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广州地区无偿献血者HPA-1—6,15基因分型及频率调查 被引量:19
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作者 叶欣 付涌水 +6 位作者 罗广平 夏文杰 陈扬凯 丁浩强 邓晶 许茹 徐秀章 《中国输血杂志》 CAS CSCD 2008年第12期921-924,共4页
目的研究人类血小板基因多态性,为人类群体遗传学研究及临床输血实践提供重要数据和依据。方法通过PCR-SSP方法对广州地区706名无偿献血者的HPA1—6,15系统进行基因分型,并统计其频率。结果706份样本中HPA-3和-15基因型的杂合程度最高,... 目的研究人类血小板基因多态性,为人类群体遗传学研究及临床输血实践提供重要数据和依据。方法通过PCR-SSP方法对广州地区706名无偿献血者的HPA1—6,15系统进行基因分型,并统计其频率。结果706份样本中HPA-3和-15基因型的杂合程度最高,其a/a、a/b、b/b的频率分别为HPA-3:0.2918、0.4830、0.2252;HPA-15:0.2691、0.5170、0.2139,不配合率较高,均达到35%以上。HPA-1、-2、-4、-5系统均以a/a纯合子为主,a基因的频率范围为0.9583—0.9993,且均未发现b/b纯合子。1b、4b的基因频率很低,分别为0.0028和0.0007。本地区的HPA-1a与中国北方、英国白人、美国黑人有统计学差异(P<0.05)。HPA-2与中国南方、北方、美国黑人和日本人有统计学差异(P<0.05);HPA-5与英国白人和美国黑人存在统计学差异(P<0.05)。HPA-6频率分别为0.9575,0.0397,0.0028。结论本研究对广州地区HPA献血员的筛查可为建立HPA供者库和对探讨由HPA引起的免疫性疾病的预防和治疗提供相关数据和研究手段。 展开更多
关键词 人类血小板抗原(HPA) 基因频率 多态性 PCR-SSP
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水稻OsLEA2基因的克隆及表达分析 被引量:4
2
作者 胡廷章 吴应梅 +1 位作者 杨俊年 吴晓丽 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2012年第3期743-749,共7页
利用RT-PCR技术从水稻中克隆到OsLEA2的cDNA。序列分析表明,OsLEA2基因的读码框为312 bp,编码一个由103个氨基酸残基组成的蛋白,富含Ala、Lys、Glu、His、Val和Arg,不含Asn、Cys、Phe和Trp。OsLEA2蛋白的1~73位氨基酸残基形成LEA_1结... 利用RT-PCR技术从水稻中克隆到OsLEA2的cDNA。序列分析表明,OsLEA2基因的读码框为312 bp,编码一个由103个氨基酸残基组成的蛋白,富含Ala、Lys、Glu、His、Val和Arg,不含Asn、Cys、Phe和Trp。OsLEA2蛋白的1~73位氨基酸残基形成LEA_1结构域。OsLEA2蛋白的二级结构有3个α-螺旋构象区域,没有伸展的β-片层构象,为亲水蛋白。进化树分析表明OsLEA2属于第4组LEA蛋白的4A亚组,OsLEA2与4A亚组LEA蛋白的氨基酸一致性为29%~45%。实时定量RT-PCR分析表明表明OsLEA2基因在水稻的不同生长发育时期的不同组织中都能表达,在完熟期的根和穗中,OsLEA2基因的表达明显升高。 展开更多
关键词 水稻 OsLEA2 基因克隆 基因表达 序列分析
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载脂蛋白E基因缺陷(C57BL/6J-ApoE)小鼠血脂及病理组织学观察 被引量:12
3
作者 康爱君 田枫 +2 位作者 张阔 周淑佩 郑振辉 《中国比较医学杂志》 CAS 2006年第2期85-88,共4页
目的观察我部饲养的不同年龄、不同性别的载脂蛋白E基因缺陷小鼠的血脂及病理组织学状况。方法选取2月龄和6月龄C57BL/6J-ApoE小鼠,以C57BL/6J小鼠为对照组,测定血清中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和载脂蛋白B的含量... 目的观察我部饲养的不同年龄、不同性别的载脂蛋白E基因缺陷小鼠的血脂及病理组织学状况。方法选取2月龄和6月龄C57BL/6J-ApoE小鼠,以C57BL/6J小鼠为对照组,测定血清中甘油三酯、总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白和载脂蛋白B的含量;小鼠全心脏液氮骤冷,冰冻切片,油红O染色,观察动脉粥样硬化斑块的形成。