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大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子单克隆抗体的制备与鉴定 被引量:3
1
作者 王耀 李燕虹 +6 位作者 吴佳蓓 邢云瑞 曹金博 陈秀金 李兆周 邓瑞广 胡骁飞 《中国食品学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第7期216-221,共6页
为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性。选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,... 为制备免疫学特性良好的大豆Bowman-Birk胰蛋白酶抑制因子(BBI)单克隆抗体(mAb),以50μg/只的免疫剂量将BBI免疫BALB/c小鼠,采用间接ELISA和间接竞争ELISA试验鉴定多抗血清效价和敏感性。选择血清效价和敏感性较优的小鼠进行细胞融合,多次筛选得到分泌BBI m Ab的稳定杂交瘤细胞株。采用体内诱生腹水法制备BBI mAb并对其免疫学特性进行鉴定。结果表明:1号小鼠经免疫后效价最高且敏感性最好,半数抑制浓度(IC50)为868.58 ng/mL。经细胞融合筛选得到5株杂交瘤细胞,其中3B7-B10 mAb效价达到1∶4.096×10^5以上,亚型为IgG1型,IC50为83.07 ng/mL,具有亲和力较高且特异性强的优点,表明所制备的mAb免疫学特性良好,能够为建立大豆及其制品中BBI的免疫学检测方法提供良好的抗体基础。 展开更多
关键词 大豆Bowman-birk胰蛋白酶抑制因子 单克隆抗体 免疫学特性
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豆浆成分对Bowman-Birk胰蛋白酶抑制剂热失活程度的影响 被引量:1
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作者 甄少波 王建设 +2 位作者 何辉 刘奕忍 陈业明 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2020年第16期15-20,共6页
建立葡萄糖+Bowman-Birk胰蛋白酶抑制剂(Bowman-Birk inhibitor,BBI)、果糖+BBI和大豆蛋白+BBI模型体系考察还原糖、大豆蛋白及热处理3个因素对BBI热失活的贡献程度。结果显示:未加热条件下,葡萄糖有增强BBI活性的作用,果糖无此作用。... 建立葡萄糖+Bowman-Birk胰蛋白酶抑制剂(Bowman-Birk inhibitor,BBI)、果糖+BBI和大豆蛋白+BBI模型体系考察还原糖、大豆蛋白及热处理3个因素对BBI热失活的贡献程度。结果显示:未加热条件下,葡萄糖有增强BBI活性的作用,果糖无此作用。加热条件下,还原糖对BBI的胰蛋白酶抑制活性(trypsin inhibitor activity,TIA)影响很大,而对胰凝乳蛋白酶抑制活性(chymotrypsin inhibitor activity,CIA)影响非常小;葡萄糖对BBI的TIA影响程度比果糖大;大豆蛋白对BBI的CIA影响程度大于TIA;BBI可与大豆球蛋白的碱性肽链形成二聚体,也可与大豆球蛋白形成多聚体;BBI可形成二聚体。在还原糖、大豆蛋白和BBI质量浓度均为2 mg/mL的情况下(沸水浴3 h),对于TIA失活:葡萄糖>热诱导构象改变>果糖>大豆蛋白;对于CIA失活:大豆蛋白>热诱导构象改变>葡萄糖/果糖。 展开更多
关键词 Bowman-birk胰蛋白酶抑制剂 葡萄糖 果糖 大豆蛋白
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Bowman-Birk蛋白酶抑制剂的体外和动物模型实验抗癌实验研究进展(英文) 被引量:1
3
作者 廖海 周嘉裕 杜林方 《四川动物》 CSCD 北大核心 2005年第4期655-659,共5页
Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)是一种植物丝氨酸蛋白酶抑制剂,能同时抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。体外及动物实验都证实:BBI纯品或BBI浓缩物均有较强的抗癌活性。本文综述了近年来有关BBI的一些抗癌研究进展,包括BBI的结构、临床前研... Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)是一种植物丝氨酸蛋白酶抑制剂,能同时抑制胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶。体外及动物实验都证实:BBI纯品或BBI浓缩物均有较强的抗癌活性。本文综述了近年来有关BBI的一些抗癌研究进展,包括BBI的结构、临床前研究及可能的分子机制等。 展开更多
关键词 Bowman-birk蛋白酶抑制剂 癌化 临床前研究 分子机理
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大豆Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBI)研究进展 被引量:7
4
作者 于颖慧 吴坤 《疾病控制杂志》 2005年第2期150-153,共4页
该文在阐述Bowman Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBI)的分子结构、生理活性及吸收分布的基础上,系统介绍了BBI在抗癌活性和辐射保护功能上取得的研究进展。目前对于BBI抗癌活性的研究已进入到临床试验的阶段。
关键词 黄豆 胰蛋白酶抑制剂 Bowman—birk大豆 分子结构 生理活性 吸收分布 抗癌活性 辐射保护功能
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一个水稻Bowman-Birk家族基因功能的研究
5
作者 颜静宛 林智敏 +3 位作者 苏军 宋亚娜 胡太蛟 王锋 《泉州师范学院学报》 2018年第6期20-24,共5页
采用荧光定量分析和过量表达的方法研究水稻Bowman-Birk家族基因BBTI-13基因的功能.结果显示,BBTI-13在野生型日本晴水稻中具有组织特异性,在胚和花药中表达最低;BBTI-13基因的烟草亚细胞表达定位表明其为组成型表达;过表达株系的田间... 采用荧光定量分析和过量表达的方法研究水稻Bowman-Birk家族基因BBTI-13基因的功能.结果显示,BBTI-13在野生型日本晴水稻中具有组织特异性,在胚和花药中表达最低;BBTI-13基因的烟草亚细胞表达定位表明其为组成型表达;过表达株系的田间表型分析发现,过表达转基因植株与野生型相比株型矮化,粒型稍变大.并通过对水稻株形矮化相关基因的表达进一步分析表明,BBTI-13基因的过量表达会引起水稻相关矮化基因的上调和下调反馈,其中Ghd2、DTH7、Ghd7、THIS1和Ghd8表现上调,OsBZR1、OsSIN表现下调. 展开更多
