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Pax-8基因敲除小鼠心脏中Bcl2l14基因表达上调 被引量:3
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作者 高瞻 来丹丹 +4 位作者 黄晓燕 褚茂平 施翔翔 张怀勤 杨德业 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期640-644,共5页
目的:寻找先天性心脏病相关基因-转录因子Pax-8的下游基因。方法:分别提取Pax-8基因敲除小鼠纯合子(Pax-8 KO-/-)和杂合子(Pax-8 KO+/-)的心脏总RNA,利用含31802个小鼠基因的基因芯片检测两组小鼠基因表达水平,找出差异表达的基因,并经... 目的:寻找先天性心脏病相关基因-转录因子Pax-8的下游基因。方法:分别提取Pax-8基因敲除小鼠纯合子(Pax-8 KO-/-)和杂合子(Pax-8 KO+/-)的心脏总RNA,利用含31802个小鼠基因的基因芯片检测两组小鼠基因表达水平,找出差异表达的基因,并经半定量RT-PCR和荧光实时定量PCR技术初步筛选出转录因子Pax-8的下游基因。结果:基因芯片检测发现,Pax-8 KO-/-组与Pax-8 KO+/-相比有25个基因表达下调,另有17个基因表达上调,差异基因涉及细胞周期及信号转导的调节因子,直接参与代谢的酶,以及核转录因子等。用半定量RT-PCR验证发现:Bcl2-like 14(Bcl2l14)基因在Pax-8 KO-/-组上调。定量RT-PCR亦证实在Pax-8KO-/-组Bcl2l14基因的表达水平较Pax-8 KO+/-组及Pax-8 KO+/+(野生型)组分别上调2.07倍和2.23倍(P<0.01)。结论:Bcl2l14基因为转录因子Pax-8的下游基因,可能在先天性心脏病室间隔缺损的发病机制中发挥重要作用。 展开更多
关键词 Paired BOX GENE 8 bcl2-like 14 室间隔缺损 细胞凋亡
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LncRNA EBLN3P调节miR-202-5p/BAG3轴对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响
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作者 马也 祁洁 +1 位作者 陈建华 徐谔文 《河北医药》 2025年第1期27-32,共6页
目的 探讨长链非编码RNA内源性博纳病毒样核蛋白3假基因(LncRNA EBLN3P)对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其作用机制。方法 体外培养乳腺癌细胞MDA-MB-468、MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7及人乳腺上皮MCF-10A细胞,qRT-PCR法检测各细... 目的 探讨长链非编码RNA内源性博纳病毒样核蛋白3假基因(LncRNA EBLN3P)对乳腺癌细胞增殖、凋亡和迁移的影响及其作用机制。方法 体外培养乳腺癌细胞MDA-MB-468、MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7及人乳腺上皮MCF-10A细胞,qRT-PCR法检测各细胞LncRNA EBLN3P和微小RNA-202-5p(miR-202-5p)的相对表达量,Western blot法检测Bcl2关联永生基因3(BAG3)蛋白的表达;使用Starbase数据库预测LncRNA EBLN3P、BAG3与miR-202-5p的结合位点,做双萤光素酶报告基因分析;转染MCF-7细胞并分为NC组、si-NC组、si-EBLN3P组、si-EBLN3P+anti-miR-NC组和si-EBLN3P+anti-miR-202-5p组,qRT-PCR法检测各组细胞LncRNA EBLN3P和miR-202-5p的相对表达量,Western blot法检测BAG3蛋白的表达,Edu法检测Edu阳性细胞比例,流式细胞术检测细胞凋亡率,细胞划痕试验检测愈合效率。结果 与MCF-10A组比较,MDA-MB-468、MDA-MB-231、SK-BR-3、MCF-7组细胞LncRNA EBLN3P、BAG3表达水平升高,miR-202-5p表达水平下降(P<0.05);生物信息学分析显示,miR-202-5p与LncRNA EBLN3P、BAG3有结合位点,且双萤光素酶报告基因证实二者存在靶向关系;与si-NC组比较,si-EBLN3P组LncRNA EBLN3P、BAG3的表达水平以及Edu阳性细胞比例、划痕愈合率降低,miR-202-5p的表达水平以及凋亡率升高(P<0.05);与si-EBLN3P+anti-miR-NC组比较,si-EBLN3P+anti-miR-202-5p组BAG3的表达水平以及Edu阳性细胞比例、划痕愈合率升高,miR-202-5p的表达水平以及凋亡率降低(P<0.05)。结论 沉默LncRNA EBLN3P表达通过上调miR-202-5p、降低BAG3的表达抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 长链非编码RNA内源性博纳病毒样核蛋白3假基因 微小RNA-202-5p bcl2关联永生基因3 增殖 凋亡 迁移