结果C57BL/6J-ApoE小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白的含量显著高于同龄同性别C57BL/6J小鼠,高密度脂蛋白的含量显著低于同龄同性别C57BL/6J小鼠;不同性别、年龄的C57BL/6J-ApoE小鼠血脂变化差异显著;ApoE小鼠血清中载脂蛋白B水平显著高于同龄同性别C57BL/6J小鼠,且随年龄增长显著升高。6月龄ApoE小鼠主动脉切面可见脂质斑块。结论该模型小鼠较C57BL/6J小鼠血清中总胆固醇和低密度脂蛋白含量明显升高,高密度脂蛋白含量明显降低;血脂变化与年龄性别有关。6月龄时已形成脂质斑块,是研究动脉粥样硬化等心血管疾病较佳的动物模型。 展开更多
关键词 载脂蛋白E 基因缺陷小鼠 血脂
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胞囊线虫侵染后不同抗性大豆根系差异基因表达的初步分析 被引量:5
4
作者 刘大伟 陈立杰 段玉玺 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第4期1494-1498,共5页
本研究利用高通量测序技术对感病品种辽豆15和抗病品种灰皮支黑豆(ZDD2315)受大豆胞囊线虫侵染后早期根系基因表达谱进行了分析,研究胞囊线虫侵染后大豆根部诱导表达的差异基因。结果表明:灰皮支黑豆受大豆胞囊线虫侵染后诱导389个差异... 本研究利用高通量测序技术对感病品种辽豆15和抗病品种灰皮支黑豆(ZDD2315)受大豆胞囊线虫侵染后早期根系基因表达谱进行了分析,研究胞囊线虫侵染后大豆根部诱导表达的差异基因。结果表明:灰皮支黑豆受大豆胞囊线虫侵染后诱导389个差异基因上调表达,344个差异基因下调表达;辽豆15受大豆胞囊线虫侵染后诱导222个差异基因上调表达,691个差异基因下调表达。这些差异表达的基因与激素应答、转录因子、蛋白激酶、热激蛋白、防御酶系、PR蛋白等有关,推测这些基因可能在大豆与胞囊线虫的非亲和互作中起重要作用。 展开更多
关键词 大豆胞囊线虫 大豆 基因表达谱
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Molecular Cloning of a Glycyrrhiza uralensis F.Aquaporin GuPIP1 Up-regulated in Response to Drought,Salt and ABA Stress 被引量:8
5
作者 WANG Fang JIANG Yong +7 位作者 FENG Xue-chao XU Li-na LI Ming-tang LIANG Hai-tao LI Yong-ming ZHU Na LIU Yan-li MA Tong-hui 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2007年第1期52-57,共6页
A PCR-bosed homologous cloning strategy was used to identify aquaporin genes from the roots of Chinese licorice ( Glycyrrhiza uralertsis F. ). A 1236 bp cDNA with 870 bp open reading frame encoding a 290 amino acids... A PCR-bosed homologous cloning strategy was used to identify aquaporin genes from the roots of Chinese licorice ( Glycyrrhiza uralertsis F. ). A 1236 bp cDNA with 870 bp open reading frame encoding a 290 amino acids aquaporin ortholog, GuPIP1, was successfully cloned and characterized. The deduced GuPIP1 protein contains six putative transmembrane domains; two conserved NPA motifs as well as the MIP and PIP family signature sequences. A rabbit polyelonal antibody against N-terminal peptide of GuPIP1 corresponded to a 31 kDa GuPIP1 protein on Western blot of plasma membrane preparation of root