关键词 水稻 Bowman-birk 基因克隆 功能分析
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植物Bowman-Birk蛋白酶抑制剂家族的基因组学分析 被引量:2
6
作者 廖东颖 古袁扬 +3 位作者 李超林 邓银 周嘉裕 廖海 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期3524-3532,共9页
本研究首先利用HMMER软件对从植物基因组网站phytozome上下载的16种植物的基因组进行检索,再利用Pfam和SMART数据库进一步验证,最终获得91个Bowman-Birk基因。随后进行理化性质分析、系统发育分析、染色体定位及表达分析等。多序列比对... 本研究首先利用HMMER软件对从植物基因组网站phytozome上下载的16种植物的基因组进行检索,再利用Pfam和SMART数据库进一步验证,最终获得91个Bowman-Birk基因。随后进行理化性质分析、系统发育分析、染色体定位及表达分析等。多序列比对结果表明CCD在Bowman-Birk抑制剂中保守性最高,此外多个位点的Cys也具有一定程度的高保守性,表明二硫键在维持Bowman-Birk抑制剂的结构稳定性和抑制活性发挥了至关重要的作用。系统发育分析的结果显示Bowman-Birk基因分为单子叶植物和双子叶植物2个簇,表明Bowman-Birk基因家族的基本特征在单双子叶植物分离之前就已经形成。EST表达分析结果表明Bowman-Birk在不同植物组织中的表达具有差异性,例如大豆的Bowman-Birk基因主要在豆荚中表达,其次是种子,而水稻主要在叶和根中表达。由于豆荚和叶等组织易受到昆虫侵食,因此在这些部位表达Bowman-Birk蛋白酶抑制剂基因有助于增强植物对昆虫的抗性。而种子和根等器官与植物生长发育密切相关,因此Bowman-Birk抑制剂在种子和根中的高表达可能与植物逆境胁迫响应相关。 展开更多
关键词 植物 Bowman-birk 生物信息学分析
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重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂的性质及抑制机理 被引量:2
7
作者 刘利 杨帆 +3 位作者 李素霞 郭奥 刘晓 王之可 《华东理工大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期292-299,共8页
利用大肠杆菌表达系统,成功表达并纯化获得了重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(rBBTI)。对比研究了天然Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBTI)和rBBTI的酶学性质和稳定性,以及分别抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的抑制动力学。结果表明:rBBTI... 利用大肠杆菌表达系统,成功表达并纯化获得了重组Bowman-Birk型大豆胰蛋白酶抑制剂(rBBTI)。对比研究了天然Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂(BBTI)和rBBTI的酶学性质和稳定性,以及分别抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的抑制动力学。结果表明:rBBTI和BBTI都有较好的热稳定性,pH对rBBTI的活性影响较大;rBBTI和BBTI抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的最适条件分别为pH 8、25℃和pH 9、16℃;二者的抑制机理相同,抑制胰蛋白酶时表现为典型的反竞争性抑制作用,而抑制糜蛋白酶时表现为典型的非竞争性抑制作用;rBBTI和BBTI对胰蛋白酶的抑制效率均高于对糜蛋白酶的抑制效率,但rBBTI抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的效率略低于BBTI。 展开更多
关键词 Bowman-birk型大豆胰蛋白酶抑制剂 重组表达 抑制动力学 酶学性质
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Bowman-Birk inhibitors from legumes as colorectal chemopreventive agents 被引量:3
8
作者 Alfonso Clemente Maria del Carmen Arques 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2014年第30期10305-10315,共11页
Aberrant functioning of serine proteases in inflammatory and carcinogenic processes within the gastrointestinal tract(GIT)has prompted scientists to investigate the potential of serine protease inhibitors,both natural... Aberrant functioning of serine proteases in inflammatory and carcinogenic processes within the gastrointestinal tract(GIT)has prompted scientists to investigate the potential of serine protease inhibitors,both natural and synthetic,as modulators of their proteolytic activities.Protease inhibitors of the Bowman-Birk type,a major protease inhibitor family in legume seeds,which inhibit potently and specifically trypsin-and chymotrypsin-like proteases,are currently being investigated as colorectal chemopreventive agents.Physiologically relevant amounts of Bowman-Birk inhibitors(BBI)can