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硒都黑猪NT5C1A基因核心启动子区鉴定及转录因子预测
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作者 任双 吴俊静 +5 位作者 彭先文 张志红 周佳伟 梅书棋 乔木 杜志强 《中国畜牧杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期116-121,128,共7页
本研究旨在探究猪胞质5'核苷酸酶1A基因(Cytosolic 5'-Nucleotidase1A,NT5C1A)启动子区序列的结构特性,确定其核心启动子区并分析其关键转录因子结合位点,为探究其表达调控机制提供理论依据。对NT5C1A互作蛋白进行预测,在线生... 本研究旨在探究猪胞质5'核苷酸酶1A基因(Cytosolic 5'-Nucleotidase1A,NT5C1A)启动子区序列的结构特性,确定其核心启动子区并分析其关键转录因子结合位点,为探究其表达调控机制提供理论依据。对NT5C1A互作蛋白进行预测,在线生物信息学分析软件预测猪NT5C1A基因核心启动子区,根据预测结果设计7对启动子缺失片段引物,以硒都黑猪血液基因组DNA为模板,通过PCR扩增和Sanger测序方法获得NT5C1A基因5'端7个启动子缺失片段并克隆至pGL3-Basic载体,以双荧光素酶报告基因检测试验对缺失片段进行荧光素酶活性检测,并通过转录因子在线预测软件预测核心启动子区潜在的转录因子。结果表明,NT5C1A基因核心启动子位于转录起始位点-290~+109bp的位置(ATG作为+1),该区域含有MYOD1、MYOG、MYF5和SP1等肌肉发育相关的转录因子结合位点。本试验为研究NT5C1A基因调控猪肌肉发育的分子机制提供了理论依据。 展开更多
关键词 硒都黑猪 NT5c1a 核心启动子区 转录因子 生物信息学
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5′-差向庆大霉素C1a及其衍生物的合成及生物活性的研究 被引量:5
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作者 郑卫 卓锦明 +2 位作者 张俊成 张发香 程元荣 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第10期592-595,共4页
以西索米星、奈替米星为母核 ,对双键进行选择催化氢化 ,得到氢化西索米星 ( 5′ 差向庆大霉素C1a)和新化合物氢化奈替米星 ( 5′ 差向依替米星 ) ,由于它们的空间构象发生改变导致抗菌活性的降低。
关键词 催化氢化 5′-差向庆大霉素c1a 5′-差向依替米星 抗菌活性
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硒都黑猪NT5C1A基因组织表达特征及遗传多态性分析 被引量:3
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作者 乔木 武华玉 +3 位作者 彭兆坤 吴俊静 梅书棋 彭先文 《中国畜牧杂志》 CAS 北大核心 2022年第8期200-204,共5页
本实验旨在探究猪NT5C1A基因组织表达特征、遗传多态性及其与胴体和肉质性状的关系,为猪肉质性状的遗传改良提供新的分子标记。利用荧光定量PCR检测了NT5C1A基因在16个组织中的表达特征。采用PCR产物直接测序技术在硒都黑猪群体中对NT5... 本实验旨在探究猪NT5C1A基因组织表达特征、遗传多态性及其与胴体和肉质性状的关系,为猪肉质性状的遗传改良提供新的分子标记。利用荧光定量PCR检测了NT5C1A基因在16个组织中的表达特征。采用PCR产物直接测序技术在硒都黑猪群体中对NT5C1A基因的SNPs位点进行筛选鉴定,并利用SAS 8.0软件中的混合线性模型分析SNPs位点与猪胴体和肉质性状的相关性。结果显示:NT5C1A基因在腰大肌表达量最高;在硒都黑猪中存在3个SNPs位点,分别为rs81390049 C>T、rs81390048 A>G和rs339707155C>T突变。性状关联分析表明,3个SNPs位点均与猪胴体或肉质性状显著相关。这3个SNPs位点紧密连锁,形成3种单倍型,并且与猪胴体和肉质性状显著关联。综上,NT5C1A基因3个SNPs位点可作为猪肉质性状遗传改良的分子标记。 展开更多
关键词 NT5c1a基因 组织表达谱 单核苷酸多态性 关联分析
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大孔弱酸树脂纯化庆大霉素单组分C1a 被引量:1
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作者 李亚军 林惠敏 +2 位作者 陈代杰 孟宪纬 李继安 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期264-269,共6页
为从庆大霉素发酵产物中分离得到高纯度的C1a单组分(1),本试验采用单因素法考察了不同类型大孔弱酸树脂(D 152、D 155、D 157、HD-2、XR 140B和XR 157型)对1的吸附和解吸附能力,以及粗提液的pH值、流速和解吸液氨水浓度对纯化产物中1的... 为从庆大霉素发酵产物中分离得到高纯度的C1a单组分(1),本试验采用单因素法考察了不同类型大孔弱酸树脂(D 152、D 155、D 157、HD-2、XR 140B和XR 157型)对1的吸附和解吸附能力,以及粗提液的pH值、流速和解吸液氨水浓度对纯化产物中1的纯度及杂质西索米星含量的影响。静态吸附法筛选结果显示,D157大孔弱酸树脂的分离效果和效率较好。动态吸附法的优选条件如下:将粗提液调节至pH 8.0~9.0,流速0.8 BV/h,洗脱液为0.15 mol/L氨水溶液,解吸流速为0.2 BV/h,树脂柱高径比4∶1。按照上述优化结果,最终可获得HPLC纯度93%以上、主要杂质西索米星降低至2.0%以下的高纯度1,可作为中间体用于合成依替米星。 展开更多
