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敲减BubR1表达对膀胱癌UMUC3细胞生物学行为的影响
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作者 董丰铭 刘屹立 《中华实用诊断与治疗杂志》 2024年第7期668-673,共6页
目的 探讨敲减BubR1表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 自TCGA数据库收集19例膀胱癌患者的癌组织标本和癌旁组织标本的BubR1 mRNA表达数据进行比较。自GEO数据库收集165例膀胱癌患者的癌相关基因GSE13507芯片数据... 目的 探讨敲减BubR1表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。方法 自TCGA数据库收集19例膀胱癌患者的癌组织标本和癌旁组织标本的BubR1 mRNA表达数据进行比较。自GEO数据库收集165例膀胱癌患者的癌相关基因GSE13507芯片数据及临床数据,比较膀胱癌组织与癌旁组织、表浅性膀胱癌与侵袭性膀胱癌、低级别膀胱癌与高级别膀胱癌、早期膀胱癌与晚期膀胱癌BubR1 mRNA相对表达量;以165例患者癌组织BubR1 mRNA相对表达量均值为界,比较78例高表达(BubR1 mRNA相对表达量≥8.68)与87例低表达(BubR1 mRNA相对表达量<8.68)者的总体生存率和特异性存活率。将用慢病毒感染的方法构建的稳转UMUC3细胞分为空白组(转染shRNA-NC)、转染1组(转染shRNA-BubR1-1)、转染2组(转染shRNA-BubR1-2),转染48 h,采用实时荧光定量PCR法检测BubR1 mRNA相对表达量,采用Western blot法检测BubR1蛋白相对表达量,选择敲减效率高的转染2组细胞进行后续实验。取空白组和转染2组细胞,采用细胞计数法检测转染后培养第1、2、3、4、5天增殖细胞数,采用细胞划痕实验检测转染后培养12、24 h时细胞划痕宽度,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭能力。结果 (1)19例膀胱癌患者癌组织BubR1 mRNA相对表达量(7.00±0.76)高于癌旁组织(1.22±0.38)(t=6.803,P<0.001)。(2)165例膀胱癌患者癌组织BubR1 mRNA相对表达量(8.68±0.08)高于癌旁组织(7.83±0.09)(t=5.862,P<0.001),侵袭性膀胱癌(9.60±0.14)高于表浅性膀胱癌(8.43±0.09)(t=4.207,P<0.001)、高级别膀胱癌(9.27±0.12)高于低级别膀胱癌(8.33±0.09)(t=6.472,P<0.001)、晚期膀胱癌(9.07±0.14)高于早期膀胱癌(8.45±0.09)(t=3.962,P<0.001)。BubR1高表达者总体生存率(42.21%)、膀胱癌特异性存活率(70.50%)均低于低表达者(56.78%、83.26%)(P<0.05)。(3)转染1组、转染2组BubR1 mRNA(0.47±0.02、0.19±0.01)及蛋白(0.42±0.04、0.13±0.02)相对表达量均低于空白组(1.00±0.08、1.00±0.07)(P<0.05),转染2组均低于转染1组(P<0.05)。(4)转染2组培养第4、5天增殖细胞数[(16.24±0.57)×10~4个、(27.74±0.84)×10~4个]均少于空白组[(18.77±0.41)×10~4个、(33.96±1.66)×10~4个](P<0.05),培养12、24 h细胞划痕宽度[(1.43±0.02)、(0.99±0.03)cm]均大于空白组[(1.29±0.01)、(0.42±0.01)cm](P<0.05),侵袭细胞数[(66.67±7.53)个]少于空白组[(122.30±7.84)个](P<0.05)。结论 BubR1在膀胱癌中呈高表达,敲减BubR1表达可抑制膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移及侵袭,BubR1可能是潜在的膀胱癌治疗靶点。 展开更多
关键词 膀胱癌 UMUC3细胞 BUBR1 增殖 迁移 侵袭
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