reach the large intestine in active form due to their extraordinary resistance to extreme conditions within the GIT.Studies in animal models have proven that dietary BBI from several legume sources,including soybean,pea,lentil and chickpea,can prevent or suppress carcinogenic and inflammatory processes within the GIT.Although the therapeutic targets and the action mechanism of BBI have not yet been elucidated,the emerging evidence suggests that BBI exert their preventive properties via protease inhibition;in this sense,serine proteases should be considered as primary targets in early stages of carcinogenesis.The validation of candidate serine proteases as therapeutic targets together with the identification,within the wide array of natural BBI variants,of the most potent and specific protease inhibitors,are necessary to better understand the potential of this protein family as colorectal chemopreventive agents. 展开更多
关键词 Bowman-birk inhibitors Cell proliferation CHEMOPREVENTION Colorectal cancer Legumes Serine proteases
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Perturbation to Noether Symmetries and Adiabatic Invariants for Generalized Birkhoff Systems Based on El-Nabulsi Dynamical Model 被引量:2
9
作者 宋传静 张毅 《Transactions of Nanjing University of Aeronautics and Astronautics》 EI CSCD 2015年第4期421-427,共7页
With the action of small perturbation on generalized El-Nabulsi-Birkhoff fractional equations,the perturbation to Noether symmetries and adiabatic invariants are studied under the framework of El-Nabulsi′s fractional... With the action of small perturbation on generalized El-Nabulsi-Birkhoff fractional equations,the perturbation to Noether symmetries and adiabatic invariants are studied under the framework of El-Nabulsi′s fractional model.Firstly,based on the invariance of El-Nabulsi-Pfaff action under the infinitesimal transformations of group,the exact invariants are given.Secondly,on the basis of the definition of higher order adiabatic invariants of a dynamical system,the adiabatic invariants of the Noether symmetric perturbation for disturbed generalized El-Nabulsi′s fractional Birkhoff system are presented under some conditions,and some special cases are discussed.Finally,an example known as Hojman-Urrutia problem is given to illustrate the application of the results. 展开更多
关键词 perturbation to Noether symmetry adiabatic invariant El-Nabulsi dynamical model generalized birk-hoff system infinitesimal transformation
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The Harrat Al-Birk basalts in southwest Saudi Arabia:characteristic alkali mafic magmatism related to Red Sea rifting
10
作者 Rami A. Bakhsh 《Acta Geochimica》 EI CAS CSCD 2017年第1期74-88,共15页