关键词 庆大霉素c1a 依替米星 西索米星 分离纯化 大孔弱酸树脂
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庆大霉素C1a生产过程中不同样品的HPLC法检测 被引量:4
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作者 丁碧粉 张韬 +2 位作者 李继安 陈代杰 林惠敏 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期310-315,共6页
参照美国药典USP37-NF32版,采用柱前衍生化-HPLC法测定庆大霉素C1a(1)对照品及生产阶段的不同样品。在检测经离子交换树脂HZ-732富集后的洗脱液样品B时出现1个新的杂质峰,且检测所得1的浓度明显偏低。经LCMS分析,推测该杂质为邻苯二甲醛... 参照美国药典USP37-NF32版,采用柱前衍生化-HPLC法测定庆大霉素C1a(1)对照品及生产阶段的不同样品。在检测经离子交换树脂HZ-732富集后的洗脱液样品B时出现1个新的杂质峰,且检测所得1的浓度明显偏低。经LCMS分析,推测该杂质为邻苯二甲醛(OPA)不足的情况下1与巯基乙酸在碱性条件下的结合产物。经方法优化,通过稀释样品、增加衍生化试剂量及增加衍生化试剂中OPA的量,均可准确检测不同样品中1的浓度和纯度。向衍生化试剂中增加OPA,更适用于1发酵生产过程中不同阶段样品的检测。 展开更多
关键词 庆大霉素c1a 发酵 柱前衍生化 高效液相色谱 测定
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C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型小鼠干眼表型及性别差异研究 被引量:6
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作者 王贵渠 赵琎 +2 位作者 徐海伟 王一 谢汉平 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期876-880,共5页
目的探讨C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型小鼠干眼体征严重程度及泪腺炎症反应与性别的关系。方法 C57BL/6.NOD-Aec1Aec2小鼠雌性和雄性组各45只,在生后第4、8、12、16、20周龄时进行泪液分泌实验(Schirmer’s testⅠ)、角膜荧光素... 目的探讨C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型小鼠干眼体征严重程度及泪腺炎症反应与性别的关系。方法 C57BL/6.NOD-Aec1Aec2小鼠雌性和雄性组各45只,在生后第4、8、12、16、20周龄时进行泪液分泌实验(Schirmer’s testⅠ)、角膜荧光素染色及评分和泪腺组织HE染色、炎症细胞浸润计数评估及角膜上皮细胞表面微绒毛扫描电镜观察。结果第4周龄时,C57BL/6.NODAec1Aec2雌、雄性小鼠均未出现明显的干眼体征。从第8周龄开始,随着周龄增加,2组小鼠泪液分泌值均逐渐减少;角膜荧光素染色及评分值均明显加重;HE染色显示泪腺组织腺管、腺泡等结构破坏及炎症细胞浸润程度逐渐加重;扫描电镜观察显示角膜上皮细胞脱落增多,微绒毛减少,细胞紧密连接减少或中断。第16周龄时,雌性小鼠组较同龄雄性小鼠组的泪液分泌值显著减少(P=0.035),角膜荧光素染色评分高(P=0.028),雌性小鼠泪腺组织破坏及炎症细胞浸润程度更严重(P=0.017)。结论雌性C57BL/6.NOD-Aec1Aec2干燥综合征模型成年小鼠干眼体征较雄性更为严重,推测可能与雌激素水平变化有关。 展开更多
关键词 干眼 C57BL/6.NOD-Aec1aec2小鼠 性别 炎症浸润
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高纯度庆大霉素C1a游离碱制备工艺研究
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作者 杨涛 陈舟舟 +5 位作者 王海东 李亚军 李继安 雷翔霄 陈代杰 储消和 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第11期1300-1306,共7页
目的探索用大孔吸附树脂层析法及盐析结晶法精制纯化硫酸依替米星起始物料—庆大霉素C1a成品(HPLC纯度91%~93%),从而减少由起始物料引入依替米星杂质的水平。方法以庆大霉素C1a吸附量和庆大霉素C1a纯度为指标,考察大孔吸附树脂纯化庆大... 目的探索用大孔吸附树脂层析法及盐析结晶法精制纯化硫酸依替米星起始物料—庆大霉素C1a成品(HPLC纯度91%~93%),从而减少由起始物料引入依替米星杂质的水平。方法以庆大霉素C1a吸附量和庆大霉素C1a纯度为指标,考察大孔吸附树脂纯化庆大霉素C1a的吸附性能和洗脱参数;以盐析后庆大霉素C1a样品纯度和盐析收率为指标,考察盐析工艺最佳温度、溶剂、酸的添加量及酸的种类。结果获得较优的树脂NM200,获得较优的解析液pH值为2.0和流速0.5BV/h。经过优化后,纯化收率从65%提高至74%。通过盐析结晶条件筛选和优化,确定室温先加溶剂后加硫酸(pH6.5)和甲醇与乙醇1:2的条件较优,优化后获得的庆大霉素C1a纯度达到98.2%,收率大于93%。研究了多种无机酸盐析结晶的情况,发现磷酸、硫酸和碳酸条件下能析出白色固体。结论通过比较大孔吸附树脂和盐析结晶的纯化连接,组合纯化后获得的庆大霉素C1a游离碱纯度大于99.0%,比纯化前样品提高6%以上,收率大于70%。 展开更多