tissue. RT-PCR and Western blot analysis indicated the expression of GuPIP1 in the root, leaf, and stem tissues. Thus far, GuPIP1 is the first Glycyrrhiza uralensis F. aquaporin that has been identified at a molecular level. Quantitative real-time PCR analysis showed that the expression of GuPIP1 was up-regulated in response to drought, ABA, and salt stress. 展开更多
关键词 AQUAPORIN CLONING Gtyeyrrhiza uralensis F. PIP c.ene regulation
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反义VEGF_(165)基因转染对人神经母细胞瘤生物学行为的影响 被引量:2
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作者 温铭杰 祁雅慧 邴国英 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期69-73,共5页
目的探讨反义VEGF165基因转染在抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长中的作用。方法构建正义和反义VEGF165真核表达载体,用脂质体转染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选稳定表达细胞克隆。应用RT-PCR证实外源性反义VEGFmRNA的表达,免疫细胞化... 目的探讨反义VEGF165基因转染在抑制肿瘤血管生成和肿瘤生长中的作用。方法构建正义和反义VEGF165真核表达载体,用脂质体转染人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y,G418筛选稳定表达细胞克隆。应用RT-PCR证实外源性反义VEGFmRNA的表达,免疫细胞化学和ELISA检测VEGF蛋白的表达水平,MTT法检测肿瘤细胞体外生长情况,并接种于裸鼠皮下,观察体内肿瘤增殖能力。结果RT-PCR证实转染反义VEGF的细胞中有外源性反义VEGFmRNA的表达,免疫细胞化学和ELISA显示VEGF蛋白表达明显降低,MTT实验显示转染前后细胞体外生长速度基本一致,而转染反义VEGF的肿瘤细胞裸鼠体内生长速度明显减慢。结论反义VEGF基因转染能够有效抑制SH-SY5Y细胞内源性VEGF蛋白的表达,抑制裸鼠体内肿瘤的生长。 展开更多
关键词 血管内皮细胞生长因子 神经母细胞瘤 反义 基因治疗
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散发高频听力下降人群中KCNQ4基因的突变筛查 被引量:1
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作者 李丽娜 李庆忠 +1 位作者 武文明 王秋菊 《听力学及言语疾病杂志》 CAS CSCD 2007年第1期25-27,共3页
目的了解高频听力下降型感音性神经聋患者是否存在KCNQ4基因突变,并检测其是否存在与已知的KCNQ4相同的或者是新的基因突变,了解它们对高频听力下降发病机制的影响。方法在门诊收集散发高频听力下降型感音神经性聋患者71例,另外选取正... 目的了解高频听力下降型感音性神经聋患者是否存在KCNQ4基因突变,并检测其是否存在与已知的KCNQ4相同的或者是新的基因突变,了解它们对高频听力下降发病机制的影响。方法在门诊收集散发高频听力下降型感音神经性聋患者71例,另外选取正常对照者40例。采取PCR扩增、直接测序的方法检测KCNQ4基因突变。结果KCNQ4基因中已经报道的和高频感音神经性听力损失有关的位点在实验组中未发现类似的突变,也没有发现可以引起氨基酸改变的新突变,只发现了几个多态性改变;在对照组中只发现了47bp的插入,没有发现47bp的缺失,也没有发现其他的多态性改变。结论KCNQ4基因的突变可能并不是引起散发高频听力下降的主要原因。 展开更多
关键词 高频听力下降 KCNQ4 基因突变 筛查
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野生型p53对涎腺多形性腺瘤细胞突变基因的修复 被引量:2
