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PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用 被引量:4
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作者 杨川 程桦 +3 位作者 王川 严励 黎锋 魏菁 《中山大学学报(医学科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期409-412,共4页
【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检... 【目的】探讨PDX-1对成肌细胞株C2C12分化为胰岛素分泌细胞的作用。【方法】将C2C12细胞分别经过不同浓度的类胰高血糖素(GLP-1)诱导120h后,瞬间转染胰腺十二指肠同源框(PDX-1)基因,用RT-PCR检测PDX-1的表达,流式细胞仪、放射免疫法检测细胞内和培养基中是否存在胰岛素。【结果】GLP-1可以直接诱导C2C12细胞表达PDX-1;PDX-1瞬时转染C2C12细胞后,胰岛素分泌细胞阳性率比值(1.19±0.10)、培养基中的胰岛素含量(2.45±1.48)×10-6U/mL均明显升高(P<0.05);单独的40nmol/LGLP-1诱导与瞬间转染PDX-1相比,阳性率比值及胰岛素浓度的差别均无统计学意义。【结论】GLP-1可以诱导C2C12表达PDX-1,而且PDX-1可以促进C2C12分泌胰岛素。提示GLP-1诱导C2C12分化为胰岛素分泌细胞可能与PDX-1有关。 展开更多
关键词 PDX-1 c2C12细胞 GLP-1 RT-PCR mol/L
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购物价值视角的C2C满意度实证分析 被引量:4
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作者 李海英 《软科学》 CSSCI 北大核心 2010年第12期134-139,共6页
以C2C网购为研究背景,从购物价值的视角构建了C2C满意度概念模型,并采用结构方程建模方法检验了实用价值和愉悦价值与满意度、转换成本的关系。实证结果显示:实用购物价值和愉悦购物价值对C2C满意度和转换成本均有显著的正向的影响,且... 以C2C网购为研究背景,从购物价值的视角构建了C2C满意度概念模型,并采用结构方程建模方法检验了实用价值和愉悦价值与满意度、转换成本的关系。实证结果显示:实用购物价值和愉悦购物价值对C2C满意度和转换成本均有显著的正向的影响,且前者的影响作用大于后者;C2C满意度和转换成本之间是正向的影响关系。在此基础上,提出了管理启示、研究局限及未来研究方向。 展开更多
关键词 c2C Perspective
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小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用 被引量:4
3
作者 张晨阳 张琳 杨卫利 《药物评价研究》 CAS 北大核心 2024年第1期68-78,共11页
目的 探究小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法 将H9c2心肌细胞分成对照组、模型组、正常给药组、模型给药组,对照组用无血清DMEM培养,正常给药组于无血清DMEM中加药,模型组用含50 mmol·L^(-1)... 目的 探究小檗碱及其体内代谢产物对高糖诱导大鼠H9c2心肌细胞损伤的保护作用。方法 将H9c2心肌细胞分成对照组、模型组、正常给药组、模型给药组,对照组用无血清DMEM培养,正常给药组于无血清DMEM中加药,模型组用含50 mmol·L^(-1)葡萄糖的无血清DMEM培养(造模剂量筛选实验设置25、50、100、200 mmol·L^(-1)),模型给药组于高糖无血清DMEM中加药,加药浓度分别为小檗碱1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),二氢小檗碱(DHB) 0.5、1.0、2.0、4.0μmol·L^(-1),小檗红碱1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),非洲防己碱(COL)1.25、2.50、5.00、10.00μmol·L^(-1),巴马汀3.125、6.250、12.500、25.000μmol·L^(-1),药根碱6.25、12.50、25.00、50.00μmol·L^(-1),去亚甲基小檗碱(DEM)6.25、12.50、25.00、50.00μmol·L^(-1),处理48 h后,通过细胞增殖计数(CCK-8)法检测细胞存活率;通过实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测经典代谢调控通路沉默调节蛋白1(Sirt1)、过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子1α(PGC1α)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(PPARα)基因水平,葡萄糖代谢相关基因丙酮酸脱氢酶激酶4 (PDK4)、葡萄糖激酶(GCK)、己糖激酶(HK2)、葡萄糖转运蛋白4(Glut4)表达水平,线粒体动力学相关基因线粒体融合蛋白2 (Mfn2)、视神经萎缩蛋白1 (OPA1)、动力学相关蛋白1(Drp1)水平及细胞凋亡相关基因天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、Caspase-9、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、 B淋巴细胞瘤-2 (Bcl-2)水平;通过Westernblotting实验检测PGC1α、 Glut4、线粒体氧化磷酸化系统(OXPHOS)蛋白表达。