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中药半夏单细胞悬浮培养、胚胎发生及植株再生 被引量:8
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作者 欧巧明 厚毅清 +3 位作者 包梅年 胡达 陈玉梁 岳春玲 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期39-49,共11页
以悬浮细胞作为靶标材料,在COLC诱导获得多倍性细胞后,经诱导分化和再生形成纯合的多倍体植株,是一条可行且高效的多倍体诱导途径。但该途径的前提是成熟、高效的单细胞悬浮培养和植株再生体系建立。鉴于此,在获得优良胚性愈伤组织的基... 以悬浮细胞作为靶标材料,在COLC诱导获得多倍性细胞后,经诱导分化和再生形成纯合的多倍体植株,是一条可行且高效的多倍体诱导途径。但该途径的前提是成熟、高效的单细胞悬浮培养和植株再生体系建立。鉴于此,在获得优良胚性愈伤组织的基础上,对半夏细胞悬浮培养、细胞分化及再生植株所涉及的关键问题及其影响因素进行研究,结果获得了以近圆形细胞为主的高质量单细胞悬浮系,细胞生长曲线呈典型的"S"型,细胞密度可达2.0×106以上,活细胞率可达86.80%,近圆形细胞率可达82.64%;明确了其细胞胚胎发生的两种可能途径,并通过诱导细胞分化,成功获得了愈伤组织增殖,最终实现了高效的植株再生,愈伤分化率可达94.46%,丛生芽诱导率可达337.42%,幼芽成苗率可达90.75%,幼苗生根率可达95.40%,移栽成活率可达98.83%,从而建立了高效的半夏悬浮细胞培养和植株再生体系,为后续的基于单细胞水平的半夏多倍体诱导研究提供技术参考和科学依据。 展开更多
关键词 半夏(Pinellia ternata briet.) 悬浮细胞 秋水仙碱 胚胎发生 植株再生 多倍体
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基于柱前衍生化高效液相色谱法的半夏中葡甘聚糖含量分析
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作者 付皎 魏璐 +5 位作者 李金鑫 徐荣 王明星 吕建梅 冯书敏 刘大会 《中国现代中药》 2025年第7期1255-1261,共7页
目的:建立1-苯基-3-甲基-5吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱法检测半夏中葡甘聚糖含量的方法。方法:使用ChomCore AQ C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈,流动相B为0.01 mol·L^(–1)乙酸铵溶液,梯度洗脱,柱温为30... 目的:建立1-苯基-3-甲基-5吡唑啉酮柱前衍生化高效液相色谱法检测半夏中葡甘聚糖含量的方法。方法:使用ChomCore AQ C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相A为乙腈,流动相B为0.01 mol·L^(–1)乙酸铵溶液,梯度洗脱,柱温为30℃,流速为0.8 mL·min^(–1),检测波长为250 nm。采用优化后的方法检测半夏水解后的单糖组成并对13个不同产地半夏样品和3个不同炮制品中的D-甘露糖与D-葡萄糖含量进行检测。结果:确定最佳超声提取方法为超纯水30 mL、50℃超声60 min;方法学验证结果表明,D-甘露糖、D-葡萄糖在各自质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.99),且精密度、重复性、稳定性、加样回收率均符合要求,适用于半夏中的D-甘露糖和D-葡萄糖的检测。半夏水解后的单糖主要为甘露糖和葡萄糖,且D-甘露糖与D-葡萄糖的摩尔比为(1.47±0.06)~(1.86±0.07),证明半夏中含有葡甘聚糖。13个不同产地半夏样品和3个不同炮制品中均含有葡甘聚糖,且含量上存在差异。结论:所建立的方法具有操作简便、重复性良好和准确度高的优点。半夏中含有葡甘聚糖,且其含量会受产地及炮制方法的影响。研究结果为半夏有效成分分析和质量控制提供了技术支撑。 展开更多
关键词 半夏 葡甘聚糖 柱前衍生化 高效液相色谱法 D-葡萄糖 D-甘露糖
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基于悬浮细胞培养的半夏多倍体诱导研究:Ⅱ.单细胞水平COLO诱导及多倍体植株再生 被引量:6
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作者 欧巧明 岳春玲 +4 位作者 厚毅清 崔文娟 郑秀芳 罗俊杰 陈玉梁 《核农学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1148-1156,共9页
