采用模块式消化、全自动凯氏定氮仪测定食品中蛋白质 被引量：8

1

作者 王丹红 周黎榕 +1 位作者 傅弘毅 朱曙梅 《福建分析测试》 CAS 2004年第2期1949-1950,1965,共3页

采用模块式消化、全自动凯氏定氮仪测定食品中的蛋白质含量,对于食品中蛋白质含量3%-80%范围均能获得良好的结果。与经典凯氏法比较,测定结果令人满意,且该方法快速、准确。

关键词 模块式消化 全自动凯氏定氮仪 蛋白质 食品 测定

在线阅读 下载PDF 职称材料

多营养补充对黄牛氮平衡和草料营养物质消化率的影响 被引量：4

2

作者 张彬 李丽立 +1 位作者 曲湘勇 刘春发 《草业学报》 CSCD 2000年第1期79-85,共7页

按 2个 3× 3的拉丁方设计研究了利用舔砖进行多营养补充对黄牛氮平衡和草料营养物质消化率的影响。结果表明 :多营养补充可明显改善黄牛的增重速度 (P<0 .0 1)和饲料转化率 (P <0 .0 5) ,使黄牛的日增重在单喂稻草、氨化稻... 按 2个 3× 3的拉丁方设计研究了利用舔砖进行多营养补充对黄牛氮平衡和草料营养物质消化率的影响。结果表明 :多营养补充可明显改善黄牛的增重速度 (P<0 .0 1)和饲料转化率 (P <0 .0 5) ,使黄牛的日增重在单喂稻草、氨化稻草和干草的基础上分别提高了2 4 .99%、16 .12 %和 2 2 .92 % ;可提高牛对草料中 DM、OM、CP、NDF和 ADF等成分的摄入量并减少这些成分的粪中排泄量 ;显著 (P<0 .0 5)提高草料中 DM、OM、NDF和 ADF的消化率和极显著 (P<0 .0 1)提高 CP的消化率 ;明显改善黄牛的氮平衡 ,显著 (P<0 .0 5)增加氮的摄入量和存留量 ,极显著 (P<0 .0 1)提高氮和蛋白质的利用率。 展开更多

关键词 黄牛 草料 营养补充 氮平衡 消化率

在线阅读 下载PDF 职称材料

乌头碱上消化道吸收实验研究 被引量：18

3

作者 李建荣 高晓山 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期46-48,共3页

以心电图改变,主要是房宣传导阻滞作为乌头碱吸收的明确指标,对乌头碱经口给药的吸收部位进行研究。实验表明,乌头碱可在大鼠的食道、胃内吸收,大鼠食道吸收乌头碱的能力明显强于胃。

关键词 乌头碱 传导阻滞 上消化道吸收

暂未订购

牛、羊矿物质复合舔块的使用效果研究 被引量：1

4

作者 刘建新 吴耀明 +2 位作者 徐宁迎 戴旭明 姚军 《广东微量元素科学》 CAS 1996年第7期53-59,共7页

通过动物饲养试验、消化代谢试验等对作者研制的牛、羊复合矿物质舔块进行了应用效果研究．饲养对比试验结果表明，补喂舔块能提高黄牛日增重８２％（Ｐ＜０．０５），提高山羊日增重３０％（Ｐ＜０．０５），促生产效果十分明显。消化... 通过动物饲养试验、消化代谢试验等对作者研制的牛、羊复合矿物质舔块进行了应用效果研究．饲养对比试验结果表明，补喂舔块能提高黄牛日增重８２％（Ｐ＜０．０５），提高山羊日增重３０％（Ｐ＜０．０５），促生产效果十分明显。消化代谢试验结果表明，补喂舔块使干草和稻草的干物质、有机物消化率分别提高１２．０％～１３．１％、１０．４％～１２．７％；稻草消化率提高到氨化稻草同样水平．用尼龙袋法测定结果表明，加喂舔块可提高干草、稻草和氨化稻草的干物质瘤胃降解度，加速稻草干物质的降解速率．舔块还能加快稻草、干草纤维的瘤胃消化速率，缩短干草纤维消化时间，增加内容物通过瘤胃速度．综合结果，使稻草和干草纤维的瘤胃内有效消化量得到改善。 展开更多