结果 与高糖模型组相比,小檗碱2.5、5.0、10.0μmol·L^(-1),DHB 1、2μmol·L^(-1),COL 5、10μmol·L^(-1),巴马汀12.5μmol·L^(-1),药根碱25、50μmol·L^(-1),DEM 12.5、25.0μmol·L^(-1)处理48 h的细胞存活率均显著上升(P<0.05、0.01、0.001);小檗碱、DHB、药根碱、DEM处理的心肌细胞中PDK4水平显著增加(P<0.05、0.001),小檗碱、DHB、DEM处理的心肌细胞中GCK水平显著增加(P<0.01、0.001),小檗碱、DHB、COL、巴马汀、DEM处理的心肌细胞中HK2水平显著增加(P<0.05、0.01),DEM处理的心肌细胞中Glut4水平显著增加(P <0.001);药根碱、DEM处理的心肌细胞中OPA1水平显著增加(P<0.05、0.001),小檗碱、DHB、COL、巴马汀、药根碱、DEM处理的心肌细胞中Drp1水平显著降低(P<0.01、0.001),小檗碱、DHB、药根碱、DEM处理的心肌细胞中Mfn2水平显著增加(P<0.05、0.001);小檗碱、DHB、COL处理的心肌细胞中Caspase-3水平显著降低(P<0.01、0.001),小檗碱、小檗红碱、COL、巴马汀处理的心肌细胞中Caspase-9水平显著降低(P<0.01、0.001),小檗碱、DHB、小檗红碱、COL、巴马汀、药根碱、DEM处理的心肌细胞中Bax水平显著降低(P<0.05、0.001),小檗碱、DHB、巴马汀处理的心肌细胞中Bcl-2水平显著增加(P<0.01、0.001);小檗碱及其代谢产物处理的心肌细胞中PGC1α、Glut4、OXPHOS表达均明显增加。结论 小檗碱体内代谢产物可以缓解高糖造成的H9c2心肌细胞损伤,其作用机制与调控Sirt1/PGC1α/PPARα信号通路,促进H9c2心肌细胞葡萄糖代谢、改善线粒体功能、抑制细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 H9c2细胞 线
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香蕉枯萎病菌C2H2型锌指转录因子FocFlbC的功能研究
4
作者 卢松茂 林秀香 +5 位作者 林亚琪 林晓兰 杨帅 郑文辉 云英子 鲁国东 《植物病理学报》 北大核心 2025年第4期649-662,共14页
由香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4,Foc TR4)引起的香蕉枯萎病是全球香蕉产业面临的重大土传病害,其土壤中的分生孢子和厚垣孢子是主要侵染源。构巢曲霉(Aspergillus nidulans)C2H2型锌指转... 由香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4,Foc TR4)引起的香蕉枯萎病是全球香蕉产业面临的重大土传病害,其土壤中的分生孢子和厚垣孢子是主要侵染源。构巢曲霉(Aspergillus nidulans)C2H2型锌指转录因子FlbC是调控分生孢子发育的关键因子。本研究在Foc TR4中鉴定到FlbC的同源基因FocFlbC,利用原生质体介导的遗传转化技术构建了其敲除突变体(ΔFocFlbC)和回补菌株,并分析了该蛋白的亚细胞定位和生物学功能。结果显示,FocFlbC定位于菌丝和分生孢子的细胞核。与野生型相比,ΔFocFlbC突变体在麦芽糖培养基上的菌丝生长速率显著降低,但在其他碳源培养基上无明显差异;该突变体在不同碳源培养基上的产孢量均显著降低,其中在麦芽糖培养基上野生型与突变体的产孢量比率最高,显著高于其他碳源培养基。虽然FocFlbC缺失突变对Foc TR4生物量累积和分生孢子萌发无显著影响,但与野生型相比,该突变体表现出:细胞壁和盐胁迫耐受性降低;α-淀粉酶、滤纸酶及β-1,4-D-葡聚糖酶活性下降,且相应水解酶基因的表达水平下调;以及致病力减弱。上述表型缺陷均可被回补菌株恢复。综上,FocFlbC不仅调控Foc TR4在麦芽糖培养基上的菌丝生长与产孢,还参与调控细胞壁完整性、盐胁迫响应、水解酶合成以及致病力等多个重要生物学过程,为深入揭示Foc TR4生长发育和致病分子机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 c2H2型锌指结构域
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乙型肝炎病毒中国流行株B2、C2基因型模型的人工构建与siRNA化合物评估
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作者 邹珂珂 张静 +2 位作者 臧超 明新 黄浩喜 《西部医学》 2025年第2期212-219,共8页
目的 为评估对中国乙型肝炎病毒(HBV)感染人群具有潜在疗效的siRNA化合物,构建一种针对中国流行株代表性HBV的细胞模型。方法 选择中国大范围流行的1 416条B2 HBV基因组序列和1 636条C2 HBV基因组序列整合构建中国HBV参考基因组。在此... 目的 为评估对中国乙型肝炎病毒(HBV)感染人群具有潜在疗效的siRNA化合物,构建一种针对中国流行株代表性HBV的细胞模型。方法 选择中国大范围流行的1 416条B2 HBV基因组序列和1 636条C2 HBV基因组序列整合构建中国HBV参考基因组。在此基础上构建中国参考HBV体外细胞评价模型,通过考察细胞中HBV DNA和细胞上清液中HBsAg、HBeAg的表达用来评估系统是否构建成功。通过该细胞模型评估得到最优siRNA化合物,进一步在HBV转基因小鼠体内中进行评估。结果 中国HBV参考基因组构建的两个细胞模型的HBV DNA和乙肝表面抗原(HBsAg)、乙肝e抗原(HBeAg)均能正常表达,B2型表达值分别为50 585 copies/μL、0.55 PEIU/mL、55.88 IU/mL,C2型表达值分别为45 302 copies/μL、35.31 PEIU/mL、56.9 IU/mL。通过该体外细胞模型评估得到的化合物BPR2030以3 mg/kg单次皮下注射到HBV转基因小鼠体内,小鼠血清中HBV DNA、HBsAg、HBeAg的最大抑制活性相比自身基线分别下调1.82(log10 IU/mL)、2.55(log10 IU/mL)、0.95(log10 PEIU/mL),给药后7~35 d对HBV的抑制活性均显著优于阳性参照物(P<0.05)。结论 成功构建了中国HBV流行株代表基因型表达的细胞模型,基于该细胞模型评估后得到的siRNA化合物在转基因小鼠体内表现出对HBV病毒高效的抑制活性,表明该细胞模型稳定可靠,有利于有针对性地开发更适合中国HBV患者的基因类药物。 展开更多
关键词 SIRNA HBV B2 c2 HBV DNA HBsAg HBEAG
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OR13C2调控PI3K/AKT通路对HeLa细胞恶性转移的影响