在建立了高效的半夏悬浮细胞培养和植株再生体系的基础上,本研究以悬浮细胞作为靶标材料,以秋水仙素(COLO)为多倍体诱导剂,对COLO诱导多倍体的适宜浓度等关键因素进行研究,并在获得多倍性细胞后,经诱导分化和再生形成纯合的多倍体植株... 在建立了高效的半夏悬浮细胞培养和植株再生体系的基础上,本研究以悬浮细胞作为靶标材料,以秋水仙素(COLO)为多倍体诱导剂,对COLO诱导多倍体的适宜浓度等关键因素进行研究,并在获得多倍性细胞后,经诱导分化和再生形成纯合的多倍体植株。结果显示,0.05~0.10mg/ml的COLO处理24h,可获得较好的多倍体细胞诱导效果,多倍性细胞比率约为74.20%,并最终获得11株纯和的半夏多倍体幼苗,根尖细胞染色体为104条,是对照54条的2倍,目测诱变率可达14.07%~46.05%,多倍体诱导率为3.85%~29.76%,嵌合体率为12.88%~17.65%。结果证明通过半夏等植物单细胞水平多倍体诱导获得纯合的多倍体植株是一条可行且高效的多倍体诱导途径。 展开更多
关键词 半夏 悬浮细胞 单细胞水平 秋水仙素 多倍体 胚胎发生 植株再生
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喀斯特温凉气候区半夏种植密度与施肥试验 被引量:6
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作者 梅艳 赵明勇 +5 位作者 阮培均 王孝华 邵继庆 周靖 张俊 王海玲 《湖北农业科学》 北大核心 2011年第12期2499-2502,共4页
采用三因素五水平二次通用旋转组合设计,研究不同种植密度、有机肥和磷肥施用量对半夏[Pinel-lia ternata(Thunb.)Briet.]产量和总生物碱含量的影响。结果表明,种植密度是影响半夏产量和总生物碱含量的重要因素,其次为磷肥施用量,有机... 采用三因素五水平二次通用旋转组合设计,研究不同种植密度、有机肥和磷肥施用量对半夏[Pinel-lia ternata(Thunb.)Briet.]产量和总生物碱含量的影响。结果表明,种植密度是影响半夏产量和总生物碱含量的重要因素,其次为磷肥施用量,有机肥施用量的影响较小。在试验设计范围内,半夏产量随种植密度的增加而增加。半夏总生物碱含量、种植密度在0水平时最高,超过或低于该水平则下降;随有机肥施用量的增加而增加;随磷肥施用量的增加而下降。在生产中,合理密植,科学施用有机肥、磷肥,将有利于半夏的高产优质生产。 展开更多
关键词 半夏 产量 总生物碱含量 喀斯特温凉气候区
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药用植物半夏细胞悬浮培养和植株再生体系建立研究 被引量:9
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作者 丁兰 欧巧明 《北方园艺》 CAS 北大核心 2007年第9期187-190,共4页
为了建立甘肃产药用植物半夏的细胞悬浮培养和植株再生体系,通过对其不同外质体筛选、愈伤组织诱导和悬浮培养的愈伤组织类型、激素水平、起始密度、震荡速率等影响因素以及细胞生长状态、生长曲线和pH值变化等指标的研究。结果表明:以... 为了建立甘肃产药用植物半夏的细胞悬浮培养和植株再生体系,通过对其不同外质体筛选、愈伤组织诱导和悬浮培养的愈伤组织类型、激素水平、起始密度、震荡速率等影响因素以及细胞生长状态、生长曲线和pH值变化等指标的研究。结果表明:以叶柄为外质体,选择"松散型"愈伤组织和2×105个/mL的起始培养密度,在附加2,4-D 2.0 mg/L+BA 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L的1/2 MS培养基上培养,温度(23±2)℃,转速90 rpm,pH值6.0,黑暗培养为最适悬浮培养体系;经检测细胞生长曲线呈"S"型,培养液pH随着细胞的生长先上升后下降,18 d时细胞基数达到最大值;悬浮继代培养后,通过降低或停止震荡转速,在添加BA 0.5 mg/L+NAA0.5 mg/L的MS液体和固体培养基上可诱导分化出芽和根,进一步形成完整的植株。 展开更多
关键词 药用植物 半夏 愈伤组织 悬浮培养 植株再生
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不同激素及浓度对半夏植株再生的影响 被引量:2
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作者 王前 王珏 +3 位作者 陆远 谷金科 王俊丽 杨林 《中央民族大学学报(自然科学版)》 2009年第1期23-28,共6页