关键词 庆大霉素c1a 大孔吸附树脂 盐析结晶
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树脂在庆大霉素C1a发酵中的应用及相关调控
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作者 詹佳弘 杨子艳 +2 位作者 张建斌 李继安 林惠敏 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期906-911,共6页
在庆大霉素C1a(1)发酵过程中利用树脂投放并优化发酵条件,开发出一条能明显提高1效价且具有工业化应用价值的1发酵新工艺。首先采用静态吸附法,筛选出适合应用于1发酵、直径为0.4~0.6 mm的树脂001×8。将筛选出的001×8树脂于发... 在庆大霉素C1a(1)发酵过程中利用树脂投放并优化发酵条件,开发出一条能明显提高1效价且具有工业化应用价值的1发酵新工艺。首先采用静态吸附法,筛选出适合应用于1发酵、直径为0.4~0.6 mm的树脂001×8。将筛选出的001×8树脂于发酵24 h时投入发酵液中继续发酵,可将1发酵放罐效价提高至1.58 g/L,但树脂回收率仅为70%。后续在投放树脂的基础上,通过降低搅拌转速、提高通气量、增加罐压并采用流加补料方式,在保证树脂回收率为95%的同时将1发酵效价提高至1.85 g/L,相比原工艺的1.20 g/L提高了54.1%。 展开更多
关键词 庆大霉素c1a 树脂 搅拌转速 溶解氧浓度 流加补料
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血清CTRP9与LTBP-2对老年慢性心力衰竭患者不良心血管事件的预测价值 被引量:2
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作者 张超 程璐 +2 位作者 邵桂丽 姜少燕 卜晓翠 《心脏杂志》 2025年第2期148-151,161,共5页
目的探究血清补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)与潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP-2)对老年慢性心力衰竭(CHF)患者发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取2020年8月~2021年10月在青岛大学附属心血管病医院收治的150例... 目的探究血清补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9(CTRP9)与潜在转化生长因子β结合蛋白2(LTBP-2)对老年慢性心力衰竭(CHF)患者发生主要不良心血管事件(MACE)的预测价值。方法选取2020年8月~2021年10月在青岛大学附属心血管病医院收治的150例经检查确诊的老年CHF患者作为研究对象,对患者进行12个月随访,45例患者发生MACE作为MACE组,105例患者未发生MACE为无MACE组。比较MACE组与无MACE组患者血清CTRP9、LTBP-2水平。ROC曲线分析CTRP9、LTBP-2对老年CHF患者发生MACE的预测价值。Logistic回归分析影响老年CHF患者发生MACE的因素。结果与无MACE组相比,MACE组LVEDD、LVESD、BNP水平升高,LVEF水平降低(均P<0.01)。血清LTBP-2水平升高,CTRP9水平降低(均P<0.01)。ROC分析显示血清CTRP9水平评估MACE发生的AUC是0.772,截断值为137.50μg/L,灵敏度为73.30%,特异度为66.70%;LTBP-2水平评估MACE发生的AUC是0.771,截断值为20.02μg/L,灵敏度为71.10%,特异度为61.90%,二者联合检测的灵敏度为84.40%,特异度为80.00%,AUC为0.889(95%CI:0.838~0.940)。多因素Logistic回归分析显示,LTBP-2是影响患者发生MACE的危险因素,CTRP9为保护因素(均P<0.01)。结论血清CTRP9和LTBP-2对评估老年CHF患者MACE的发生有一定的诊断价值。 展开更多
关键词 老年慢性心力衰竭 补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白9 潜在转化生长因子β结合蛋白2 主要不良心血管事件 预测价值
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亲子关系对青少年攻击行为的影响:正念的中介作用和NR3C1基因rs41423247多态性的调节作用 被引量:1
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作者 胡义秋 何震 +3 位作者 曾子豪 刘双金 杨琴 方晓义 《心理发展与教育》 北大核心 2025年第4期561-570,共10页