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作者 李晓丹 崔建涛 +2 位作者 陈秀英 耿莉莉 王莹 《生物技术》 2025年第2期212-217,共6页
[目的]探究OR13C2在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌恶性转移的影响。[方法]通过蛋白免疫印迹和实时的荧光定量PCR检测宫颈癌组织OR13C2表达情况。将宫颈癌细胞分为pcDNA NC组、pcDNA OR13C2组和抑制剂(PI-103)组。CCK-8实验分析宫颈癌... [目的]探究OR13C2在宫颈癌组织中的表达以及对宫颈癌恶性转移的影响。[方法]通过蛋白免疫印迹和实时的荧光定量PCR检测宫颈癌组织OR13C2表达情况。将宫颈癌细胞分为pcDNA NC组、pcDNA OR13C2组和抑制剂(PI-103)组。CCK-8实验分析宫颈癌细胞增殖能力,Transwell实验和划痕实验分析宫颈癌细胞侵袭和迁移能力,流式细胞术检测宫颈癌细胞的凋亡率,蛋白免疫印迹分析OR13C2对PI3K/AKT通路蛋白表达的影响。[结果]OR13C2在宫颈癌组织中低表达,而在宫颈癌旁组织中高表达(0.23±0.02 vs 0.97±0.07;2.01±0.05 vs 4.81±0.13;P<0.05)。OR13C2高表达后能够抑制宫颈癌细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进宫颈癌细胞凋亡。此外,OR13C2高表达能够抑制PI3K/AKT的激活(0.73±0.03 vs 0.19±0.05 vs 0.26±0.08;0.72±0.08 vs 0.23±0.06 vs 0.31±0.03;P<0.05)。[结论]OR13C2在宫颈癌组织中表达减少,上调OR13C2的表达可以抑制宫颈癌HeLa细胞的增殖、侵袭和迁移能力,促进宫颈癌HeLa细胞凋亡,此作用与OR13C2抑制PI3K/AKT通路的激活相关。 展开更多
关键词 OR13c2 AKT PI3K
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EPA/DHA干预的C2C12肌管细胞对3T3-L1脂肪细胞脂质代谢的作用 被引量:1
7
作者 杨娴 曾欢婷 +1 位作者 毛联智 毛丽梅 《营养学报》 北大核心 2025年第1期60-67,共8页
目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预... 目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预结束后,撤掉干预液,将干预后的肌管细胞在transwell小室中与成熟的脂肪细胞共培养24h。用油红O定量脂肪细胞内的脂质蓄积情况,用PCR法测定脂肪细胞的脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,Hsl)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ的共激活物1α(PPARG coactivator 1 alpha,Pgc-1α)、解偶联蛋白-1(uncoupling protein-1,Ucp-1)和固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,Srebp-1c)基因mRNA表达水平,用Western blot检测脂肪细胞腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine5’-monophosphate(AMP)-activatedproteinkinase,AMPK)与信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的蛋白表达。结果经100、200、400μmol/L EPA干预的肌管细胞可以显著降低脂肪细胞的脂质蓄积(P<0.05或P<0.001),而DHA干预后的肌管细胞则没有显著的改善脂质蓄积的作用;经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著上调脂肪细胞脂肪分解基因Atgl和Hsl的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂质氧化基因Ucp-1和Pgc-1α的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提升脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.05或P<0.01),而一定浓度DHA干预的肌管细胞则是可以显著降低脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.01);经所有浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-STAT3/STAT3的比值(P<0.01),对p-AMPK/AMPK比值变化的影响则没有显著性;经200、400μmol/L DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-AMPK/AMPK的比值(P<0.01),但是p-STAT3/STAT3比值的变化没有显著性意义。结论EPA和DHA在适宜浓度均可以促进肌管细胞提高脂肪细胞的脂质分解和脂质氧化,EPA干预的肌管细胞还可以一定程度提高脂质合成,DHA干预的肌管细胞可以一定程度降低脂质合成;EPA干预后的肌管细胞可能通过STAT3通路改善脂质代谢,DHA干预后的肌管细胞可能通过AMPK通路改善脂质代谢。 展开更多
关键词 c2C12肌管细胞 3T3-L1 STAT3/AMPK
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毛喉素调控ERK和Akt信号通路促进C2C12成肌细胞分化
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作者 黄柳艳 张文烯 +3 位作者 陈淑雯 余诗美 戴忠 左长清 《中国组织工程研究》 北大核心 2026年第5期1114-1121,共8页
