BsNPV感染油桐尺蠖及Bs484细胞的酯酶分析 被引量：4

1

作者 徐旭士 张超英 谢天恩 《中国病毒学》 CSCD 1994年第1期37-42,共6页

本文使用聚丙烯酰胺凝胶电泳及薄层扫描技术测定了油桐尺蠖Ｂｕｚｕｒａｓｕｐｐｒｅｓｓａｒｉａ和Ｂｓ４８４细胞感染核型多角体病毒后的酯酶（ＥＳＴ）含量及类型的变化。结果表明，油桐尺蠖中肠ＦＳＴ的含量和类型在病毒感染８小时... 本文使用聚丙烯酰胺凝胶电泳及薄层扫描技术测定了油桐尺蠖Ｂｕｚｕｒａｓｕｐｐｒｅｓｓａｒｉａ和Ｂｓ４８４细胞感染核型多角体病毒后的酯酶（ＥＳＴ）含量及类型的变化。结果表明，油桐尺蠖中肠ＦＳＴ的含量和类型在病毒感染８小时后就有明显的改变，随着感染时间延长，这二项指标都有较大的变化。而Ｂｓ４８４细胞的ＥＳＴ含量变化开始于病毒感染后３小时，细胞ＥＳＴ的类型则无改变。 展开更多

关键词 感染 酯酶 油桐尺蠖 核多角体病毒

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昆虫病毒多角体蛋白基因的克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：1

2

作者 齐义鹏 黄永秀 +1 位作者 沈英 尹义忠 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期25-31,共7页

将含有大尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)多角体蛋白基因(ocu)的BamHI-H片段克隆到表达载体pDR 540的BamHI位点,得到能抗高浓度氨苄青霉素(200μg/ml)的两个阳性重组体,其胞外总蛋白比亲本质粒高1.1—1.4倍。在大肠杆菌细胞中,BsNPV ocu基因... 将含有大尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)多角体蛋白基因(ocu)的BamHI-H片段克隆到表达载体pDR 540的BamHI位点,得到能抗高浓度氨苄青霉素(200μg/ml)的两个阳性重组体,其胞外总蛋白比亲本质粒高1.1—1.4倍。在大肠杆菌细胞中,BsNPV ocu基因在原核杂合启动子tac驱动下能高水平的表达,表达量达到0.8和4.7mg/ml。免疫沉淀反应证明,表达蛋白为BsNPV的包涵体蛋白,凝胶过滤法测定的平均分子量为32.1×10~3道尔顿。 展开更多

关键词 昆虫病毒 bsnpv ocu 表达蛋白

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组建油桐尺蠖核型多角体病毒基因组物理图谱的计算机方法 被引量：1

3

作者 陈海雷 刘年翠 《生物化学杂志》 CSCD 1990年第1期3-9,共7页

本文报道了一种双酶混合切割后用计算机对结果进行分析、比较及组建出物理图谱的方法。用Bam HⅠ、BglⅡ等限制性内切酶进行单酶双酶切割,计算出油桐尺蠖核型多角体病毒基因组DNA的分子量为120.23Kb,BamHⅠ切割DNA后产生10条带;BglⅡ切... 本文报道了一种双酶混合切割后用计算机对结果进行分析、比较及组建出物理图谱的方法。用Bam HⅠ、BglⅡ等限制性内切酶进行单酶双酶切割,计算出油桐尺蠖核型多角体病毒基因组DNA的分子量为120.23Kb,BamHⅠ切割DNA后产生10条带;BglⅡ切割后产生7条带。经计算机分析后打印出前者在物理图谱中的顺序为A(GE)C(HI)B(DFJ),后者在物理图谱中的顺序为AGC(EF)BD。在本文中还提出了组建图谱的计算机程序思想,并讨论了此法的可靠性。 展开更多

