BsAb HER-2×CD3对过度表达HER-2乳腺癌细胞的细胞毒作用 被引量：1

1

作者 王冠军 温丽敏 +2 位作者 马俐君 赵丽纯 朱迅 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期39-42,共4页

目的 :研究应用抗HER 2抗原和CD3抗原的双向基因工程抗体BsAbHER 2×CD3介导T淋巴细胞对过度表达HER 2乳腺癌细胞的细胞毒作用。方法 :以过度表达HER 2的乳腺癌细胞株SK BR 3为靶细胞 ,T淋巴细胞为效应细胞 ,采用MTT法、3 H TdR掺... 目的 :研究应用抗HER 2抗原和CD3抗原的双向基因工程抗体BsAbHER 2×CD3介导T淋巴细胞对过度表达HER 2乳腺癌细胞的细胞毒作用。方法 :以过度表达HER 2的乳腺癌细胞株SK BR 3为靶细胞 ,T淋巴细胞为效应细胞 ,采用MTT法、3 H TdR掺入法测定BsAbHER 2×CD3对靶细胞、效应细胞的抑制作用及其介导的效应细胞对靶细胞的杀伤作用。结果 :BsAbHER 2×CD3具有MAbHER 2和MAbCD3的双重特性 ,既能抑制SK BR 3细胞生长 ,又可促进正常人外周血T淋巴细胞增殖。BsAbHER 2×CD3介导T淋巴细胞对靶细胞产生显著的细胞毒作用 ,明显强于MAbHER 2对靶细胞的作用 ,E∶T =2 0∶1为最佳效靶比。结论 :BsAbHER 2×CD3 ,既可以与HER 2过度表达的肿瘤细胞特异性结合 ,又可以介导T淋巴细胞对肿瘤细胞产生特异性杀伤作用 。 展开更多

关键词 bsab HER-2×CD3 HER-2 乳腺癌细胞 细胞毒作用

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复合模式层析在双特异性抗体纯化工艺开发中的应用

2

作者 魏利 刘道琴 +9 位作者 于雪莲 徐婷 陈楚楚 高海鸰 王春艳 吴婷婷 王如意 窦颖辉 范清林 宋礼华 《中国生物制品学杂志》 2025年第8期951-961,共11页

目的利用复合模式层析技术去除双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb,简称双抗)生产过程中的聚集体,在保证目的蛋白回收率的前提下,尽可能提高产品纯度、去除杂质残留。方法利用复合模式层析(阴离子和疏水)结合实验设计(Design of Exp... 目的利用复合模式层析技术去除双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb,简称双抗)生产过程中的聚集体,在保证目的蛋白回收率的前提下,尽可能提高产品纯度、去除杂质残留。方法利用复合模式层析(阴离子和疏水)结合实验设计(Design of Experiments,DoE)方法对一种IgG-like的对称型双抗在流穿模式下的纯化工艺进行开发,建立高纯度、高回收率的纯化工艺,明确复合模式层析在流穿模式中的关键工艺参数——上样样品和平衡液的pH和电导、保留时间、上样载量,以及关键工艺参数对聚集体去除的影响趋势、聚集体在收获液不同出峰时间点的分布情况等。结果经CHO细胞培养收获的含双抗蛋白的细胞上清进行3步层析工艺纯化后,目的双抗蛋白的体积排阻高效液相色谱(size exclusion high-performance liquid chromatography,SEC-HPLC)纯度>99%,宿主细胞蛋白(host cell protein,HCP)残留<20 ppm,宿主DNA残留低于检测下限。结论复合模式层析在去除约7%聚集体的同时仍能保持93%以上的目的蛋白回收率,在双抗纯化工艺开发中具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 双特异性抗体 复合模式层析 实验设计 聚集体 宿主细胞蛋白 宿主DNA

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双特异性抗体在复发/难治性多发性骨髓瘤中的临床应用:现状与挑战

