目的:探究补骨膏对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠的骨保护作用及其对骨保护素(OPG)-核因子κB受体激活蛋白(RANK)-核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)信号通路的调控作用。方法:将36只大鼠随机分为假手术组(9只)和手术组(27只),手术组采用...目的:探究补骨膏对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠的骨保护作用及其对骨保护素(OPG)-核因子κB受体激活蛋白(RANK)-核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)信号通路的调控作用。方法:将36只大鼠随机分为假手术组(9只)和手术组(27只),手术组采用双侧卵巢切除建立PMOP大鼠模型。造模成功后,将24只PMOP大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组、补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组,然后予相应药物灌胃8周。骨密度仪检测股骨近端骨密度;Micro-CT三维重建分析股骨微结构;苏木精-伊红(HE)染色观察股骨组织病理形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、OPG水平,测定盒检测血清中磷、钙水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测股骨组织中OPG、RANK、RANKL蛋白表达水平;RT-qPCR法检测股骨组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA、精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA、OPG mRNA、RANK mRNA、RANKL mRNA表达水平。结果:假手术组大鼠股骨结构连续完整,骨小梁数目较多,形态较厚,结构致密;模型组大鼠股骨近端骨密度明显降低;补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组和戊酸雌二醇组大鼠股骨近端骨小梁数量、骨组织形态结构均得到不同程度改善。模型组大鼠骨密度及血清中钙、BALP、BGP、OPG水平均低于假手术组(P<0.01),血清磷水平高于假手术组(P<0.01);补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组及戊酸雌二醇组大鼠骨密度及血清中钙、BALP、BGP、OPG水平均高于模型组(P<0.05或P<0.01),血清磷低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠股骨组织OPG蛋白相对表达量低于假手术组(P<0.01),RANK、RANKL蛋白相对表达量均高于假手术组(P<0.01);补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组及戊酸雌二醇组大鼠股骨组织中OPG蛋白相对表达量高于模型组(P<0.05)或(P<0.01),RANK、RANKL蛋白相对表达量均低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠股骨组织TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA、MMP-9 m RNA、RANK m RNA、RANKL mRNA对表达量均高于假手术组(P<0.01),Arg-1 m RNA、TGF-β1 mRNA、OPG mRNA对表达量均低于假手术组(P<0.01);补骨膏高剂量组及戊酸雌二醇组大鼠股骨组织TNF-α mRNA、IFN-γ m RNA、MMP-9mRNA、RANK mRNA、RANKL mRNA相对表达量均低于模型组(P<0.01),Arg-1 mRNA、TGF-β1 mRNA、OPG m RNA相对表达量均高于模型组(P<0.01)。结论:补骨膏可能通过调控OPG-RANK-RANKL信号通路,抑制免疫炎症反应,调节骨基质胶原合成与降解,从而维持骨代谢平衡,改善PMOP大鼠骨密度及骨微结构病理损伤。展开更多
文摘目的:探究补骨膏对绝经后骨质疏松症(PMOP)大鼠的骨保护作用及其对骨保护素(OPG)-核因子κB受体激活蛋白(RANK)-核因子κB受体激活蛋白配体(RANKL)信号通路的调控作用。方法:将36只大鼠随机分为假手术组(9只)和手术组(27只),手术组采用双侧卵巢切除建立PMOP大鼠模型。造模成功后,将24只PMOP大鼠随机分为模型组、戊酸雌二醇组、补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组,然后予相应药物灌胃8周。骨密度仪检测股骨近端骨密度;Micro-CT三维重建分析股骨微结构;苏木精-伊红(HE)染色观察股骨组织病理形态;酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中骨碱性磷酸酶(BALP)、骨钙素(BGP)、OPG水平,测定盒检测血清中磷、钙水平;蛋白质印迹法(Western blotting)检测股骨组织中OPG、RANK、RANKL蛋白表达水平;RT-qPCR法检测股骨组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、干扰素-γ(IFN-γ)mRNA、精氨酸酶-1(Arg-1)mRNA、转化生长因子-β1(TGF-β1)mRNA、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA、OPG mRNA、RANK mRNA、RANKL mRNA表达水平。结果:假手术组大鼠股骨结构连续完整,骨小梁数目较多,形态较厚,结构致密;模型组大鼠股骨近端骨密度明显降低;补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组和戊酸雌二醇组大鼠股骨近端骨小梁数量、骨组织形态结构均得到不同程度改善。模型组大鼠骨密度及血清中钙、BALP、BGP、OPG水平均低于假手术组(P<0.01),血清磷水平高于假手术组(P<0.01);补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组及戊酸雌二醇组大鼠骨密度及血清中钙、BALP、BGP、OPG水平均高于模型组(P<0.05或P<0.01),血清磷低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠股骨组织OPG蛋白相对表达量低于假手术组(P<0.01),RANK、RANKL蛋白相对表达量均高于假手术组(P<0.01);补骨膏低剂量组、补骨膏高剂量组及戊酸雌二醇组大鼠股骨组织中OPG蛋白相对表达量高于模型组(P<0.05)或(P<0.01),RANK、RANKL蛋白相对表达量均低于模型组(P<0.01)。模型组大鼠股骨组织TNF-α mRNA、IFN-γ mRNA、MMP-9 m RNA、RANK m RNA、RANKL mRNA对表达量均高于假手术组(P<0.01),Arg-1 m RNA、TGF-β1 mRNA、OPG mRNA对表达量均低于假手术组(P<0.01);补骨膏高剂量组及戊酸雌二醇组大鼠股骨组织TNF-α mRNA、IFN-γ m RNA、MMP-9mRNA、RANK mRNA、RANKL mRNA相对表达量均低于模型组(P<0.01),Arg-1 mRNA、TGF-β1 mRNA、OPG m RNA相对表达量均高于模型组(P<0.01)。结论:补骨膏可能通过调控OPG-RANK-RANKL信号通路,抑制免疫炎症反应,调节骨基质胶原合成与降解,从而维持骨代谢平衡,改善PMOP大鼠骨密度及骨微结构病理损伤。