关键词 舔块 消化率 牛 羊 矿物质舔块 饲养管理

在线阅读 下载PDF 职称材料

酶消化法联合组织块法与经典酶消化法体外分离培养黑色素细胞的比较 被引量：2

5

作者 牛牧 李其林 +3 位作者 何丹华 黄永华 陆小娟 戴丽冰 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期501-504,共4页

目的对酶消化法联合组织块法(以下简称"联合法")与单纯酶消化法体外分离培养人黑色素细胞进行比较,以找到更加快速、经济、简便的黑色素细胞体外分离培养方法。方法使用倒置相差显微镜连续多代观察两种方法体外培养的黑色素... 目的对酶消化法联合组织块法(以下简称"联合法")与单纯酶消化法体外分离培养人黑色素细胞进行比较,以找到更加快速、经济、简便的黑色素细胞体外分离培养方法。方法使用倒置相差显微镜连续多代观察两种方法体外培养的黑色素细胞原代、传代情况,分别从形态学、生长情况等方面对比两种方法培养黑色素细胞的差别。结果细胞形态:联合法分离的细胞同源性好,细胞较细长,树突较多且相互交叉成网状呈集落分布,但初代培养时间较长;酶消化法分离的细胞同源性一般,初代细胞较粗短,树突较少且细胞分布较分散,但初代培养时间短。两种方法细胞形态随着传代次数的增多渐趋一致。生长情况:酶消化法分离的细胞一次可获得较大的细胞量,但容易污染,且初代培养的细胞混有较多的上皮细胞,需多次传代纯化;联合法分离的细胞较单一,但细胞量相对较少,两种方法分离细胞增殖和生长曲线大体一致。结论联合法可获得比较可观的细胞量,两次传代后即可获得比较纯净的黑色素细胞,可避免胰蛋白酶对黑色素细胞的损伤,是较为快速、经济的黑色素细胞体外分离方法。 展开更多

关键词 黑色素细胞 联合法 酶消化法 体外培养

暂未订购

自然流产胚胎绒毛细胞培养方法比较 被引量：4

6

作者 朱庆文 施蔚虹 《中国计划生育学杂志》 2012年第9期629-631,共3页

目的:探讨自然流产胚胎绒毛细胞培养的简单有效方法。方法:取57例早期自然流产胚胎绒毛组织分别采用改良组织块培养法和酶消化法进行培养。结果:改良组织块培养法培养成功51例(89.5%),酶消化法培养成功42例(73.7%),两者比较差异有统计... 目的:探讨自然流产胚胎绒毛细胞培养的简单有效方法。方法:取57例早期自然流产胚胎绒毛组织分别采用改良组织块培养法和酶消化法进行培养。结果:改良组织块培养法培养成功51例(89.5%),酶消化法培养成功42例(73.7%),两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:改良组织块培养法用于自然流产胚胎染色体诊断简单可行,成功率高。 展开更多

关键词 绒毛组织细胞 改良组织块培养法 酶消化培养法

暂未订购

用于SQL注入检测的语句块摘要树模型 被引量：1

7

作者 黄保华 马岩 谢统义 《信息安全与技术》 2012年第3期34-37,共4页

SQL注入具有危害性大而实施简单的特点,目前已经成为危害网络信息安全的主要攻击方法之一。本文提出一个用于SQL注入检测的语句块摘要树模型,定义抽象SQL语句、语句块和反映应用系统功能的语句块摘要树,给出该树的生成算法和基于该树的... SQL注入具有危害性大而实施简单的特点,目前已经成为危害网络信息安全的主要攻击方法之一。本文提出一个用于SQL注入检测的语句块摘要树模型,定义抽象SQL语句、语句块和反映应用系统功能的语句块摘要树,给出该树的生成算法和基于该树的SQL注入检测算法,将检测纳入到应用系统执行的SQL语句序列上下文中,提高了检测的准确性,降低了误报率。实验表明,基于语句块摘要树模型实现SQL注入检测的中间件对系统性能影响很小,说明了模型的有效性和可行性。 展开更多