采用基因×环境(G×E)研究设计,使用问卷法和DNA分型技术,以701名初中生为被试,引入环境变量(亲子关系)和重要基因位点(NR3C1基因rs41423247),构建了一个有调节的中介模型,考察青少年攻击行为的发生机制。并结合积极心理学的视... 采用基因×环境(G×E)研究设计,使用问卷法和DNA分型技术,以701名初中生为被试,引入环境变量(亲子关系)和重要基因位点(NR3C1基因rs41423247),构建了一个有调节的中介模型,考察青少年攻击行为的发生机制。并结合积极心理学的视角,引入正念这一积极心理特质,进一步探讨基因与环境的交互作用是否对个体的正念水平产生影响。结果表明:(1)正念在亲子关系对青少年攻击行为的影响中发挥中介作用;(2)rs41423247多态性与亲子关系的交互作用显著预测正念,且这种交互作用模式符合不同易感性模型。具体表现为,在消极亲子关系环境中,携带C/C基因型的青少年正念水平低于携带G/G和G/C基因型的青少年。而在积极亲子关系环境中,携带C/C基因型的青少年正念水平高于携带G/G和G/C基因型的青少年。 展开更多
关键词 亲子关系 正念 青少年攻击行为 NR3C1基因rs41423247多态性
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S/D处理法和干热法用于C1酯酶抑制剂病毒灭活的效果验证
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作者 杨立宏 岳广智 +2 位作者 徐宏山 刘欣玉 叶强 《药物分析杂志》 北大核心 2025年第1期104-109,共6页
目的:验证运用有机溶剂/去污剂(S/D)处理法和干热法对C1酯酶抑制剂(C1-INH)中病毒灭活效果。方法:采用S/D处理法灭活含S/D样品中添加的辛德毕斯病毒,噬斑滴定法检测灭活前后的病毒滴度,-干热法灭活脑心肌炎病毒(EMCV)和猪细小病毒(PPV)... 目的:验证运用有机溶剂/去污剂(S/D)处理法和干热法对C1酯酶抑制剂(C1-INH)中病毒灭活效果。方法:采用S/D处理法灭活含S/D样品中添加的辛德毕斯病毒,噬斑滴定法检测灭活前后的病毒滴度,-干热法灭活脑心肌炎病毒(EMCV)和猪细小病毒(PPV),细胞病变法检测灭活前后的病毒滴度。结果:经S/D处理法灭活后,3批含S/D样品中辛德毕斯病毒降低量分别为>4.35 lg PFU·mL^(-1)、>4.51 lg PFU·mL^(-1)、>4.64 lg PFU·mL^(-1)。经干热法灭活后,3批不含S/D样品中EMCV降低量分别为≥5.38 lg TCID_(50)/0.1 mL、≥5.12 lg TCID_(50)/0.1 mL、≥5.25 lg TCID_(50)/0.1 mL,PPV降低量分别为4.57 lg TCID_(50)/0.1 mL、4.18 lg TCID_(50)/0.1 mL、4.68 lg TCID_(50)/0.1 mL。结论:通过对指示病毒的验证效果评估,证明S/D法和干热法对C1-INH中的辛德毕斯病毒、EMCV和PPV均有较好的灭活效果。 展开更多
关键词 有机溶剂/去污剂处理法 干热法 C1酯酶抑制剂 病毒灭活 辛德毕斯病毒 脑心肌炎病毒 猪细小病毒
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CTRP3介导UCHL1增强SeVGMT重编程CFs保护MI小鼠心功能的研究
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作者 宋延彬 张云清 +1 位作者 刘惠玉 陈俊民 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第10期1896-1907,共12页
目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)增强仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)治疗心肌梗死(MI)小鼠的作用机制,并分析泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)是否介导该治疗途径。方法将小鼠分为7... 目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)增强仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)治疗心肌梗死(MI)小鼠的作用机制,并分析泛素羧基末端水解酶L1(UCHL1)是否介导该治疗途径。方法将小鼠分为7组(n=12):Sham组、MI组、SeVGMT组、CTRP3-Lv组、UCHL1-sh组、SeVGMT+CTRP3-Lv组和SeVGMT+CTRP3-Lv+UCHL1-sh组。Sham组小鼠仅切开皮肤不结扎,其他组小鼠在左心耳下方2~3 mm处结扎冠状动脉。结扎30 min后,Sham组和MI组小鼠MI边界3个点分别注射PBS;其他组小鼠按分组情况分别注射SeVGMT、CTRP3-Lv或UCHL1-sh。治疗4周后,检测小鼠短轴缩短率(FS)、射血分数(EF)、左室舒张末期内径(LVIDd)、左心室收缩末期内径(LVIDs)、心率(HR)、平均动脉压(MAP)、血清肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)、心肌肌钙蛋白I(cTnI)和乳酸脱氢酶(LDH)水平、心肌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素(IL)-1β和IL-6水平。采用2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)、苏木精-伊红(HE)、Masson三色和末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色检测心肌组织病理变化。