3

作者 王晨韵 蔡真 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第8期1096-1105,共10页

多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种源自骨髓浆细胞的血液系统恶性肿瘤。近年来,随着新药以及造血干细胞移植技术的广泛应用,MM患者的预后得到了显著改善,但MM目前仍难以治愈且易复发耐药。对于复发/难治性多发性骨髓瘤(relapsed/... 多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)是一种源自骨髓浆细胞的血液系统恶性肿瘤。近年来,随着新药以及造血干细胞移植技术的广泛应用,MM患者的预后得到了显著改善,但MM目前仍难以治愈且易复发耐药。对于复发/难治性多发性骨髓瘤(relapsed/refractory multiple myeloma,RRMM),亟需发掘新的治疗方法。双特异性抗体(bispecific antibodies,BsAbs)是一种新兴免疫疗法,通过同时与肿瘤细胞靶抗原和内源性效应细胞结合,形成免疫突触,促进效应细胞活化并最终诱导肿瘤细胞裂解。多项临床研究显示,BsAbs单药治疗或与其他方案联合治疗在RRMM患者中具有较为显著的疗效。本文总结了BsAbs的作用机制、疗效和安全性,并对免疫疗法的最佳排序进行探讨,以期为治疗MM提供新思路。 展开更多

关键词 复发/难治性多发性骨髓瘤 双特异性抗体 免疫治疗

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多发性骨髓瘤的免疫治疗:成果与挑战

4

作者 王萌 孙春艳 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第6期774-782,共9页

多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种以恶性浆细胞增殖为特征的血液系统肿瘤。目前,蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitors, PIs)、免疫调节剂(immunomodulatory drugs, IMiDs)和自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic ste... 多发性骨髓瘤(multiple myeloma, MM)是一种以恶性浆细胞增殖为特征的血液系统肿瘤。目前,蛋白酶体抑制剂(proteasome inhibitors, PIs)、免疫调节剂(immunomodulatory drugs, IMiDs)和自体造血干细胞移植(autologous hematopoietic stem cell transplantation, ASCT)是改善MM患者生存预后的主要手段,但随着治疗的深入,大多数患者仍面临难治和复发问题,治愈之路依然充满挑战。近年来,单克隆抗体(monoclonal antibodies, mAbs)、嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cells, CAR-T)、抗体药物耦联物(antibody-drug conjugates, ADCs)和双特异性抗体(bispecific antibodies, BsAbs)均在临床研究和/或临床应用中取得了良好的疗效,这些基于抗体和细胞的免疫治疗为难治复发性MM(refractory and relapsed multiple myeloma, RRMM)患者带来了新的希望。各类免疫治疗产品在激活免疫细胞、靶向肿瘤以及改善患者预后方面各有优势,但同时也面临安全性和耐药性的挑战。未来,随着分子生物学和抗体工程技术的不断进步,新型免疫治疗产品有望通过联合疗法等多种策略实现协同增效,从而为RRMM患者带来更长久的生存获益和生活质量的改善。本文旨在综述多发性骨髓瘤免疫治疗的研究成果与现存挑战,探讨单克隆抗体、CAR-T、抗体药物耦联物和双特异性抗体的作用机制、临床应用现状及未来发展趋势,为相关领域研究者和临床医生提供一个全面和系统的参考,推动MM精准免疫治疗的发展。 展开更多

关键词 多发性骨髓瘤 免疫治疗 单克隆抗体 嵌合抗原受体T细胞 抗体药物耦联物 双特异性抗体

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双特异性抗体研发进展 被引量：7

5

作者 张峰 王开芹 王兰 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第1期78-85,共8页

双特异性抗体(bsAb)因可同时特异性结合2个不同抗原表位,拓展了治疗性单克隆抗体的临床应用范围。制备bsAb需要对传统的抗体结构进行改造,在此过程中衍生出了数十种结构,不同的结构具有不同的作用特点。本综述就当前典型的bsAb结构及其... 双特异性抗体(bsAb)因可同时特异性结合2个不同抗原表位,拓展了治疗性单克隆抗体的临床应用范围。制备bsAb需要对传统的抗体结构进行改造,在此过程中衍生出了数十种结构,不同的结构具有不同的作用特点。本综述就当前典型的bsAb结构及其原理进行介绍,对bsAb的作用原理进行分析,并对当前代表性的bsAb的研发阶段进行了简单总结。 展开更多