背景:毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花中提取到的二萜类天然化合物,对骨骼肌的修复具有重要的调节作用。但毛喉素对C2C12骨骼肌细胞成肌分化的调控作用尚未得到充分探索。目的:研究毛喉素对C2C12成肌细胞系分化的影响,并探讨其潜在的分子机制... 背景:毛喉素是一种从毛喉鞘蕊花中提取到的二萜类天然化合物,对骨骼肌的修复具有重要的调节作用。但毛喉素对C2C12骨骼肌细胞成肌分化的调控作用尚未得到充分探索。目的:研究毛喉素对C2C12成肌细胞系分化的影响,并探讨其潜在的分子机制。方法:在C2C12细胞生长过程中分别加入0,0.1,0.25,0.5,1,5,10,20μmol/L毛喉素进行处理,CCK-8和qRT-PCR检测细胞增殖情况。在诱导C2C12细胞成肌分化过程中分别加入0,0.25,0.5,1μmol/L毛喉素进行处理,免疫荧光染色及qRT-PCR检测C2C12细胞成肌分化状况;Western blot检测影响成肌分化的相关信号通路蛋白的表达水平。结果与结论:①高浓度(>1μmol/L)毛喉素处理后,C2C12细胞的活力下降,细胞增殖被抑制。②与0μmol/L组比较,成肌诱导4 d时,qRT-PCR结果显示毛喉素能够上调Myh2、Myh4、Myomaker的表达,但是下调Myh7的表达;免疫荧光染色结果表明,毛喉素处理后C2C12细胞的融合指数和肌管直径均增加,肌管的数量增多。③Western blot结果表明成肌分化诱导2 d时,毛喉素处理明显抑制细胞外信号调节激酶1/2磷酸化蛋白表达水平,促进蛋白激酶B磷酸化蛋白表达;毛喉素处理会显著上调成肌分化转录因子肌细胞生成素蛋白表达水平。④结果表明,毛喉素可能通过调控细胞外信号调节激酶1/2及蛋白激酶B信号传导促进C2C12骨骼肌细胞成肌分化。 展开更多
关键词 c2C12细胞 ERK1/2 Akt
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丝氨酸和3-磷酸甘油酸脱氢酶抑制剂对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响
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作者 詹硕 刘轶群 +4 位作者 韩枫 王建荣 朱铭钰 王琴 黄振武 《卫生研究》 北大核心 2025年第3期488-494,共7页
目的 评估丝氨酸补充和3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)抑制剂NCT503对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响。方法 将C2C12细胞分为4组:空白对照组、高硒对照组、丝氨酸干预组和NCT503干预组。处理48 h后... 目的 评估丝氨酸补充和3-磷酸甘油酸脱氢酶(3-phosphoglycerate dehydrogenase, PHGDH)抑制剂NCT503对高硒环境下C2C12细胞糖代谢重塑的影响。方法 将C2C12细胞分为4组:空白对照组、高硒对照组、丝氨酸干预组和NCT503干预组。处理48 h后,所有细胞均接受胰岛素刺激15 min。测量胰岛素刺激前后细胞培养液中的葡萄糖浓度,并通过Western Blot检测硒蛋白谷胱甘肽过氧化物酶1(glutathione peroxidase 1, GPX1)、硒蛋白N(selenoprotein N, SELENON)、丝氨酸合成与代谢酶PHGDH、丝氨酸羟甲基转移酶1(hydroxy-methyltransferases 1, SHMT1)、亚甲基四氢叶酸还原酶(5,10-methylenetetrahydrofolate reductase, MTHFR)、蛋氨酸合成酶(methionine synthase, MS)以及信号因子哺乳动物雷帕霉素靶蛋白、蛋白激酶B(protein kinase B, AKT)、Ser 473磷酸化的Akt1激酶、Thr 308磷酸化的Akt1激酶和磷脂酰肌醇3激酶的表达水平。结果 与高硒对照组相比,丝氨酸干预组或NCT503干预组C2C12细胞对胰岛素敏感性有所改善,表现为胰岛素刺激前后培养液中葡萄糖差值增大(P<0.05)。与高硒对照组相比,丝氨酸干预组C2C12细胞内丝氨酸合成酶(PHGDH)与代谢酶(SHMT1和MS)的表达均下调(P<0.05)。与高硒对照组相比,NCT503干预组C2C12细胞只有部分丝氨酸代谢酶(SHMT1和MS)表达下调(P<0.05)。结论 外源性丝氨酸和PHGDH抑制剂均可以缓解高硒诱导C2C12细胞内异常的糖代谢,但丝氨酸是人体天然成分且可以反馈抑制丝氨酸合成的关键酶PHGDH。 展开更多
关键词 c2C12细胞 3-(PHGDH) -B-3(mTOR-AKT-PI3K) NCT503
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左归降糖舒心方调控TLR4/NF-κB/NLRP3通路抑制H9C2心肌细胞炎性损伤机制
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作者 黄娟 黄湘宁 +7 位作者 王屹菲 李美英 刘晶晶 王瑾茜 刘林劵 林湘东 王婷婷 喻嵘 《陕西中医》 2025年第11期1454-1461,共8页
目的:探讨左归降糖舒心方对于脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护机制。方法:以H9C2心肌细胞为研究对象,随机分为空白血清组、模型组、左归降糖舒心方组、二甲双胍组、TAK-242组。除空白血清组外,其余各组均以LPS诱导损伤,构建心... 目的:探讨左归降糖舒心方对于脂多糖(LPS)诱导的H9C2心肌细胞损伤的保护机制。方法:以H9C2心肌细胞为研究对象,随机分为空白血清组、模型组、左归降糖舒心方组、二甲双胍组、TAK-242组。除空白血清组外,其余各组均以LPS诱导损伤,构建心肌细胞炎症损伤体外模型。通过CCK-8法筛选含药血清干预浓度,ELISA法及免疫荧光法检测细胞IL-1β、TNF-α、IL-6含量及蛋白表达;Hoechst/PI双染检测细胞焦亡水平;AO/EB双染检测细胞膜通透性;Western Blot法检测TLR4、NF-κB p65、p-NF-κB p65及NLRP3蛋白表达;RT-PCR技术检测IL-1β、Caspase-1及GSDMD mRNA表达。结果:通过CCK-8法筛选,确定10%的左归降糖舒心方含药血清浓度为后续实验的干预浓度。与空白血清组相比,模型组H9C2细胞释放的TNF-α、IL-6、IL-1β含量和相对荧光强度增加(P<0.01)。PI染色细胞数量明显增多,EB橘红色荧光比例上升,TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达升高,IL-1β、Caspase-1及GSDMD mRNA表达增高(均P<0.01)。与模型组相比,左归降糖舒心方组、二甲双胍组、TAK-242组细胞中的TNF-α、IL-6、IL-1β含量及相对荧光强度降低(P<0.01)。PI染色细胞数量减少,左归降糖舒心方组AO/EB染色的EB橘红色荧光比例缩小。中药含药血清及TAK-242可抑制细胞的TLR4、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白表达和Caspase-1、GSDMD mRNA表达。结论:左归降糖舒心方含药血清能抑制LPS诱导的H9C2心肌细胞炎症反应,减轻心肌细胞焦亡,这与抑制TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路相关。 展开更多