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CD4阳性T细胞分泌的Bcl2L12蛋白在小儿溃疡性结肠炎中促进Th2细胞活化对疾病进展的影响 被引量:3
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作者 赵玉霞 刘迎春 +1 位作者 张细元 梅红 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第12期1489-1493,共5页
目的:探讨CD4阳性T(CD4+T)细胞分泌的Bcl2L12蛋白介导Th2细胞活化对小儿溃疡性结肠炎(UC)进展的影响。方法:分别收集20例UC患儿及健康儿童的外周血样本,测量血清中Th2细胞因子(IL-2,IL-5,IL-13)和Bcl2L12蛋白水平,检测并对比两组外周血... 目的:探讨CD4阳性T(CD4+T)细胞分泌的Bcl2L12蛋白介导Th2细胞活化对小儿溃疡性结肠炎(UC)进展的影响。方法:分别收集20例UC患儿及健康儿童的外周血样本,测量血清中Th2细胞因子(IL-2,IL-5,IL-13)和Bcl2L12蛋白水平,检测并对比两组外周血单个核细胞(PBMC)中Th2细胞比例。以CD4+T细胞内Bcl2L12特异性敲除小鼠(Bcl2L12-KO)及野生型(WT)小鼠为动物模型,通过硫酸葡聚糖(DSS)进行UC造模,比较Bcl2L12-KO和WT经DSS造模后结肠病变的严重程度、血清炎症因子水平及结肠组织内Th2细胞凋亡比例等。结果:UC患儿血清中IL-4、IL-5、IL-13和Bcl2L12水平均显著高于对照组儿童,PBMC中Th2细胞比例也显著高于对照组儿童,差异均存在统计学意义(P<0.05)。经DSS诱导的UC模型中,Bcl2l12-KO小鼠的结肠炎症情况体及重降低程度明显低于WT小鼠,结肠长度长于WT小鼠。此外,Bcl2L12-KO小鼠的外周血Th2细胞、IL-4、IL-5、IL-13和Bcl2L12水平也显著低于WT小鼠,差异均存在统计学意义(P<0.05)。通过分离结肠组织中的免疫细胞并进行凋亡流式分析后发现,Bcl2l12-KO小鼠的Th2凋亡细胞比例显著高于WT小鼠,差异存在统计学意义(P<0.05)。结论:UC患儿血清中Bcl2L12和Th2细胞因子水平显著升高,处于Th2细胞偏向性炎症反应状态,而CD4+T细胞分泌的Bcl2L12蛋白能够抑制Th2细胞凋亡、促进Th2细胞活化和Th2细胞因子分泌增加而促进UC进展。 展开更多
关键词 儿童 溃疡性结肠炎 bcl2样蛋白12 TH2细胞
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基因TOB1通过BCL-2和BCL-xl抑制胶质瘤细胞的生长
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作者 杨娴 迟爱秋 +8 位作者 范思佳 张伟龙 张琪玟 唐天珍 王佳慧 张青 武艺笑 饶建 林社裕 《南通大学学报(医学版)》 2022年第3期205-210,共6页
目的 :探讨基因TOB1在胶质瘤中的作用及其调控机制。方法 :通过免疫组织化学法对胶质瘤组织及正常组织中TOB1、BCL-2(BCL2 apoptosis regulator)、BCL-xl(BCL2 like 1)的表达进行检测。采用Western Blot和荧光素酶检测系统对靶向基因TOB... 目的 :探讨基因TOB1在胶质瘤中的作用及其调控机制。方法 :通过免疫组织化学法对胶质瘤组织及正常组织中TOB1、BCL-2(BCL2 apoptosis regulator)、BCL-xl(BCL2 like 1)的表达进行检测。采用Western Blot和荧光素酶检测系统对靶向基因TOB1的microRNA进行筛选分析。用含TOB1过表达、干扰或对照的慢病毒感染胶质瘤细胞株U251。采用噻唑蓝比色法(methyl thiazolyl tetrazolium, MTT)或流式细胞术检测TOB1对U251细胞活力、细胞周期及凋亡的影响。实时聚合酶链式反应(real time polymerase chain reaction, Real-time PCR)和Western Blot分别检测TOB1对凋亡相关因子表达的影响。结果:胶质瘤组织中TOB1基因表达被抑制,miR-92a-3p可以通过结合TOB1基因的3′-非翻译区来调控基因TOB1的表达。并且,过表达TOB1可降低细胞活力,抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,而抑制TOB1表达则具有相反作用。此外,TOB1过表达组的抗凋亡因子BCL-2和BCL-xl表达显著下调;相反,TOB1被干扰后,抗凋亡因子BCL-2和BCL-xl表达则上调。免疫组织化学法显示,胶质瘤组织中BCL-2和BCL-xl的表达增加。结论:TOB1在胶质瘤中表达受到抑制,并通过调控BCL-2和BCL-xl基因的表达影响胶质瘤的增殖和凋亡。 展开更多