采用qRT-PCR检测心肌中CTRP3和UCHL1的mRNA表达水平。采用Western blot或免疫组化染色检测心肌CTRP3、UCHL1、Ⅰ型胶原蛋白(collagenⅠ)、Ⅲ型胶原蛋白(collagenⅢ)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)和B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)的蛋白表达水平。结果与SeVGMT组和CTRP3-Lv组比较,SeVGMT+CTRP3-Lv组小鼠的EF、FS、HR和MAP水平升高(P<0.05),LVIDd、LVIDs、CK-MB、cTnI、LDH、TNF-α、IL-1β和IL-6水平均降低(P<0.05);MI面积、纤维化面积和TUNEL阳性率均降低(P<0.05),collagen Ⅰ、collagen Ⅲ和Bax蛋白水平降低(P<0.05),Bcl-2蛋白水平升高(P<0.05);CTRP3和UCHL1的mRNA和蛋白水平以及相对染色强度均升高(P<0.05)。与SeVGMT+CTRP3-Lv组比较,加用UCHL1-sh处理(SeVGMT+CTRP3-Lv+UCHL1-sh组)显著削弱了SeVGMT+CTRP3-Lv对上述指标的影响(P<0.05)。结论CTRP3介导UCHL1增强了SeVGMT重编程CFs对小鼠MI的治疗作用。 展开更多
关键词 心肌梗死 C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3 SeVGMT 重编程 心脏纤维母细胞 泛素羧基末端水解酶L1
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共存中的竞争:中美俄“C5+1”机制间关系 被引量:1
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作者 周明 林宇晴 《国际展望》 北大核心 2025年第4期71-95,164,共26页
近年来,中美俄“C5+1”机制在中亚地区形成了共存中竞争的局面。三国间“无声的协调”、中亚国家对区域身份的认可以及机制和政策的扩散,共同促成了三国“C5+1”机制在中亚地区的共存,但中美俄在中亚地区的机制竞争也日益凸显。梳理并... 近年来,中美俄“C5+1”机制在中亚地区形成了共存中竞争的局面。三国间“无声的协调”、中亚国家对区域身份的认可以及机制和政策的扩散,共同促成了三国“C5+1”机制在中亚地区的共存,但中美俄在中亚地区的机制竞争也日益凸显。梳理并比较中美俄创建“C5+1”机制的战略目标后发现,三国“C5+1”机制在中亚的竞争,在侧重领域、比较优势和投入力度方面均存在差异。相较中国聚焦于打造“和合”关系,美国侧重于权力竞争,俄罗斯注重恢复主导地位。中美俄三国分别通过雄厚经济实力和规范性理念、软实力、历史文化联系等方式吸引中亚国家参与机制建设,但在机制建设的投入上不尽相同。在中美俄战略博弈加剧的背景下,三国“C5+1”机制虽呈现出竞争力度加剧、竞争领域扩大、竞争层级上升的趋势,但也存在机制合作的空间。未来,中美俄围绕中亚区域政治、经济、安全秩序的竞争仍将持续。 展开更多
关键词 “C5+1”机制 中亚地区 竞争性共存 中国—中亚命运共同体
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金银花糖基转移酶基因的原核表达及其编码蛋白纯化
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作者 蔡芷辰 赵君谊 +2 位作者 陈海杰 刘训红 王进 《中草药》 北大核心 2025年第4期1338-1345,共8页
目的以金银花Lonicerae Japonicae Flos中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶LjUGT73C1基因的生物信息学分析、基因合成与亚克隆、表达分析和纯化。方法利用前期盐胁迫金银花组学研究构建的金银花转录组数据库注释信息,筛选得到金银... 目的以金银花Lonicerae Japonicae Flos中糖基转移酶为研究对象,进行糖基转移酶LjUGT73C1基因的生物信息学分析、基因合成与亚克隆、表达分析和纯化。方法利用前期盐胁迫金银花组学研究构建的金银花转录组数据库注释信息,筛选得到金银花中关键糖基转移酶LjUGT73C1,进行基因合成和亚克隆;利用基因重组技术构建了原核表达载体Pet-30a-LjUGT73C1,遗传转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态;应用SDS-PAGE凝胶电泳和Western blotting检测蛋白的表达量、检测不同诱导条件下基因的表达情况,最后经亲和色谱进行纯化。结果通过基因合成与亚克隆得到糖基转移酶LjUGT73C1的全长序列,理论编码氨基酸数目为493,等电点(PI)预测为6.27,理论相对分子质量为55530。构建了LjUGT73C1基因的原核表达载体并且在大肠杆菌中诱导表达得到重组蛋白,应用His亲和色谱柱进行蛋白纯化并经SDS-PAGE凝胶电泳检测,确定为金银花LjUGT73C1蛋白。结论首次报道了盐胁迫金银花中糖基转移酶基因LjUGT73C1,并进行表达分析和纯化,为进一步研究金银花中苯丙素的生物合成及表达调控研究奠定了基础。 展开更多
关键词 金银花 LjUGT73C1基因 生物信息分析 原核表达 蛋白纯化
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CTRP3调控SeVGMT重编程心脏纤维母细胞为心肌样细胞的机制