关键词 SQL注入 抽象SQL语句 语句块摘要树

在线阅读 下载PDF 职称材料

桂牧一号杂交象草在人工瘤胃培养液中蛋白质及氨基酸的消化规律研究 被引量：4

8

作者 杨膺白 李菁华 +3 位作者 赵雅丽 叶添梅 蔡小艳 于凯 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2021年第22期103-108,152,153,共8页

为了研究桂牧一号杂交象草在人工瘤胃培养液中蛋白质和氨基酸的消化规律,筛选消化受阻蛋白并分析其功能,试验将3只黑山羊成年羯羊的瘤胃液与人工唾液以1∶2的体积比混合,配制成人工瘤胃培养液,采用产气法消化10 g桂牧一号杂交象草,测定... 为了研究桂牧一号杂交象草在人工瘤胃培养液中蛋白质和氨基酸的消化规律,筛选消化受阻蛋白并分析其功能,试验将3只黑山羊成年羯羊的瘤胃液与人工唾液以1∶2的体积比混合,配制成人工瘤胃培养液,采用产气法消化10 g桂牧一号杂交象草,测定桂牧一号杂交象草原料及在人工瘤胃培养液中不同消化时间点(12,24,48小时)的干物质、蛋白质(粗蛋白、真蛋白、可溶性粗蛋白)相对含量,计算其消化率;采用定量蛋白组学筛选不同消化时间点的消化受阻蛋白,并对消化12 h的消化受阻蛋白进行亚细胞定位、基因本体(GO)注释和酶活性注释;测定不同消化时间点桂牧一号杂交象草样品中氨基酸含量及消化率。结果表明:桂牧一号杂交象草样品随消化时间的延长,粗蛋白和真蛋白的消化率逐渐升高,消化24小时时的可溶性粗蛋白消化率低于12小时时;与0小时对比,消化12小时时鉴定到66个消化受阻蛋白,消化24小时时鉴定到105个消化受阻蛋白,消化48小时时鉴定到112个消化受阻蛋白;消化12,24,48小时时的消化受阻蛋白都主要定位于叶绿体中;消化12小时时的消化受阻蛋白主要分布在RNA代谢过程、细胞组分发生、大分子复合物亚基组成等生物学过程,类囊体部分、类囊体、叶绿体类囊体、质体类囊体等细胞组分,结合、杂环化合物结合、有机环状化合物结合等分子功能;消化12小时时的消化受阻蛋白具有水解酶功能的蛋白数量最多,其次是转移酶、氧化还原酶等;桂牧一号杂交象草氨基酸含量整体呈0~24 h上升、24~48 h降低的趋势,消化12小时时,丙氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸的消化率较低(<10%),其中组氨酸消化率最低(0.41%)。说明在人工瘤胃培养液条件下,桂牧一号杂交象草的蛋白质和氨基酸的消化存在阻滞现象。 展开更多

关键词 桂牧一号杂交象草 消化受阻蛋白 蛋白质组学 人工瘤胃液 氨基酸

原文传递

复合营养舔砖对山羊的营养价值和饲用效果研究 Ⅲ.对日粮营养物质消化率和氮平衡的影响

9

作者 李丽立 张彬 +2 位作者 刘成一 林大木 陈立祥 《湖南农业大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第4期327-330,共4页

