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白菜小孢子发育相关基因BcMF3的分离及序列分析 被引量:19
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作者 王永勤 余小林 曹家树 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1302-1308,共7页
利用cDNA AFLP技术对‘矮脚黄’白菜 (BrassicacampestrisL .ssp .chinensisMakinovar.communisTsenetLeecv .Aijiaohuang)雄性不育两系不育株系与可育株系的表达差异进行分析 ,结果以A18和T16引物为引物对在可育的中蕾和大蕾中筛选出一... 利用cDNA AFLP技术对‘矮脚黄’白菜 (BrassicacampestrisL .ssp .chinensisMakinovar.communisTsenetLeecv .Aijiaohuang)雄性不育两系不育株系与可育株系的表达差异进行分析 ,结果以A18和T16引物为引物对在可育的中蕾和大蕾中筛选出一条 4 74bp特异表达的差异条带BA18 T16 ,配合RACE方法扩增了该片段的 3′和5′末端 ,获得了该基因的cDNA全长序列BcMF3。BcMF3全长 2 0 82bp ,开放阅读框长度为 175 5bp ,编码 5 84个氨基酸。序列分析结果表明 ,BcMF3基因与油菜、大白菜和拟南芥的花药特异表达果胶甲酯酶 (PME)基因具有较高的相似性 ,由此推定 。 展开更多
关键词 白菜 Brassica CAMPESTRIS L. 雄性不育两用系 CDNA-AFLP bcmf3 果胶甲酯酶
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白菜雄性不育相关基因BcMF3功能的反义RNA验证 被引量:3
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作者 刘乐承 余小林 +2 位作者 叶纨芝 向珣 曹家树 《浙江大学学报(农业与生命科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期473-478,共6页
为了研究白菜等十字花科植物花粉发育及雄性不育发生的机理,根据编码果胶甲酯酶的白菜雄性不育相关基因BcMF3的cDNA序列设计特异引物,从普通白菜(Brassica campestrisssp.chinensisvar.communis,syn.B.rapassp.chinensisvar.communis)花... 为了研究白菜等十字花科植物花粉发育及雄性不育发生的机理,根据编码果胶甲酯酶的白菜雄性不育相关基因BcMF3的cDNA序列设计特异引物,从普通白菜(Brassica campestrisssp.chinensisvar.communis,syn.B.rapassp.chinensisvar.communis)花蕾cDNA中扩增出458 bp的片断,构建BcMF3的反义RNA植物表达栽体,然后转化菜心(B.campestrisssp.chinensisvar.parachinensis).研究发现,31.3%菜心转基因植株花粉表现出畸形,而且只有部分花粉具有活力,花粉离体萌发率降低为31.6%,其花药果胶甲酯酶活性降低了12.8%.上述结果表明BcMF3基因与普通白菜和菜心等白菜植物的花粉发育密切相关. 展开更多
关键词 普通白菜 BRASSICA CAMPESTRIS BRASSICA RAPA bcmf3 菜心 花粉 果胶甲酯酶
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白菜雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4的A9启动子的基因沉默植物表达载体的构建 被引量:2
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作者 刘乐承 曹家树 《长江大学学报(自科版)(中旬)》 CAS 2007年第2期48-53,共6页
以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4为沉默对象,利用绒毡层组织特异性的A9启动子,构建了反义RNA、RNA干涉和双价反义RNA植物表达载体。结果表明,经过一系列分子操作,获得... 以白菜(Brassica campestris ssp.chinensis,syn.B.rapa ssp.chinensis)雄性不育相关基因BcMF3和BcMF4为沉默对象,利用绒毡层组织特异性的A9启动子,构建了反义RNA、RNA干涉和双价反义RNA植物表达载体。结果表明,经过一系列分子操作,获得了A9启动子和目的基因片段,并利用它们构建了5个基因沉默植物表达载体,可用于基因功能验证。 展开更多
关键词 白菜 雄性不育 bcmf3 BcMF4 基因沉默 表达载体
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Expression of an Antisense BcMF3 Affects Microsporogenesis and Pollen Tube Growth in Arabidopsis 被引量:3
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作者 LIU Le-cheng CAO Jia-shu +2 位作者 YU Xiao-lin XIANG Xun FEI Yong-jun 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2006年第5期339-345,共7页
In an effort to provide some information relevant to the molecular mechanism of genic male sterility in plants, BcMF3 gene that encodes a pectin methylesterase was isolated from the fertile B line of Chinese cabbage-p... In an effort to provide some information relevant to the molecular mechanism of genic male sterility in plants, BcMF3 gene that encodes a pectin methylesterase was isolated from the fertile B line of Chinese cabbage-pak-choi (Brassica rapa ssp. chinensis, syn. B. campestris ssp. chinensis). In the present paper, a 455-bp antisense cDNA fragment of BcMF3 was introduced to binary vector pB1121, and then was mobilized into Agrobacterium tumefaciens strain LBA4404. The A. tumefaciens harboring the BcMF3 antisense fragment was transformed to Arabidopsis thaliana by floral dip. Scanning electronic microscopy examination demonstrated that 47.8% of BcMF3 antisense pollen grains exhibited abnormal shape, which might lead to decreased germination of pollens, suggesting that the product of BcMF3 gene plays an important role during microsporogenesis. The evidence on burst of 45.7% of BcMF3 antisense pollen tubes in vitro and a majority of BcMF3 antisense pollens restricted within the stigmatic tissue revealed that BcMF3 is involved in aiding the growth of pollen tubes. The results suggest that BcMF3 acts at both stages of microsporogensis and pollen tube growth. 展开更多
关键词 ANTISENSE bcmf3 MICROSPOROGENESIS pectin methylesterase (PME) POLLEN
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Bc MF3反义基因植物表达载体的构建及其对拟南芥的遗传转化 被引量:3
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作者 刘乐承 余小林 +3 位作者 叶纨芝 向珣 卢钢 曹家树 《长江大学学报(自然科学版)》 CAS 2005年第11期76-79,共4页
根据编码白菜(Brassica rapa L.ssp.chinensis,syn B.campestris ssp.chinensis)果胶甲酯酶的BcMF3基因cDNA序列内部第1343~1797个碱基之间序列设计引物,从白菜花蕾eDNA中PCR扩增出455bp的片段,把该片段作为反义基因连接至双... 根据编码白菜(Brassica rapa L.ssp.chinensis,syn B.campestris ssp.chinensis)果胶甲酯酶的BcMF3基因cDNA序列内部第1343~1797个碱基之间序列设计引物,从白菜花蕾eDNA中PCR扩增出455bp的片段,把该片段作为反义基因连接至双元载体pBI121上,得到了植物表达栽体pBI-B3,并用“三亲杂交”法导入农杆菌LBA4404菌株中,PCR扩增和酶切结果表明所构建的植物表达载体pBFB3含有BcMF3反义基因片断,并已导入了根癌农杆菌(Agrobacterinrn tume fuciens)中;采用花序浸润法转化拟南芥(Arabidopsis thaliana)后,播种筛选浸润植株的种子获得了5株卡那霉素抗性植株,PCR扩增证明BcMF3反义片段成功整合到拟南芥基因组中;转基因拟南芥子代(T2)的抗性分离符合孟德尔分离比例,表明外源基因是单一位点插入。 展开更多
关键词 反义基因 拟南芥(Arabidopsis thaliana) bcmf3 白菜 表达载体 遗传转化
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