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作者 宋延彬 张云清 +1 位作者 刘惠玉 陈俊明 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第8期14-28,共15页
目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)调控仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)为心肌样细胞(iCMs)的效率及作用机制。方法将CFs分为Control组、NC-Lv组、CTRP3-Lv组、NC-sh组和CTRP3-sh... 目的探究C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)调控仙台病毒(SeV)载体过表达Gata4、Mef2c和Tbx5(SeVGMT)重编程心脏纤维母细胞(CFs)为心肌样细胞(iCMs)的效率及作用机制。方法将CFs分为Control组、NC-Lv组、CTRP3-Lv组、NC-sh组和CTRP3-sh组。使用Lipofectamine 3000试剂将NC-Lv、CTRP3-Lv、NC-sh和CTRP3-sh转染至CFs,转染48 h。然后将Lipofectamine 3000试剂与SeVGMT混合并在室温下孵育48 h,更换培养基后继续培养21 d。显微镜下观察不同培养时间点(0、3、7、14、21 d)的细胞形态。通过细胞免疫荧光、RT-qPCR和Western blot检测不同时间点的心肌特异性蛋白α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的表达,并计算不同时间点的跳动细胞比例。结果随着培养时间的延长,各组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的上述心肌特异性蛋白的表达水平较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养3、7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中α-MHC、α-actin、cTnT、Cx43、Actc1和Myh6的相对荧光强度、mRNA和蛋白水平均显著降低(P<0.05)。培养7 d时,各组CFs中出现跳动细胞,随着培养时间的延长,各组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05),并且培养14 d时的跳动细胞比例较培养7 d时大幅度升高(P<0.05)。培养7、14和21 d时,与NC-Lv组比较,CTRP3-Lv组CFs中的跳动细胞比例显著升高(P<0.05)。与NC-sh组比较,CTRP3-sh组CFs中的跳动细胞比例显著降低(P<0.05)。结论CTRP3可增强SeVGMT重编程CFs为iCMs。 展开更多
关键词 心肌梗死 C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3 SeVGMT 重编程 心脏纤维母细胞 心肌样细胞
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妊娠糖尿病患者血清CTRP9水平与胰岛素抵抗的相关性
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作者 崔爽 陈海英 夏春玲 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第10期954-957,共4页
研究妊娠糖尿病(GDM)患者血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9(CTRP9)水平的变化规律,分析CTRP9水平与胰岛素抵抗的相关性。GDM患者血清CTRP9水平升高与胰岛素抵抗以及炎性细胞因子密切相关,应用CTRP9联合稳态模型评估胰岛素抵抗指数筛查GD... 研究妊娠糖尿病(GDM)患者血清C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9(CTRP9)水平的变化规律,分析CTRP9水平与胰岛素抵抗的相关性。GDM患者血清CTRP9水平升高与胰岛素抵抗以及炎性细胞因子密切相关,应用CTRP9联合稳态模型评估胰岛素抵抗指数筛查GDM的发生,具有重要临床意义。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 C1q/肿瘤坏死因子相关蛋白-9 胰岛素抵抗 脂联素 相关性
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虎杖及虎杖苷对肥胖小鼠脂肪组织脂质沉积的影响
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作者 徐碧林 盛鲁光 +4 位作者 刘丹丹 刘维斌 雷涛 陈清光 陆灏 《中成药》 北大核心 2025年第9期2912-2917,共6页