为了探寻复合营养舔砖对山羊作用的内在机制，按２ 个３×３ 的拉丁方设计研究了舔砖对日粮营养物质消化率和氮平衡的影响．结果表明：复合营养舔砖可明显提高山羊的增重速度，山羊补饲舔砖后的日增重比单喂稻草、氨化稻草和野杂干... 为了探寻复合营养舔砖对山羊作用的内在机制，按２ 个３×３ 的拉丁方设计研究了舔砖对日粮营养物质消化率和氮平衡的影响．结果表明：复合营养舔砖可明显提高山羊的增重速度，山羊补饲舔砖后的日增重比单喂稻草、氨化稻草和野杂干草分别提高了 ３２０６％ ，２４１７％ 和３０２１％ ．补饲舔砖后，山羊对粗饲料中 Ｄ Ｍ， Ｏ Ｍ ， Ｃ Ｐ， Ｎ Ｄ Ｆ 和 Ａ Ｄ Ｆ 的摄入量均有提高；对粗饲料中 Ｄ Ｍ ， Ｏ Ｍ， Ｄ Ｎ Ｆ和 Ａ Ｄ Ｆ 等营养成分的消化率有明显提高，对粗饲料、粗蛋白质的消化率有极显著的提高．补饲舔砖还可明显改善山羊氮平衡，显著增加氮存留量，显著提高氮和蛋白质利用率． 展开更多

关键词 山羊 复合营养舔砖 氮平衡 消化率

在线阅读 下载PDF 职称材料

复合营养舔砖对瘤胃酶活性及消化代谢的影响 被引量：1

10

作者 叶鼎承 刘庆华 《福建畜牧兽医》 2010年第3期6-8,共3页

为了研究复合营养舔砖对瘤胃酶活性及消化代谢的影响,选用4头装有永久瘤胃瘘管的公牛(丹麦红牛公与闽南黄牛母的杂种一代),采用反转试验设计,对瘤胃内pH值、氨态氮(NH3-N)和瘤胃液中纤维素酶、蛋白水解酶的活性进行测定。研究表明:(1)... 为了研究复合营养舔砖对瘤胃酶活性及消化代谢的影响,选用4头装有永久瘤胃瘘管的公牛(丹麦红牛公与闽南黄牛母的杂种一代),采用反转试验设计,对瘤胃内pH值、氨态氮(NH3-N)和瘤胃液中纤维素酶、蛋白水解酶的活性进行测定。研究表明:(1)饲喂舔砖后,瘤胃液pH值在短时间内下降,随后又缓慢升高。pH值波动幅度较大,这与复合营养舔砖的蛋白降解率较高有关。(2)舔砖对瘤胃内NH3-N浓度有较大影响,舔砖的粗蛋白含量高达38.7%,产生的NH3-N浓度比对照组高且差异显著。(3)舔砖对瘤胃液蛋白水解酶和纤维素酶的活性没有显著影响,这表明每头饲喂500g/d舔砖对牛的消化代谢功能不会产生不良影响。 展开更多

