目的探讨胰淀素(amylin)通过下丘脑室旁核(PVN)ERK通路对小鼠摄食行为的调控作用。方法将54只C57BL/6J小鼠随机分为多组开展实验。首先采用免疫荧光检测4只小鼠脑内ERK和降钙素受体(CTR)神经元的分布。通过化学损伤法建立PVN神经元损伤...目的探讨胰淀素(amylin)通过下丘脑室旁核(PVN)ERK通路对小鼠摄食行为的调控作用。方法将54只C57BL/6J小鼠随机分为多组开展实验。首先采用免疫荧光检测4只小鼠脑内ERK和降钙素受体(CTR)神经元的分布。通过化学损伤法建立PVN神经元损伤模型,将16只小鼠分为4组(每组4只):对照组(Ctrl)、鹅膏酸损毁组(IBO)、amylin组和amylin+IBO组,统计PVN区域ERK阳性神经元数量及摄食量。随后,将16只小鼠分为4组(每组4只):Ctrl组、amylin组、ERK拮抗剂U0126组、amylin+U0126组,通过Real-time PCR检测PVN即刻早期基因(c-fos)表达水平。免疫荧光检测Ctrl组和amylin组小鼠脑内p-ERK阳性神经元分布(每组4只)。最后,通过侧脑室注射,将18只小鼠随机分为3组(每组6只):Ctrl组、amylin组和amylin+受体拮抗剂AC187组,然后免疫荧光检测PVN区域p-ERK、神经型一氧化氮合酶(nNOS)及CTR免疫阳性神经元共表达,同步记录处理后3 h内的摄食量。结果ERK阳性神经元主要分布于视交叉上核(SCN)、弓状核(ARC)和蓝斑核(LC),而ERK和CTR共表达阳性神经元特异性富集于PVN(P<0.01)。PVN神经元损伤导致ERK阳性神经元数量减少(P<0.001),且阻断了amylin的抑食作用(P<0.001)。Amylin激活PVN区域c-fos基因表达(P<0.05),而该效应可被U0126抑制(P<0.05)。侧脑室注射amylin后,PVN中p-ERK、nNOS和CTR三标阳性神经元数量增加(P<0.05),添加AC187则阻断amylin的激活效应(P<0.01),并逆转amylin的抑食效应(1 h P=0.2218,2 h P=0.2218,3 h P=0.6974)。结论PVN中p-ERK神经元通过amylin受体依赖的ERK信号通路调控摄食行为。展开更多
文摘目的探讨胰淀素(amylin)通过下丘脑室旁核(PVN)ERK通路对小鼠摄食行为的调控作用。方法将54只C57BL/6J小鼠随机分为多组开展实验。首先采用免疫荧光检测4只小鼠脑内ERK和降钙素受体(CTR)神经元的分布。通过化学损伤法建立PVN神经元损伤模型,将16只小鼠分为4组(每组4只):对照组(Ctrl)、鹅膏酸损毁组(IBO)、amylin组和amylin+IBO组,统计PVN区域ERK阳性神经元数量及摄食量。随后,将16只小鼠分为4组(每组4只):Ctrl组、amylin组、ERK拮抗剂U0126组、amylin+U0126组,通过Real-time PCR检测PVN即刻早期基因(c-fos)表达水平。免疫荧光检测Ctrl组和amylin组小鼠脑内p-ERK阳性神经元分布(每组4只)。最后,通过侧脑室注射,将18只小鼠随机分为3组(每组6只):Ctrl组、amylin组和amylin+受体拮抗剂AC187组,然后免疫荧光检测PVN区域p-ERK、神经型一氧化氮合酶(nNOS)及CTR免疫阳性神经元共表达,同步记录处理后3 h内的摄食量。结果ERK阳性神经元主要分布于视交叉上核(SCN)、弓状核(ARC)和蓝斑核(LC),而ERK和CTR共表达阳性神经元特异性富集于PVN(P<0.01)。PVN神经元损伤导致ERK阳性神经元数量减少(P<0.001),且阻断了amylin的抑食作用(P<0.001)。Amylin激活PVN区域c-fos基因表达(P<0.05),而该效应可被U0126抑制(P<0.05)。侧脑室注射amylin后,PVN中p-ERK、nNOS和CTR三标阳性神经元数量增加(P<0.05),添加AC187则阻断amylin的激活效应(P<0.01),并逆转amylin的抑食效应(1 h P=0.2218,2 h P=0.2218,3 h P=0.6974)。结论PVN中p-ERK神经元通过amylin受体依赖的ERK信号通路调控摄食行为。