目的探讨虎杖及虎杖苷对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂肪组织脂质沉积的影响。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组(10只)和高脂饲料组(30只),正常组给予常规饲料,高脂饲料组给予高脂饲料,饲喂8周,建立肥胖模型。将造模成功的小鼠随机... 目的探讨虎杖及虎杖苷对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂肪组织脂质沉积的影响。方法将40只雄性C57BL/6J小鼠随机分为正常组(10只)和高脂饲料组(30只),正常组给予常规饲料,高脂饲料组给予高脂饲料,饲喂8周,建立肥胖模型。将造模成功的小鼠随机分为模型组、虎杖苷组(250 mg/kg)、虎杖组(4.5 g/kg),每组8只,继续给予高脂饲料喂养的同时灌胃给予相应剂量药物,干预8周,每周测定小鼠体质量。给药结束后,检测血清TG、TC、LDL水平;HE染色观察脂肪组织形态学改变;RT-qPCR法检测脂肪组织AMPK、SREBP-1c、FAS mRNA表达;Western blot法检测脂肪组织p-AMPK、SREBP-1c、FAS蛋白表达。结果与正常组比较,模型组小鼠体质量、腹股沟脂肪质量、附睾脂肪质量均增加(P<0.05);血清TG、TC、LDL水平升高(P<0.05);腹股沟脂肪和附睾脂肪细胞体积增大(P<0.01);腹股沟脂肪组织p-AMPK蛋白表达降低(P<0.01),SREBP-1c、FAS mRNA和蛋白表达均升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,虎杖组及虎杖苷组小鼠体质量、腹股沟脂肪质量均降低(P<0.05);血清TG、TC水平降低(P<0.05);腹股沟脂肪细胞缩小(P<0.01);腹股沟脂肪组织p-AMPK蛋白表达升高(P<0.01),SREBP-1c、FAS mRNA和蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01)。结论虎杖及虎杖苷能上调脂肪组织中p-AMPK表达,下调SREBP-1c、FAS表达,可能通过抑制脂肪合成发挥降低肥胖小鼠体质量的作用。 展开更多
关键词 虎杖 虎杖苷 肥胖 脂质沉积 AMPK SREBP-1C FAS
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血清miR-210、TSG-6、CTRP3水平与扩张型心肌病患者心肌纤维化及预后的关系
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作者 王叶宝 林永萍 +1 位作者 刘玲 李建民 《实用医学杂志》 北大核心 2025年第23期3690-3696,共7页
目的探讨血清微小RNA-210(miR-210)、肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)、补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)与扩张型心肌病(DCM)患者心肌纤维化及预后的相关性。方法选取2024年3—8月泰州市人民医院收治的117例DCM患者(DCM组)。根据DC... 目的探讨血清微小RNA-210(miR-210)、肿瘤坏死因子α刺激基因6(TSG-6)、补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)与扩张型心肌病(DCM)患者心肌纤维化及预后的相关性。方法选取2024年3—8月泰州市人民医院收治的117例DCM患者(DCM组)。根据DCM患者心脏磁共振检查,分为纤维化组(n=96)和非纤维化组(n=21)。根据DCM患者1年内预后随访是否发生急性心力衰竭,分为心衰组(n=47)和非心衰组(n=70)。同期选取58例健康志愿者(健康对照组)。比较各组血清miR-210、TSG-6、CTRP3、Ⅲ型前胶原N端肽(PⅢNP)、左室射血分数(LVEF)、N末端B型利钠肽(NT-proBNP)。结果DCM组血清miR-210、TSG-6、PⅢNP、NT-proBNP水平高于健康对照组,CTRP3、LVEF低于健康对照组(P<0.05)。纤维化组血清miR-210、TSG-6、PⅢNP、NT-proBNP水平高于非纤维化组,CTRP3、LVEF低于非纤维化组(P<0.05)。心衰组血清miR-210、TSG-6、PⅢNP、NT-proBNP水平高于非心衰组,CTRP3、LVEF低于非心衰组(P<0.05)。血清miR-210、TSG-6水平与血清PⅢNP、NT-proBNP水平呈正相关(P<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05)。血清miR-210高水平(OR=2.065,95%CI=1.116~3.821)、TSG-6高水平(OR=1.047,95%CI=1.013~1.083)是DCM患者发生心衰的危险因素(P<0.05),而血清CTRP3高水平(OR=0.911,95%CI=0.849~0.978)是保护性因素(P<0.05)。血清miR-210、TSG-6、CTRP3预测DCM患者发生心衰的灵敏度分别为72.34%、74.47%、74.47%,特异度分别为62.86%、62.86%、68.57%(AUC=0.669,AUC=0.712,AUC=0.759)。结论DCM患者血清miR-210、TSG-6上调,CTRP3下调,并且与心肌纤维化和心功能密切相关。miR-210、TSG-6、CTRP3对DCM预后有较好的预测价值。 展开更多
关键词 扩张型心肌病 心肌纤维化 预后 微小RNA-210 肿瘤坏死因子α刺激基因6 补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白3
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口腔鳞状细胞癌组织中醛酮还原酶AKR1C3的表达及与预后的关系
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作者 周婷 张晓昕 +3 位作者 张磊 金萬勇 泥艳红 胡勤刚 《临床与实验病理学杂志》 北大核心 2025年第9期1200-1205,共6页