Harrat Al-Birk volcanics are products of the Red Sea rift in southwest Saudi Arabia that started in the Tertiary and reached its climax at ~ 5 Ma.This volcanic field is almost monotonous and is dominated by basalts th... Harrat Al-Birk volcanics are products of the Red Sea rift in southwest Saudi Arabia that started in the Tertiary and reached its climax at ~ 5 Ma.This volcanic field is almost monotonous and is dominated by basalts that include mafic-ultramafic mantle xenoliths(gabbro,websterite,and garnet-clinopyroxenite).The present work presents the first detailed petrographic and geochemical notes about the basalts.They comprise vesicular basalt,porphyritic basalt,and flow-textured basalt,in addition to red and black scoria.Geochemically,the volcanic rock varieties of the Harrat Al-Birk are low- to medium-Ti,sodic-alkaline olivine basalts with an enriched oceanic island signature but extruded in a within-plate environment.There is evidence of formation by partial melting with a sort of crystal fractionation dominated by clinopyroxene and Fe-Ti oxides.The latter have abundant titanomagnetite and lesser ilmenite.There is a remarkable enrichment of light rare earth elements and depletion in Ba,Th and K,Ta,and Ti.The geochemical data in this work suggest Harrat Al-Birk basalts represent products of watersaturated melt that was silica undersaturated.This melt was brought to the surface through partial melting of asthenospheric upper mantle that produced enriched oceanic island basalts.Such partial melting is the result of subducted continental mantle lithosphere with considerable mantle metasomatism of subducted oceanic lithosphere that might contain hydrous phases in its peridotites.The fractional crystallization process was controlled by significant separation of clinopyroxene followed by amphiboles and Fe-Ti oxides,particularly ilmenite.Accordingly,the Harrat Al-Birk alkali basalts underwent crystal fractionation that is completely absent in the exotic mantle xenoliths(e.g.Nemeth et al.in The Pleistocene Jabal Akwa A1 Yamaniah maar/tuff ring-scoria cone complex as an analogy for future phreatomagmatic to magmatic explosive eruption scenarios in the Jizan Region,SW Saudi Arabia 2014). 展开更多
关键词 Harrat Al-birk Alkaline basalt Red Sea rifting Hydrous mantle Reworked oceanic crust
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Novel alleles among soybean Bowman-Birk proteinase inhibitor gene families 被引量:2
11
作者 WANG YuePing1,2, CHEN XiongTing2 & QIU LiJuan1 1 National Key Facility for Crop Gene Resources and Genetic Improvement, Key Laboratory of Crop Germplasm & Biotechnology(MOA)/Institute of Crop Science, Chinese Academy of Agricultural Sciences, Beijing 10008, China 2 Institute of Tropical Biotechnology, Chinese Academy of Tropical Agricultural Sciences, Haikou 571101, China 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 2008年第8期687-692,共6页
Trypsin inhibitors have been found in various animals, plants and microorganisms.There were two types of trypsin inhibitors in soybean including Bowman-Birk protease inhibitors(BBI) and Kunitz in-hibitors(KTI).The dif... Trypsin inhibitors have been found in various animals, plants and microorganisms.There were two types of trypsin inhibitors in soybean including Bowman-Birk protease inhibitors(BBI) and Kunitz in-hibitors(KTI).The different BBI genes from wild soybean(G.soja) and