关键词 尿 H9c2心肌细胞 TLR4/NF-κB/NLRP3
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SR9009联合吲哚丙酸通过核因子κB信号通路减轻C2C12成肌细胞的炎症反应 被引量:1
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作者 姬慧慧 蒋旭 +7 位作者 张志敏 邢运虹 王亮亮 李娜 宋雨庭 罗旭光 崔慧林 曹锡梅 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第6期1220-1229,共10页
背景:钟基因Rev-erbα参与调节炎症,但激活Rev-erbα会增加心脑血管疾病风险。为降低相关风险,探索Rev-erbα激动剂SR9009联合其他药物来减轻骨骼肌成肌细胞炎症,奠定治疗炎症相关性骨骼肌萎缩的理论基础。目的:探讨脂多糖刺激C2C12成... 背景:钟基因Rev-erbα参与调节炎症,但激活Rev-erbα会增加心脑血管疾病风险。为降低相关风险,探索Rev-erbα激动剂SR9009联合其他药物来减轻骨骼肌成肌细胞炎症,奠定治疗炎症相关性骨骼肌萎缩的理论基础。目的:探讨脂多糖刺激C2C12成肌细胞时吲哚丙酸、SR9009与核因子κB信号通路的关系。方法:①1μg/mL脂多糖刺激C2C12成肌细胞,RNA转录组测序结合KEGG通路富集分析信号通路。②CCK-8法检测C2C12成肌细胞活性,筛选吲哚丙酸的最佳给药浓度;然后将细胞分为空白对照组、脂多糖(1μg/mL)组、SR9009(10μmol/L)+脂多糖组、吲哚丙酸(80μmol/L)+脂多糖组、吲哚丙酸+SR9009+脂多糖组,ELISA检测细胞上清液中白细胞介素6水平,RT-qPCR检测白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体4、CD14 mRNA表达,Western blot检测NF-κB p65、p-NF-κB p65蛋白表达。③siRNA敲减Rev-erbα,RT-qPCR评估敲减效率,检测白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达。结果与结论:①与空白对照组比较,脂多糖时间依赖性抑制成肌细胞融合形成肌管,白细胞介素6、肿瘤坏死因子αmRNA表达水平升高,细胞上清液中白细胞介素6水平显著升高;KEGG通路分析支持脂多糖刺激激活核因子κB信号通路。②吲哚丙酸浓度>80μmol/L时抑制C2C12成肌细胞活性;吲哚丙酸和SR9009通过抑制核因子κB信号通路发挥抗炎作用,降低白细胞介素6、肿瘤坏死因子α、Toll样受体4、CD14 mRNA表达水平,p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达比值低于脂多糖组。SR9009联合吲哚丙酸显著降低脂多糖诱导的炎症,Toll样受体4、CD14、白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA表达水平进一步下调,p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达比值显著低于吲哚丙酸+脂多糖组和SR9009+脂多糖组。③Rev-erbα随脂多糖刺激时间依赖性升高;siRNA敲减Rev-erbα效率达58%以上,成功敲减Rev-erbα后添加脂多糖,白细胞介素6和肿瘤坏死因子αmRNA表达较脂多糖组显著上调。④结果说明,Rev-erbα可以作为调节炎症反应的靶点,SR9009靶向激活Rev-erbα联合吲哚丙酸能抑制核因子κB信号通路显著减轻C2C12成肌细胞的炎症反应,联合抗炎效果优于单独干预。 展开更多
关键词 Rev-erbα SR9009 ΚB c2C12成肌细胞
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C2C网络环境下声誉、保障服务对消费者购买过程的影响 被引量:1
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作者 张楠 叶乃沂 《中国商界》 2010年第11期165-168,共4页
为缓解C2C网上交易中信息不对称问题,促进网上交易快速发展,一些C2C网站推出信用评价制度、第三方保障服务。本文以淘宝网为例,研究声誉、保障服务对消费者购买过程的影响,发现声誉、保障服务对消费者的点击浏览、收藏、实际购买均有正... 为缓解C2C网上交易中信息不对称问题,促进网上交易快速发展,一些C2C网站推出信用评价制度、第三方保障服务。本文以淘宝网为例,研究声誉、保障服务对消费者购买过程的影响,发现声誉、保障服务对消费者的点击浏览、收藏、实际购买均有正向影响,并推测消费者进行C2C网上购物时的购买习惯。 展开更多
关键词 c2C网站
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circ_0037128靶向miR-1184对H_(2)O_(2)诱导的H9C2细胞氧化应激和凋亡的影响
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作者 陈施羽 肖鹏 +1 位作者 汪鑫 靳鑫 《解剖学研究》 2025年第4期303-308,316,共7页