关键词 多角体病毒 bsnpv 物理图谱

原文传递

油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的病变研究 被引量：2

4

作者 徐旭士 《江西大学学报（自然科学版）》 1992年第3期243-246,257,共4页

本文报道了油桐尺蠖核型多角体病毒感染Bs484细胞的二种病变现象,并分析了其产生的原因及其意义。

关键词 感染 细胞病变 bsnpv 油桐尺蠖

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油桐尺蠖核多角体病毒的基因型变异 被引量：1

5

作者 吴远明 刘军 +2 位作者 兰萍章 梁布锋 张益民 《微生物学杂志》 CAS CSCD 1989年第3期55-60,共6页

本文用AvaⅡ、BamHⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ四种限制性内切酶对油桐尺蠖核多角体病毒(Buzvra suppressaria Nuclear PolyhedrosisVirus)DNA作酶解图谱分析,比较了湖北、湖南、四川三个分离株的基因组。三者图谱基本相似,但少数片段略有不同... 本文用AvaⅡ、BamHⅠ、EcoRⅠ和HindⅢ四种限制性内切酶对油桐尺蠖核多角体病毒(Buzvra suppressaria Nuclear PolyhedrosisVirus)DNA作酶解图谱分析,比较了湖北、湖南、四川三个分离株的基因组。三者图谱基本相似,但少数片段略有不同。亚克分子片段的存在表明野生的油桐尺蠖核多角体病毒有基因型变异,包含着数个基因型变种。 展开更多

关键词 bsnpv-DNA ENDONUCLEASE DIGESTION patterns Submolar FRAGMENTS Genotypie variation

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大尺蠖核多角体病毒多角体蛋白基因的物理图谱和部分序列测定 被引量：1

6

作者 张生家 齐义鹏 +1 位作者 黄永秀 裴子飞 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期42-48,共7页

分子杂交证明,大尺蠖核多角体病毒(BsNPV)的多角体蛋白基因(ocu)定位在BamHI-H片段上。进一步构建了该片段的XhoⅠ,SmaⅠ,Hind Ⅲ及PstⅠ的物理图谱,测定了377个核苷酸序列。由于在所测序列中具有杆状病毒ocu基因的典型特征,如14bp保守... 分子杂交证明,大尺蠖核多角体病毒(BsNPV)的多角体蛋白基因(ocu)定位在BamHI-H片段上。进一步构建了该片段的XhoⅠ,SmaⅠ,Hind Ⅲ及PstⅠ的物理图谱,测定了377个核苷酸序列。由于在所测序列中具有杆状病毒ocu基因的典型特征,如14bp保守序列和ATG上游的AT丰富区等,并经与AcNPV的ocu基因对比,我们认为,从BamH I-H片段5’端第26个核苷酸起始,包含了BsNPV ocu基因的全部序列。在ATG上游-15bp处有一个Xho Ⅰ位点,在此位点插入质粒pUC18的多聚接头,构建成带有多克隆位点的转移载体pBsA39。 展开更多

关键词 多角蛋白基因 物理图谱 bsnpv

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油桐尺蠖核多角体病毒多角体蛋白基因定位与克隆 被引量：4

7

作者 刘明富 胡志红 +2 位作者 金锋 李孟津 谢天恩 《中国病毒学》 CSCD 1992年第1期80-84,共5页

以[^(32)P]-dATP标记含AcNPV DNA的EcoRI-I片段的重组质粒为探针,在35℃条件下对油桐尺蠖核多角体病毒(BsNPV)多角体蛋白基因进行了定位,将其分别定位在BamH Ⅰ-A,Bgl Ⅰ-A,Bgl Ⅱ-F,EocR Ⅰ-R,Hind Ⅲ-A,Kpn Ⅰ-Ⅰ,Pst Ⅰ-D,Xba Ⅰ-A(... 以[^(32)P]-dATP标记含AcNPV DNA的EcoRI-I片段的重组质粒为探针,在35℃条件下对油桐尺蠖核多角体病毒(BsNPV)多角体蛋白基因进行了定位,将其分别定位在BamH Ⅰ-A,Bgl Ⅰ-A,Bgl Ⅱ-F,EocR Ⅰ-R,Hind Ⅲ-A,Kpn Ⅰ-Ⅰ,Pst Ⅰ-D,Xba Ⅰ-A(或B),Xho Ⅰ-F和G片段上,并以M13mp18为载体,克隆了Kpn Ⅰ-Ⅰ片段。 展开更多