cultivated soybean(G.max) formed a multigene family.We constructed a cDNA library of cultivar 'SuiNong 14' seed at the R7 growth stage using the SMART Kit.Seventeen contigs or singletons were highly homologous to soy-bean protease inhibitors.Contigs of 5, 35, 8 and 9 were highly homologous to BBI family members BBI-A1, BBI-A2, BBI-C and BBI-D, respectively.Sequence analyses showed there were novel allelic varia-tions among the 4 BBI members in SuiNong 14.Based on the comparison of soybean seed cDNA li-braries from different developmental stages, it was apparent that the expression of trypsin inhibitors increased during seed development in soybean.Phylogenetic analysis of BBI gene sequences among dicotyledonous and monocotyledonous plants demonstrated that these genes shared a common pro-genitor. 展开更多
关键词 SOYBEAN TRYPSIN INHIBITOR Bowman-birk PROTEINASE INHIBITOR KUNITZ TRYPSIN INHIBITOR allelic VARIATION
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Birks百年传奇 皇家御用
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作者 王元 《时尚北京》 2019年第11期114-115,共2页
谈起Birks这个品牌可能对于很多中国消费者还稍显陌生。这个已有百余年历史的首饰品牌在欧美可谓家喻户晓。前不久,Birks落户了位于前门地区的英园(The British House),落户仪式当天,我与Birks品牌大使相约了本次采访,近距离了解了这个... 谈起Birks这个品牌可能对于很多中国消费者还稍显陌生。这个已有百余年历史的首饰品牌在欧美可谓家喻户晓。前不久,Birks落户了位于前门地区的英园(The British House),落户仪式当天,我与Birks品牌大使相约了本次采访,近距离了解了这个历史悠久且大有来头的品牌。 展开更多
关键词 品牌 birks 首饰
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Inducible expression pattern of rice Bowman-Birk inhibitorgene OsWIP1-2 and its protease inhibitory activity 被引量:7
13
作者 CHENJun LIUJing GUOLei QULijia CHENZhangliang GUHongya 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2004年第9期895-899,共5页
The WIP1-2 gene was cloned from rice. It be-longs to the Bowman-Birk inhibitor gene family. Northern blot showed that expression of this gene was induced by wounding and jasmonic acid (JA). It indicates that the OsWIP... The WIP1-2 gene was cloned from rice. It be-longs to the Bowman-Birk inhibitor gene family. Northern blot showed that expression of this gene was induced by wounding and jasmonic acid (JA). It indicates that the OsWIP1 gene plays an important role in the rice defense sys-tem. The OsWIP1-2 was cloned into pET28a and expressed in E. coli. Its expressed product was purified in the form of fusion protein and tested for the inhibitory activities against trypsin and chymotrypsin. It was found that the fusion pro-tein could inhibit chymotrypsin, but not trypsin. It was also found that the His tag at its C-terminal affected its inhibitory activity significantly. The fusion protein with a natural C-terminal had the inhibitory activity, while no inhibitory activity was detected in the fusion protein with a (His)6-tag at its C-terminal. This implies that extra amino acid residues at the C-terminal of OsWIP1-2 may interfere with its correct folding. The inhibitory assay indicated that the members of rice Bowman-Birk inhibitor gene family probably differenti-ated both in their structure and function. 展开更多
关键词 诱导表达 水稻 创伤诱导 蛋白酶抑制剂 WIPI 茉莉酸