关键词 双特异性抗体(bsab) 单克隆抗体 抗体结构 研发 进展

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抗B-CLL Idx抗CD3双特异性抗体的制备及其特性研究 被引量：1

6

作者 杨敬 王晓林 +2 位作者 沈关心 朱慧芬 苏娜 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期204-206,共3页

应用无筛选标记细胞株杂交瘤·杂交瘤细胞直接融合法制备了２株分泌抗慢性Ｂ淋巴细胞白血病（Ｂ－ＣＬＬ）Ｉｄｘ抗ＣＤ３双特异性抗体（ＢｓＡｂ）的四价体瘤细胞株。采用间接ＥＬＩＳＡ试验与间接免疫荧光试验证明了该ＢｓＡｂ能... 应用无筛选标记细胞株杂交瘤·杂交瘤细胞直接融合法制备了２株分泌抗慢性Ｂ淋巴细胞白血病（Ｂ－ＣＬＬ）Ｉｄｘ抗ＣＤ３双特异性抗体（ＢｓＡｂ）的四价体瘤细胞株。采用间接ＥＬＩＳＡ试验与间接免疫荧光试验证明了该ＢｓＡｂ能分别与Ｂ－ＣＬＬ患者血清及带ＣＤ３标记的细胞特异性结合，经细胞结合试验证明该ＢｓＡｂ同时具备与Ｉｄ及ＣＤ３两种抗原结合能力，经酶桥联法证明该ＢｓＡｂ亚类为ＩｇＧ１×ＩｇＧ２ａ。 展开更多

关键词 慢性 白血病 双特异性抗体 制备 B细胞 bsab CD3

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抗CD3-抗B细胞白血病独特型双特异性抗体的制备及细胞毒性 被引量：1

7

作者 朱慧芬 王晓林 +2 位作者 张悦 沈关心 熊伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 1998年第1期40-42,共3页

采用化学偶联法制备抗ＣＤ３抗Ｂ细胞性白血病独特型双特异性抗体，研究了该双特异性抗体诱导ＬＡＫ细胞的增殖及其细胞毒作用。结果提示，双特异性抗体可显著提高ＬＡＫ细胞与Ｄａｕｄｉ细胞的结合率；促进淋巴细胞的增殖。乳酸脱氢... 采用化学偶联法制备抗ＣＤ３抗Ｂ细胞性白血病独特型双特异性抗体，研究了该双特异性抗体诱导ＬＡＫ细胞的增殖及其细胞毒作用。结果提示，双特异性抗体可显著提高ＬＡＫ细胞与Ｄａｕｄｉ细胞的结合率；促进淋巴细胞的增殖。乳酸脱氢酶试验检测发现，加入双特异性抗体后，ＬＡＫ细胞对Ｄａｕｄｉ细胞的细胞毒性作用显著高于对照组。 展开更多

关键词 bsab 双特异性抗体 制备 细胞毒性

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双特异性抗体及其在肿瘤治疗中的应用

8

作者 张欣 张春明 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期166-169,共4页

双特异性抗体(BsAb)是改造抗体治疗效果的发展方向之一,现已成为抗体工程研究领域的热点。在过去20年的研究中,研究人员看到了常规BsAb的潜能以及它的不足。随着分子生物学技术的迅速发展,出现了利用基因工程手段构建的BsAb的多种模式,... 双特异性抗体(BsAb)是改造抗体治疗效果的发展方向之一,现已成为抗体工程研究领域的热点。在过去20年的研究中,研究人员看到了常规BsAb的潜能以及它的不足。随着分子生物学技术的迅速发展,出现了利用基因工程手段构建的BsAb的多种模式,并且有多种BsAb制剂已经用于肿瘤的初期临床诊断和治疗。该文对BsAb最新的研究进展和肿瘤治疗中的应用进行了阐述。 展开更多