关键词 复合营养舔砖 瘤胃 酶活性 消化代谢

在线阅读 下载PDF 职称材料

两种奶牛真皮成纤维细胞分离培养方法的比较 被引量：2

11

作者 鲁文赓 袁思琦 +4 位作者 司琳清 田春雨 谢何昕 周继伟 金吉东 《黑龙江八一农垦大学学报》 2023年第1期41-45,共5页

为了比较两种体外分离和培养奶牛真皮成纤维细胞方法,采集奶牛蹄部真皮组织,通过组织块贴壁法和双酶消化法(胰蛋白酶-Ⅰ型胶原酶)分离原代奶牛真皮成纤维细胞,通过传代培养进一步纯化并扩增。利用显微镜观察细胞形态及生长特性,MTT法用... 为了比较两种体外分离和培养奶牛真皮成纤维细胞方法,采集奶牛蹄部真皮组织,通过组织块贴壁法和双酶消化法(胰蛋白酶-Ⅰ型胶原酶)分离原代奶牛真皮成纤维细胞,通过传代培养进一步纯化并扩增。利用显微镜观察细胞形态及生长特性,MTT法用于绘制细胞生长曲线,利用细胞免疫荧光技术检测其表面标志物,鉴定细胞纯度。倒置显微镜下观察,贴壁后第6天有细胞爬出,形态多呈长梭形,排列紧密呈漩涡状或束状;双酶消化组第2天有长梭形细胞生长,混杂少量上皮细胞生长。生长曲线图表示,组织块贴壁组细胞生长速度较快。免疫化学荧光检测第四代奶牛真皮成纤维细胞,波形蛋白呈阳性表达,角蛋白-18呈阴性表达,表示细胞纯度较高。两种方法均能分离出奶牛真皮成纤维细胞,与双酶消化法相比,组织块贴壁法分离的细胞纯度更高,活性更佳,增殖周期更短,提示组织块贴壁法是分离培养奶牛真皮成纤维细胞的首选方法。 展开更多

关键词 奶牛 蹄叶炎 真皮成纤维细胞 组织块贴壁法 双酶消化法

在线阅读 下载PDF 职称材料

小鼠胎儿成纤维细胞饲养层的制备 被引量：1

12

作者 郎洪彦 王海龙 +2 位作者 胡鹏飞 张金友 张贵学 《吉林畜牧兽医》 2006年第5期8-9,共2页

在进行胚胎干细胞、精原干细胞等特殊细胞的研究时,往往需要将这些细胞接种到成纤维细胞的饲养层上,但需要量不大。因此不便于大规模的制备。本实验通过将组织块培养法和酶消化培养法结合起来制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层,在一定程度... 在进行胚胎干细胞、精原干细胞等特殊细胞的研究时,往往需要将这些细胞接种到成纤维细胞的饲养层上,但需要量不大。因此不便于大规模的制备。本实验通过将组织块培养法和酶消化培养法结合起来制备小鼠胎儿成纤维细胞饲养层,在一定程度上解决了这一问题。利用该方法制备成纤维细胞饲养层,既简化了实验操作,又节省了实验费用。将精原干细胞接种到该饲养层后,其可在体外进行生长和增殖。 展开更多

关键词 组织块培养法 酶消化培齐法 饲养层 小鼠

在线阅读 下载PDF 职称材料

原代胃癌相关成纤维细胞的分离培养与鉴定方法比较

13

作者 梅晶晶 吴霏 +3 位作者 支慧 徐慧秋 江玉华 李佳嘉 《右江民族医学院学报》 2021年第6期710-713,共4页

目的 通过优化人原代胃癌相关成纤维细胞的分离培养方法来提高分离培养细胞的纯度和效率,以期为胃癌的治疗建立相关模型。方法 采用胰酶消化法和组织块消化法相结合,二次筛网过滤、差速贴壁法分离培养人原代胃癌相关成纤维细胞,观察胃... 目的 通过优化人原代胃癌相关成纤维细胞的分离培养方法来提高分离培养细胞的纯度和效率,以期为胃癌的治疗建立相关模型。方法 采用胰酶消化法和组织块消化法相结合,二次筛网过滤、差速贴壁法分离培养人原代胃癌相关成纤维细胞,观察胃癌相关成纤维细胞的形态和生长特点。HE染色和免疫组化鉴别胃癌相关成纤维细胞的表面标志物。结果 0.25%胰酶消化3~4h后,经过筛网过滤,可以得到较少的胃癌相关成纤维细胞,过滤后的组织块继续在培养瓶中培养可以得到较多的胃癌相关成纤维细胞。胰酶消化法得到的细胞在20d后可以铺满瓶底,组织块培养法得到的细胞可以在14d铺满瓶底。结论 胃癌相关成纤维细胞在第5代后的生长速度开始缓慢,并且随着传代次数的增多,细胞的形态发生相应的改变,细胞触角增多,胞体变短。所获得的细胞ɑ-平滑肌肌动蛋白和波形蛋白都是呈阳性表达,角蛋白CK-18呈阴性表达。 展开更多

