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黑曲霉C112脂肪酶基因的克隆及异源表达优化
1
作者 徐鹏钧 曾柏全 +5 位作者 肖志红 李美群 张轩 李培旺 赵茜彤 颜丽安 《中国油脂》 北大核心 2025年第4期73-81,共9页
旨在为脂肪酶的改性及其工业化应用提供参考,基于黑曲霉C112菌株通过PCR扩增得到脂肪酶基因,对该基因进行了生物信息学分析,并运用基因工程技术构建了毕赤酵母GS115重组菌,对该重组菌诱导产生的脂肪酶进行了纯化,分析了该脂肪酶的酶学性... 旨在为脂肪酶的改性及其工业化应用提供参考,基于黑曲霉C112菌株通过PCR扩增得到脂肪酶基因,对该基因进行了生物信息学分析,并运用基因工程技术构建了毕赤酵母GS115重组菌,对该重组菌诱导产生的脂肪酶进行了纯化,分析了该脂肪酶的酶学性质,并通过单因素实验和响应面实验对该重组菌产酶条件进行了优化。结果表明:该脂肪酶基因片段长度为894 bp,理论分子质量为31.79 kDa,其氨基酸序列中存在一个新的五肽基序RHSLG;该脂肪酶最适反应温度和pH分别为40℃和4,具有良好的热稳定性和pH稳定性;重组菌最佳产酶条件为YNB添加量10.50 mL(100 mL BMMY培养基中)、接种量4.3%、每隔24 h添加1%甲醇、培养时间2.8 d,优化条件下所得重组脂肪酶活性达到78.92 U/mL,是优化前的1.79倍。综上,经克隆、异源表达优化的重组脂肪酶稳定性强、酶活性高。 展开更多
关键词 黑曲霉c112 脂肪酶 毕赤酵母 生物信息学 克隆
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黑曲霉C112纤维二糖酶基因的克隆与生物信息学分析 被引量：1
2
作者 朱永瑞 曾柏全 +1 位作者 曾磊 刘辉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期116-122,共7页
以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(Gen Bank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据库的Aspergillus ni... 以紫外诱变获得的高产纤维素酶黑曲霉C112菌株为模板,采用RT-PCR技术克隆黑曲霉C112的纤维二糖酶基因bgl(Gen Bank登录号:KP307454);该基因全长2 934 bp,含有非编码序列,编码860个氨基酸,等电点为4.70,核酸序列与数据库的Aspergillus niger(Gen Bank登录号JX982101.1)同源性达到了99%;生物信息学分析表明,纤维二糖酶为具有一定亲水性的稳定酸性分泌蛋白;二级结构以α-螺旋、β-折叠和无规则卷曲为结构元件;该基因经IPTG诱导重组蛋白表达,SDS-PAGE检测结果表明,重组表达产物的相对分子量约为93.3 k D,与预期相符;纤维二糖酶在大肠杆菌BL21中胞内融合表达,重组蛋白p NPG酶活为5.847U/m L,最适反应温度为50℃,最适p H值为5.0。 展开更多
关键词 黑曲霉c112 纤维二糖酶 克隆 生物信息学
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C_(112)作捕收剂浮选磷灰石和方解石及其机理的研究 被引量：8
3
作者 丁浩 崔林 《化工矿山技术》 1991年第4期20-24,共5页
研究表明十二烷基亚氨基二次甲基膦酸(C_(112))是磷灰石和方解石的良好捕收剂,再分别使用水玻璃或硫酸铝作调整剂,可以实现磷灰石与方解石的浮选分离。C_(112)与磷灰石和方解石表面活性质点Ca^(2+)发生了化学键合,在方解石表面还有C_(1... 研究表明十二烷基亚氨基二次甲基膦酸(C_(112))是磷灰石和方解石的良好捕收剂,再分别使用水玻璃或硫酸铝作调整剂,可以实现磷灰石与方解石的浮选分离。C_(112)与磷灰石和方解石表面活性质点Ca^(2+)发生了化学键合,在方解石表面还有C_(112)的钙盐生成,除化学吸附外,C_(112)在两矿物表面还存在物理吸附,其中方解石表面物理吸附成分较多。 展开更多
关键词 磷灰石 方解石 浮选 捕收剂 c112
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半固态B_4C/Y112复合材料磨损性能研究
4
作者 闫思聪 郝新 《铸造技术》 CAS 北大核心 2012年第3期274-276,共3页
研究了机械搅拌法制备的半固态B4C/Y112复合材料在不同载荷下的磨损性能。采用SEM对磨损面和磨屑显微组织进行了观察与分析,讨论了不同质量分数的B4C颗粒对磨损机制的影响。结果表明,基体和复合材料磨损质量损失都是随着载荷的增加而增... 研究了机械搅拌法制备的半固态B4C/Y112复合材料在不同载荷下的磨损性能。采用SEM对磨损面和磨屑显微组织进行了观察与分析,讨论了不同质量分数的B4C颗粒对磨损机制的影响。结果表明,基体和复合材料磨损质量损失都是随着载荷的增加而增加,磨损质量损失随B4C颗粒含量增加而减少。随着载荷增加,材料从轻微磨损向严重磨损转变。总体上讲,复合材料比基体的耐磨性好。 展开更多
关键词 机械搅拌 半固态 B4C/Y112复合材料 磨损性能
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