以半夏[Pinellia ternate (Thunb) Briet]叶片、叶柄为外植体,接种于含有不同激素浓度的培养基中,进行诱导培养.结果表明:较低浓度的2,4-D、IAA和NAA有利于半夏外植体小块茎的诱导,随着生长素浓度的升高,愈伤组织的诱导率有所增加,2.0 m... 以半夏[Pinellia ternate (Thunb) Briet]叶片、叶柄为外植体,接种于含有不同激素浓度的培养基中,进行诱导培养.结果表明:较低浓度的2,4-D、IAA和NAA有利于半夏外植体小块茎的诱导,随着生长素浓度的升高,愈伤组织的诱导率有所增加,2.0 mg/L 2,4-DI、AA诱导产生大量被绒毛的粗根,NAA诱导产生致密的长根,从而抑制了小块茎的分化.较低浓度的6-BA有利于小块茎的诱导,随着浓度的升高,愈伤组织的诱导率有所增加.不同浓度的KT、ZT对小块茎的诱导率影响不大. 展开更多
关键词 半夏 激素 组织培养 植株再生
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灵发素(LFS)对诱导半夏体细胞胚胎发生过程中内源激素含量的影响 被引量:3
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作者 梁琼月 周凤珏 +3 位作者 许鸿源 覃柳兰 何丽珊 何冰 《热带农业科学》 2017年第2期38-42,共5页
以半夏叶柄为材料,比较MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L(CK)和MS+LFS 0.3 mg/L(Lingfasu,LFS,灵发素)2种培养基在诱导体细胞胚胎发生和发育过程中内源激素的变化差异。结果表明:在半夏体细胞胚胎发生和发育过程中,2个处理组内源激素变化趋... 以半夏叶柄为材料,比较MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L(CK)和MS+LFS 0.3 mg/L(Lingfasu,LFS,灵发素)2种培养基在诱导体细胞胚胎发生和发育过程中内源激素的变化差异。结果表明:在半夏体细胞胚胎发生和发育过程中,2个处理组内源激素变化趋势,除ABA大致呈"M"状外,IAA、GA_3和ZR激素大致呈"∧"状;在半夏体胚发生的重要时期(胚性愈伤组织时期和早期胚时期),LFS处理组中IAA和ABA的含量显著高于CK组,ZR在早期胚时期高于对照29.0%,GA_3含量以CK组含量较高。此结果表明,LFS对半夏体细胞胚胎的发生和发育过程中内源激素IAA、ZR、ABA和GA_3的调控起着重要作用。 展开更多
关键词 半夏 灵发素(LFS) 体细胞胚胎 内源激素
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灵发素(LFS)对诱导半夏体细胞胚胎发生过程中一些生化指标的影响 被引量:3
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作者 梁琼月 何冰 +4 位作者 周凤珏 解云英 陈汝贤 许鸿章 许鸿源 《中国医药科学》 2012年第11期9-11,共3页
目的探索LFS高效优质诱导半夏体细胞胚胎发生的机制。方法以半夏无菌苗叶柄切段作外植体,MS为基本培养基,比较MS+BA2,0+NAA0.1(CK)和MS+LFS0.3在诱导体细胞胚胎发生和发育过程中一些生化指标的变化差异。结果 (1)LFS显著提高体细胞胚胎... 目的探索LFS高效优质诱导半夏体细胞胚胎发生的机制。方法以半夏无菌苗叶柄切段作外植体,MS为基本培养基,比较MS+BA2,0+NAA0.1(CK)和MS+LFS0.3在诱导体细胞胚胎发生和发育过程中一些生化指标的变化差异。结果 (1)LFS显著提高体细胞胚胎发生发育过程中可溶性蛋白质、可溶性糖和淀粉等的含量,为增殖更多更壮的体胚提供物质保障。(2)LFS还显著提高SOD、POD和PPO三种抗氧化酶的活性,以利及时清除旺盛代谢产生的自由基,为体细胞胚胎的发生发育创造良好的内环境。结论 LFS能高效优质地诱导半夏体胚的发生发育,与其显著提高可溶性蛋白质、可溶性糖和淀粉的含量及提高抗氧化酶的活性密切相关。 展开更多
关键词 半夏 灵发素 体细胞胚胎
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半夏miR167及其靶基因响应大豆花叶病毒胁迫的表达
9
作者 王晨燕 杜江 +3 位作者 马振男 张丽 王德富 牛颜冰 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第5期724-733,共10页
MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA,在植物逆境及生物胁迫中通过调节靶基因来发挥重要的调控作用。半夏内源miR167是否参与了大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的胁迫及相互作用关系尚不清楚。本研究利用茎环法扩增半夏内源mi... MicroRNAs(miRNAs)是一类小的非编码RNA,在植物逆境及生物胁迫中通过调节靶基因来发挥重要的调控作用。半夏内源miR167是否参与了大豆花叶病毒(soybean mosaic virus,SMV)的胁迫及相互作用关系尚不清楚。本研究利用茎环法扩增半夏内源miR167基因,命名为pt-miR167,采用生物信息学软件对其进行保守性分析,系统进化性分析及靶基因预测。