关键词 油桐尺蠖 核多角体病毒

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油桐尺蠖核型多角体病毒在Bs484细胞中的感染特性研究 被引量：4

8

作者 徐旭士 谢天恩 《中国病毒学》 CSCD 1992年第3期289-295,共7页

本文研究了油桐尺蠖核型多角体病毒(简称BsNPV)在油桐尺蠖成虫卵巢细胞系(Bs484)中的以下感染特性:1.病毒接种传代3-4天的细胞时,病毒感染率最高;2.病毒按种量在一定范围内与感染细胞的多角体总产量平行;3.病毒在细胞中连续传代七次后... 本文研究了油桐尺蠖核型多角体病毒(简称BsNPV)在油桐尺蠖成虫卵巢细胞系(Bs484)中的以下感染特性:1.病毒接种传代3-4天的细胞时,病毒感染率最高;2.病毒按种量在一定范围内与感染细胞的多角体总产量平行;3.病毒在细胞中连续传代七次后其滴度无明显变化;4,病毒基因组在感染细胞后6小时左右开始合成,并于感染后14小时达到最大。此外,本实验还发展了一种用于检测感染细胞中的病毒核酸的简便方法。 展开更多

关键词 感染 油桐尺蠖 核多角体病毒

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油桐尺蠖核型多角体病毒的空斑测定 被引量：1

9

作者 胡志红 谢天恩 《中国病毒学》 CSCD 1991年第4期340-343,共4页

在油桐尺蠖卵巢细胞系上对油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)进行了空斑测定。用此方法测定了BsNPV的感染力,并将所得的结果与其TCID_(50)进行比较,结果显示这两种方法在测定病毒感染力时敏感性相似。

关键词 油桐尺蠖核型多角体病毒 空斑 半数组织培养感染剂量

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油桐尺蠖核型多角体病毒在同源和异源细胞中复制效果的比较 被引量：1

10

作者 梁布锋 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期84-86,共3页

自从昆虫细胞系建立以后,杆状病毒在体外系统中的复制一直是人们感兴趣的课题。油桐尺蠖核型多角体病毒(Bozura suppressaria Nuclear Polyhedrosis Virus,Bs一NPV)作为一种生物杀虫剂已成功地在茶园、杉木林中大面积使用,并已建立了对... 自从昆虫细胞系建立以后,杆状病毒在体外系统中的复制一直是人们感兴趣的课题。油桐尺蠖核型多角体病毒(Bozura suppressaria Nuclear Polyhedrosis Virus,Bs一NPV)作为一种生物杀虫剂已成功地在茶园、杉木林中大面积使用,并已建立了对该病毒敏感的细胞系。多粒包埋型核多角体病毒(MNPV)在体外复制成功的报道较多。有的MNPV在体外感染的范围较宽,不仅能感染同源的细胞系,亦能感染异源的细胞系。单粒包埋型核多角体病毒(SNPV)在体外复制的报道较少,且大多数SNPV仅在同源细胞系内增殖。BsNPV是一种SNPV。本文用BsNPV接种1种同源细胞和3种异源鳞翅目细胞,比较BsNPV的感染和复制规律的异同。 展开更多

关键词 油桐尺蠖 核多角体病毒 体外复制

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原位化学切割法对油桐尺蠖核型多角体病毒两种相似多肽的比较研究 被引量：1

11

作者 刘明富 谢天恩 《病毒学杂志》 CSCD 1991年第1期75-78,共4页

油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)自1978年分离以来,对其形态结构、形态发生、毒力测定、血清学、理化特性、安全性试验、剂型研究及大田应用等已进行了广泛的研究,其基因组物理图谱也已构建。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)研究Bs... 油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)自1978年分离以来,对其形态结构、形态发生、毒力测定、血清学、理化特性、安全性试验、剂型研究及大田应用等已进行了广泛的研究,其基因组物理图谱也已构建。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)研究BsNPV蛋白质时发现,多角体蛋白与病毒粒子的一种主要蛋白质的分子量非常接近, 展开更多

