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溴苯基姜黄素对胆管癌细胞凋亡、迁移和侵袭的影响及机制研究 被引量：3
1
作者 赵冀安 马艳荣 +3 位作者 聂文佳 董梁 刘文聪 谷敬锋 《中国药房》 CAS 北大核心 2021年第4期467-474,共8页
目的:研究溴苯基姜黄素(GL63)对人胆管癌RBE细胞凋亡、迁移和侵袭的影响,并基于Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度GL63[0(空白对照,下同)、1.25、2.5、5、10、20、40μmo... 目的:研究溴苯基姜黄素(GL63)对人胆管癌RBE细胞凋亡、迁移和侵袭的影响,并基于Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路探讨其作用机制。方法:采用MTT法检测不同浓度GL63[0(空白对照,下同)、1.25、2.5、5、10、20、40μmol/L]作用48 h对RBE细胞增殖的影响,并计算其半数抑制浓度(IC_(50));采用结晶紫染色法检测不同浓度GL63(0、5、10、20μmol/L)作用48 h对细胞集落形成的影响;分别采用流式细胞术、Hoechst 33342染色法、细胞划痕实验、Transwell小室侵袭实验检测不同浓度GL63(0、5、10、20μmol/L)作用24 h对细胞周期分布、凋亡情况以及细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western blotting法检测不同浓度GL63(0、5、10、20μmol/L)作用24 h对细胞中JAK2/STAT3信号通路肿瘤相关蛋白表达的影响。结果:不同浓度GL63组(1.25~40μmol/L)RBE细胞的增殖抑制率均较空白对照组显著升高(P<0.01),并呈剂量依赖趋势;其IC_(50)为(8.46±1.30)μmol/L。与空白对照组比较,不同浓度GL63组(5、10、20μmol/L)RBE细胞的集落形成抑制率均显著降低(P<0.01);G0/G1期细胞占比均显著升高,S期细胞占比均显著降低(P<0.01);细胞凋亡率均显著升高(P<0.01),且细胞核呈浓染致密的固缩形态并可见凋亡小体;细胞迁移愈合率均显著降低(P<0.01),穿过基底膜的侵袭细胞数均显著减少(P<0.01);细胞中磷酸化JAK2、磷酸化STAT3、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9、前体胱天蛋白酶9(Pro-caspase-9)、Pro-caspase-3蛋白表达水平均显著降低,Bcl-2相关x蛋白(Bax)、细胞色素C、裂解Caspase-9(Cleaved-caspase-9)、Cleaved-caspase-3蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。结论:GL63能通过抑制JAK2/STAT3信号通路来实现对人胆管癌RBE细胞增殖、迁移和侵袭的抑制并诱导其发生凋亡。 展开更多
关键词 溴苯基姜黄素 胆管癌 RBE细胞 Janus激酶2/信号转导及转录激活因子3信号通路 迁移 侵袭 凋亡
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溴苯基姜黄素对胆管癌细胞裸鼠移植瘤抑制作用及机制 被引量：1
2
作者 赵冀安 张梅 +4 位作者 张蕊 董梁 聂文佳 刘文聪 刘维丽 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2022年第15期3720-3725,共6页
目的探讨姜黄素(CUR)衍生物溴苯基CUR(GL63)对人胆管癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测GL63对人胆管癌RBE细胞增殖的影响;采用流式细胞法检测GL63对RBE细胞凋亡和周期的影响;建立人胆管癌裸鼠移植瘤模型... 目的探讨姜黄素(CUR)衍生物溴苯基CUR(GL63)对人胆管癌细胞裸鼠移植瘤生长的抑制作用及机制。方法采用噻唑蓝(MTT)法检测GL63对人胆管癌RBE细胞增殖的影响;采用流式细胞法检测GL63对RBE细胞凋亡和周期的影响;建立人胆管癌裸鼠移植瘤模型,随机将裸鼠平均分为对照组、低浓度GL63组、高浓度GL63组各10只,分别给予生理盐水和10、20μmol/L GL63处理裸鼠。记录各组肿瘤重量和体积变化,并计算抑瘤率;对移植瘤组织进行病理学检测。Western印迹检测细胞中各蛋白表达情况。结果GL63能显著抑制人胆管癌RBE细胞生长,阻滞细胞周期于G0/G1期,诱导细胞发生凋亡,且呈浓度和时间依赖性。低、高浓度GL63组瘤重、瘤体积均明显小于对照组,抑瘤率明显高于对照组(P<0.05)。苏木素-伊红(HE)染色显示,低、高浓度GL63组肿瘤较对照组分化明显高,免疫组化显示,低、高浓度GL63组肿瘤细胞增殖抗原(PCNA)表达明显降低(P<0.05)。Western印迹结果显示,低、高浓度GL63组磷酸化酪氨酸激酶(p-JAK)2、磷酸化信号转导和转录活化因子(p-STAT)3蛋白表达与对照组相比显著下降(P<0.05)。下游通路中B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9蛋白表达明显下降,Bcl-2相关X蛋白(Bax)和组织金属蛋白酶抑制剂(TIMP)-2蛋白表达明显升高,且呈浓度依赖性(P<0.05)。结论GL63可促进胆管癌细胞凋亡,抑制其增殖和侵袭作用,从而抑制裸鼠移植瘤的生长。 展开更多
关键词 裸鼠移植瘤 溴苯基姜黄素 胆管癌 JAK2/STAT3信号通路
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