在此基础上,采用qRT-PCR技术检测病毒积累量、miR167及其潜在的靶基因的表达水平,分析miR167及靶基因响应病毒侵染的表达模式。结果表明,病毒积累量在5~15 d时迅速增加,其中10 d时增加最快,随后呈现缓慢上升趋势。病毒侵染后,pt-miR167相比对照组,表达量呈下调,并且在10 d时表达量最低。进化树分析表明,pt-miR167与番茄(Solanum lycopersicum)中的sly-miR167a聚为一族,高度同源。预测的潜在主要靶基因ARF6表达量与pt-miR167表达量呈现正好相反的趋势,其在10 d时表达量达到最高。本研究表明,miRNA167参与了寄主半夏与病毒SMV的相互作用关系,研究结果有助于揭示SMV与寄主半夏之间的相互作用机制,为今后深入研究病毒与植物提供了参考,为半夏生产提供了研究的基础。 展开更多
关键词 半夏 大豆花叶病毒 miR167 靶基因 表达模式
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兰炭在造气炉中试烧小结 被引量:1
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作者 高志勇 《化肥工业》 CAS 2011年第1期63-65,共3页
随着冶金焦价格不断攀升,导致TDI产品生产成本大幅增加。兰炭由于煤种、生产工艺的原因,在强度和挥发分含量上具有优势,因此选用兰炭进行试烧试验。试烧结果表明,在造气炉出口温度约380℃、炉条温度120~160℃条件下,系统可稳定运行。
关键词 兰炭 试烧 小结
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Cation Selectivity of Channels Formed at Planar Lipid Bilayer by Pinellia ternata Lectin 被引量:3
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作者 张辉 施玉醻 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1994年第5期547-556,共10页
By means of the two-compartment system. PTL-channels, the first lectin channels formed on planar lipid bilayers by Pinellia ternata lectin (PTL) have been studied. The results show (i) PTL-channels are voltage-indepen... By means of the two-compartment system. PTL-channels, the first lectin channels formed on planar lipid bilayers by Pinellia ternata lectin (PTL) have been studied. The results show (i) PTL-channels are voltage-independent and have apparent subunits; (ii) in 50 mmol/L KC1 and 25 mmol/L BaCl2 solutions, a single channel has unit conductance of 21 pS and 42 pS, respectively; (iii) the channel exhibits a slightly higher permeability to divalent than monovalent cation (PBa/PK=4.1), and (iv) the selectivity among divalent or monovalent cations is poor. The cation selectivity sequence for the channel will follow PBa(7. 0)-Psr (6. 4)~PMg(6. 4)>PK(1. 7)>PN.(1. 0)~PLi(l. 0).Moreover, these data also give explanation to the facilitatory action of PTL on the release of acetyl-choline from motor nerve terminals. 展开更多
关键词 Pinellia ternata briet LECTIN LIPID BILAYER SINGLE-CHANNEL recording CATION selectivity.
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