关键词 双特异性抗体(bsab) 双链抗体(Db) 单链双价抗体(scDb) 肿瘤治疗

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双特异性抗体的临床应用进展

9

作者 肖创清 黄志红 《放射免疫学杂志》 CAS 2013年第5期587-589,共3页

天然的单体抗体分子具有两条相同的配基识别臂，若将其中配基识别臂替换，使其能够结合另一种配基，即成为双特异性抗体（bispecificantibody，BsAb）。早在19世纪末BsAb就被描述为专门针对微生物，而保留正常宿主细胞能力的一种化学物... 天然的单体抗体分子具有两条相同的配基识别臂，若将其中配基识别臂替换，使其能够结合另一种配基，即成为双特异性抗体（bispecificantibody，BsAb）。早在19世纪末BsAb就被描述为专门针对微生物，而保留正常宿主细胞能力的一种化学物质。其特点是在同一抗体分子的两个抗原结合臂，可同时结合两个不同的抗原，一个与靶抗原结合；另一个与免疫效应细胞上的标志抗原结合，能在靶细胞和功能分子（细胞）之间架起桥梁，激发具有导向性的免疫反应。本文仅就BsAb临床上的应用进行简要综述如下。 展开更多

关键词 双特异性抗体 临床应用 文献综述 抗体分子 免疫效应细胞 bsab 宿主细胞 靶抗原

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抗EpCAM+CD3双特异性抗体关键表征解析 被引量：3

10

作者 张红梅 张峰 +6 位作者 武刚 王文波 于传飞 段茂芹 黄璟 王兰 刘万卉 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期620-632,共13页

目的:解析抗EpCAM+CD3双特异性抗体(BsAb)的关键表征。方法:以抗EpCAM+CD3双特异性抗体为研究对象,超高效液相色谱串联质谱联用技术(LC-MS/MS)检测相对分子质量、肽图(氨基酸序列)、N-糖基化位点、糖型及各糖型含量、二硫键位点;表面等... 目的:解析抗EpCAM+CD3双特异性抗体(BsAb)的关键表征。方法:以抗EpCAM+CD3双特异性抗体为研究对象,超高效液相色谱串联质谱联用技术(LC-MS/MS)检测相对分子质量、肽图(氨基酸序列)、N-糖基化位点、糖型及各糖型含量、二硫键位点;表面等离子体共振(SPR)技术测定其与上皮细胞粘附因子(EpCAM)、白细胞分化簇3(CD3)和Fc受体(FcRs)的亲和力。结果:含糖基化的完整抗体、轻链、重链和单链的相对分子质量分别为128521.78、24117.83、50808.85和53585.87;不含糖完整抗体、轻链、重链和单链的相对分子质量分别为125633.30、24117.85、49364.53和52141.30;对象BsAb氨基酸序列与理论序列一致;N-糖基化位点位于重链Asn300和单链Asn326;N-连接寡糖的糖型包括以岩藻糖化的双天线复杂N-糖(G0F占全部糖型含量77.10%)为主的11种糖型;对象BsAb内含13对二硫键;单链第Cys105位和第Cys249为游离巯基;SPR测定结果显示:对象BsAb与EpCAM、CD3的亲和力分别为2.71×10^-8和5.94×10^-7 mol·L^-1,与FcγRⅠ、FcγRⅡa、FcγRⅡb、FcγRⅢa、FcγRⅢb和FcRn的亲和力分别为2.89×10^-8、8.85×10^-7、7.94×10^-6、3.69×10^-7、2.73×10^-6和8.77×10^-7 mol·L^-1。结论:采用LC-MS/MS和SPR技术可有效解析抗EpCAM+CD3 BsAb的关键表征,为其质量控制和产品放行提供依据。 展开更多

关键词 双特异性抗体(bsab) 抗EpCAM+CD3 表征 亲和力 超高效液相色谱串联质谱联用技术 表面等离子体共振

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双特异性抗体在肿瘤治疗中的研究进展 被引量：1

11

作者 刘妍 付凯飞 周丽君 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第18期3141-3144,共4页