关键词 癌相关成纤维细胞 胰酶消化法 组织块培养法

暂未订购

绒毛细胞培养方法的比较及绒毛细胞核型分析在胚胎停育中的应用

14

作者 汤素环 李付广 +2 位作者 谭卫荷 唐江 郭晓燕 《中国优生与遗传杂志》 2017年第4期63-64,133,共3页

目的探讨两种绒毛细胞培养方法对绒毛细胞培养结果的影响以及其染色体核型分析在胚胎停育中的应用。方法取103例胚胎停育的绒毛细胞分别采用胰酶与胶原酶混合消化法和组织块直接培养法进行细胞培养、染色体核型分析。结果 103例绒毛组... 目的探讨两种绒毛细胞培养方法对绒毛细胞培养结果的影响以及其染色体核型分析在胚胎停育中的应用。方法取103例胚胎停育的绒毛细胞分别采用胰酶与胶原酶混合消化法和组织块直接培养法进行细胞培养、染色体核型分析。结果 103例绒毛组织两种方法均培养成功98例,培养成功率为95.1%,胰酶与胶原酶混合消化法比组织块培养法培养时间更短。共分析绒毛标本98例,发现异常核型42例,异常率42.86%,其中数目异常最多(39例)。结论胰酶与胶原酶混合消化法可以缩短绒毛细胞培养时间,绒毛染色体核型异常是胚胎停育的重要因素。 展开更多

关键词 绒毛细胞 组织块培养法 胰酶与胶原酶混合消化法培养 染色体核型分析 胚胎停育

原文传递

补充青贮玉米或精料对复合稻草块消化率及其饲喂奶牛产奶性能的影响 被引量：3

15

作者 刘晓晖 吴跃明 刘建新 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期671-676,共6页

通过体外产气试验和奶牛饲养试验研究了4种不同处理复合稻草块的消化率及其对奶牛采食量和产奶性能的影响.复合稻草块的调制:①稻草块Ⅰ由74.2%的稻草、20.4%混合精料等压块调制而成;②稻草块Ⅱ、Ⅲ是将稻草块Ⅰ中10%的稻草分别用青贮... 通过体外产气试验和奶牛饲养试验研究了4种不同处理复合稻草块的消化率及其对奶牛采食量和产奶性能的影响.复合稻草块的调制:①稻草块Ⅰ由74.2%的稻草、20.4%混合精料等压块调制而成;②稻草块Ⅱ、Ⅲ是将稻草块Ⅰ中10%的稻草分别用青贮玉米、混合精料等量替代(按DM计)调制而成;③稻草块Ⅳ的组成与稻草块Ⅰ相同,仅在压块时额外添加10%的水分,以降低其硬度.试验1,通过体外产气法测定了稻草块Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ和苜蓿草块的体外产气量(GP)、产气参数、体外有机物消化率(OMD)及代谢能(ME).试验2,选取25头初产荷斯坦泌乳母牛采用随机区组设计按产犊日期、产奶量一致原则等分为5组,对照组用奶牛场常规日粮饲喂,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别用稻草块Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ等量替代苜蓿草块,每头替代量为2.7 kg?d-1(DM计),试验期49 d.结果表明,稻草块Ⅱ(P>0.05)和稻草块Ⅲ(P<0.05)的GP24、GP48、OMD、ME均明显高于稻草块Ⅰ,但仍低于苜蓿草块(P<0.05),产气滞后时间低于稻草块Ⅰ(P>0.05),且明显短于苜蓿草块(P>0.05),补充青贮玉米、精料或降低硬度可显著提高对稻草块的采食量,提高幅度分别为78.4%(P<0.01)、75.0%(P<0.01)、43.8%(P<0.01).相应的,试验Ⅱ、Ⅲ组的产奶量、4%标准乳产量和乳脂率与试验Ⅰ组相比,有明显提高趋势(P>0.05),且明显高于对照组(P>0.05).综上所述,给复合稻草块适量补充青贮玉米或增加精料比例能有效提高其采食量、有机物消化率及代谢能,并达到略优于苜蓿草块的饲喂效果. 展开更多

