)降低。添加PERK/e IF2α通路特异性抑制剂GSK2606414与DIM共处理,相关蛋白的表达水平被扭转。结果表明,DIM导致C2C12细胞内质网应激并激活了下游的PERK/e IF2α通路,且该通路介导了DIM致C2C12细胞成肌分化受损的过程。 展开更多
关键词 乐果 c2c12 内质网应激 成肌分化
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大数据时代背景下C2C企业营销战略研究——以淘宝为例
8
作者 刘钊 衣蕾 +2 位作者 胡凌旖 姜永海 李熙泽 《中国市场》 2025年第14期115-118,共4页
通过文章的深入分析,将有助于为C2C企业提供更具指导性和实践性的营销战略,推动电子商务领域的进一步发展。同时,也将为相关研究领域提供有关大数据时代背景下C2C企业营销战略的研究方法和实证结果,为学术界和业界提供有益的参考和借鉴。
关键词 企业营销 营销战略 淘宝 c2c 大数据
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C2C12细胞诱导分化为脂肪细胞的转录组分析
9
作者 田洪伟 美荣 +1 位作者 李玉玲 乌云达来 《中国细胞生物学学报》 2025年第4期777-792,共16页
为了探究C2C12细胞转分化为脂肪细胞的关键基因,实验采用添加IBMX、地塞米松、胰岛素和罗格列酮的培养基诱导C2C12细胞6天。通过油红O染色和免疫荧光染色方法鉴定诱导前后细胞的分化情况,利用转录组分析与实时荧光定量PCR技术评估差异... 为了探究C2C12细胞转分化为脂肪细胞的关键基因,实验采用添加IBMX、地塞米松、胰岛素和罗格列酮的培养基诱导C2C12细胞6天。通过油红O染色和免疫荧光染色方法鉴定诱导前后细胞的分化情况,利用转录组分析与实时荧光定量PCR技术评估差异表达基因的表达水平;借助蛋白质免疫印迹实验测定蛋白水平;运用酶联免疫吸附测定实验分析细胞状态。结果显示,诱导6天后C2C12细胞经油红O染色可见大量脂滴,免疫荧光染色则检测到FABP4阳性信号。基因本体(GO)分析与京都基因组百科全书(KEGG)通路分析发现,病毒响应和免疫系统通路相关基因表达水平显著上调。进一步筛选出核心(Hub)基因Isg15、Ddx58、Ifit3、Irgm2、Eif2ak2、Irf9和Stat1。实时荧光定量PCR验证了Isg15、Fabp4和C/EBPα的表达上调,免疫印迹实验证实了FABP4、IL-6蛋白水平增加。上调表达的Ddx58、Ifit3、Irgm2、Eif2ak2、Irf9和Stat1基因参与炎症反应,以维持细胞存活。综上所述,该研究揭示了肌细胞向脂肪细胞转化的部分分子机制,为进一步理解肌源性脂肪生成提供了依据。 展开更多
关键词 c2c12细胞 转录组 脂肪 ISG15
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C2C电子商务云物流模式研究与应用
10
作者 陈源 胡孝红 《电子商务评论》 2025年第6期2650-2655,共6页
在数字化背景下,伴随互联网技术进步,C2C电子商务蓬勃发展。基于此,本文重点围绕云物流模式在C2C电子商务中的运用展开研究。先是阐释云物流的定义和基本原理,点明其借助先进信息技术整合资源、实现协同运作的特性。进而详细说明其在C2... 在数字化背景下,伴随互联网技术进步,C2C电子商务蓬勃发展。基于此,本文重点围绕云物流模式在C2C电子商务中的运用展开研究。先是阐释云物流的定义和基本原理,点明其借助先进信息技术整合资源、实现协同运作的特性。进而详细说明其在C2C电子商务里的应用,涵盖整体构建,像数据整合、仓储分配模型等;商品订单整合的共同配送方式,包含订单数据处理、相似度计算等内容,希望能为行业突破C2C电子商务物流困境、提升物流效益提供部分参考。 展开更多
关键词 c2c电子商务 云物流模式 共同配送
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miR-191-5p靶向C/EBPβ抑制C2C12细胞脂质沉积
11
作者 连欣荣 陈海敏 +3 位作者 王佳瑞 夏静雯 张瑾 毋文静 《中国细胞生物学学报》 2025年第6期1323-1336,共14页