双特异性抗体（bispecific antibody，BsAb）是一类可以同时结合2个不同抗原的人工蛋白，早在20世纪90年代，BsAb就开始被用于肿瘤治疗的研究领域，一度由于临床试验的失败而出现停滞。21世纪初，由于DNA重组技术的出现，BsAb的研究再... 双特异性抗体（bispecific antibody，BsAb）是一类可以同时结合2个不同抗原的人工蛋白，早在20世纪90年代，BsAb就开始被用于肿瘤治疗的研究领域，一度由于临床试验的失败而出现停滞。21世纪初，由于DNA重组技术的出现，BsAb的研究再次被启动。 展开更多

关键词 双特异性抗体 治疗 肿瘤 DNA重组技术 bsab 临床试验

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一种三特异性抗体设计以及功能研究 被引量：1

12

作者 张瑞 李大力 《药物生物技术》 CAS 2022年第3期227-233,共7页

收稿日期:2021-11-23修回日期:2022-01-06作者简介:张瑞(1988-),男,安徽蚌埠人,硕士研究生在读,研究方向:生物工程:E-mail:634947112@qq:com。通信作者:李大力(1965-),男,江苏徐州人,副教授,研究方向:生物工程:E-mail:lidali@njust.edu... 收稿日期:2021-11-23修回日期:2022-01-06作者简介:张瑞(1988-),男,安徽蚌埠人,硕士研究生在读,研究方向:生物工程:E-mail:634947112@qq:com。通信作者:李大力(1965-),男,江苏徐州人,副教授,研究方向:生物工程:E-mail:lidali@njust.edu.cn。 展开更多

关键词 三特异性抗体 FIT-Ig bsabs FAE 结合活性 CD3

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抗GD2/抗CD16单链双特异性抗体的构建及在大肠杆菌中的表达 被引量：1

13

作者 倪剑锋 纪剑飞 +4 位作者 白向阳 吕安国 黄日波 韦宇拓 吴文芳 《生物医学工程学杂志》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期659-663,共5页

利用重叠PCR(overlap-PCR)将抗GD2表面抗原GD2的单链抗体基因m-ScFv和抗CD16的单链抗体基因NM3E2融合在一起,得到新型的单链双特异性抗体基因n-m,双抗的联接肽序列为SerGly4Ser,在肽连的C端引入了6×his以利于纯化。该双特异性抗体... 利用重叠PCR(overlap-PCR)将抗GD2表面抗原GD2的单链抗体基因m-ScFv和抗CD16的单链抗体基因NM3E2融合在一起,得到新型的单链双特异性抗体基因n-m,双抗的联接肽序列为SerGly4Ser,在肽连的C端引入了6×his以利于纯化。该双特异性抗体基因的序列经测序验证后,连接表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌菌株BL21(DE3),诱导表达,凝胶成像系统扫描显示表达的外源融合蛋白约占菌体总蛋白的27%。表达蛋白分泌于胞质空间,经超声波破胞后收集上清,经Ni+亲和层析柱分离,纯度可达90%以上。经SDS-PAGE及Westernblotting鉴定表达蛋白的分子量为53KD,与预期的相符。 展开更多

关键词 单链抗体 单链双特异性抗体 表达

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化学交联的抗TNF和抗CALLA双功能抗体的制备及其导向功能研究 被引量：1

14

作者 刘明旭 贺永怀 +1 位作者 沈倍奋 赵薇薇 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1992年第6期341-344,共4页

本文探索了用抗 CALLA 和抗 TNF 的双功能抗体导向 TNF 杀伤 CALLA 阳性白血病细胞的可行性.用化学交联剂 SPDP 制备了抗 TNF 和抗 CALLA 抗体的交联物,经鉴定为双功能抗体;与 TNF 联合使用,在 CALLA 阳性白血病细胞系 nalm—6上进行体... 本文探索了用抗 CALLA 和抗 TNF 的双功能抗体导向 TNF 杀伤 CALLA 阳性白血病细胞的可行性.用化学交联剂 SPDP 制备了抗 TNF 和抗 CALLA 抗体的交联物,经鉴定为双功能抗体;与 TNF 联合使用,在 CALLA 阳性白血病细胞系 nalm—6上进行体外杀伤实验。MTT 比色法测定杀伤效果。我们发现经双功能抗体导向后,nalm—6细胞对 TNF 的敏感性明显增加。 展开更多

