目的:探讨C1q样蛋白4(C1q-like protein 4,C1ql4)对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响,以及可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测50例乳腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织以及乳腺细胞(乳腺癌细胞BT549和MCF-7以及正常乳腺细胞MCF-10A)中...目的:探讨C1q样蛋白4(C1q-like protein 4,C1ql4)对乳腺癌细胞侵袭及迁移的影响,以及可能的作用机制。方法:采用实时荧光定量PCR法检测50例乳腺癌患者肿瘤组织和癌旁组织以及乳腺细胞(乳腺癌细胞BT549和MCF-7以及正常乳腺细胞MCF-10A)中C1ql4 mRNA的表达水平。合成针对C1ql4基因的siRNA(siC1ql4),采用脂质体转染的方法将其转入乳腺癌BT549细胞,并采用蛋白质印迹法检测沉默效率。MTT法检测各组细胞的增殖能力,Transwell小室实验检测细胞的侵袭能力,划痕实验检测细胞的迁移能力;蛋白质印迹法法检测各组细胞中Snail、Slug、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)以及磷酸化NF-κB(phospho-NF-κB,p-NF-κB)的表达水平,免疫荧光法定位NF-κB的分布,实时荧光定量PCR法检测NF-κB靶基因TNF-α和IL-1β mRNA的表达水平。结果:乳腺癌组织中C1ql4 mRNA的表达水平明显高于癌旁组织,乳腺癌BT549和MCF-7细胞中C1ql4 mRNA的表达水平明显高于正常乳腺MCF-10A细胞(P<0.05)。沉默C1ql4表达后,BT549细胞的增殖、侵袭和迁移能力均明显下降(P均<0.001);Snail和Slug的mRNA以及蛋白的表达量均显著下调(P均<0.001),TNFα和IL-1β的mRNA表达水平均明显降低(P均<0.001);NF-κB入核减少,p-NF-κB/NF-κB比值减小(P均<0.05)。结论:C1ql4可能通过激活NF-κB通路调控乳腺癌细胞的侵袭及迁移,促进乳腺癌进展。展开更多
