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茎瘤芥BjuDDF1的克隆与表达分析
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作者 陈明飞 何秦瑶 +2 位作者 彭姣姣 张世琦 程春红 《分子植物育种》 北大核心 2026年第4期1085-1091,共7页
本研究克隆BjuDDF1的蛋白编码序列并分析了BjuDDF1的亚细胞定位情况,并在NaCl、ABA和低温胁迫处理下分析了BjuDDF1的表达模式,为深入探究BjuDDF1的基因功能和抗逆分子机制提供研究依据。本研究提取茎瘤芥幼苗RNA,反转录cDNA,以cDNA作为... 本研究克隆BjuDDF1的蛋白编码序列并分析了BjuDDF1的亚细胞定位情况,并在NaCl、ABA和低温胁迫处理下分析了BjuDDF1的表达模式,为深入探究BjuDDF1的基因功能和抗逆分子机制提供研究依据。本研究提取茎瘤芥幼苗RNA,反转录cDNA,以cDNA作为模板,采用PCR技术对BjuDDF1的CDS序列进行克隆,采用无缝克隆技术将目的载体35S::PTF101-GFP与BjuDDF1的CDS序列进行连接;利用生物信息学、荧光定量PCR和烟草叶片瞬时转化技术,对BjuDDF1的基因和蛋白序列及结构、逆境胁迫下的基因表达模式及BjuDDF1的亚细胞定位情况进行分析。研究结果表明,BjuDDF1与DDF1(AT1G12610)的基因同源性可达73%,并且两者的蛋白序列高度相似,均能编码一种AP2型转录因子;在50μmol/L ABA处理3 h后,BjuDDF1的表达显著受ABA诱导表达,而在NaCl和低温胁迫处理下,BjuDDF1的表达与对照组没有显著性差异,表明BjuDDF1可能参与调控榨菜对于ABA的响应;在烟草细胞的细胞核中能清晰地检测到BjuDDF1-GFP融合蛋白信号,表明BjuDDF1编码蛋白在细胞核中发挥生物学功能。本研究结果将为进一步研究BjuDDF1的生物学功能和培育耐逆稳产的茎瘤芥新品种提供科学参考。 展开更多
关键词 茎瘤芥 bjuddf1 基因克隆 基因表达分析 亚细胞定位
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