关键词 双功能抗体 肿瘤 血白病 免疫疗法

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抗3种β-激动剂双特异性单克隆抗体的建立及鉴定 被引量：3

15

作者 余厚美 崔廷婷 +1 位作者 冯才伟 万宇平 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期607-611,共5页

制备抗克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺双特异性抗体并初步鉴定。将分泌抗克仑特罗、沙丁胺醇抗体的细胞株和分泌抗莱克多巴胺抗体的细胞株分别驯化,使之成为HAT敏感株。将两者融合,筛选分泌双特异性单克隆抗体的杂交-杂交瘤株,然后对... 制备抗克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺双特异性抗体并初步鉴定。将分泌抗克仑特罗、沙丁胺醇抗体的细胞株和分泌抗莱克多巴胺抗体的细胞株分别驯化,使之成为HAT敏感株。将两者融合,筛选分泌双特异性单克隆抗体的杂交-杂交瘤株,然后对其进行初步鉴定。共获得5株杂交-杂交瘤细胞株,将其分泌的双特异性单克隆抗体(BsAb)经过酶联免疫吸附法(ELISA)初步检测,IC50可达1 ng/mL,腹水效价为105以上,用ELISA法证明BsAb只与克仑特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺有特异性反应。该方法制备简单、风险低、灵敏度高、周期短,具有较好的应用前景。 展开更多

关键词 双特异性单克隆抗体(bsab) 克仑特罗 沙丁胺醇 莱克多巴胺

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双特异性抗体药物的专利分析 被引量：1

16

作者 梁亚茹 李丽媛 《生命科学》 CSCD 北大核心 2022年第7期888-896,共9页

双特异性抗体是指能同时特异性结合两个抗原或抗原表位的人工抗体。由于其特异性和双功能性,现已成为抗体工程领域的研究热点,在肿瘤、自身免疫病、炎症、糖尿病、阿尔茨海默症和骨质疏松症等多个领域中具有广泛的应用前景。该文通过文... 双特异性抗体是指能同时特异性结合两个抗原或抗原表位的人工抗体。由于其特异性和双功能性,现已成为抗体工程领域的研究热点,在肿瘤、自身免疫病、炎症、糖尿病、阿尔茨海默症和骨质疏松症等多个领域中具有广泛的应用前景。该文通过文献调研、数据库检索、数据统计与分析等研究方法,对双特异性抗体相关专利信息进行分析,以了解双特异抗体领域的发展脉络和趋势。 展开更多

关键词 双特异性抗体 bsabs 免疫治疗 专利分析

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溶瘤呼肠孤病毒联合CD30/CD16A双特异性抗体对NK细胞介导的ADCC效应的影响 被引量：2

17

作者 廖春香 龙世棋 +5 位作者 安媛媛 车启元 王念雪 陈亮 杨薇 赵星 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第1期1-8,15,共9页