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Expression and inhibitory activity analysis of a 25-kD Bowman-Birk protease inhibitor in rice 被引量:2
14
作者 CHEN Jun MAO Shengji +6 位作者 XlE Yang CAO Zhongren ZHANG Yan LIU jing CHEN Zhangliang QU Lijia GU Hongya 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2006年第1期54-62,共9页
Rice Bowman-Birk inhibitors (RBBI), with one (8 kD) or two homologous domains (16 kD), were found to be effective trypsin inhibitors in vitro. In this study, we demonstrate that the 25-kD protein corresponding to the ... Rice Bowman-Birk inhibitors (RBBI), with one (8 kD) or two homologous domains (16 kD), were found to be effective trypsin inhibitors in vitro. In this study, we demonstrate that the 25-kD protein corresponding to the three-domain RBBI indeed ex- ists in rice in planta, and that the RBBIs are regulated by development and wounding. We also found by inhibitory activity assay that the 3:13 disulfide bond, but not the 4:5 disulfide bond, suppresses the tryp- sin-inhibitory activity, and the D3 domain of RBBI3-1 has no inhibitory activity against trypsin, chymotryp- sin, paparin or subtilisin. Mutation analyses showed that conversion from Lys to Leu or Tyr in the N-terminal P1 site in D1 domain did not create chy- motrypsin-inhibitory activity, suggesting that the structure of the reactive loop in D1 domain hinder the new inhibitory specificity at P1 site, and the chy- motrypsin-inhibitory activity might need the participa- tion of other structures, e.g. 3:13 disulfide bond. 展开更多
关键词 水稻 RBBI 双硫键 胰凝乳蛋白酶 胰岛素
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玉米受伤诱导基因Wip1的启动子克隆及表达分析 被引量:4
15
作者 练云 刘允军 王国英 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2889-2896,共8页
【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情... 【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情况和在不同受伤时间下的表达模式,为抗虫基因在植物中应用提供新信息。【方法】以玉米叶片组织的cDNA为模板,采用克隆测序技术获得Wip1启动子序列和该基因的cDNA序列。将所得启动子与植物表达载体p1300连接,构建重组表达载体p1300-Wip1-GUS,并采用冻融法将其转入农杆菌LBA4404中。利用农杆菌介导的瞬时表达体系在玉米愈伤组织中对Wip1启动子的表达活性进行分析。利用热酚法提取玉米相应组织的总RNA,纯化后于含甲醛的变性胶中电泳分离,并将RNA转移到尼龙膜上,用[α-32P]dCTP标记探针的Northern blot技术对Wip1在玉米不同组织、不同胁迫条件、不同受伤时间下的表达模式进行分析。【结果】获得的启动子序列全长1 737 bp,cDNA全长512 bp。将含有重组质粒p1300-Wip1-GUS的农杆菌侵染玉米愈伤组织,3 d后,GUS染色显示侵染部位变蓝,说明所克隆的启动子在玉米愈伤中能启动GUS正常表达。基于Northern blot技术的植物组织表达结果显示,正常情况下,Wip1仅在胚芽鞘中有一定的表达,在受伤后的胚芽鞘、根、茎、叶、雌穗、雄穗、花丝及苞叶中均大量表达;在所设置的胁迫处理时间(2 h)内,Wip1不受缺氧、低温、脱水、PEG、ABA、NaCL和IAA胁迫诱导,仅受伤害胁迫诱导表达;Wip1在玉米叶片受伤胁迫下,玉米叶片受伤2 h时,检测到了Wip1表达,4—24 h时表达量迅速提高且处于持续增加趋势。【结论】玉米Wip1特异地受机械伤害诱导表达;Wip1启动子是一种有效的伤害诱导特异性启动子。 展开更多
关键词 玉米 受伤诱导 WIP1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Bowman-birk
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黑豆种子中一种耐热型胰蛋白酶抑制剂的分离及性质表征 被引量:4
16
作者 邵彪 汪少芸 饶平凡 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期90-95,共6页
应用硫酸铵分级沉降、弱阳交换色谱CM-Sephadex C-50、凝胶过滤色谱Sephacryl S-200HR、强阳离子高效液相色谱POROS HS-20,从黑豆种子中分离纯化一种耐热型蛋白酶抑制剂,命名为TSTI.该蛋白的N末端序列为DEYSKPCCDLCMCTRRCPPQ,与豆科植物... 应用硫酸铵分级沉降、弱阳交换色谱CM-Sephadex C-50、凝胶过滤色谱Sephacryl S-200HR、强阳离子高效液相色谱POROS HS-20,从黑豆种子中分离纯化一种耐热型蛋白酶抑制剂,命名为TSTI.该蛋白的N末端序列为DEYSKPCCDLCMCTRRCPPQ,与豆科植物Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂具有高度同源性,推测其属于Bowman-Birk型胰蛋白酶抑制剂.SDS-PAGE和IEF测出TSTI分子量和等电点分别为23.9 kD和6.2.TSTI对胰蛋白酶有很强的抑制作用,当二者摩尔比达到1时,胰蛋白酶活力被完全抑制.此外,该蛋白酶抑制剂具有很强的热稳定性和pH稳定性,在高达100℃温度及pH2-12范围内处理,其活性均不会受到太大影响.TSTI对植物致病菌苹果轮纹病菌、瓜果腐霉病菌、白菜黑斑病菌、甜瓜枯萎病菌和葡萄灰霉病菌具有抑制作用. 展开更多