关键词 复合稻草块 采食量 消化率 产奶性能 奶牛

在线阅读 下载PDF 职称材料

花鲈肠上皮细胞原代培养及鉴定方法的探讨研究 被引量：4

16

作者 李莎 刘紫严 +4 位作者 杨红玲 蔡国鹤 聂庆杰 张春晓 孙云章 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期381-389,共9页

为探究建立稳定可靠的花鲈肠上皮细胞原代培养方法,通过组织块法和酶消化法培养花鲈肠上皮细胞,确定酶消化法的最佳消化液及消化时间,所得细胞悬液于L-15培养液中进行培养。利用形态学观察、透射电镜观察和碱性磷酸酶染色方法对细胞进... 为探究建立稳定可靠的花鲈肠上皮细胞原代培养方法,通过组织块法和酶消化法培养花鲈肠上皮细胞,确定酶消化法的最佳消化液及消化时间,所得细胞悬液于L-15培养液中进行培养。利用形态学观察、透射电镜观察和碱性磷酸酶染色方法对细胞进行鉴定。结果显示:组织块法细胞迁出情况不稳定,且迁出时间较长;酶消化法的最佳消化液为胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化液,最佳消化时间为45 min;胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化法获得的细胞连接紧密、排列整齐、呈上皮细胞典型的“铺路石”状,细胞相对独立、界限清晰。透射电镜观察和碱性磷酸酶染色进一步证实所培养的细胞为肠上皮细胞。总之,经胶原酶Ⅰ、Ⅳ联合消化液消化45 min、培养48 h可得到初始条件一致、生长旺盛的花鲈原代肠上皮细胞。 展开更多

关键词 花鲈 肠上皮细胞 原代培养 组织块法 酶消化法

在线阅读 下载PDF 职称材料

犬子宫内膜上皮细胞和基质细胞的分离培养与鉴定 被引量：6

17

作者 宗振平 朱琪 +3 位作者 钱婉莹 钟友刚 许剑琴 刘凤华 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2016年第1期20-23,I0001,共5页

为了探究犬子宫内膜细胞的培养方法,采用组织块培养法和酶消化培养法进行细胞培养并使用倒置显微镜观察细胞的形态结构和生长状态,对细胞进行免疫组化鉴定。结果表明,组织块培养法需要1周左右培养出犬子宫内膜上皮细胞,且细胞不易纯化;... 为了探究犬子宫内膜细胞的培养方法,采用组织块培养法和酶消化培养法进行细胞培养并使用倒置显微镜观察细胞的形态结构和生长状态,对细胞进行免疫组化鉴定。结果表明,组织块培养法需要1周左右培养出犬子宫内膜上皮细胞,且细胞不易纯化;酶消化培养法节省时间,获得的细胞活力强、纯度高。综上所述酶消化培养法更适于培养犬子宫内膜细胞,为后期细胞水平研究奠定基础。 展开更多

关键词 犬 子宫内膜细胞 组织块培养法 酶消化培养法

在线阅读 下载PDF 职称材料

不同测温标准器及填充介质对消解实验仪温度测量影响的探讨 被引量：1

18

作者 李少鹏 陈成新 胡继承 《计测技术》 2016年第6期54-57,共4页

使用不同测温标准器及填充介质进行水解实验仪的温度实验,探讨不同条件下对温度测量结果的影响。经实验验证,推荐使用热电偶测温标准器进行温度测量,同时可使用填充介质作为导热辅助,以减少非紧密接触产生的误差。