目的 探究溶瘤呼肠孤病毒(reovirus)联合CD30/CD16A双特异性抗体(Bs Abs)对自然杀伤细胞(NK)活性及抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)的影响。方法 采集健康献血者肝素抗凝静脉血30 m L,分离外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠筛... 目的 探究溶瘤呼肠孤病毒(reovirus)联合CD30/CD16A双特异性抗体(Bs Abs)对自然杀伤细胞(NK)活性及抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)的影响。方法 采集健康献血者肝素抗凝静脉血30 m L,分离外周血单个核细胞(PBMC),采用免疫磁珠筛选获得NK细胞,采用流式细胞术检测NK细胞纯度;溶瘤呼肠孤病毒(reovirus)预处理NK细胞(Reo-NK组),以单独NK组为对照,采用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测2组NK细胞的活化作用;reovirus联合(CD30/CD16A) Bs Ab杀伤KARPAS-299细胞,分为Ig G1处理组(Ig G1+NK组)、CD30/CD16A处理组(CD30/CD16A+NK组)、病毒联合Ig G1处理组(Ig G1+Reo-NK组)及病毒联合CD30/CD16A处理组(CD30/CD16A+Reo-NK组),采用LDH释放实验检测各组NK细胞的活化作用,采用流式细胞术检测各组NK细胞表面活化标注物CD69和细胞毒性颗粒CD107a的表达;用reovirus联合(CD30/CD16A) Bs Ab处理NK细胞(Reo-NK+CD30/CD16A组),以NK联合(CD30/CD16A) Bs Ab为对照(NK+CD30/CD16A组),采用LDH释放试验检测2组NK细胞对Raji细胞的杀伤效应。结果 体外新鲜分离的NK细胞纯度可达70%以上;与单独NK细胞组相比,Reo-NK组DLD-1细胞的杀伤率明显增高(P<0.01);KARPAS-299细胞上CD30分子的阳性率高达90%以上;Ig G1与(CD30/CD16A) Bs Ab抗体浓度大于1.00×10^-12mol/L时,与NK+Ig G1组相比,NK+CD30/CD16A组促进KARPAS-299细胞死亡率(P<0.05);与Reo-NK相比,Reo-NK+CD30/CD16A组能明显促进KARPAS-299细胞死亡率(P<0.01);随着reovirus滴度增加,NK细胞表面活化标致物CD69及细胞毒性物质CD107a阳性率随之上升;reovirus与(CD30/CD16A) Bs Abs相比可以进一步促进NK细胞的活化。结论 Reovirus可促进NK细胞的活化并增强其细胞毒作用,联合(CD30/CD16A) Bs Abs后可进一步促进NK细胞介导的ADCC效应。 展开更多

关键词 抗体 双特异性 呼肠孤病毒 自然杀伤细胞 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 溶瘤作用 细胞毒效应

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靶向B细胞成熟抗原在多发性骨髓瘤中的治疗进展 被引量：3

18

作者 刘佳慧 邱录贵 安刚 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2022年第20期1039-1046,共8页

过去20年,多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的治疗取得了较大的进展,患者的生存时间获得显著延长,但多数患者最终仍会复发或变为难治性,MM仍然无法治愈。B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)的表达仅限于一些B细胞谱系,在M... 过去20年,多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)的治疗取得了较大的进展,患者的生存时间获得显著延长,但多数患者最终仍会复发或变为难治性,MM仍然无法治愈。B细胞成熟抗原(B cell maturation antigen,BCMA)的表达仅限于一些B细胞谱系,在MM细胞上广泛表达,是MM的一个理想靶抗原。多种靶向BCMA的治疗,包括嵌合抗原受体(chimeric antigen receptor,CAR)T细胞、双特异性抗体(bispecific antibodies,BsAbs)和抗体-药物偶联物(antibod-drug conjugate,ADC),在复发/难治性MM患者中取得显著的临床反应。本文综述了近年来MM靶向BCMA治疗的研究进展。 展开更多

关键词 BCMA 多发性骨髓瘤 CAR-T 细胞治疗 双特异性抗体 抗体药物偶联物

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基于靶点人源化小鼠的PD-1/CTLA-4双特异性抗体及其IgG1亚型的抗癌活性评价 被引量：2

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作者 胡红梅 于秋红 +2 位作者 杨毅 沈月雷 刘柏宏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期380-386,共7页