目的 探讨circ_0037128靶向miR-1184对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞(H9C2)氧化应激和凋亡的影响。方法 用150μmol/L H_(2)O_(2)处理H9C2细胞建立氧化损伤模型。共分为Con、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+si-NC、H_(2)O_(2)+sicirc_0037128、H_... 目的 探讨circ_0037128靶向miR-1184对H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞(H9C2)氧化应激和凋亡的影响。方法 用150μmol/L H_(2)O_(2)处理H9C2细胞建立氧化损伤模型。共分为Con、H_(2)O_(2)组、H_(2)O_(2)+si-NC、H_(2)O_(2)+sicirc_0037128、H_(2)O_(2)+miR-NC、H_(2)O_(2)+miR-1184、H_(2)O_(2)+si-circ_0037128+anti-miR-NC、H_(2)O_(2)+si-circ_0037128+antimiR-1184组。比色法检测细胞内超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活性、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)含量以及培养液中乳酸脱氢酶(Lactate Dehydrogenase,LDH)活性。流式细胞术评估细胞凋亡情况。双荧光素酶报告实验确定circ_0037128和miR-1184的靶向关系。结果 与Con组比较,H_(2)O_(2)组细胞circ_0037128表达水平、MDA、LDH、凋亡率升高(P<0.05),而miR-1184表达、SOD活性降低(P<0.05)。相对于H_(2)O_(2)+si-NC组,MDA、LDH、凋亡率在H_(2)O_(2)+si-circ_0037128组中升高(P<0.05),而SOD降低(P<0.05)。相对于H_(2)O_(2)+miR-NC组,MDA、LDH、凋亡率在H_(2)O_(2)+miR-1184组中升高(P<0.05),而SOD降低(P<0.05)。circ_0037128和miR-1184直接结合。miR-1184沉默缓解了干扰circ_0037128对H_(2)O_(2)介导的MDA、LDH、凋亡率、SOD的影响(P<0.05)。结论 下调circ_0037128表达通过促进miR-1184表达能够减轻H_(2)O_(2)诱导的心肌细胞氧化应激和凋亡,减缓细胞损伤。 展开更多
关键词 circ_0037128 miR-1184 H9c2细胞
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黄芩苷通过调控铁死亡减轻H9c2细胞缺氧复氧损伤及其机制研究 被引量:3
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作者 李家权 许锦 +1 位作者 谭子富 方孝俊 《中医药导报》 2025年第2期13-18,共6页
目的:研究黄芩苷通过铁死亡途径对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:采用Na_(2)S_(2)O_(4)诱导大鼠H9c2心肌细胞铁死亡模型,随后用黄芩苷干预。采用试剂盒检测细胞活力、ROS、线粒体膜电位和Fe^(2+)水平。Western blotting... 目的:研究黄芩苷通过铁死亡途径对H9c2心肌细胞缺氧复氧损伤的作用及机制。方法:采用Na_(2)S_(2)O_(4)诱导大鼠H9c2心肌细胞铁死亡模型,随后用黄芩苷干预。采用试剂盒检测细胞活力、ROS、线粒体膜电位和Fe^(2+)水平。Western blotting检测细胞PTGS2、NOX2和GPX4蛋白表达水平。PTGS2激动剂BUR1联合黄芩苷干预Na_(2)S_(2)O_(4)诱导的细胞后,试剂盒检测细胞Fe^(2+)水平。结果:80μmol/L以内的黄芩苷对H9c2细胞无毒性。Na_(2)S_(2)O_(4)诱导H9c2细胞铁死亡,表现为细胞ROS和Fe^(2+)水平升高,线粒体膜电位坍塌,GPX4表达明显下降(P<0.05)。黄芩苷干预后,Na_(2)S_(2)O_(4)诱导的细胞ROS和Fe^(2+)水平下降,线粒体膜电位恢复,GPX4表达明显升高(P<0.05),铁死亡进程被逆转。Na_(2)S_(2)O_(4)诱导H9c2细胞后,PTGS2和NOX4表达明显升高(P<0.05),而黄芩苷干预后,Na_(2)S_(2)O_(4)诱导的H9c2心肌细胞PTGS2和NOX4表达明显降低(P<0.05)。黄芩苷与PTGS2和NOX4有很好的结合活性,结合能分别为-10.65和-8.82 kcal/mol。BUR1能够逆转黄芩苷抑制的Fe^(2+)水平。结论:黄芩苷对Na_(2)S_(2)O_(4)诱导H9c2细胞建立的缺氧复氧损伤模型铁死亡具有明确的恢复作用,其机制可能与其抑制PTGS2和NOX4蛋白表达有关。 展开更多
关键词 大鼠H9c2心肌细胞 Na_(2)S_(2)O_(4) PTGS2 NOX4
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骨髓间充质干细胞来源的外泌体抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩 被引量:1
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作者 柯义兵 丁永宏 +3 位作者 阿布都克热木·达吾提 郭浩然 兰志杰 王勇平 《中国药理学通报》 CAS 北大核心 2025年第1期50-56,共7页
目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2... 目的研究骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)来源的外泌体(exsomes,EXOs)对地塞米松(dexamethasone,DEX)诱导的C2C12肌管萎缩的影响。方法(1)分离提取培养C57BL/6J小鼠BMSCs。(2)提取并鉴定BMSCs-EXOs。(3)C2C12细胞成肌分化。(4)将肌管细胞分为对照组(Control,2%马血清培养基培养48 h)、地塞米松组(DEX、浓度为10μmol·L^(-1)的DEX干预肌管48 h)、外泌体组(EXOs、外泌体干预肌管48 h)、外泌体抑制剂组(GW4869、10μmol的GW4869干预BMSCs后提取的外泌体干预肌管48 h)。48 h后测量各组肌管直径,CCK-8法检测各组细胞活力,Western blot检测各组肌肉萎缩及成肌分化相关蛋白的表达量。结果BMSCs呈长梭形,BMSCs-EXOs在透射电镜下为圆形的双层膜结构,直径约200 nm,且高表达CD9、CD63和CD81。相比于Control组,DEX组细胞活性降低(P<0.01),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低;相比于DEX组,BMSCs-EXOs组细胞活性升高(P<0.01),肌管细胞直径增加(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.01)的表达明显下调,MYOD(P<0.01)蛋白表达升高;相比于BMSCs-EXOs组,BMSCs-EXOs(GW4869)组细胞活性降低(P<0.05),肌管细胞直径减少(P<0.01),atrogin-1(P<0.05)和MuRF-1(P<0.05)的表达上调,MYOD(P<0.01)蛋白表达降低。结论骨髓间充质干细胞来源的外泌体(BMSCs-EXOs)可抑制地塞米松诱导的C2C12肌管萎缩。 展开更多