关键词 胶质瘤 TOB1 bcl-2 bcl-XL 细胞凋亡
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miR-214-3p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制 被引量:2
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作者 郭冬芬 任真奎 +2 位作者 胡玉梅 吴昌学 禹文峰 《贵州医科大学学报》 CAS 2021年第7期766-772,共7页
目的探讨miR-214-3 p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用数据库TargetScan 7.2预测miR-214-3 p和B淋巴细胞瘤因子2样蛋白2(BCL2L2)之间的结合位点;选取人胚肾293T细胞共转染分为BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶... 目的探讨miR-214-3 p对缺糖缺氧再灌注诱导PC12细胞凋亡的作用及机制。方法利用数据库TargetScan 7.2预测miR-214-3 p和B淋巴细胞瘤因子2样蛋白2(BCL2L2)之间的结合位点;选取人胚肾293T细胞共转染分为BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶报告载体+miR-214-3 p mimic(wt+mimic)组、BCL2L2 mRNA 3′UTR野生型荧光素酶报告载体+mimic negative control(wt+NC)组、BCL2L2 mRNA 3′UTR突变型荧光素酶报告载体+miR-214-3 p mimic(mut+mimic)组及BCL2L2 mRNA 3′UTR突变型荧光素酶报告载体+mimic NC(mut+NC组),检测4组293T细胞荧光素酶的发光活性;肾上腺嗜铬神经细胞瘤12(PC12)细胞转染miR-214-3 p mimic(mimic组)、miR-214-3 p mimic NC(mimic NC组)、miR-214-3 p inhibitor(inhibitor组),miR-214-3 p inhibitor NC(inhibitor NC组),采用蛋白免疫印迹法检测BCL2L2蛋白表达;PC12细胞作为对照(Control组),用缺氧缺糖(OGD/R)处理PC12细胞构建缺血再灌注细胞模型(OGD/R组),用miR-214-3 p mimic转染PC12细胞,然后用OGD/R处理PC12细胞(OGD/R+mimic组),采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测Control组和OGD/R组miR-214-3 p及BCL2L2 mRNA表达,采用蛋白免疫印迹法检测Control组、OGD/R组及OGD/R+mimic组裂解胱天蛋白水解酶3(Cleaved-caspase3)、B淋巴细胞瘤-2相关X(Bax)及B淋巴细胞瘤因子2(Bcl2)的蛋白表达。结果数据库Targetscan 7.2预测结果表明,miR-214-3 p与BCL2L2的3′UTR区之间存在结合位点;荧光素酶报告基因实验结果表明,wt+mimic组荧光素酶活性低于wt+NC组,mut+mimic组和mut+NC中荧光素酶活性无明显差异;mimic NC组BCL2L2的蛋白表达高于mimic组,inhibitor NC组BCL2L2的蛋白表达低于inhibitor组(P<0.05);与Control组比较,OGD/R组PC12细胞中BCL2L2 mRNA和蛋白表达水平降低、miR-214-3 p mRNA表达升高,差异有统计学意义(P<0.05);OGD/R组Cleaved-caspase-3和Bax表达分别高于Control组、低于OGD/R+mimic组,但Bcl2表达分别低于Control组、高于OGD/R+mimic组(P<0.05)。结论过表达miR-214-3 p可靶向结合并下调BCL2L2的表达,从而加速PC12细胞的凋亡。 展开更多
关键词 细胞凋亡 肾上腺嗜铬神经细胞瘤12细胞 缺糖缺氧再灌注 微小RNA 214-3p B淋巴细胞瘤因子2样蛋白2 bcl2-Associated X的蛋白质
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