该研究旨在探究miR-191-5p对C2C12细胞成肌分化和肌管内异位成脂的作用及其机理。以小鼠成肌细胞系C2C12为材料,使用马血清以及油酸钠和棕榈酸钠诱导细胞成肌或肌内成脂;转染mi R-191-5p mimic或inhibitor后,采用q RT-PCR和Western blo... 该研究旨在探究miR-191-5p对C2C12细胞成肌分化和肌管内异位成脂的作用及其机理。以小鼠成肌细胞系C2C12为材料,使用马血清以及油酸钠和棕榈酸钠诱导细胞成肌或肌内成脂;转染mi R-191-5p mimic或inhibitor后,采用q RT-PCR和Western blot检测成肌标志基因(Myo D、Myo G、My HC、Myf5)和成脂标志基因(FAS、PPARγ、HSL)的表达以及相关信号通路的活性;最后,利用生物信息学分析和双荧光素酶报告系统对mi R-191-5p靶基因进行预测和验证。结果发现,miR-191-5p于小鼠骨骼肌中高表达,在C2C12细胞成肌分化过程中表达水平先升后降,推测其参与调控骨骼肌发育;与对照组相比,过表达mi R-191-5p促C2C12细胞成肌分化,显著提高Myo D、Myo G等基因的表达量;在异位成脂方面,过表达mi R-191-5p可显著抑制细胞内脂滴的沉积,下调FAS、PPARγ等基因表达,同时ERK1/2的磷酸化水平也显著下降;另外,共转染psi-CHECK-2-C/EBPβ3?UTR与mi R-191-5p mimic会明显降低海肾与萤火虫荧光强度比值,提示mi R-191-5p可直接作用于C/EBPβ的3?UTR。综上所述,miR-191-5p可能是通过靶向C/EBPβ,提升ERK1/2信号通路的活性,促进C2C12细胞成肌和抑制异位脂质沉积。 展开更多
关键词 miR-191-5p 骨骼肌 c2c12成肌细胞 脂质沉积
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我国C2C二手物品交易中消费者权益保护问题研究 被引量：1
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作者 李嘉颖 《中国价格监管与反垄断》 2025年第5期91-93,共3页
消费者对消费者(C2C)模式下二手物品交易中的消费者权益保护面临着平台审核机制和评价机制不完善的问题。本文对这些问题进行归纳总结,并提出相应的解决方案。第一,对于平台审核机制不完善的问题,应提高平台的准入条件、改进流程,从而... 消费者对消费者(C2C)模式下二手物品交易中的消费者权益保护面临着平台审核机制和评价机制不完善的问题。本文对这些问题进行归纳总结,并提出相应的解决方案。第一,对于平台审核机制不完善的问题,应提高平台的准入条件、改进流程,从而提高服务质量,保障商品品质;第二,优化平台评价机制,让消费者在购买前可以参考更为清晰的商品评价,减少信息不对称带来的风险;第三,健全的诉讼保护机制是保护消费者权益的关键。 展开更多
关键词 c2c二手物品交易 二手物品交易平台 消费者权益保护
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C2C12细胞和RAW264.7细胞共培养后细胞内钙成像及棕榈酸钠诱导后的改变
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作者 宋丽君 吴爽 +3 位作者 沙勤 杨传信 童兴瑜 蒋晖 《复旦学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期877-882,共6页
目的观察RAW264.7细胞对棕榈酸钠诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗模型中钙流的影响。方法采用C2C12细胞和RAW264.7细胞共培养模拟在体骨骼肌状态。用含2%马血清的高糖培养基培养C2C12细胞,诱导其分化为成熟的肌管细胞后分为5组:对照组(RAW26... 目的观察RAW264.7细胞对棕榈酸钠诱导的C2C12细胞胰岛素抵抗模型中钙流的影响。方法采用C2C12细胞和RAW264.7细胞共培养模拟在体骨骼肌状态。用含2%马血清的高糖培养基培养C2C12细胞,诱导其分化为成熟的肌管细胞后分为5组:对照组(RAW264.7单独培养组)、C2C12和RAW264.7共培养组、C2C12单独培养组,C2C12和RAW264.7共培养+棕榈酸钠(sodium palmitate,PA)组和C2C12单独培养+PA组。用PA(5 mmol/L)诱导培养24 h建立C2C12细胞胰岛素抵抗模型。将复苏和扩增的RAW264.7细胞等量均匀加入到C2C12细胞中共培养2天,改良台式液培养,钙离子荧光探针Fluo-4 AM装载两种细胞,1,7-二甲基黄嘌呤诱发细胞内的钙流,在激光共聚焦显微镜下拍摄和记录活体细胞的钙成像。结果对照组未见明显的钙信号变化,共培养的C2C12细胞内有快速且明显的钙信号变化。单独培养的C2C12细胞内钙信号在整个观察期间持续缓慢增加且未出现明显下降,共培养的C2C12细胞内钙信号达峰速度明显快于单独培养的C2C12细胞(P<0.001);加入PA后C2C12细胞内钙信号变化不明显,但PA诱导后共培养组C2C12细胞内仍会出现明显的钙信号变化,且钙信号达峰速度明显快于PA诱导后单独培养的C2C12细胞(P<0.001)。结论RAW264.7细胞共培养可提升正常C2C12细胞和PA诱导后C2C12细胞内钙信号动态响应性。 展开更多