目的:构建基于靶点人源化小鼠的程序性死亡受体-1(PD-1)/细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)双特异性抗体(BsAb)并对BsAb及其IgG1亚型进行抗癌活性评价和探讨其潜在的作用机制。方法:构建和扩增并纯化不同结构及抗体亚型的PD-1/CTLA-4抗体... 目的:构建基于靶点人源化小鼠的程序性死亡受体-1(PD-1)/细胞毒性T淋巴细胞抗原-4(CTLA-4)双特异性抗体(BsAb)并对BsAb及其IgG1亚型进行抗癌活性评价和探讨其潜在的作用机制。方法:构建和扩增并纯化不同结构及抗体亚型的PD-1/CTLA-4抗体BsAb1、BsAb2和BsAb3,对纯化BsAb进行靶点亲和力检测,采用荧光素酶报告基因实验和FCM检测抗体的生物学活性。基于B-hPD-1-hPD-L1-h CTLA-4人源化小鼠的MC38-hPD-L1结肠癌细胞移植瘤模型对BsAb进行体内药效评估,并通过移植瘤组织中肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)分析PD-1/CTLA-4抗体的作用机制。结果:成功制备的BsAb1、BsAb2及BsAb3对靶点PD-1和CTLA-4均有较强的特异性亲和力、对靶点通路均有不同程度的阻滞活性,均明显抑制移植瘤的生长(P<0.05或P<0.01)。IgG1亚型BsAb体内药效更优(P<0.01),TIL分析发现BsAb2-IgG1明显增加了CTL百分率(P<0.05),显著降低了肿瘤浸润Treg细胞百分率(P<0.01),使肿瘤免疫微环境更有利于杀伤肿瘤细胞;增强ADCC活性的Fc突变体亚型BsAb2-SI则不能进一步提高抗肿瘤活性。结论:具有Fc效应功能的IgG1亚型的PD-1/CTLA-4抗体体内抗癌药效更优,因其可以更好地清除TIL中的Treg细胞。 展开更多

关键词 程序性死亡受体-1 细胞毒性T淋巴细胞抗原-4 双特异性抗体 抗体亚型优化 肿瘤 MC38-hPD-L1结肠癌细胞

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靶向抗PD-1/CD19双特异性抗体的表达与活性鉴定 被引量：1

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作者 赵晓翠 李冉冉 +3 位作者 胡亚利 李相国 李镜 李锋 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第4期359-364,共6页

目的:重组表达和纯化靶向抗PD-1/CD19双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)并验证其活性。方法:以pCAR1为载体,利用分子克隆技术构建抗PD-1/CD19 BsAb真核表达载体,通过PEI试剂转染哺乳动物细胞株CHO-S瞬时表达抗体。利用亲和层析法... 目的:重组表达和纯化靶向抗PD-1/CD19双特异性抗体(bispecific antibody,BsAb)并验证其活性。方法:以pCAR1为载体,利用分子克隆技术构建抗PD-1/CD19 BsAb真核表达载体,通过PEI试剂转染哺乳动物细胞株CHO-S瞬时表达抗体。利用亲和层析法对BsAb进行纯化,用SDS-PAGE和WB实验进行BsAb蛋白鉴定。用荧光素酶报告基因检测BsAb对PD-1/PD-L1的体外阻断活性,乳酸脱氢酶细胞毒实验检测BsAb依赖的PBMC介导细胞毒性(ADCC)活性。结果:成功构建双质粒真核表达载体pCAR1-19X3,BsAb在CHO-S细胞中成功表达,命名为pCAR1-19X3-TY。pCAR1-19X3-TY在体外能够有效地阻断PD-1与其配体PD-L1的结合,其量效曲线的EC50为0.306μg/ml。ADCC结果显示,pCAR1-19X3-TY能介导PBMC对Raji细胞产生细胞毒性,曲线呈现直线上升的趋势;当效靶比为50∶1时,pCAR1-19X3-TY的杀伤率为(38.9±0.3)%,与阳性处理组的杀伤率(46.7±4.9)%的差异比较无统计学意义(P>0.05),明显高于阴性对照组(1.2±0.1)%杀伤率(P<0.05)。结论:重组表达的靶向抗PD-1/CD19BsAb能有效阻断PD-1和PD-L1的结合、激活PBMC介导的Raji细胞毒性作用,具有开发用于治疗B细胞恶性肿瘤的潜力。 展开更多

关键词 双特异性抗体 PD-1 CD19 PD-1/PD-L1相互作用 ADCC活性 肿瘤 免疫治疗

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