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作者 王旭 王洁 +2 位作者 董福生 董玉英 侯亚丽 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期144-147,共4页
目的检测涎腺多形性腺瘤基因突变方式及野生型 p53对突变基因的修复。方法留取4例涎腺多形性腺瘤新鲜标本,进行原代细胞培养。采用野生型 p53基因转染培养细胞,通过逆转录聚合酶链反应检测转染后的基因表达。提取转染后各例细胞 DNA 及... 目的检测涎腺多形性腺瘤基因突变方式及野生型 p53对突变基因的修复。方法留取4例涎腺多形性腺瘤新鲜标本,进行原代细胞培养。采用野生型 p53基因转染培养细胞,通过逆转录聚合酶链反应检测转染后的基因表达。提取转染后各例细胞 DNA 及对应的肿瘤组织 DNA,分别进行 PCR 反应扩增,聚丙烯酰胺凝胶电泳及核酸序列测定分析。结果 PCR-单链构象多态性分析屁示,3例出现异常电泳带。核酸序列测定结果显示,第6外显子的第203号密码子点突变;第8外显子的第272至290号密码子之间出现碱基缺失和碱基插入。野生型 p53转染后的细胞 DNA 序列分析显示,p53第6和第8外显子的5个突变位点均恢复正常。结论涎腺多形性腺瘤发生过程中具有较高频率的 p53基因突变,突变方式多样,涉及多个密码子;外源性野生型 p53可有效地修复涎腺多形性腺瘤细胞中突变的 p53基因位点。 展开更多
关键词 涎腺 腺瘤 多形性 基因 P53
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Wilson病ATP7B基因突变检测 被引量:6
9
作者 蒋黎敏 张晓青 +1 位作者 钱一磊 傅启华 《诊断学理论与实践》 2013年第4期406-409,共4页
目的:研究Wilson病(WD)患者基因突变的类型和发生情况,为本病的早期诊断提供理论依据。方法:提取13例WD患儿的基因组DNA,用聚合酶链反应法,对其ATP7B基因的21个外显子进行扩增,并用DNA测序方法对扩增产物进行测序分析。并选择100名健康... 目的:研究Wilson病(WD)患者基因突变的类型和发生情况,为本病的早期诊断提供理论依据。方法:提取13例WD患儿的基因组DNA,用聚合酶链反应法,对其ATP7B基因的21个外显子进行扩增,并用DNA测序方法对扩增产物进行测序分析。并选择100名健康儿童的样本作为对照,以排除发现的基因突变为多态性的可能。结果:13例WD患儿中,共发现7种错义突变,2种无义突变,其中最常见的突变方式为c.2333 G>T(p.Arg778Leu),占46.15%;其次为c.2975 C>T(p.Pro992Leu),占15.38%。21个外显子中,8号外显子发生突变的频率最高,为53.85%;其次为13号外显子,其突变频率为26.92%。结论:ATP7B基因的8、13号外显子是WD的突变热点,其中8号外显子以Arg778Leu、13号外显子以Pro992Leu为主要突变形式,基因检测可对WD患儿作出快速、准确的诊断。 展开更多
关键词 肝豆状核变性 ATP7B 基因 突变
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与人体肥胖相关的神经肽Y基因克隆及序列分析 被引量:5
10
作者 董萍 丁克祥 +5 位作者 杨永鹏 郑永晨 朱晓亮 单志新 韩晋云 丁宇 《国际护理学杂志》 2009年第2期257-259,共3页
目的克隆与肥胖相关的人神经肽Y(NPY)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法根据GeneBank中收录的NPY基因序列,设计该基因上下游序列,经过PCR反应合成NPY的cDNA,然后与pET28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,测序... 目的克隆与肥胖相关的人神经肽Y(NPY)基因,并鉴定该克隆基因序列的正确性。方法根据GeneBank中收录的NPY基因序列,设计该基因上下游序列,经过PCR反应合成NPY的cDNA,然后与pET28a+载体重组,筛选阳性克隆和DNA序列分析鉴定,测序后与GeneBank中NPY基因进行同源性比较和序列分析。结果PCR扩增出一个100bp左右的DNA片段,与载体重组后和DNA序列分析鉴定,DNA序列分析显示克隆的DNA片段是人NPY基因。且所克隆的基因共编码36个氨基酸,分子量为4.2kD,与GeneBank中NPY基因序列同源性达100%。结论克隆的人NPY基因与Genebank中NPY序列完全一致,为进一步应用分子生物学技术深入研究NPY与人体肥胖发生、发展及转化等相关作用机制及应用该基因进行其基因蛋白表达奠定了基础。 展开更多
关键词 肥胖 神经肽Y 基因克隆 DNA序列分析
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