关键词 c2c12细胞 RAW264.7细胞 共培养 钙成像 棕榈酸钠(PA) 1 7-二甲基黄嘌呤
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skMLCK基因对成肌细胞C2C12肌纤维组成及信号通路的影响
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作者 李孝涵 朱弘焱 +3 位作者 韩佳琪 张尚松 田玉民 苏玉虹 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第3期47-57,共11页
旨在研究高、低表达骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)基因对肌纤维组成成分和信号通路关键分子的影响。采用高表达和RNAi技术,获得skMLCK高、低表达稳转成肌细胞C2C12细胞株,提取细胞总RNA和总蛋白质,采用实时定量PCR和Western blot方法... 旨在研究高、低表达骨骼肌肌球蛋白轻链激酶(skMLCK)基因对肌纤维组成成分和信号通路关键分子的影响。采用高表达和RNAi技术,获得skMLCK高、低表达稳转成肌细胞C2C12细胞株,提取细胞总RNA和总蛋白质,采用实时定量PCR和Western blot方法检测skMLCK高、低表达后C2C12中skMLCK基因,5种肌纤维组成成分肌球蛋白轻链(MLC)、肌球蛋白重链(MyHC)slow、MyHC 2a、MyHC 2x和MyHC 2b和6种信号通路关键因子肌球蛋白增强因子2C(MEF2C)、钙调蛋白(CaM)、促分裂原活化蛋白激酶p38(MAPKp38)、AMPK激活性蛋白激酶α2(AMPKα2)、RhoA和丝切蛋白2(CFL2)的表达情况。结果:在高、低表达稳转株中信号通路关键分子MAPKp38与skMLCK蛋白和mRNA表达量变化相同;2种肌纤维组成成分(MyHC 2x和MyHC 2b)和3种信号通路关键分子(CFL2、AMPKα2和RhoA)与skMLCK基因mRNA表达量变化相反;2种肌纤维组成成分(MyHC 2x和MyHC 2b)和4种信号通路关键分子(MEF2C、CaM、AMPKα2和CFL2)与skMLCK蛋白表达量变化相反,其余组分结果均一致;将所有蛋白质表达结果合并进行统计学分析发现,skMLCK基因与信号通路RhoA高度相关。综上,skMLCK基因可能通过改变C2C12细胞中RhoA信号通路来影响肌纤维的组成,skMLCK基因可以抑制CFL2的表达和肌纤维的生长。 展开更多
关键词 骨骼肌肌球蛋白轻链激酶 c2c12细胞株 肌纤维 信号通路
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丝氨酸和3-磷酸甘油酸脱氢酶抑制剂对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响
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作者 詹硕 刘轶群 +4 位作者 韩枫 王建荣 朱铭钰 王琴 黄振武 《卫生研究》 北大核心 2025年第3期488-494,共7页
目的 评估丝氨酸补充和3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)抑制剂NCT503对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响。方法 将C2C12细胞分为4组:空白对照组、高硒对照组、丝氨酸干预组和NCT503干预组。处理48 h后... 目的 评估丝氨酸补充和3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)抑制剂NCT503对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响。方法 将C2C12细胞分为4组:空白对照组、高硒对照组、丝氨酸干预组和NCT503干预组。处理48 h后,所有细胞均接受胰岛素刺激15 min。测量胰岛素刺激前后细胞培养液中的葡萄糖浓度,并通过Western Blot检测硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1, GPX1)、硒蛋白N(selenoprotein N, SELENON)、丝氨酸合成与代谢酶PHGDH、丝氨酸羟甲基转移酶1(hydroxy-methyltransferases 1, SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)、蛋氨酸合成酶(methionine synthase, MS)以及信号因子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、Ser 473磷酸化的Akt1激酶、Thr 308磷酸化的Akt1激酶和磷脂酰肌醇3激酶的表达水平。