关键词 c2C12
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绿豆C2H2型锌指蛋白转录因子家族鉴定及非生物胁迫下的表达分析
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作者 张均 郭飞翔 +2 位作者 田文仲 李春霞 马超 《核农学报》 北大核心 2025年第9期1875-1885,I0008-I0010,共14页
C2H2型锌指转录因子家族在植物非生物胁迫应答和生长发育等生命过程中起着重要的调控作用。为明确C2H2型锌指转录因子家族在绿豆生长发育中的功能,本研究利用绿豆(Vigna radiata L.)基因组数据和生物信息学技术鉴定了C2H2转录因子,对其... C2H2型锌指转录因子家族在植物非生物胁迫应答和生长发育等生命过程中起着重要的调控作用。为明确C2H2型锌指转录因子家族在绿豆生长发育中的功能,本研究利用绿豆(Vigna radiata L.)基因组数据和生物信息学技术鉴定了C2H2转录因子,对其理化性质、系统进化、染色体定位、共线性、启动子顺式作用元件及基因结构做了预测分析,并通过绿豆转录组数据和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了其在不同组织与非生物胁迫下的表达模式。结果表明,共鉴定到60个C2H2转录因子成员,其中53个分布于9条染色体,7个成员染色体信息未知;Motif1和Motif3是绿豆C2H2转录因子家族所特有的保守基序,Motif3则是部分C2H2转录因子家族成员所特有的一段保守序列“QALGGH”;编码155~1 581个氨基酸,均为亲水性蛋白且均定位在细胞核中;系统进化将绿豆C2H2转录因子家族分为7个亚组(V1~V7)。共线性分析表明,片段复制事件均进行了纯化选择;启动子顺式作用元件分析表明,绿豆C2H2基因启动子区含有大量与生长发育、逆境胁迫和激素相关的响应元件;基因表达分析表明,叶柄、叶片、下胚轴、籽粒种皮中表达量较高(FPKM值大于10)的基因分别占25.0%、26.7%、20.0%、26.7%;qRT-PCR分析发现,VrC2H2-22和VrC2H2-46对于温度胁迫具有特异性的调控作用,VrC2H2-51对干旱胁迫的响应程度较强。本研究结果为进一步对绿豆C2H2锌指转录因子家族的功能研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 绿 c2H2锌指蛋白转录因子 线
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过表达Bmal1通过增强Wnt信号传导促进C2C12成肌细胞增殖与分化
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作者 蒋旭 姬慧慧 +5 位作者 宋雨庭 王亮亮 李娜 孙俊红 崔慧林 曹锡梅 《中国临床解剖学杂志》 北大核心 2025年第3期278-288,共11页
目的探讨过表达Bmal1对C2C12成肌细胞增殖与分化的影响及可能机制。方法慢病毒介导成肌细胞过表达Bmal1,RT-qPCR和Western blot检测肌调节因子的表达;RNA转录组测序结合聚类分析及相关实验探究过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化过程中Wnt... 目的探讨过表达Bmal1对C2C12成肌细胞增殖与分化的影响及可能机制。方法慢病毒介导成肌细胞过表达Bmal1,RT-qPCR和Western blot检测肌调节因子的表达;RNA转录组测序结合聚类分析及相关实验探究过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化过程中Wnt信号通路和细胞周期调节因子的表达;抑制剂XAV939阻断Wnt信号通路,观察XAV939对过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化的影响。结果过表达Bmal1促进成肌细胞增殖,表现为S相分数、DNA增殖指数升高,EdU阳性细胞比例及β-catenin核转位率增加;诱导成肌分化,过表达Bmal1促进肌管融合,上调MyoD、myogenin、Myh3的表达。聚类分析和实验支持过表达Bmal1成肌细胞增殖与分化过程中Wnt信号传导增强,其下游细胞周期调节因子表达上调;XAV939(5μmol/L)显著下调过表达Bmal1成肌细胞Tcf1、c-Jun的表达,持续抑制过表达Bmal1成肌细胞的肌管融合,下调MyoD、myogenin、Myh3的表达。结论Bmal1可作为骨骼肌损伤修复的靶点,过表达Bmal1通过增强Wnt信号传导促进成肌细胞增殖与分化。 展开更多
关键词 BMAL1 WNT XAV939 c2C12成肌细胞
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丹酚酸B介导Elovl6/Echs1/Acot1通路调节脂肪酸代谢减轻H9c2细胞OGD/R损伤
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作者 曹策 宋鉴书 +5 位作者 杨丽丽 李浩然 刘子馨 李磊 付建华 刘建勋 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期482-490,共9页