目的探讨醛酮还原酶AKR1C3在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及与患者预后的关系。方法采用免疫组化染色检测86例OSCC肿瘤组织和癌旁组织中AKR1C3的表达,分析AKR1C3的表达与患者临床预后的相关性;应用Kaplan... 目的探讨醛酮还原酶AKR1C3在口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中的表达及与患者预后的关系。方法采用免疫组化染色检测86例OSCC肿瘤组织和癌旁组织中AKR1C3的表达,分析AKR1C3的表达与患者临床预后的相关性;应用Kaplan-Meier法对OSCC患者进行生存期分析,运用Cox回归模型对OSCC患者预后进行单因素和多因素分析,并与TCGA数据库结果比对验证。结果AKR1C3在OSCC肿瘤组织表达显著高于癌旁正常组织,肿瘤浸润前沿比肿瘤中心高表达,在肿瘤细胞和肿瘤相关成纤维细胞呈高表达,肿瘤相关炎性细胞无表达。χ^(2)检验比较OSCC患者中AKR1C3不同表达水平与临床病理特征的关系,结果显示:AKR1C3的高表达与较高肿瘤分期(P=0.001)、淋巴结转移(P=0.023)、肿瘤分化程度低(P=0.018)、最差浸润方式(P=0.024)及浸润深度(P=0.012)密切相关。采用Kaplan-Meier生存曲线分析:AKR1C3高表达与OSCC患者的总生存期(P=0.004)、无瘤生存期(P=0.019)以及无转移生存期(P=0.05)相关。Cox回归模型预后分析,单因素分析表明AKR1C3在肿瘤细胞中高表达是患者的肿瘤分期(P<0.001)、淋巴结转移(P<0.001)、肿瘤分化程度(P<0.001)、最差浸润方式(P<0.001)和浸润深度(P<0.001)的高风险因素,进一步多因素分析显示AKR1C3在肿瘤细胞中高表达是OSCC患者的独立预后因素(P=0.025)。结论AKR1C3表达与OSCC患者预后密切相关,OSCC中AKR1C3高表达患者的预后差,提示AKR1C3在OSCC的发生、发展中起重要作用。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 AKR1C3 临床病理特征 预后
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机器人辅助经皮螺钉与开放复位固定Tile C1~2型骨盆骨折
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作者 司徒晓鹏 李灿辉 张颖 《中国矫形外科杂志》 北大核心 2025年第22期2038-2044,共7页
[目的]比较机器人辅助与常规通道螺钉固定Tile C1~2型骨盆骨折的效果。[方法]回顾性分析2020年6月—2023年8月本科收治的185例Tile C1~2型骨盆骨折患者的临床资料,根据医患沟通结果,93例接受天玑骨科机器人辅助微创螺钉固定(机器人组),9... [目的]比较机器人辅助与常规通道螺钉固定Tile C1~2型骨盆骨折的效果。[方法]回顾性分析2020年6月—2023年8月本科收治的185例Tile C1~2型骨盆骨折患者的临床资料,根据医患沟通结果,93例接受天玑骨科机器人辅助微创螺钉固定(机器人组),92例接受常规开放复位固定(常规组),比较两组围手术期、随访和影像资料。[结果]机器人组手术时间[(92.5±10.3)min vs(138.7±12.7)min,P<0.001]、置钉时间[(14.3±2.7)min vs(15.4±3.1)min,P=0.011]、切口长度[(1.4±0.4)cm vs(1.6±0.5)cm,P=0.003]、术中透视次数[(2.5±0.8)次vs(2.8±0.9)次,P=0.018]、术中失血量[(31.7±4.2)mL vs(52.9±6.7)mL,P<0.001]、住院时间[(9.3±2.1)d vs(10.2±2.4)d,P=0.007]、总并发症发生率[例(%),7(7.6)vs 17(18.4),P=0.027]、首次置钉成功率(95.7%vs 81.5%,P=0.002)、切口愈合等级[甲/乙/丙,(42/37/14)vs(27/40/25),P=0.039]均显著优于常规组。所有患者均获12个月以上随访,机器人组下地行走时间[(13.7±4.6)d vs(18.8±5.2)d,P<0.001]、临床愈合时间[(36.4±12.1)d vs(41.0±13.7)d,P=0.016]显著早于常规组。随时间推移,两组患者VAS、Majeed评分均显著改善(P<0.05),术前两组VAS、Majeed评分的差异均无统计学意义(P>0.05),但术后3个月和末次随访时,机器人组VAS评分[(3.1±1.0)vs(3.7±1.2),P<0.001;(2.2±0.7)vs(2.8±0.9),P<0.001]、Majeed评分[(85.3±3.2)vs(80.4±4.1),P<0.001;(90.1±1.8)vs(89.2±2.0),P=0.002]均显著优于常规组。影像方面,术后相应时间点,机器人组Matta评级、骨折愈合率均显著优于常规组(P<0.05)。[结论]对于Tile C1~2型骨盆骨折,天玑骨科机器人辅助微创经皮通道螺钉固定后住院天数缩短,有效缓解疼痛,促进骨折快速愈合,术后并发症较少,安全性高。 展开更多
关键词 TILE C1-2 型骨盆骨折 微创经皮通道螺钉固定 机器人辅助技术 徒手技术
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