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白菜雄性不育相关基因BcMF4基因功能的RNAi验证 被引量：11
1
作者 刘乐承 向珣 曹家树 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第11期1428-1434,共7页
BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜(Brassica campestris ssp．chinensis var．communis,syn．B．rapa ssp．chinensis var．communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据... BcMF4(Brassica campestris Male Fertility 4)是前一阶段从普通白菜(Brassica campestris ssp．chinensis var．communis,syn．B．rapa ssp．chinensis var．communis)核雄性不育两用系的可育株中分离到的雄性不育相关基因。本研究根据BcMF4基因的cDNA序列设计两对特异引物,从普通白菜花蕾cDNA中扩增出两个片断后连接至双元载体pBI121中,得到了RNAi(RNA interference)植物表达栽体pBI-B4R,并导入了农杆菌LBA4404菌株中;通过组织培养途径转化菜心(B．campestris ssp．chinensis var,parachinensis),72．2％的菜心转基因植株中45．8％的花粉为缩小而空瘪的畸形,而且这些植株的花粉离体萌发率降低至23．7％;Northern杂交显示,转基因植株的花粉畸形,是由于BcMF4基因片段的插入使BcMF4基因的表达受到了抑制。结果表明,采用RNAi技术下调了BcMF4基因的表达,导致了菜心转基因植株部分花粉的不育,证明BcMF4基因在普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育中起着重要作用。 展开更多
关键词 普通白菜 bcmf4 菜心 花粉 RNAi(RNA interference)
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白菜雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4的A9启动子的基因沉默植物表达载体的构建 被引量：2
2
作者 刘乐承 曹家树 《长江大学学报（自科版）（中旬）》 CAS 2007年第2期48-53,共6页
以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4为沉默对象,利用绒毡层组织特异性的A9启动子,构建了反义RNA、RNA干涉和双价反义RNA植物表达载体。结果表明,经过一系列分子操作,获得... 以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4为沉默对象,利用绒毡层组织特异性的A9启动子,构建了反义RNA、RNA干涉和双价反义RNA植物表达载体。结果表明,经过一系列分子操作,获得了A9启动子和目的基因片段,并利用它们构建了5个基因沉默植物表达载体,可用于基因功能验证。 展开更多
关键词 白菜 雄性不育 BcMF3 bcmf4 基因沉默 表达载体
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紫菜薹BcMF4基因的克隆及其RNAi植物表达载体的构建 被引量：1
3
作者 刘乐承 林小芳 《长江大学学报（自科版）（中旬）》 CAS 2010年第4期44-46,共3页
根据普通白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因Bc-MF4序列设计一对特异引物,从紫菜薹(B.campestris ssp.chinensisvar.purpuraria)中克隆出了大小为710bpBcMF4基因片段。采用Gateway技术... 根据普通白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因Bc-MF4序列设计一对特异引物,从紫菜薹(B.campestris ssp.chinensisvar.purpuraria)中克隆出了大小为710bpBcMF4基因片段。采用Gateway技术,构建了BcMF4基因RNA干涉(RNA interference,RNAi)植物表达载体。为下一步通过沉默BcMF4基因,明确其对紫菜薹花粉发育和雄性不育的影响奠定了基础。 展开更多
关键词 紫菜薹(Brassicacampestris ssp.chinensis var.purpuraria) bcmf4基因 克隆 RNAi(RNA interference) 表达载体
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