目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)抗H9c2细胞氧糖剥夺/再复(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)损伤机制。方法CCK-8筛选SalB对OGD/R损伤H9c2细胞保护浓度;试剂盒检测SalB对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,L... 目的观察丹酚酸B(salvianolic acid B,SalB)抗H9c2细胞氧糖剥夺/再复(oxygen glucose deprivation/re-oxygenation,OGD/R)损伤机制。方法CCK-8筛选SalB对OGD/R损伤H9c2细胞保护浓度;试剂盒检测SalB对乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、天冬氨酸转氨酶(aspartate transaminase,AST)、肌酸激酶(creatine kinase,CK)的影响;转录组测序探索SalB对OGD/R损伤H9c2作用机制;分子对接检测SalB和差异蛋白结合情况;ELISA法检测脂肪酸含量;RT-qPCR和Western blot验证差异基因表达水平;孟德尔随机化验证SalB作用靶点与HF因果关系。结果与模型组相比,SalB可保护OGD/R损伤后H9c2细胞,且明显降低CK、LDH和AST含量;转录组筛选差异基因100个,涉及脂肪酸延长、癌症中心碳代谢、色氨酸代谢通路;分子对接显示SalB与差异蛋白具有良好结合能;核心基因Elovl6、Echs1、Acot1 mRNA和蛋白表达与转录组一致;SalB可降低OGD/R损伤后脂肪酸含量;孟德尔随机化表明SalB可调节脂肪酸代谢,降低HF风险。 结论 SalB下调Elovl6、Echs1、Acot1表达水平,通过脂肪酸代谢通路保护OGD/R损伤后H9c2细胞。 展开更多
关键词 B H9c2心肌细胞 OGD/R /
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软件定义C2
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作者 阳东升 李强 +1 位作者 沈震 毛少杰 《指挥与控制学报》 北大核心 2025年第4期I0001-I0003,共3页
指挥控制(command and control,C2)系统作为军事体系的“神经中枢”,其形态与效能直接决定战争形态与胜负走向。随着全域作战、智能化作战等新型作战样式的演进,传统基于编制预设的C2体系面临跨域协同不足、动态适应能力薄弱等瓶颈。“... 指挥控制(command and control,C2)系统作为军事体系的“神经中枢”,其形态与效能直接决定战争形态与胜负走向。随着全域作战、智能化作战等新型作战样式的演进,传统基于编制预设的C2体系面临跨域协同不足、动态适应能力薄弱等瓶颈。“软件定义C2”通过软件重构硬件逻辑。 展开更多
关键词 软件定义c2 c2系统
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基于LncRNA malat-1/miR-133通路调控p-ERK1/2探讨温阳振衰颗粒含药血清对阿霉素诱导H9C2心肌细胞损伤的影响
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作者 王楠 唐燕萍 +3 位作者 蔡虎志 陈新宇 李少东 陈雪靓 《中华中医药学刊》 北大核心 2025年第5期89-93,I0026,共6页
目的基于长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,malat-1)/微小RNA-133(microRNA-133,miR-133)通路调控细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化(p-ERK1/2)探... 目的基于长链非编码RNA(Long non-coding RNAs,LncRNA)肺腺癌转移相关转录子1(metastasis associated lung adenocarcinoma transcript 1,malat-1)/微小RNA-133(microRNA-133,miR-133)通路调控细胞外调节蛋白激酶1/2磷酸化(p-ERK1/2)探讨温阳振衰颗粒含药血清对阿霉素诱导H9C2心肌细胞损伤的影响。方法使用2.67μmol/L阿霉素(adriamycin,ADR)培养液共培养45 h以建立H9C2心肌细胞损伤模型并设置正常对照组、正常+W组(W:温阳振衰颗粒含药血清)、miR-133过表达组、miR-133过表达+W组、ADR组[ADR:阿霉素(adriamycin)]、ADR+W组、ADR+miR-133过表达组、ADR+miR-133过表达+W组共8组。细胞增殖活性采用MTT法检测,N端B型脑钠肽前体(N-terminal B-type brain natriuretic peptide precursor,NT-proBNP)的变化采用ELISA法检测,各组H9C2心肌细胞lncRNA malat-1、miR-133以及ERK1/2 mRNA的含量采用Real-time PCR法检测,ERK1/2及p-ERK1/2的蛋白表达采用Western blot检测。结果ADR组、ADR+miR-133过表达组、ADR+W组、ADR+miR-133过表达+W组、正常对照组、miR-133过表达组、正常+W组、miR-133过表达+W组心肌细胞活性依次增加(P<0.05);NT-proBNP含量依次降低(P<0.05)。实验后各组心肌细胞ERK1/2 mRNA表达差异无统计学意义(P>0.05),ADR组、ADR+miR-133过表达组、ADR+W组、ADR+miR-133过表达+W组、正常对照组、miR-133过表达组、正常+W组、miR-133过表达+W组miR-133表达依次增加(P<0.05);lncRNA malat-1表达依次降低(P<0.05)。实验后各组心肌细胞ERK1/2蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05);ADR组、ADR+W组、ADR+miR-133过表达组、ADR+miR-133过表达+W组、正常对照组、miR-133过表达组、正常+W组、miR-133过表达+W组p-ERK1/2蛋白表达依次降低(P<0.05)。结论温阳振衰颗粒含药血清能够降低心肌细胞p-ERK1/2蛋白表达从而对慢性心力衰竭发挥疗效,其机制可能是通过对心肌细胞中的lncRNA malat-1/miR-133通路进行调控而实现的。 展开更多
关键词 H9c2心肌细胞 1/2 RNA-133 1
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