结果 与高硒对照组相比,丝氨酸干预组或NCT503干预组C2C12细胞对胰岛素敏感性有所改善,表现为胰岛素刺激前后培养液中葡萄糖差值增大(P<0.05)。与高硒对照组相比,丝氨酸干预组C2C12细胞内丝氨酸合成酶(PHGDH)与代谢酶(SHMT1和MS)的表达均下调(P<0.05)。与高硒对照组相比,NCT503干预组C2C12细胞只有部分丝氨酸代谢酶(SHMT1和MS)表达下调(P<0.05)。结论 外源性丝氨酸和PHGDH抑制剂均可以缓解高硒诱导C2C12细胞内异常的糖代谢,但丝氨酸是人体天然成分且可以反馈抑制丝氨酸合成的关键酶PHGDH。 展开更多
关键词 硒 c2c12细胞 胰岛素抵抗 丝氨酸合成通路 3-磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH) 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白-蛋白激酶B-磷脂酰肌醇3激酶(mTOR-AKT-PI3K)信号通路 丝氨酸 NCT503
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C2C电子商务税收遵从演化博弈分析
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作者 金鹏 郑长娟 蒋昀轩 《现代广告》 2025年第7期53-59,共7页
本文应用演化博弈论方法分析了C2C电子商务税收遵从博弈中税务机关和纳税人的行为策略动态演化过程,研究发现,在C2C电子商务中,造成纳税人不遵从的原因主要有三个方面,分别是税务机关与纳税人之间的信息不对称度较大、纳税人的销售额较... 本文应用演化博弈论方法分析了C2C电子商务税收遵从博弈中税务机关和纳税人的行为策略动态演化过程,研究发现,在C2C电子商务中,造成纳税人不遵从的原因主要有三个方面,分别是税务机关与纳税人之间的信息不对称度较大、纳税人的销售额较小、税务机关的稽查成本较高;对于销售额较高的C2C电子商务纳税人,税务机关会加强税收征管。根据分析结论,本文针对如何提高C2C电子商务税收遵从水平,提出了三点政策建议,一是税务机关应通过加强与C2C电子商务相关网络中介的信息共享,减小与C2C电子商务纳税人之间的信息不对称度;二是税务机关应提高稽查人员的信息技术应用能力;三是税务机关应将销售额较高的一部分C2C电子商务纳税人作为重点征管对象。 展开更多
关键词 c2c电子商务 税收遵从 演化博弈
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iPSC-MSCs联合HMB和D-核糖缓解地塞米松诱导的C2C12肌管细胞萎缩
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作者 孟姣 张宁 +3 位作者 杨光华 朱天飞 常崇斐 王正平 《聊城大学学报(自然科学版)》 2025年第3期464-474,共11页
目的:探讨诱导多能干细胞来源的间充质干细胞(iPSC-MSCs)与β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)和D-核糖(DR)联合使用在肌管细胞萎缩中的作用及机制。方法:以C2C12细胞系为研究对象,利用地塞米松(Dex)建立体外肌萎缩模型,分别设置对照组,Dex组,iPS... 目的:探讨诱导多能干细胞来源的间充质干细胞(iPSC-MSCs)与β-羟基-β-甲基丁酸(HMB)和D-核糖(DR)联合使用在肌管细胞萎缩中的作用及机制。方法:以C2C12细胞系为研究对象,利用地塞米松(Dex)建立体外肌萎缩模型,分别设置对照组,Dex组,iPSC-MSCs、HMB和DR单独及联合组。采用CCK8法检测细胞活力,HE染色法观察肌管形态,免疫印迹法和免疫荧光法对其机制进行研究。结果:与Dex组比较,iPSC-MSCs+HMB+DR+Dex组显著增加C2C12肌管细胞活力(***P<0.001)和肌管直径(***P<0.001)。免疫印迹结果显示,iPSC-MSCs+HMB+DR+Dex组P-PKB(**P<0.01)、P-mTOR(**P<0.01)、PI3K(*P<0.05)、PGC-1(*P<0.05)、IGF-1(**P<0.01)、MHC(*P<0.05)、Pax-7(*P<0.05)和MyoD-1(*P<0.05)蛋白表达显著增加,Foxo3a(**P<0.01)、MuRF-1(*P<0.05)、Caspase-3(*P<0.05)和Bax(*P<0.05)蛋白表达以及Bax/Bcl-2比值(**P<0.01)显著降低。免疫荧光结果与免疫印迹结果相一致,即iPSC-MSCs+HMB+DR+Dex组与Dex组比较,MuRF-1蛋白表达显著降低(***P<0.001),Pax-7蛋白表达显著增加(***P<0.001)。结论:iPSC-MSCs联合HMB和DR可以改善Dex诱导的C2C12肌管细胞萎缩。这可能与iPSC-MSCs、HMB和DR联合使用可以激活PI3K/PKB信号通路,促进蛋白质合成;降低Bax/Bcl-2比值以及抑制Caspase-3蛋白表达从而阻止细胞凋亡;增加肌蛋白MHC、Pax-7和MyoD-1的表达有关。 展开更多