关键词 黑豆 胰蛋白酶抑制剂 耐热型 Bowman-birk 分离纯化
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大豆制浆过程对胰蛋白酶抑制剂影响的研究进展 被引量:2
17
作者 陈聪 朱佳琳 +3 位作者 刘鑫 刘娟 范大明 赵建新 《食品与机械》 CSCD 北大核心 2012年第5期255-258,共4页
胰蛋白酶抑制剂是豆浆中最主要的抗营养因子。生产豆浆时,应注意除去这种抗营养因子。豆浆不同的加工方法会影响到胰蛋白酶抑制剂的残留量。文章着重综述在豆浆加工处理过程中去除胰蛋白酶抑制剂的研究成果,提出豆浆工业可以采取的新式... 胰蛋白酶抑制剂是豆浆中最主要的抗营养因子。生产豆浆时,应注意除去这种抗营养因子。豆浆不同的加工方法会影响到胰蛋白酶抑制剂的残留量。文章着重综述在豆浆加工处理过程中去除胰蛋白酶抑制剂的研究成果,提出豆浆工业可以采取的新式加工手段,分析去除豆浆中胰蛋白酶抑制剂技术的发展趋势,以期为豆浆生产提供理论依据。 展开更多
关键词 大豆 制浆 Kunitz抑制剂 Bowman-birk抑制剂 热处理
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重组绿豆BBI(6-33)结构域的抗肿瘤作用分析 被引量:1
18
作者 黄锐 罗深恒 +2 位作者 赵昌彩 刁爱坡 龙民慧 《天津科技大学学报》 CAS 北大核心 2016年第1期40-45,共6页
通过大肠杆菌外源表达绿豆BBI蛋白抗肿瘤活性结构域,研究纯化后的BBI蛋白抗肿瘤活性结构域蛋白对肿瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响及引起肿瘤细胞凋亡的分子机制.MTT、DAPI染色、克隆形成、划痕实验等结果表明,重组BBI(6-33)域对A549等... 通过大肠杆菌外源表达绿豆BBI蛋白抗肿瘤活性结构域,研究纯化后的BBI蛋白抗肿瘤活性结构域蛋白对肿瘤细胞增殖、凋亡和迁移的影响及引起肿瘤细胞凋亡的分子机制.MTT、DAPI染色、克隆形成、划痕实验等结果表明,重组BBI(6-33)域对A549等肿瘤细胞的增殖和迁移有抑制作用,对其凋亡则起促进作用.Western blot分析显示,重组BBI(6-33)域可激活caspase-3、caspase-9、p21等表达,提示其诱导肿瘤细胞凋亡作用可能主要是通过线粒体途径发挥的. 展开更多
关键词 Bowman—birk 抗肿瘤 线粒体途径
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大豆BBi基因ihpRNA种子特异性表达载体的构建 被引量:5
19
作者 付永平 张君 +2 位作者 王丕武 周海涛 曲静 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2010年第1期83-89,96,共8页
【目的】构建具有大豆蛋白酶抑制剂BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体,并将其转入根癌农杆菌中,为大豆品质改良奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆大豆蛋白酶抑制剂BBi基因的正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和... 【目的】构建具有大豆蛋白酶抑制剂BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体,并将其转入根癌农杆菌中,为大豆品质改良奠定基础。【方法】采用PCR技术克隆大豆蛋白酶抑制剂BBi基因的正义和反义片段、大豆种子特异性启动子7αP和作为内含子的GFP基因片段,分别连入克隆载体pMD18-T Vector中。然后根据植物中ihpRNA原理,以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,将组成RNAi载体的4个目的片段分别连入其中,然后利用冻融法转化根癌农杆菌,并进行PCR鉴定。【结果】PCR扩增得到组成RNAi载体的4个目的片段,分别构建成重组克隆载体和ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS,并转化得到含有p7αP-GFP-BBiS的农杆菌EHA101和EHA105。【结论】成功构建了具有BBi基因反向重复结构的ihpRNA种子特异性表达载体p7αP-GFP-BBiS,BBi基因的ihpRNA表达框架成功转入到农杆菌中。 展开更多
关键词 大豆 蛋白酶抑制剂BBi基因 ihpRNA表达载体 种子特异性启动子
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水稻胰蛋白酶抑制剂对褐飞虱产卵刺激的响应 被引量:3
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作者 解晓军 高媛媛 +1 位作者 戚舒 周强 《中山大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期104-109,共6页
昆虫产卵过程对寄主植物的直接刺激包括产卵器的机械损伤和卵表面物质带来影响,这些刺激是启动植物诱导抗虫性的重要途径。通过对褐飞虱产卵处理后水稻植株内胰蛋白酶抑制剂(BBPI)合成酶基因的表达量及物质含量的测定,对比褐飞虱取食和... 昆虫产卵过程对寄主植物的直接刺激包括产卵器的机械损伤和卵表面物质带来影响,这些刺激是启动植物诱导抗虫性的重要途径。通过对褐飞虱产卵处理后水稻植株内胰蛋白酶抑制剂(BBPI)合成酶基因的表达量及物质含量的测定,对比褐飞虱取食和机械损伤处理,发现褐飞虱产卵能够诱导水稻BBPI合成酶基因的表达和BBPI物质的生成。处理后6 h,12 h,水稻BBPI表达量显著高于取食和机械损伤处理;产卵诱导的BBPI物质含量显著高于正常水稻。褐飞虱产卵诱导水稻启动BBPI表达和物质合成表明,与取食危害类似,水稻同样会对褐飞虱产卵刺激产生响应,启动相应的植物防御体系,进而达到阻滞褐飞虱危害的目的。 展开更多
关键词 水稻 褐飞虱 产卵 胰蛋白酶抑制剂
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