关键词 油桐尺蠖病毒 原位化学切割 bsnpv

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用微核试验测定几种茶树昆虫病毒对小白鼠的安全性 被引量：6

12

作者 陈海雷 叶林柏 刘年翠 《病毒学杂志》 CSCD 1991年第2期147-150,共4页

用一种快速简便的测定细胞染色体是否被损伤的方法(即微核试验)测定茶毛虫NPV、油茶尺蠖NPV及油桐尺蠖NPV对小白鼠的安全性,通过测定其骨髓中嗜多染红细胞微核的出现频率,证明无论是单独或是混合感染方式均不能测出这些病毒对骨髓细胞... 用一种快速简便的测定细胞染色体是否被损伤的方法(即微核试验)测定茶毛虫NPV、油茶尺蠖NPV及油桐尺蠖NPV对小白鼠的安全性,通过测定其骨髓中嗜多染红细胞微核的出现频率,证明无论是单独或是混合感染方式均不能测出这些病毒对骨髓细胞染色体有特定的损伤,而阳性对照环磷酰胺所诱发的微核率与其相比极为显著。此法可作为评价昆虫病毒对哺乳动物安全性的一个重要方法。 展开更多

关键词 昆虫病毒 安全试验 微核测定 茶

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油桐尺蠖卵巢细胞系BS-484克隆株特性的研究 被引量：2

13

作者 梁布锋 梁莉 邹帅洲 《病毒学杂志》 CSCD 1989年第4期402-407,共6页

通过有限稀释法由Bs—484细胞系中成功地分离出四个克隆株(Bs—484B,E,F,G)。克隆细胞侏的生长特性不同于原细胞株Bs—484,各克隆株之间的形态特征、细胞倍增时间、以及在维持油桐尺蠖核型多角体病毒的复制能力等方面均有差异。用三种... 通过有限稀释法由Bs—484细胞系中成功地分离出四个克隆株(Bs—484B,E,F,G)。克隆细胞侏的生长特性不同于原细胞株Bs—484,各克隆株之间的形态特征、细胞倍增时间、以及在维持油桐尺蠖核型多角体病毒的复制能力等方面均有差异。用三种同工酶(乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶和酯酶)比较了各克隆株与原细胞株之间的异同。 展开更多

关键词 油桐尺蠖 核多角体病毒 克隆

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^(125)Ⅱ标记病毒DNA探针制备方法的研究

14

作者 谌济国 吴远明 《病毒学杂志》 CSCD 1990年第4期404-409,共6页

本文报道以油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)DNA、单纯疤疹病毒(HSV)DNA、λDNA为材料,用国产^(125)I-碘化钠制备探针。探讨了离子强度,pH值、反应温度及时间诸因素对以三氯化铊为氧化剂核酸标记的影响。在pH值为4.8—4.9,离子强度(以Na^+... 本文报道以油桐尺蠖核型多角体病毒(BsNPV)DNA、单纯疤疹病毒(HSV)DNA、λDNA为材料,用国产^(125)I-碘化钠制备探针。探讨了离子强度,pH值、反应温度及时间诸因素对以三氯化铊为氧化剂核酸标记的影响。在pH值为4.8—4.9,离子强度(以Na^+计)为0.1mol/L、反应温度为70℃、时间为30分钟条件下,可获得高比活性的产物。^(125)I的掺入率在10—30％之间,探针的比活性可超过10~6cpm/μgDNA。点杂交结果显示,探针最低可检测出1Pg同源DNA,探针的特异性强,存放于-20％冰箱的探针在两个月内最低检测量没有明显变化。 展开更多

关键词 碘125 标记病毒 DNA探计

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