关键词 肌管萎缩 iPSC-MSCs HMB D-核糖 c2c12
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C2C模式下小微企业税收优惠政策的应用与效果分析
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作者 黄梦媛 《电子商务评论》 2025年第9期983-988,共6页
随着数字经济的高速发展和居民消费方式的变化,电子商务发展蒸蒸日上,C2C电子商务作为近几年兴起的新业态,是时代发展的新趋势,C2C模式成为小微企业参与市场竞争的重要渠道。小微经营主体作为市场经济的重要组成部分,国家近年来出台了... 随着数字经济的高速发展和居民消费方式的变化,电子商务发展蒸蒸日上,C2C电子商务作为近几年兴起的新业态,是时代发展的新趋势,C2C模式成为小微企业参与市场竞争的重要渠道。小微经营主体作为市场经济的重要组成部分,国家近年来出台了一系列税收优惠政策帮助小微企业解决“急难愁盼”问题。本文以C2C模式下的小微企业为研究对象,首先,系统梳理了我国现行的税收优惠政策体系;其次,结合实际经营案例,具体分析税收优惠政策在增值税、个人所得税及其他税费中的应用场景;进而从企业税负减轻和企业活跃度提升这两个维度,评估税收优惠政策实施效果;同时深入剖析了政策理解偏差、政策执行困难、合规成本偏高等政策执行中存在的突出问题;最后针对性地提出优化政策宣传方式、优化征管流程、完善合规支撑措施等建议,旨在提升政策落地效果,为C2C模式下小微企业的健康可持续发展提供支持。 . 展开更多
关键词 c2c模式 小微企业 税收优惠 政策应用 效果分析
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C2C平台静默授权模式的合法性与合理性分析——以闲鱼APP为例
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作者 刘儒倩 《电子商务评论》 2025年第10期1776-1783,共8页
本文以闲鱼APP为例,分析C2C平台静默授权模式的合法性、合理性及其法律风险。静默授权虽在提升用户体验方面具有一定合理性,但其本质上侵害了用户的知情权与选择权,违反《个人信息保护法》的知情同意原则。文章创新性地提出,平台作为数... 本文以闲鱼APP为例,分析C2C平台静默授权模式的合法性、合理性及其法律风险。静默授权虽在提升用户体验方面具有一定合理性,但其本质上侵害了用户的知情权与选择权,违反《个人信息保护法》的知情同意原则。文章创新性地提出,平台作为数据控制者应对用户承担信义义务,其核心在于忠实、勤勉与充分披露。通过构建以信义义务为基础的平台责任体系,可为治理隐私侵权提供法理支撑,推动平台在个人信息处理中履行更高标准的保护义务。 展开更多
关键词 c2c平台 隐私权 个人隐私保护 静默授权 信义义务
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数字鸿沟视角下C2C发展的现实困境与路径研究
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作者 段妍妍 《电子商务评论》 2025年第7期628-633,共6页
互联网技术与电商深度融合下,C2C平台在突破传统商业壁垒时,面临数字鸿沟引发的可持续发展困境。基于数字鸿沟与数字包容理论,研究发现:用户端因网络基建不完善、设备性能不足存在一级数字鸿沟,制约弱势群体接入;交易端因非标商品信息... 互联网技术与电商深度融合下,C2C平台在突破传统商业壁垒时,面临数字鸿沟引发的可持续发展困境。基于数字鸿沟与数字包容理论,研究发现:用户端因网络基建不完善、设备性能不足存在一级数字鸿沟,制约弱势群体接入;交易端因非标商品信息不对称、维权机制单一,导致信任危机与交易低效;供应端长尾卖家数字素养缺失,造成平台生态多样性萎缩。研究提出发展路径:通过技术适配优化网络与设备兼容性以破除接入障碍;利用区块链与智能仲裁构建全程信任机制以提升公平性;通过分层培训与多方协作赋能卖家以激活生态活力。研究表明,C2C平台需以数字包容为核心,在技术创新与社会价值平衡中实现可持续发展。 展开更多
关键词 数字鸿沟 c2c电商 技术适配 信任机制 数字素养
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