关键词 测温标准器 填充介质 消解实验仪 温度

在线阅读 下载PDF 职称材料

组织块贴壁法和混合酶消化法分离原代血管平滑肌细胞的表型特征比较 被引量：3

19

作者 赵奇慧 张恂 +2 位作者 申刚义 刘伟志 朱丹 《中国医药导刊》 2019年第5期294-298,共5页

目的:探究组织块贴壁法、混合酶消化法分离培养的原代大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)在形态、生长、表型特征蛋白表达方面的不同,为合理使用VSMCs提供参考。方法:分别使用组织块贴壁法和混合酶消化法分离获得原代VSMCs,进行体外传代培养,观... 目的:探究组织块贴壁法、混合酶消化法分离培养的原代大鼠血管平滑肌细胞(VSMCs)在形态、生长、表型特征蛋白表达方面的不同,为合理使用VSMCs提供参考。方法:分别使用组织块贴壁法和混合酶消化法分离获得原代VSMCs,进行体外传代培养,观察细胞形态及细胞表型特征蛋白免疫荧光亮度。结果:混合酶消化法获得的原代VSMCs特征蛋白SMα-actin表达明显,表明在收缩表型特征方面优于组织块贴壁法,随着传代次数的增加,混合酶消化法在第7代仍部分保留收缩表型特性,而组织块贴壁法在第7代已丧失收缩表型特性,转变为合成型。结论:混合酶消化法在获得较稳定的收缩表型VSMCs方面比组织块贴壁法更具有优势,各实验室应根据自身的实验条件和实验设计准确选择。 展开更多

关键词 组织块贴壁法 混合酶消化法 SMα-actin 收缩表型 合成表型

暂未订购

哈萨克羊胎盘原代滋养层细胞的分离、纯化与基本特征鉴定 被引量：1

20

作者 陈慧慧 郝科兴 +4 位作者 龙德智 宋美君 海思妤 王静 胡广东 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2022年第11期5-11,共7页

为了获得纯度较高的哈萨克羊胎盘原代滋养层细胞,采用组织块培养法、胰酶消化法和胰酶+组织块法分离原代滋养层细胞,通过胰酶差时消化法对细胞进行纯化,显微镜下观察滋养层细胞的形态学特点和生长特性,利用免疫细胞化学染色法对滋养层... 为了获得纯度较高的哈萨克羊胎盘原代滋养层细胞,采用组织块培养法、胰酶消化法和胰酶+组织块法分离原代滋养层细胞,通过胰酶差时消化法对细胞进行纯化,显微镜下观察滋养层细胞的形态学特点和生长特性,利用免疫细胞化学染色法对滋养层细胞的特异性表达角蛋白7(cytokeratin 7,CK7)进行鉴定,通过RT-PCR对滋养层细胞标志基因干扰素-τ(IFN-τ)进行检测,同时使用孕酮(P_(4))、雌二醇(E_(2))或P_(4)、E_(2)和IFN-τ处理滋养层细胞,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测胚胎附植相关基因的转录水平。结果显示,与其他方法相比,利用胰酶+组织块法细胞生长周期较短,第2天有细胞从组织块中迁出,5~6 d细胞呈单层铺开,细胞均呈上皮样生长。免疫细胞化学染色显示,细胞CK7染色阳性结果大于95%。RT-PCR检测到分离的滋养层细胞可正常表达IFN-τ。此外,通过P_(4)、E_(2)和IFN-τ处理后,胚胎附植相关基因ISG15、CXCL10、RSAD2、CTSL、SPP1和MUC1在滋养层细胞中的表达水平显著上调。本研究通过胰酶+组织块培养法结合胰酶差时消化法成功分离和纯化哈萨克羊胎盘原代滋养层细胞,为哈萨克羊胚胎附植相关调控机制的研究奠定了基础。 展开更多

关键词 哈萨克羊 滋养层细胞 胰酶+组织块培养

在线阅读 下载PDF 职称材料